Способ обнаружения наличия микробной биомассы земного типа на космических телах



Способ обнаружения наличия микробной биомассы земного типа на космических телах
Способ обнаружения наличия микробной биомассы земного типа на космических телах
Способ обнаружения наличия микробной биомассы земного типа на космических телах

 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2586778:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт космических исследований Российской академии наук (RU)

Изобретение относится к аналитической химии и касается способа обнаружения наличия микробной биомассы земного типа. Сущность способа заключается в том, что получают тестируемый образец, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы, помещают тестируемый образец в контейнер, отделяют от тестируемого образца компоненты тестируемого образца с микроорганизмами, проводят масс-спектрометрическое исследование компонентов тестируемого образца с микроорганизмами. В качестве тестируемого образца используют полученный при исследованиях грунт космических тел, измельчают тестируемый образец и помещают его в бортовое устройство с герметичным объемом 10 см3, затем в него добавляют дистиллированную очищенную воду, перемешивают тестируемый образец с водой и отделяют сливом верхний слой с микрочастицами и десорбированными в воду от тестируемого образца грунта микроорганизмами, причем верхний слой с микроорганизмами сливают в картридж, в котором его пропускают через смешанный слой ионообменных смол анионита АВ-17 и катионита КУ-2. После этого очищенную воду с микроорганизмами подают на металлическую подложку мишени для масс-спектрометрического исследования, где испарением воды формируют на металлической подложке слой микроорганизмов и оставшихся в воде микрочастиц, а затем полученную мишень вводят в масс-спектрометр для лазерного воздействия, при этом в ходе масс-спектрометрического исследования вывод о наличии микроорганизмов земного типа делают по величинам массовых пиков химических элементов, относящихся к исследуемым биомаркерам N, C и соотношению биомаркеров: P/S и Ca/K, составляющим для соотношения P/S от 0,15 до 3, для соотношения Ca/K от 0,3 до 5 и для концентраций N и C более 1% и 10% соответственно. Использование способа позволяет определить микробную массу земного типа, наример в космических объектах. 2 ил.

 

Изобретение относится к созданию способа выявления микробной биомассы на планетах и спутниках планет Солнечной системы.

Известен способ для выявления микробной биомассы по регистрации ее химических элементов, в котором важнейшие характеристики, включая физиологическое состояние клетки, определялись по измерению величины соотношения содержания в клетке некоторых биологически значимых элементов: К, Са, Р, S, что позволило отличить жизнеспособные микроорганизмы, находящиеся в вегетативной фазе, от нежизнеспособных бактерий, при этом низкое соотношение P/S и повышенное содержание кальция указывали на покоящиеся формы микробных сообществ. Для проведения измерений использовался электронный микроскоп JEM-100CXII (JEOL, Япония), снабженный сканирующей приставкой EM-ASID4D и рентгеновским микроанализатором LINK-860 с детектором Е5423, что обеспечивало необходимую чувствительность и массовое разрешение элементов (см. статью А.Л. Мулюкин и др. «Применение рентгеновского микроанализа для выявления клеток микроорганизмов различного физиологического статуса в объектах окружающей среды», журнал Микробиология, М., 2002, том 71, вып. 6, стр. 836-848).

Однако выявление биомассы с использованием рентгеновского микроанализа связано со сложностью настройки и дистанционного управления и значительным весом инструмента, а также с большими трудностями по автоматической подготовке пробы для таких измерений, которая является достаточно сложной даже в условиях земной лаборатории.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ обнаружения наличия микробной биомассы земного типа, заключающийся в том, что получают тестируемый образец, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы, помещают тестируемый образец в контейнер, отделяют от тестируемого образца компоненты тестируемого образца с микроорганизмами, проводят масс-спектрометрическое исследование компонентов тестируемого образца с микроорганизмами (см. патент RU №2533252, кл. G01N 33/50, опубл. 20.11.2014).

Данный способ позволяет выявлять микроорганизмы, однако данный способ не позволяет обнаруживать наличие микроорганизмов в грунте тестируемого образца, полученного при исследованиях грунта космических тел, что сужает возможности данного способа.

Задача изобретения заключается в расширении возможностей по обнаружению наличия микробной биомассы земного типа.

Технический результат заключается в том, что достигается возможность обеспечить объемный анализ биомассы для обнаружения наличия микробной биомассы земного типа.

Указанная задача решается, а технический результат достигается за счет того, что способ обнаружения наличия микробной биомассы земного типа заключается в том, что получают тестируемый образец, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы, отделяют от тестируемого образца компоненты тестируемого образца с микроорганизмами, проводят масс-спектрометрическое исследование компонентов тестируемого образца с микроорганизмами, при этом в качестве тестируемого образца используют полученный при исследованиях грунт космических тел, который перемешивают с водой или спиртовым растворителем и отделяют сливом верхний слой с десорбированными в воду от тестируемого образца грунта микроорганизмами в качестве компонентов тестируемого образца с микроорганизмами, причем при сливе верхний слой с микроорганизмами пропускают через смешанный слой ионообменных смол анионита АВ-17 и катеонита КУ-2, и таким образом обеспечивают очистку воды с микроорганизмами в 102-103 раз, после этого очищенную воду с микроорганизмами подают на металлическую подложку мишени для масс-спектрометрического исследования, далее испарением воды на металлической подложке формируют слой микроорганизмов и оставшихся в воде микрочастиц, а затем полученную мишень помещают через шлюз в предварительно откачанную вакуумную камеру или помещают в камеру, которую затем вакуумируют, после чего мишень подвергают масс-спектрометрическому лазерному воздействию, при этом в ходе масс-спектрометрического исследования вывод о наличии микроорганизмов земного типа делают по величинам массовых пиков химических элементов, относящихся к исследуемым биомаркерам N, С и соотношению биомаркеров: P/S и Са/К.

Дополнительно в ходе масс-спектрометрического исследования могут быть использованы маркеры биологически важных соединений (биоэлементы) Cl, Na, Mg.

Дополнительно в ходе масс-спектрометрического исследования могут быть использованы маркеры биологически важных микропримесей (микроэлементы) Mn, Zn, Cu, I, F, Со, Мо, В, Br, As, Pb, Ag, Ni, Li, V.

В ходе проведенного исследования была выявлена возможность обнаружения наличия микробной биомассы земного типа в тестируемых образцах, полученных при исследованиях грунта космических тел.

Но важно было не просто найти способ исследования, а обеспечить возможность для проведения подобных работ с борта космических аппаратов.

Для этого нужно было одновременно решить несколько взаимосвязанных задач. В частности, обеспечить объемный анализ биомассы и существенно уменьшить вес бортового прибора.

Для устранения препятствий, связанных с измерениями объемного элементного состава биологической пробы, в качестве измерительного инструмента выбран компактный, многоцелевой, несложный в управлении бортовой прибор - лазерный времяпролетный масс-спектрометр (ЛВПМС) (см. патент RU №2096861). Этот прибор обладает высоким быстродействием, чувствительностью и аналитическими характеристиками.

Подготовка пробы в данном случае может быть осуществлена при использовании относительно простого экстрактора микроорганизмов из реголита. Лазерное воздействие позволяет испарять слои толщиной несколько микрон и, следовательно, получать информацию об объемном составе элементов, входящих в состав микроорганизмов.

Эксперименты по испытанию ЛВПМС для обнаружения биомаркеров показали, что он подходит для решения поставленной задачи. Так, было установлено, что элементы, представляющие собой биомаркеры, такие как Са, К, Р, S, регистрируются с высоким разрешением и с хорошей точностью. Результаты этих измерений после их обработки позволяют с необходимой точностью определить соотношения биомаркеров.

На фиг. 1 представлены результаты серии измерений элементного состава микроорганизмов, нанесенные на диаграмму.

На осях диаграммы показаны величины соотношений биомаркеров: P/S и Са/К.

На фиг. 2 представлены геологические породы и различные микроорганизмы согласно соотношению маркеров N/C.

Условные обозначения к графикам, изображенным на фигурах 1 и 2.

А - зона, соответствующая микроорганизмам

В - зона, соответствующая составу марсианского реголита по данным McLennan et al.,2014, APXS Curiosity NASA JPL.

По результатам этих измерений была выделена зона расположения культур различных микроорганизмов и область разброса этих данных, в том числе и статистическая.

В ходе проведения исследований создавалась модель биологической пробы. Для этого чистые культуры микроорганизмов добавлялись в дистиллированную воду. Далее капля воды с культурой наносилась на вольфрамовую подложку. После высыхания капли биологическая проба, нанесенная на вольфрамовую подложку, вводилась в неоткаченную вакуумную камеру, которую затем откачивали до достижения в ней высокого вакуума, или через шлюз вводилась в откаченную вакуумную камеру, после чего проводились измерения масс-спектрометром. По результатам этих измерений определялись величины соотношений P/S и Са/К, которые наносились на график (см. фиг. 1).

Кроме этих результатов на график наносились результаты измерений соотношений элементов P/S и Са/К для марсианского реголита, измеренные с помощью прибора APXS с борта марсианского ровера Curiosity.

На этот график также были нанесены соотношения P/S и Са/К для минеральных стандартов земных пород.

Как это хорошо видно из графика, данные по соотношениям P/S и Са/К для реголита и для большинства различных геологических стандартов не попадали в область диаграммы, которой соответствовали пробы микроорганизмов.

В качестве дополнительных биомаркеров для повышения достоверности метода введены матричные биомаркеры N и С, находящиеся в микроорганизмах с концентрацией не менее 8%, а также маркеры биологически важных соединений (биоэлементы) Cl, Na, Mg и маркеры биологически важных микропримесей (микроэлементы) Mn, Zn, Cu, I, F, Со, Мо, В, Br, As, Pb, Ag, Ni, Li, V.

Проба базальта BCVO-2, согласно измерениям, находится достаточно близко к зоне микроорганизмов. Для увеличения достоверности результатов было принято решение ввести дополнительные маркеры, которые автоматически регистрировались в тех же условиях и тем же прибором. Предложенные биомаркеры N и С условно можно назвать матричными или структурными биомаркерами, так как они являются базовыми для любой живой субстанции, в том числе и для микроорганизмов. Попадание исследуемой пробы в зону жизни по всем критериям существенно увеличивает надежность результатов.

При наблюдении же клеток in situ, в составе грунтов и почв, для определения микроорганизмов по соотношению четырех элементов, необходимо экстрагировать клетки из минеральной среды, в которой они находятся.

Известно, что матричные структуры любой земной биологической субстанции содержат такие элементы, как Н, N, С, О. Однако концентрации Н и О в этих структурах зависят от влажности биомассы. Поэтому для обеспечения надежности измерений использовались в качестве дополнительных такие биомаркеры, как N и С, с тем, чтобы не связываться с элементами, входящими в состав воды.

По сути, введение дополнительных биомаркеров дополняет двумерную диаграмму (P/S-Са/К) еще одной (N-С), на которой должно было произойти существенное разделение зоны микроорганизмов от зоны марсианского реголита, а также от зоны, занятой геологическими породами земных стандартов.

Исследования, проведенные по определению содержания N и С, показывают, что для микроорганизмов обе эти величины существенно превышают 1% и располагаются в правом верхнем углу графика. В то же время, согласно последним данным по измерениям марсианского реголита эти величины не превышают 0,3% и 0,1% соответственно и располагаются в левом нижнем углу графика. Также следует отметить, что стандарты земных геологических пород не «достигают» зоны локализации микроорганизмов.

Как видно из графика на фиг. 2, проба вулканического базальта BHVO-2 по соотношению маркеров N/C не может быть ошибочно отнесена к зоне, соответствующей микроорганизмам.

Для дальнейшего увеличения надежности выявления биомассы в зависимости от поставленной задачи можно рассматривать и дополнительные биомаркеры. Так, одним из важных маркеров является хлор, который необходим для обеспечения протекания биохимических реакций. Для выявления биомассы также можно рассматривать и химические элементы, относящиеся к биологическим микроэлементам. Эти микроэлементы исполняют ряд важных функций в процессе жизнедеятельности живой субстанции, и их присутствие в пробе может рассматриваться как вспомогательный маркер живой материи.

Известно, что реголит Марса содержит значительное количество водорастворимых солей, включающих К и Са. При высокой засоленности среды в спектре в повышенных концентрациях могут оказаться элементы, совпадающие с элементами биомаркеров, что может не позволить корректно провести определение. В этом случае для проведения корректных измерений необходимо после осаждения грубых фракций и экстракции провести очистку исследуемой пробы от солей.

Подобная очистка проводилась в процессе подготовки пробы с помощью микрокартриджей, находящихся в составе устройства подготовки пробы при использовании широко известных и общепринятых стандартных методов экстракции земных микроорганизмов.

Бортовое устройство представляет собой герметичный объем 10 см. После загрузки в него реголита (от 1 до 2 см) объем наполняется водой высокой очистки. Далее происходит интенсивное перемешивание реголита с водой. При этом микрочастицы и десорбированные от грунта микроорганизмы будут перемещаться к поверхности жидкости с образованием слоя толщиной 2-3 мм, обогащенного биомассой. По грубым предварительным оценкам процесс осаждения твердых мелких частиц и всплытие микроорганизмов в условиях Марса должен занимать на 30-50% больше времени по сравнению с земными условиями. После осаждения взвеси верхний слой сливается в мини-картридж, в котором находится смешанный слой ионообменных смол анионита АВ-17 и катеонита КУ-2. Общее их действие обеспечивает очистку воды в 102-103 раз (при начальной 1500 ppm).

При лабораторной отработке методики было экспериментально определено, что характерное время осаждения твердой фракции смеси составляет 5 мин. Для условий гравитации Марса расчетное время экстракции в приближении формулы Стокса составит 13 минут.

После очистки вода, свободная от солей и насыщенная микроорганизмами, будет подаваться на подложку мишени. Ее испарение с поверхности металлической подложки обеспечивает образование слоя микроорганизмов. Далее мишень помещалась в масс-спектрометр для лазерного воздействия.

В бортовом инструменте фокальное пятно лазерного воздействия диаметром 50 мкм и плотностью мощности 109 Вт/см2 автоматически перемещается по поверхности мишени. После каждого воздействия фокальное пятно лазера смещается на величину не менее 100 мкм, после чего проба вновь подвергается воздействию лазера. При этом основной сигнал содержит массовые спектры от микроорганизмов, нанесенных на подложку, а сигнал от микрочастиц пренебрежимо мал. С каждой пробы можно получить до 1000 спектров. Однако для получения достоверных результатов необходимо отобрать 100-500 наиболее полных и достоверных спектров. Процесс отбора спектров выполняется автоматически специальной программой. Этой же системой проводится и статистическая обработка спектров, которые содержат информацию о том, можно ли полученные спектры отнести к спектрам биомассы.

Следует подчеркнуть, что в каждом отдельном спектре представлена вся информация о величинах массовых пиков элементов, относящихся к исследуемым биомаркерам. Это в первую очередь относится к матричным биомаркерам N и С, к биомаркерам P/S, Са/К, к биологически важным соединениям, а также микропримесям.

Чувствительность масс-спектрометра составляет 100 ppm в одном спектре или 10 ppm в 100 спектрах. Чувствительность возрастает при увеличении количества спектров. Характерная точность определения содержания элементов с концентрацией в пробе порядка 0.1% составляет 0,005% по 500 спектрам, а элементов с содержанием порядка 1% - менее 0,002%.

Вся полученная таким образом информация после обработки спектров представлена в виде таблиц с данными об интенсивности каждого конкретного пика элемента. Это позволяет сопоставить величины как биомаркеров, так биологически важных элементов и микропримесей, и сделать заключение о наличии биомассы в составе пробы с вероятностью ошибки не более 1%, что на порядок величины превосходит вероятность ошибки при учете только лишь соотношений P/S и Са/К.

Для проведения проверки работоспособности предлагаемого способа оптимальным будет проведение лабораторных опытов по моделированию условий на Марсе с использованием земных микроорганизмов и грунтов, находящихся в условиях, близких к марсианским.

Так как сегодня достоверно практически ничего не известно о наличии жизни на Марсе и о свойствах марсианских микроорганизмов, при рассмотрении задачи корректного моделирования для условий Марса необходимо сделать ряд допущений. Эти допущения, представленные ниже, сегодня можно считать достаточно хорошо обоснованными и общепризнанными, особенно тем научным сообществом и учеными, которые непосредственно соприкасаются с проблемой поиска внеземной жизни и ведут исследования на поверхности Марса.

Первое допущение заключается в том, что из-за высокого подобия геологических историй Земли и Марса жизнь на обеих планетах могла зародиться 3.5 миллиарда лет назад, в том числе и на больших глубинах в коре Марса, где уже не могла быть уничтожена полностью в процессе потери атмосферы.

Второе допущение состоит в том, что, предположительно, жизнь на Марсе с высокой вероятностью может быть земного типа.

Третье допущение, которое сегодня уже можно считать фактом, заключается в том, что самые суровые условия жизни микроорганизмов в полярных областях на Земле, в частности в арктических пустынях, близки или подобны лучшим условиям жизни микроорганизмов на экваторе Марса, поэтому для отработки на Земле в качестве модели грунтов и сообществ марсианских микроорганизмов обосновано использовать земные микроорганизмы, находящиеся в составе проб арктических и антарктических грунтов.

Согласно полученным результатам для земных микроорганизмов, находящихся в суровых климатических условиях высоких широт севера и юга, по соотношению биомаркеров определен интервал их «зоны локализации». Эти «зоны» для соотношения P/S составили от 0,15 до 3, для соотношения Са/К от 0,3 до 5 и для концентраций N и С более 1% и 10% соответственно (см фиг. 2).

Аналитические характеристики предлагаемого способа получены экспериментально, а результаты подтверждены на различных пробах с использованием лабораторного прототипа бортового прибора.

Способ положен в основу разработки бортового прибора, устанавливаемого на десантируемом модуле космического аппарата с целью обнаружения признаков жизни земного типа во льдах и реголитах на космических объектах за пределами Земли.

Способ обнаружения наличия микробной биомассы земного типа, заключающийся в том, что получают тестируемый образец, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы, помещают тестируемый образец в контейнер, отделяют от тестируемого образца компоненты тестируемого образца с микроорганизмами, проводят масс-спектрометрическое исследование компонентов тестируемого образца с микроорганизмами, отличающийся тем, что в качестве тестируемого образца используют полученный при исследованиях грунт космических тел, измельчают тестируемый образец и помещают его в бортовое устройство с герметичным объемом 10 см3, затем в него добавляют дистиллированную очищенную воду, перемешивают тестируемый образец с водой и отделяют сливом верхний слой с микрочастицами и десорбированными в воду от тестируемого образца грунта микроорганизмами, причем верхний слой с микроорганизмами сливают в картридж, в котором его пропускают через смешанный слой ионообменных смол анионита АВ-17 и катионита КУ-2, и таким образом обеспечивают очистку воды с микроорганизмами в 102-103 раз, после этого очищенную воду с микроорганизмами подают на металлическую подложку мишени для масс-спектрометрического исследования, где испарением воды формируют на металлической подложке слой микроорганизмов и оставшихся в воде микрочастиц, а затем полученную мишень вводят в масс-спектрометр для лазерного воздействия, при этом в ходе масс-спектрометрического исследования вывод о наличии микроорганизмов земного типа делают по величинам массовых пиков химических элементов, относящихся к исследуемым биомаркерам N, C и соотношению биомаркеров: P/S и Ca/K, составляющим для соотношения P/S от 0,15 до 3, для соотношения Ca/K от 0,3 до 5 и для концентраций N и C более 1% и 10% соответственно.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования фетоплацентарной системы и развития плода на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки риска развития патологии беременности. Сущность способа состоит в том, что в качестве биомаркеров оценки риска развития патологии беременности используют концентрацию гипоксантина, ксантина, мочевой кислоты, для чего сыворотку крови разводят дистиллированной водой, освобождают от белков, маскирующих определение биомаркеров риска развития патологии беременности.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для диагностики нарушения трансаминирования глутаминовой кислоты в синцитиотрофобласте плаценты беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации.
Изобретение относится к медицине и касается способа получения продукта, содержащего иммуноглобулины G, A, M, при котором в качестве исходного сырья используют осадки фракции Кона, которые гомогенизируют с получением суспензии, которую обрабатывают хлороформом, перемешивают, выдерживают, центрифугируют, формируют осадок с последующим удалением балластных фракций дополнительным центрифугированием, выделяют целевой продукт с последующим розливом, замораживанием и высушиванием.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения наследственной предрасположенности к нарушению барьерной функции кожи. Сущность способа состоит в том, что из венозной крови осуществляют выделение генетического материала.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для раннего иммунологического прогнозирования возникновения «малых повреждений миокарда» (МПМ) в послеоперационный период после проведения чрескожных коронарных вмешательств (ЧКВ) и стентирования коронарных артерий у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС).

Изобретение относится к медицине, к актуальной проблеме современного здравоохранения, разделу педиатрии и может быть использовано для оценки тяжести поражения гепато-билиарной системы у младенцев и детей раннего возраста и степени выраженности фиброза печени.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска формирования хронической истинной экземы (ХИЭ) в зависимости от наследственной отягощенности у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья РФ.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования течения рассеянного склероза (PC) путем исследования крови, отличающийся тем, что из крови, взятой из вены, выделяют лейкоцитарную взвесь, затем из лейкоцитарной взвеси выделяют ДНК и методом ПЦР в режиме реального времени определяют наличие или отсутствие патологических аллелей в полиморфных вариантах генов rs1800629 (TNFα) и rs6074022 (CD40), причем при выявлении аллеля G полиморфного локуса rs1800629 (TNFα) и аллеля С полиморфного локуса rs6074022 (CD40) прогнозируют повышенную среднюю скорость прогрессирования рассеянного склероза.

Изобретение относится к области медицины, в частности к травматологии, и предназначено для прогнозирования нарушения консолидации при переломах костей конечностей.

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии и молекулярной биологии, и предназначено для диагностики плоскоклеточного рака легкого (ПКРЛ). Осуществляют получение исходной пары образцов ткани от пациента, где один из образцов получен из предположительно пораженной раком ткани, а второй - из прилегающей гистологически нормальной ткани, выделение и очистку препаратов РНК, синтез кДНК на матрице РНК, амплификацию фрагмента гена CALL и сравнение количества амплифицированного фрагмента ДНК CALL для образца, полученного из предположительно пораженной раком ткани, с количеством амплифицированного фрагмента ДНК для образца, полученного из нормальной ткани. Уменьшение содержания мРНК гена CALL от 3 до 44 раз служит диагностическим признаком ПКРЛ. Изобретение обеспечивает раннюю диагностику ПКРЛ. 4 з.п. ф-лы, 1 ил., 4 табл., 6 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиохирургии, и может быть использовано для лабораторной оценки эффективности лечения фондапаринуксом у кардиохирургических больных с гепарин-индуцированной тромбоцитопенией. Сущность способа: кардиохирургическим больным с гепарин-индуцированной тромбоцитопенией вводят фондапаринукс подкожно 1 раз в сутки в дозе 2,5-7,5 мг и через 3 часа после его введения определяют остаточную активность Ха фактора и активность антитромбина III в плазме крови. При остаточной активности Ха в диапазоне 0,4-0,7 мг/мл и активности антитромбина III в диапазоне 60-120% терапия фондапаринуксом эффективна - отсутствует риск развития кровотечений или тромбозов. При остаточной активности Ха ниже 0,4 мг/мл и активности антитромбина III в диапазоне 60-120% терапия фондапаринуксом не эффективна - высокий риск развития тромбозов, рекомендуется увеличение дозы фондапаринукса. При остаточной активности Ха фактора ниже 0,4 мг/мл и активности антитромбина III ниже 60% терапия фондапаринуксом не эффективна - высокий риск развития тромбозов, рекомендуется увеличение активности антитромбина III в плазме крови с помощью введения свежезамороженной плазмы или препаратов антитромбина. При остаточной активности Ха выше 0,7 мг/мл и активности антитромбина III в диапазоне 60-120% терапия фондапаринуксом не эффективна - высокий риск развития кровотечения, рекомендуется уменьшение дозы фондапаринукса. Изобретение направлено на повышение эффективности лечения фондапаринуксом у кардиохирургических больных с гепарин-индуцированной тромбоцитопенией. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития инфекционных осложнений у больных злокачественными лимфопролиферативными заболеваниями, получающих программную химиотерапию. Из клеток периферической венозной крови выделяют ДНК и до наступления цитопенических осложнений программной химиотерапии и манифестации инфекций проводят анализ распределения генотипов полиморфизма Т-1237С гена TLR9. В случае выявления гомозиготы СС Т-1237С TLR9 прогнозируют повышение риска развития инфекций. Изобретение обеспечивает получение новых критериев прогноза развития инфекционных осложнений в ранние сроки полихимиотерапии. 1 ил., 3 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к гнойной хирургии, и может быть использовано для профилактики гипертрофических рубцов при лечении флегмон мягких тканей. Для этого проводят ежедневное гистологическое исследование мазка-отпечатка и лабораторное исследование типа ацетилирования. При ацетилярной активности более 30% и выявлении II фазы раневого процесса, комплекс консервативной терапии включает местное нанесение мази Эгаллохит в течение 5 дней, а при выявлении III фазы раневого процесса - ультрафонофорез геля Контрактубекс в течение 5 дней. При ацетилярной активности от 30 до 20% и при выявлении II фазы раневого процесса комплекс консервативной терапии включает местное нанесение мази Эгаллохит в течение 7 дней, а при выявлении III фазы раневого процесса - ультрафонофорез геля Контрактубекс в течение 7 дней, а затем электрофорез Карипазима 350 ПЕ в течение 7 дней. При ацетилярной активности менее 20% и при выявлении II фазы раневого процесса комплекс консервативной терапии включает введение Лонгидазы по 1,0 мл внутримышечно 1 раз в 3 дня в количестве 10 инъекций, местное нанесение мази Эгаллохит в течение 10 дней, а при выявлении III фазы раневого процесса - ультрафонофорез геля Контрактубекс в течение 10 дней, затем электрофорез Карипазима 350 ПЕ в течение 10 дней, лазеротерапия по 10 минут в течение 5 дней. Способ обеспечивает снижение частоты образования гипертрофических рубцов за счёт предупреждения избыточного рубцевания, ликвидации воспаления и стимуляции регенерации с учётом индивидуальных особенностей больного в отношении избыточного рубцевания. 3 пр.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ дифференциальной диагностики стадий гонартроза, включающий исследование крови и определение в ее плазме концентрации мочевой кислоты (МК), в мкМ/л, отличающийся тем, что в мононуклеарной фракции крови также определяют активность миелопероксидазы (МПО), в у.е./мин·мг, и активность ксантиноксидоредуктазы (КОР), в МЕ/г, после чего рассчитывают суммарный коэффициент диагностики К по формуле: при выполнении условия 3.1≤К<3.4 диагностируют I стадию; при выполнении условия 3.4≤К<3.9 диагностируют II стадию; при выполнении условия 3.9≤К<5.2 диагностируют III стадию; при выполнении условия К≥5.2 диагностируют IV стадию гонартроза по шкале Kellgren-Lawrence. Осуществление изобретения обеспечивает повышение надежности дифференциальной диагностики стадии гонартроза. 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска госпитальной летальности больных острым коронарным синдромом без подъема сегмента ST. Сущность способа состоит в том, что метод для определения риска госпитальной летальности больных острым коронарным синдромом без подъема сегмента «ST» на электрокардиограмме проводят путем пошагового анализа ряда биологических параметров, включающих следующие переменные: возраст пациента 62 года и выше, уровень креатинина крови более 168,0 мкмоль/л, уровень глюкозы крови более 6,4 ммоль/л, уровень тропонина I в крови более 1нг/мл, класс III-IV острой сердечной недостаточности по классификации Killip, систолическое артериальное давление ниже 100 мм рт. ст., передняя локализация инфаркта миокарда. При сумме баллов от 0-3 пациента относят к категории низкого риска, при сумме баллов от 4 до 7 пациента относят к категории высокого риска госпитальной летальности. Использование заявленного изобретения позволяет повысить прогностическую ценность заявленного способа, он отличается удобством и простотой использования, учетом наиболее значимых прогностических факторов, способствует выбору оптимальной тактики лечения для каждого пациента с учетом индивидуальных особенностей. 4 ил., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, и предназначено для дифференциации природы происхождения рецидивных кист при цистном эхинококкозе. Осуществляют выделение ДНК из клеток герминативного слоя оболочки первичной и рецидивной эхинококковых кист. Методом полимеразной цепной реакции получают фрагменты маркерного участка гена cox1 Е. granulosus. Проводят анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов. При обнаружении сходства длин рестрикционных фрагментов первичной и рецидивной эхинококковых кист устанавливают, что рецидивная киста имеет имплантационную природу происхождения. При нахождении различий устанавливают резидуальную или реинвазивную причину возникновения рецидивной кисты. Изобретение обеспечивает получение новых критериев дифференциации природы происхождения послеоперационных рецидивов цистного эхинококкоза. 2 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ). У индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья, определяют возраст, уровень систолического и диастолического артериального давления, наличие отягощенного семейного анамнеза, наличие сопутствующих неинфекционных заболеваний глаз, микрососудистых изменений в конъюнктиве, степень пигментации угла передней камеры, осуществляют забор периферической венозной крови и выделение ДНК, проводят анализ полиморфизма гена VEGF-A с.-958C>T (rs833061), после чего определяют значения дискриминантных показателей Dp и Dk по формулам. В случае, если Dp больше Dk, прогнозируют риск развития ПОУГ. Изобретение обеспечивает раннюю диагностику ПОУГ и позволяет формировать группы риска по данному заболеванию. 3 ил., 5 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития хронического калькулезного холецистита (ХКХ). У женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, осуществляют забор крови, выделение ДНК и анализ полиморфизмов генов интерлейкинов. В случае выявления генетического варианта -511Т IL-1В, либо сочетания аллелей и генотипов -889ТT IL-1А, -511Т IL-1В и -113Т IL-9, либо сочетания аллелей и генотипов -511Т IL-1В и -113ТТ IL-9, либо сочетания аллелей -511Т IL-1B, -113Т IL-9, -592C IL-10 и -251Т IL-8, либо сочетания аллелей -511Т IL-1B, -703Т IL-5 и -584C IL-4 прогнозируют повышенный риск развития ХКХ. В случае выявления сочетания аллелей -889С IL-1А, -511С IL-1B и -703С IL-5, либо сочетания аллелей -511C IL-1B и -703С IL-5 прогнозируют низкий риск развития ХКХ. Изобретение обеспечивает получение новых критериев оценки риска развития ХКХ у женщин. 8 ил., 7 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики. Предложен способ прогнозирования характера поражения желчного пузыря у женщин, больных хроническим калькулезным холециститом, русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России. В случае выявления сочетания генотипов -889ТТ и -889СТ IL-1A либо генотипа -174СС IL-6 прогнозируют образование крупного диаметра камня, а в случае выявления генотипа -584СС IL-4 прогнозируют увеличение толщины стенки желчного пузыря более 4 мм. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование характера поражения желчного пузыря у женщин, больных хроническим калькулезным холециститом. 6 ил., 3 пр.
Наверх