Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав



Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав
Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав
Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав

 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2607751:

Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт мясного скотоводства Российской академии сельскохозяйственных наук (RU)

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при отборе проб биоматериала для получения достоверных данных по содержанию макро- и микроэлементов шерсти крупного рогатого скота. Способ отбора и подготовки проб шерсти включает настриг требуемого образца по массе не менее 2 г с верхней части холки животного с участка кожи размером 5×5 см. Полученную пробу шерсти замачивают в электрохимически дезинфицирующей активированной католитной воде с температурой от +40 до +60°С в течение 2-3 часов. Далее промывают проточной водой с большим напором до исчезновения видимых загрязнений. Очищают в ультразвуковых ваннах с рабочей частотой колебания 35 кГц, используя последовательно моющие среды: 40%-ный этиловый спирт, бидистиллированную воду по 60 мин в каждой среде. По окончании пробу высушивают в сушильном шкафу при +40°С. Обеспечивается удобство взятия образца шерсти с менее загрязненного участка кожи. 1 з.п. ф-лы, 3 табл.

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при отборе и подготовке проб биосубстратов для получения достоверных данных об особенностях метаболизма химических элементов в организме животных.

Покров служит одним из объективных показателей приспособленности животного к условиям среды. Он изменяется в пределах генотипа не только в зависимости от природно-климатической зоны, но и от уровня кормления и содержания. В этой связи неинвазивные методики взятия и оценки химического состава шерсти позволяют разрабатывать индивидуальные программы профилактики и коррекции элементозов.

Шерсть как биосубстрат не требует специального оборудования для хранения и транспортировки, может хранится практически неограниченное время, не теряя своей информационной ценности. При этом следует учесть, что при исследовании шерсти на макро- и микроэлементный состав их концентрация выше, чем в физиологических жидкостях, традиционно используемых для клинических и биохимических анализов, что позволяет существенно расширить набор химических элементов, доступных для аналитического определения.

Между тем при использовании шерсти следует учитывать, что этот субстрат животного как правило сильно загрязнен, это искажает результат исследования и не дает возможности объективной оценки минерального обмена в организме.

В ветеринарии до настоящего времени не существует унифицированной комплексной методики отбора и подготовки проб шерсти животных для исследований на элементный состав. Не определены оптимальные места и размеры участка на теле животного для отбора образцов шерсти.

Известен способ отбора племенных каракульских овец серой окраски, характеризующейся тем, что у ягнят при рождении и 30-дневном возрасте берут образцы шерсти с 1 см2 кожи на крестце и холке с последующим определением степени пигментированности волосков методом ЭПР спектрометрии [1]. Однако данный способ не показывает накопления макро- и микроэлементов в шерсти и возможность взятия образцов с холки для определения элементозов скота. Исследования проведены на ягнятах 30-дневного возраста, сильно отличающихся шерстью по структуре (ость, пух, переходный) и длине с шерстью крупного рогатого скота, недостаточной площадью для взятия образцов, так как у крупного рогатого скота масса шерсти, выстриженной с 1 см2 поверхности кожи на холке, составляет - 0,08 г, что недостаточно для определения макро- и микроэлементов стандартными методами атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии.

Известен способ диагностики хронических микроэлементозов сельскохозяйственных копытных животных, характеризующийся отбором образцов шерсти путем настрига ее с кисти хвоста [2], основными недостатками которого являются:

- невозможность взятия образца шерсти из-за купирования хвоста или утраты его вследствие механической травмы;

- сильного загрязнения шерсти кисти хвоста, что не позволяет отобрать пригодный для анализа образец;

- неполный состав химических элементов (7 элементов), для которых выполнены исследования.

Наиболее близким техническим решением к заявленному при подготовке пробы шерсти к анализу является способ отмывки в моющих средах [3].

Цель нашего изобретения - разработка способа отбора и пробоподготовки шерсти крупного рогатого скота к исследованию на элементный состав.

Способ осуществляется следующим образом:

1. Отбор образца шерсти по массе не менее 2 г, согласно стандартным требованиям при методах исследования на элементный состав, обеспечивающим достижение необходимой точности [4, 6], осуществляется путем настрига его с верхней части холки животного.

2. При пробоподготовке образец волос погружается в лабораторный стакан объемом 200 мл с электрохимически активированной дезинфицирующей католитной водой с температурой от +40 до +60С° на 2-3 часа.

Техническая подготовка ЭХА воды предусматривает применение активатора типа PTV-A (ИВА-1), производимого в России (сертификат соответствия №РОССLТ.АЯ 46.А14995). Водопроводная вода с исходными характеристиками поступает в активатор и на выходе после установленного времени католитная (щелочная) принимает требуемое значение (3,4).

3. Затем воду сливают, а лабораторный стакан с образцом помещают под проточную воду с большим напором и проводят отмывание волос до исчезновения видимых загрязнений, разбивая их стеклянной палочкой.

4. По истечении указанного времени воду сливают, пробу заливают 40% этиловым спиртом и вновь помещают на 60 минут в ультразвуковую ванну с рабочей частотой 35 кГц.

5. Спирт сливают, пробу заливают бидистилированной водой и снова подвергают очистке в ультразвуковой ванне в течение 60 минут.

6. Пробу высушивают в сушильном шкафу при +40С° и исследуют на макро- и микроэлементный состав.

В связи с тем, что в настоящее время не существует унифицированной методики взятия образцов шерсти для изучения элементного статуса по основным химическим элементам, нами проведены исследования шерсти из различных частей тела животного:

- затылочная часть головы;

- корень хвоста с верхней стороны;

- середина последнего ребра;

- передняя часть грудной области;

- верхняя часть холки (впервые в практике взятия проб);

- кисть хвоста.

Данные места взятия проб оценивались по диапазону варьирования элементов, отклонению от средней по всем элементам, удобству и возможности отбора, загрязненности.

При оценке удобства отбора образцов наиболее доступными являются места у корня хвоста с верхней стороны и верхней части холки, так как при фиксации животного в станках данные места всегда доступны.

Для оценки загрязненности шерсти произведен отбор образцов с участка 5×5 см у 120 голов крупного рогатого скота герефордекой и казахской белоголовой пород. После этого нами определялась степень загрязнения пробы путем вычисления разницы массы шерсти до и после пробоподготовки (табл. 1).

Данные табл. 1 показывают, что наиболее «чистой» является шерсть с верхней части холки и передней части грудной области, самой загрязненной частью является кисть хвоста.

Для определения содержания макро- и микроэлементов в биосубстрате мытую шерсть от физиологически здоровых животных в количестве 120 образцов (различные половозрастные группы и время года) исследовали в лаборатории АНО «Центра биотической медицины» г. Москва (регистрационный номер в государственном реестре - Росс.RU 0001. 513118 от 29 мая 2003; Registration Certificate of ISO 9001: 2000, Number 4017-5.04.06) по 25 химическим элементам. Точность определяемых параметров достигалась путем использования методов атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии (АЭС-ИСП и МС-ИСП) на оборудовании Elan 9000 (Perkin Elmer, США) и Optima 2000 V (Perkin Elmer, США), обеспечивающих достижение точности 109-1012 по 25 химическим элементам (Са, Cu, Fe, Li, Mg, Mn, Ni, As, Cr, K, Na, P, Zn, I, V, Co, Se, Al, B, Cd, Pb, Hg, Sn, Si, Sr) [5].

Масс-спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой (ИСП-МС) является современным методом определения малых (мкг/кг) и сверхмалых (нг/кг и менее) концентраций элементов, а также их изотопного состава в различных объектах. Метод позволяет проводить определение практически всех элементов периодической системы в одной пробе за время около минуты. Он основан на использовании индуктивно-связанной плазмы в качестве источника ионов и масс-спектрометра для их разделения и детектирования [4].

Результаты анализа шерсти на содержание макро- и микроэлементов представлены в табл. 2.

При исследовании учитывалось отклонение содержания изучаемых элементов отдельно взятой пробы шерсти от среднего показателя всех зон его отбора, для выявления места отбора, которое наиболее соответствует общему элементному статусу всего организма животного.

Анализ полученных в исследовании данных показал, что по 22 (K, Са, Mg, Na, Р, Zn, Fe, Cu, Mn, I, Se, Cr, Co, Si, B, Li, V, Al, Sr, Pb, Sn, Hg) из 25 исследованных макро- и микроэлементов, влияющих на биологические процессы обмена веществ, наиболее близкими к средней величине, при недостоверной разнице, характеризовались пробы шерсти с верхней части холки, следовательно, ее можно использовать в качестве маркера для взятия и определения элементного статуса животного (табл. 2, 3).

Таким образом, на основании изучения элементного статуса средних показателей проб шерсти, по удобству и возможности отбора, загрязненности шерсти наиболее приемлемым для анализа является предлагаемое место отбора образца с верхней части холки.

При отборе образцов шерсти в производственных условиях существует проблема с выбором оптимальной площади участка настрига шерсти, с которого гарантированно дает необходимую для исследований навеску образца. Проблема обусловлена еще и тем, что чрезмерно большой по площади участок, выстриженный на холке животного, негативным образом отражается на защитной и терморегуляционной функции, которую выполняет шерстяной покров животного.

С целью определения площади участка для отбора образца нами проведено исследование на крупном рогатом скоте (n=120).

Источники информации

1. Патент на изобретение KZ №23604 Способ отбора племенных каракульских овец серой окраски / Бейбеков Е., Омбаев A.M., Ескара М.А., Алибаев П., Саденов А., Алибаев П., Саденов А., Абуов Г., Бойбеков М.Е.: Опубликовано 15.10.2010 г.

2. Патент на изобретение РФ №2477483 Способ диагностики хронических микроэлементозов сельскохозяйственных копытных животных / С.Ф. Тютиков, В.В. Ермаков: опубликовано 10.03.2013.

3. Патент на изобретение РФ №2451926. Способ подготовки проб волос крупного рогатого скота к исследованию на макро- и микроэлементный состав / Ю.К. Коваленок: опубликовано 27.05.2012 - прототип.

4. МУК 4.1.1483-03 Определение содержания химических элементов в диагностируемых биосубстратах, препаратах и биологически активных добавках методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной аргоновой плазмой.

5. Http://www.fgu-radiovetlab.ru/preimuschestva-metoda-atomno-emissionnoy-spektrometrii-s-induktivno-svyazannoy-plazmoy.html

6. Мирошников С.А. и др. Закономерность формирования элементного состава биосубстратов человека как основа технологии и коррекции элементозов. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН, №4, 2014. - С. 1-11.

1. Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав, включающий настриг требуемого образца по массе не менее 2 г с верхней части холки животного с участка кожи размером 5×5 см, подготовку проб шерсти, включающую ее замачивание в электрохимически дезинфицирующей активированной католитной воде с температурой от +40 до +60°С в течение 2-3 часов с последующим промыванием проточной водой с большим напором до исчезновения видимых загрязнений и последующую очистку в ультразвуковых ваннах с рабочей частотой колебания 35 кГц, используя последовательно моющие среды: 40%-ный этиловый спирт, бидистиллированную воду по 60 мин в каждой среде, по окончании пробу высушивают в сушильном шкафу при +40°С.

2. Cпособ по п. 1, отличающийся тем, что точность определяемых параметров образца шерсти по элементному статусу животного достигается путем использования методов атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии, обеспечивающих достижение точности 109-1012 по 25 химическим элементам.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, иммунологии, и касается способа прогнозирования невынашивания беременности в первой половине гестации у женщин с урогенитальной инфекцией.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки риска прогрессирования хронической болезни почек (ХБП) у детей. У ребенка с подозрением на ХБП забирают кровь из периферической вены и с помощью метода аллель-специфичной полимеразной цепной реакции проводят идентификацию однонуклеотидных полиморфизмов генов ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ) Alu Ins/Del I>D, ангиотензина (AGT) Thr174Met и Met235Thr, рецепторов 1 типа ангиотензина 2 (R1AGT) С1166С и эндотелина-1 (ЕТ-1) Lys198Asn.
Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии, и может быть использовано при прогнозировании летального исхода у недоношенных новорожденных при церебральной ишемии средней степени тяжести, обусловленной врожденной цитомегаловирусной инфекцией.

Изобретение относится к медицине, а именно к гемокоагулологии, и касается способа выявления в крови продуктов паракоагуляции. Способ выявления в крови продуктов паракоагуляции, включающий забор крови, стабилизацию ее 3,8%-ным цитратом натрия, отделение плазмы от форменных элементов крови и определение в ней массы образующегося сгустка, при этом плазму разделяют по 1 мл на контрольную и опытные пробы, в контрольную пробу вводят 0,1 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия, в опытные - по 0,1 мл 0,03-0,09%-ного раствора гипохлорита натрия, проводят инкубацию проб в течение 30 мин при комнатной температуре, определяют в каждой пробе концентрацию фибриногена по методу Рутберг с последующим расчетом разности концентраций опытной пробы с максимальным значением и контрольной пробы, положительное значение которой 0,25 г/л и выше указывает на наличие в плазме продуктов паракоагуляции.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу ранней диагностики ангиопатии при метаболическом синдроме. Способ ранней диагностики ангиопатии при метаболическом синдроме включает определение индекса массы тела (ИМТ), содержания в периферической венозной крови триглицеридов и N-концевого фрагмента мозгового натрийуретического пептида (Nt-pro-BNP) и при увеличении содержания Nt-pro-BNP более 500 фмоль/мл, триглицеридов более 3,0 ммоль/л и ИМТ более 35 кг/м2 диагностируют метаболический синдром, включающий ангиопатию.

Изобретение относится к области генной инженерии, конкретно к скринингу веществ, оказывающих регулирующее вес действие, и может быть использовано в медицине. Способ скрининга веществ, оказывающих регулирующее вес действие, включает приведение тестируемого вещества в контакт с клетками, экспрессирующими ген синовиолина, и идентификацию того, имеет или нет указанное тестируемое вещество ингибирующее влияние на экспрессию гена синовиолина.

Изобретение относится к микрофлюидной системе и может быть использовано для количественного определения отклика живых клеток на определенные молекулы. Микрофлюидная система для управления картой концентраций молекул, пригодных для возбуждения клеток-мишеней, включает: микрофлюидное устройство (1); камеру (8) или дополнительный микрофлюидный канал, содержащий основание (6), предназначенное для приема клетки-мишени; микропористую мембрану (5), покрывающую сеть отверстий (47, 470); одно или несколько средств снабжения для снабжения одного или каждого из микрофлюидных каналов текучей средой, причем по меньшей мере одна из этих текучих сред содержит стимулирующие молекулы клетки-мишени.
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и касается способа выбора длительности терапии Церулоплазмином у пациентов с бронхиальной астмой. Сущность способа заключается в том, что у пациентов с бронхиальной астмой определяют в крови супкроксиддисмутазу (СОД) и малоновый альдегид (МА) и их соотношения МДА/СОД после лечения Церулоплазмином в дозе 100 мг внутривенно 1 раз в сутки в течение 7 дней.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике и может быть использовано для оценки угрозы формирования у беременной гемической анемии при индуцирующем действии цитомегаловирусной инфекции в период обострения на скелет эритроцитов.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики предрасположенности к посттравматическому остеоартрозу коленного сустава. У пациентов существляют генотипирование полиморфизма rs2276109 (A-82G) гена ММР-12.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки реакции организма экспериментального животного на введение сетчатого синтетического импланта.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу неинвазивной экспресс-диагностики сахарного диабета 2 типа. Способ неинвазивной экспресс-диагностики сахарного диабета 2 типа, включающий сбор секретов больших слюнных желез, лиофильную сушку микропрепаратов, нанесенных в виде капли на поверхность обезжиренного предметного стекла, расположенного строго горизонтально, как при проведении метода клиновидной дегидратации в вакуумной камере, далее визуально выделяют наружный и промежуточный слои в периферической части микропрепарата; если ширина наружного слоя менее 13 мкм в секретах левой и правой околоушных, подчелюстных и подъязычных слюнных желез и ширина промежуточного слоя менее 88 мкм в секретах левой и правой околоушных желез и менее 42 мкм в секретах подчелюстных и подъязычных слюнных желез, диагностируют отсутствие сахарного диабета; а если величина ширины наружного слоя 13 мкм и более в секретах левой и правой околоушных, подчелюстных и подъязычных слюнных желез, ширина промежуточного слоя 88 мкм и более в секретах левой и правой околоушных желез и 42 мкм и более в секретах подчелюстных и подъязычных слюнных желез, свидетельствует о наличии сахарного диабета 2 типа.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу неинвазивной экспресс-диагностики сахарного диабета 2 типа. Способ неинвазивной экспресс-диагностики сахарного диабета 2 типа, включающий сбор секретов больших слюнных желез, лиофильную сушку микропрепаратов, нанесенных в виде капли на поверхность обезжиренного предметного стекла, расположенного строго горизонтально, как при проведении метода клиновидной дегидратации в вакуумной камере, далее визуально выделяют наружный и промежуточный слои в периферической части микропрепарата; если ширина наружного слоя менее 13 мкм в секретах левой и правой околоушных, подчелюстных и подъязычных слюнных желез и ширина промежуточного слоя менее 88 мкм в секретах левой и правой околоушных желез и менее 42 мкм в секретах подчелюстных и подъязычных слюнных желез, диагностируют отсутствие сахарного диабета; а если величина ширины наружного слоя 13 мкм и более в секретах левой и правой околоушных, подчелюстных и подъязычных слюнных желез, ширина промежуточного слоя 88 мкм и более в секретах левой и правой околоушных желез и 42 мкм и более в секретах подчелюстных и подъязычных слюнных желез, свидетельствует о наличии сахарного диабета 2 типа.

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для ранней диагностики мастита у коров. Способ заключается в том, что молоко в объеме 100-200 мкл наносят на предметное стекло и проводят дегидратацию препарата в потоке теплого воздуха при температуре 40-50°С и влажности 20-30% в течение 15-20 минут в горизонтальном положении.

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для ранней диагностики мастита у коров. Способ заключается в том, что молоко в объеме 100-200 мкл наносят на предметное стекло и проводят дегидратацию препарата в потоке теплого воздуха при температуре 40-50°С и влажности 20-30% в течение 15-20 минут в горизонтальном положении.

Изобретение относится к медицине, а именно к лучевой диагностике, и может быть использовано для прогнозирования годовой антиостеопоротической эффективности менопаузальной гормональной терапии (МГТ).

Изобретение относится к области биохимии, клинико-лабораторной диагностики, в частности к определению степени обсемененности пародонта патогенными бактериями с помощью ПЦР в реальном времени.

Группа изобретений относится к медицине и касается системы детекции для электрохимического выявления белкового аналита, включающей наноструктурированный микроэлектрод, содержащий линкер на своей поверхности, где линкер присоединен к антителу или его фрагменту, способным связывать белковый аналит; и редокс-репортер, способный к переносу электронов с указанным наноструктурированным микроэлектродом, где связывание белкового аналита с указанными антителом или его фрагментом препятствует переносу электронов между указанным редокс-репортером и указанным наноструктурированным микроэлектродом.

Группа изобретений относится к области определения концентрации глюкозы. Способ определения концентрации глюкозы осуществляется при помощи системы, включающей в себя тестовую полоску с контрольным электродом и рабочим электродом, который имеет покрытие из слоя реагента, нанесенного на слой матрикса, содержащего медиатор, и измерительный прибор.

Изобретение относится к медицине, в частности к неврологии, и может быть использовано для диагностики болезни Паркинсона на доклинической стадии. Сущность способа заключается в том, что проводят определение в плазме крови с помощью ВЭЖХ концентрации норадреналина (НА), дофамина (ДА), 3,4-диоксифениоаланина (L-ДОФА), 3,4-диоксифенилуксусной кислоты (ДОУФК), сравнение концентрации этих показателей с концентрацией, предварительно измеренной у здоровых людей.

Изобретение относится к медицине, а именно кардиохирургии и кардиореаниматологии, и может быть использовано для лабораторной оценки тяжести состояния у реанимационных пациентов кардиохирургического профиля с осложненным послеоперационным периодом. Сущность способа: в мазках крови реанимационных пациентов ежедневно выявляют нормобласты и при определении лейкоцитарной формулы производят подсчет нормобластов и при количестве нормобластов в пределах от 1 до 6 на 100 лейкоцитов оценивают тяжесть состояния как средней степени тяжести; при количестве нормобластов в пределах от 7 до 20 на 100 лейкоцитов оценивают тяжесть состояния как тяжелую; при увеличении количества нормобластов более 21 на 100 лейкоцитов оценивают тяжесть состояния как крайне тяжелую. Изобретение обеспечивает упрощение оценки тяжести состояния у реанимационных пациентов кардиохирургического профиля с осложненным послеоперационным периодом. 1 табл., 3 пр.
Наверх