Способ получения производных 7-аминоцефалоспорановой кислоты

 

(><) 425402

О П И С А Н И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Союз Советских

Социалистимеских

Ресттубттик (61) Зависимый от патента (51) М. Кл. С 070 99/24 (22) Заявлено 02.01.69 (21) 1295124/23-4 (32) Приоритет 02.01.68 (31) 1/68 (33) Швейцария

Опубликовано 25.04.74. Бюллетень № 15

Государст венный комитет

Совета Министров СССР оо делам изобретений и открытий (53) УДК 547 789 07 (088.8) Дата опубликования описания 15.01.75 (72) Авторы изобретения

Иностранцы

Ганс Бикель, Рольф Боссгард, Бруно Фехтиг, Енрико Менард, Иоганнес Мюллер и Гейнрих Петер (Швейцария) Иностранная фирма

«Циба-Гейги АГ» (Швейцария) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

7-АМИНОЦЕФАЛОСПОРАНОВОИ КИСЛОТЫ

Ha1ÑH2СΠ— ХН

СН2Н2

С ООН

Изобретение относится к способам получения новых производных 7-аминоцефалоспорановой кислоты, обладающих фармакологической активностью, превышающей активность очень близких по структуре аналогичных соединений.

Предлагаемый способ получения производных 7-аминоцефалоспорановой кислоты общей формулы

1К ЯНСН СΠ— ХН

,— М СН282

g00Ц где Rl — пятичленный гетероциклический остаток, содерЖащий не менее двух гетероатомов — азот, серу или кислород, — который в положении 5 может быть незамещен или замещен меркаптогруппой, а в других положениях также может быть незамещен или замещен низшим алкилом и в котором атом углерода пятичленного кольца в положении 2 или 3, находящийся между двумя гетероатомами, связан с атомом серы меркаптоацетильной группы;

R> — оксигруппа, свободная или этерифицированная карбоновой или тиокарбоновой кислотой в сложный эфир, N-замещенная карбамоилоксигруппа, в которой атомы кислорода могут быть заменены атомами серы, или остаток четвертичной аммониевой соли, основан на известной реакции меркаптана

5 с галоидалкилами.

Способ заключается в том, что 7-галогенацетиламиноцефалоспорановую кислоту общей формулы

15 где R> имеет указанные значения;

На1 — атом галогена, подвергают взаимодействию с меркаптосоединением формулы R,SH

20 где R> имеет указанные значения.

Процесс желательно проводить в инертном растворителе, таком как метиленхлорид, хлороформ, четыреххлористый углерод, тетрагидрофуран, диоксан, диметилформамид, ацето25 нитрил, в присутствии связывающего кислоту агента, такого как слабое неорганическое основание, например кар бои ат, бикар бои ат, ацетат щелочного металла или третичный амин, предпочтительно этилдиизопропиламин

30 (основание Гюнига) .

425402

Реакцию обычно осуществляют при комнатной температуре в течение нескольких часов. Можно проводить процесс и при более низкой или более высокой температуре.

Продукты выделяют известным способом в свободном виде или в виде соли щелочного или щелочноземельного металла. В случае, если R> является оксигруппой, этерифицированной карбоновой или тиокарбоновой кислотой в сложный эфир, то эту группу известными приемами можно перевести в N-замещенную карбамоилоксигруппу, в которой атомы кислорода могут быть замещены атомами серы, или в четвертичную аммониевую соль.

Пример 1. 3,93 г (10 ммоль) бромацетил-7-аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в 20 мл метиленхлорида, прибавляя

3,45 мл (20 ммоль) N-этилдиизопропиламина.

Затем добавляют раствор 1,37 r (12 ммоль)

2-меркапто-1-метилимидазола в 20 мл метиленхлорида, дополнительно споласкивают

10 мл метиленхлорида.

Через 7 час удаляют растворитель в вакууме и к оставшемуся маслу прибавляют

10 мл метанола и 1,65 мл ледяной уксусной кислоты, после чего через короткое время выпадают кристаллы, их отфильтровывают на нутче, промывают метанолом, сушат и получают практически чистую 7-(1-метилимидазолил- (2) - меркаптоацетиламино) цефалоспорановую кислоту, т. пл. 177 — 179 C (разложение) в запаянном капилляре.

Продукт переводят в кристаллическую соль натрия следующим образом. 2,9 г смешивают с 60 мл метанола и затем прибавляют 3,75 мл

3 М метанольного натрий-(x-этилгексаноата.

При перемешивании и коротком нагревании на водяной бане, имеющей температуру 30 С, вначале идет растворение, а затем кристаллизация соли натрия. Смесь концентрируют в вакууме примерно до объема 15 мл, оставляют ее стоять 1 час при — 20 С, фильтруют на нутче, промывают смесью из тетрагидрофурана и метанола (1: 1) и сушат в вакууме. Натриеваясольлегко растворима вводе, (а) +

+ 107 +. 1 (с = 1; Н О).

УФ-спектр (в воде) показывает максимум при Х 256 ммк (в 12800), т. пл. 150 — 154 С (при разложении), Rf52 0,04; М,щ„. 0,35.

Пример 2. 3,93 г (10 ммоль) бромацетил-7-аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в 15 мл метиленхлорида, прибавляя

3,45 мл (20 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина. К нему добавляют раствор, изготовленный растворением 1,23 г (12 ммоль) 2-меркаптоимидазолина в 20 мл диметилформамида с

10 мл метиленхлорида. Дополнительно промывают 5 мл метиленхлорида.

Через 6 час удаляют метиленхлорид в вакууме, получаемом при помощи водоструйного насоса, затем отгоняют по возможности полнее диметилформамид под вакуумом примерно 0,3 мм рт, ст. и при температуре 30 С.

Врезультате образуется 10,,7 г густого масла.

4.

Прибавлением 100 мл тетрагидрофурана получают вязкую массу, которую интенсивно перемешивают. Отфильтровывают и растирают остаток еще с 50 мл тетрагидрофурана, отсасывают и промывают небольшим количеством тетрагидрофурана и затем гексаном. После высушивания в вакууме получают 6,75 r желтоватого порошка.

Растворяют 4,5 г этого сырого продукта в

13,5 мл диметилформамида и разбавляют

13,5 мл метанола. Раствор размешивают кончиком шпателя с активированным углем при комнатной температуре в течение 5 мин, затем фильтруют его через слой диатомовой земли и фильтр промывают 6 мл смеси диметилформамида и метанола (1: 1). Соединяют фильтрат и промывные воды и добавляют

165 мл тетрагидрофурана, при этом выпадает светло-желтый осадок. Оставляют его стоять

1 час при — 20 С. Затем отфильтровывают на нутче и хорошо промывают остаток подряд смесью метанола и тетрагидрофурана (1: 4,5), тетрагидрофураном и, наконец, гексаном.

После высушивания получают 7- (имидазолинил- (2) - меркаптоацетиламино) цефалоспорановую кислоту в виде почти бесцветного аморфного порошка, который однороден по данным тонкослойной хроматографии, Rf5

0,05; К1до,„0,25, т. пл. (запаянные капилляры)

213 — 216 С (разложение), (а) + 143 +- 2 (в воде, с = 0,5) .

Пример 3. 3,93 г бромацетил-7-аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в

27 мл метиленхлорида, прибавляя 3,45 мл

N,N-диизопропилэтиламина. Затем добавляют раствор, изготовленный растворением 1,43 r

2-меркаптотиазолина в 2 мл диметилформамида с последующим разбавлением 8 мл метиленхлорида. Дополнительно смывают 10 мл метил енхлорида.

Через 7 час удаляют растворитель сначала в получаемом при помощи водоструйного насоса вакууме и затем примерно при 0,3 мм рт, ст. (в водяной бане при 30 С). Получают

7 г густого масла.

6,3 r этого сырого продукта поглощают

27 мл 10 /о-ного раствора дигидрофосфата калия. Прибавлением 0,3 мл 2 н. раствора соды доводят рН до 5. Затем выливают раствор в делительную воронку и экстр агируют его

55 мл метиленхлорида и затем 90 мл этилацетата. Органические фазы промывают подряд два раза, используя по 45 мл фосфатного буфера (рН 5), и выбрасывают их. Затем соединяют все водные фазы и разделяют их

180 мл этилацетата, после чего доводят рН прибавлением 11 мл 1 н. соляной кислоты до

2,9 и насыщают водную фазу поваренной солью. Смесь хорошо взбалтывают, разделяют фазы и экстрагируют водную фазу еще два раза, используя по 90 мл этилацетата. Органические фазы промывают подряд 45 мл насыщенного раствора поваренной соли, сушат сульфатом натрия, соединяют и выпаривают

425402

5 их под вакуумом досуха. Аморфный остаток перекристаллизовывается из 6 мл смеси этилацетата и тетрагидрофурана (9; 1) почти полностью.

Кристаллы (1,76 r) фильтруют на нутче и промывают этилацетатом, очищают их, растворяя в 15 мл тетрагидрофурана, размешивая кончиком шпателя с активированным углем при комнатной температуре и фильтруя через слой диатомовой земли. Фильтрат промывают

5 мл тетрагидрофурана, растворитель удаляют в вакууме и аморфный остаток кристаллизуют из 5 мл смеси этилацетата и тетрагидрофурана (9: 1). Кристаллы фильтруют на нутче, промывают их этилацетатом и сушат в высоком вакууме. Получают чистую 7-(тиазолинил- (2) — меркаптоацетиламино) цефалоспорановую кислоту, т. пл. (запаянные капилляры) 131 — 138 С (разложение).

Для получения соли натрия суспендируют

1,6 г кислоты в 32 мл метанола и к суспензии прибавляют 2,1 мл 3N метанольного этилгексаната натрия. Полученный раствор концентрируют в вакууме до объема 8 — 10 мл и оставляют его стоять примерно 2,5 час при — 20 С. Затем фильтруют на нутче и промывают кристаллы соли натрия подряд 12 мл смеси метанола и этилацетата (1: 1), 5 мл смеси этилацетата и гексана.

Соль натрия плавится при 185 †1 С (при разложении), (а) + 120: : 1 (в воде, с =

= 1), Rfgg 0,26; И101А 0,55.

Пример 4. 3,93 г бромацетил-7-аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в 20 мл метиленхлорида, прибавляя 3,45 мл диизопропилэтиламина. Затем вводят раствор, изготовленный растворением 1,22 г З-меркапто-1,2,4триазола в 10 мл диметилформамида и разбавлением 10 мл метиленхлорида. Промывают дополнительно 10 мл метиленхлорида, Через 7 час отгоняют растворитель сначала в получаемом при помощи водоструйного насоса вакууме, а затем примерно при 0,2 мм рт. ст. (в водяной бане, имеющей температуру 30 — 40 С), в результате остается 10,5 г буроватого масла. Этот сырой продукт растворяют в 20 мл 10 /о-ного раствора дигидрофосфата калия. Прибавляя 0,9 мл 2 н. раствора соды, доводят рН до 5. Затем экстрагируют раствор в делительной воронке подряд 80 мл метиленхлорида и 30 мл этилацетата. Органические фазы промывают два раза, используя по 20 мл фосфатного буфера (рН 5). Соединенные водные фазы разделяют затем 300 мл этилацетата и рН доводят до 2,9, прибавляя

1,0 мл концентрированной соляной кислоты.

В результате образуется бесцветная вязкая масса, которая заполняет обе фазы. Все содержимое делительной воронки фильтруют на нутче через стеклянный фильтр и дополнительно промывают остаток 100 мл этилацетата. Повторным растиранием этого осадка с тетрагидрофураном (примерно 150 мл) можно выделить из раствора почти чистую и кри5

З0

З5 сталлизующуюся 7- (1,2,4-триазолил- (3) -меркаптоацетиламино) цефалоспорановую кислоту. Разделяют содержащий обе фазы фильтрат и получают из него еще кристаллизат.

2,5 r объединенного сырого кристаллизата растворяют в 30 мл смеси тетрагидрофурана и метанола (1: 1), размешивают раствор с активированным углем при комнатной температуре, фильтруют его через слой диатомовой земли и дополнительно промывают фильтр

3 мл упомянутой смеси и 5 мл метанола. Затем сгущают фильтрат в вакууме примерно до объема 5 мл, причем из него сейчас же выпадают кристаллы после заражения кристаллом, т. пл. 149 — 151 С (при разложении).

Суспендируют 1,55 r кислоты в 50 мл метанола и прибавляют 1,85 мл ЗМ метанольного этилгексаната натрия. Прозрачный раствор сгущают в вакууме примерно до 10 — 12 мл, из которого медленно образуются кристаллы.

Прибавляют еще 2,5 мл тетрагидрофурана и оставляют раствор стоять 2 час при — 20 С.

Затем фильтруют на нутче и промывают остаток последовательно смесью метанола и тетрагидрофурана (1: 11, тетрагидрофураном, этилацетатом и гексаном.

Чистая соль натрия плавится при 220—

230 С (при разложении); (а),О + 113 +. 1 ;

Rfn 0,21; К1,О А 0,5.

Пример 5. 39,3 мг бромацетил-7-аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в

0,2 мл метиленхлорида, прибавляя 25.8 мг

N,N-диизопропилэтиламина. Затем вводят раствор, приготовленный растворением 17,4 мг

2-меркапто-4,5-диметилтиазола в 0.05 мл диметилформамида и разбавлением 0,15 мл метиленхлорида. Смывают дополнительно

0,05 мл метиленхлорида.

Через 7 час удаляют растворитель в вакууме при 0,3 мм рт. ст. (на водяной бане, имеющей температуру 30 С) и перерабатывают выделяющееся масло дальше, как описано в примере 3. Получают 7- (4,5-диметилтиазолил(2) - меркаптоацетиламино) пефалоспорановую кислоту, Rf 0,35; РЪы 0,6.

Пример 6. 393 мг (1,0 ммоль) бромацетил-7-аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в 2,0 мл метиленхлорида, прибавляя

258 мг,N,N-диизопропилэтиламина. Затем добавляют раствор, изготовленный растворением 180 мг 2,5-димеркапто-1,3,4-тиадиазола в

0,5 мл диметилформамида с последующим разбавлением 2,2 мл метиленхлорида. Смывают дополнительно 1 мл метиленхлорида.

Через 6 час отгоняют растворитель сначала в получаемом при помощи водоструйного насоса вакууме, а затем примерно при 0.2 мм рт. ст. (в водяной бане, имеющей те перат ру 30 С), остается примерно 1,1 r желтоватого масла. Этот сырой продукт поглощают

10 мл 10 /о-ного раствора дигидрофосфата калия и, прибавляя 0.3 мл 2 н. раствора соды, доводят рН раствора до 5. Затем экстраги425402

65 руют в делительной воронке последовательно

20 мл метиленхлорида и 30 мл этилацетата.

Органические фазы промывают два раза, используя по 10 мл фосфатного буфера (рН 5).

Затем соединяют водные фазы и разделяют их при помощи 40 мл этилацетата, Прибавлением 2,7 мл 1 н. соляной кислоты доводят рН до 2,9 и насыщают водную фазу поваренной солью. После сильного взбалтывания разделяют фазы и дополнительно экстрагируют водный раствор еще два раза, используя по

20 мл этилацетата. Промывают три органические фазы подряд 8 мл насыщенного раствора поваренной соли, затем сушат сульфатом натрия, фильтруют и выпаривают в вакууме досуха. Остаток перекристаллизовывают из смеси этилацетата и тетрагирофурана (9: 1).

7- (5-Меркапто-1,3,4-тиадиазолил - (2) -меркаптоацетиламино) цефалоспорановая кислота плавится при 130 — 142 С при разложении (запаянные капилляры), Rf 0,36; К1дц„0,6.

Пример 7. 1,97 г бромацетил-7-аминоцефалоспорановой кислоты растворяют в 50 мл метиленхлорида, прибавляя 1,29 r (1,73 мл)

N,,N-диизопр опилэтилямина. Затем вводят р аствор, который был изготовлен растворением

0,975 г 2-меркаптобензимидазола в 5 мл диметилформамида и разбавлением 10 мл метиленхлорида. Дополнительно споласкивают

5 мл метиленхлорида.

Через 5 час отгоняют растворитель сначала в получаемом при помощи водоструйного насоса вакууме и затем примерно при 0,2 мм рт. ст. (водяная баня имеет температуру

30 С). Выделяющееся светло-бурое масло поглощают 10 мл 10О/О-ного раствора дигидрофосфата калия и, прибавляя 0.5 мл 2 н. раствора соды, доводят рН до 5. Затем экстрагируют два раза в делительной воронке, используя по 100 мл этилацетата, и промывают экстракты два раза, применяя по 5 мл фос-Фатного буфера (рН 5). Соединяют водные фазы, разделяя их 250 мл этилацетата и, прибавляя 9 мл 1 н. соляной кислоты, доводят рН до 2,5. При этом образуется смолистая тягучая масса, большая часть которой состоит из желаемого продукта. Разделяют и смешивают его с гексаном, из полученного при этом твердого остатка экстрагируют 7-(бензимидазолил- (2) - меркаптоацетиламино) цефалоспорановую кислоту с помощью тетрагидрофурана. Полученный после разделения вязкой массы двухфазный фильтрат насыщают хлоридом натрия. После сильного взбалтывания разделяют органическую фазу, экстрагируют водный раствор еще два раза, используя по 100 мл этилацетата, и промывают три водные фазы подряд 10 мл насыщенного раствора поваренной соли, сушат сульфатом натрия, фильтруют и сгущают соединенные органические растворы в вакууме до объема примерно !О мл. причем кристаллизуется большая часть 7- (бензимидазолил- (2) -меркаптоацетиламино) цефалоспорановой кислоты, 5

35 т. пл. 135 — 145 С (при разложении), Rfgg 0,35;

Rf„,„. 06

Пример 8. 11,75 г 3-(дезацетоксиметил)3-бензоилтиометил - 7- бромацетиламиноцефалоспорановой кислоты растворяют в 75 мл диметилформамида, прибавляя 9,75 мл N-этилдиизопропиламина. Затем вводят раствор

3,58 г 2-меркаптотиазолина в 25 мл диметилформамида и при отсутствии света оставляют его стоять при комнатной температуре. Через

20 час отгоняют большую часть растворителя в вакууме (05 — 1 мм рт. ст.) и поглощают выделяющийся масляный остаток 250 мл фосфатного буфера (рН 6) и 250 мл сложного уксусного эфира. Затем доводят рН водной фазы до 6 и разделяют фазы. Выбрасывают органическую фазу, рН водной доводят соляной кислотой до 2,3 и насыщают ее поваренной солью. Экстрагируют подряд при помощи

1000, 250 и 250 мл сложного уксусного эфира.

Экстракты сложного уксусного эфира промывают насыщенным раствором поваренной соли, сушат сульфатом натрия и фильтруют через колонку с 75 r силикагеля. Из соединенных фильтратов получается 11 г сухого остатка. Последний хроматографируют на колонке с 520 r силикагеля при помощи хлороформа и смесей хлороформа и ацетона. Для хлороформа — ацетона (9: 1) элюаты дают 7,6 r аморфной 3- (дезацетоксиметил) -3-бензоилтиометил-7-(тиазолинил - (2) -меркаптоацетиламино)цефалоспорановой кислоты, которую можно перевести в кристаллическую соль натрия со структурой — 8 — СН СО NH

S

СН2SCOCGH5 при помощи натрий-сс-этилгексаната, R4 0,50, Х 240 нм (в 19 200) и 3, 274 нм (в 20000).

Применяемую как исходный продукт 3-(дезацетоксиметил) - 3-бензоилтиометил - 7-бромацетиламиноцефалоспорановую кислоту можно изготовить следующим образом.

Раствор 17,5 г 3-(дезацетоксиметил)-3-бензоилтиометил)-7-аминоцефалоспорановой кислоты (сравни бельгийский патент № 650444) и 12,5 мл триэтиламина в 1 л диметилформамида прикапывают в течение 1 час в хорошо перемешанный и имеющий температуру минус 13 — минус 15 С раствор 9,2 мл бромистого бромацетила в 100 мл метиленхлорида в атмосфере азота.

Температуре дают в течение 90 мин медленно подняться до 10 С и поддерживают ее еще

30 мин. Затем отгоняют большую часть растворителя в вакууме при 0,5 — 1 мм рт. ст. при помощи охладителя — сухого льда и ацетона.

Масляный продукт наливают на фосфатный буфер (рН 6) и смешивают его с 1 л сложного уксусного эфира. На границе обеих фаз

425402

8 SHCH СО-ЯН

ы снр, C 008

65 образуется вязкая масса, которую отделяют путем фильтрования и центрифугирования.

Затем доводят рН водной фазы до 2, насыщают последнюю поваренной солью и разделяют органическую фазу. Водную фазу экстрагируют дополнительно 600 и 400 мл сложного уксусного эфира. После промывания насыщенным раствором поваренной соли сушат органические фазы над сульфатом натрия и фильтруют их последовательно через колонну с 100 мл силикагеля. Фильтраты сгущают в вакууме досуха, к остатку прибавляют

30 мл этанола и перекристаллизовывают его при — 20 С. Получают 7,8 r 3- (дезацетоксиметил) -3 - бензоилтиометил-7-бромацетиламиноцефалоспорановой кислоты, т. пл. 137 †1 С, R4 0,55.

Соль натрия в УФ-спектре в воде: Хмакс

243 нм (в 16800) и X„,, 275 нм (в 20600), (а) о 47+ 1 (с = 1, в 0,1М растворе бикарбоната натрия — ацетона (1: 1) ).

Пример 9. 4,73 г 3-(дезацетоксиметил)3- бензоилтиометил-7-(тиазолинил - (2) - меркаптоацетиламино) цефалоспорановой кислоты (соль натрия) растворяют в 35 мл пиридина и затем прибавляют 35 мл диоксана. Далее вводят 20,9 мл 40%-ного раствора перхлората ртути и дают раствору прореагировать, сильно перемешивая его 45 мин при

45 С (в атмосфере азота). Охлаждают, прибавляют 11,1 мл тиобензойной кислоты и взбалтывают 5 мин. Отгоняют растворитель в вакууме и взбалтывают раствор остатка в

140 мл воды с активированным углем. Фильтрат промывают подряд 90 мл толуола два раза, используя по 55 мл Amberlit 1 А-2 в 115 мл толуола, и два раза, применяя по 90 мл толуола. Затем фильтруют водную фазу через колонку, которая содержит снизу вверх 8,5 мл

Sephadex СМ С-25 (Н+-форма), 34 мл Alox, 8,5 мл Zeo-КагЬ 226 (Н+-форма), 34 мл Alox, 8,5 мл Dowex-1 (ацетатная форма) и 8,5 мл

Sephadex СМ С-25 (Н+-форма). Celite, органические фазы и колонку экстрагируют дополнительно два раза, используя по 30 мл воды, колонку элюируют, кроме того, еще 200 мл воды. Сгущают соединенные элюаты в вакууме, удаляют небольшое количество вязкой массы фильтрацией и выпаривают досуха.

Остаток дигерируют 10 мл спирта и получают чистую 3- (дезацетоксиметил) -3-пиридинометил-7- (тиазолинил - (2) -меркаптоацетиламино)цефалоспорановую кислоту, (а) + 41 ++1 (с= l, в водей; УФ-спектр в воде; Х,.

257 ммк (в 13000), К1цц„. 0,18.

Пример 10. 2,95 г соли натрия 7-(тиазолинил- (2) - меркаптоацетиламино) цефалоспорановой кислоты (сравни пример 3) растворяют в 150 мл воды. Раствор нагревают до

37 С и 0,7 мл 0,1 н. натрового щелока доводят его до рН 7,5. Затем смешивают с 60 мг ацетилэстеразы (из Bacillus subtilis АТСС

6633, сравни английский патент № 1080904) в 2 мл воды и автоматическим титратором LA

20 г5

50 непрерывно нейтрализуют образовавшуюся уксусную кислоту при помощи 0,1 н. натрового щелока (доводят рН до 7,3). Через 4 час реакция окончена. Доводят рН до 65, фильтруют раствор через стеклянный фильтр G 4 и подвергают лиофильной сушке. Получают

3,18 г желтоватой смолы соли натрия 7-(тиазолинил- (2) - меркаптоацетиламино) - О - дезацетилцефалоспорановой кислоты.

Этот сырой продукт растворяют непосредственно в смеси 30 мл абсолютного диметилформамида и 8,5 мл триэтиламина, прибавляют к нему 5,05 мл р-хлорэтилизоцианата и перемешивают 30 мин при комнатной температуре. Затем удаляют растворитель в высоком вакууме и растирают смолистый буроватый остаток три раза, используя по 150 мл абсолютного простого эфира, Нерастворимый в простом эфире остаток поглощают 75 мл

10%-ного фосфатного буфера (рН 6,7) и отделяют его 500 мл сложного уксусного эфира.

Прибавлением 30 мл 2 н. соляной кислоты доводят рН водной фазы до 2,5. После сильного взбалтывания разделяют фазы и дополнительно экстрагируют затем водную фазу еще раз

300 и 200 мл сложного уксусного эфира. Органические фазы промывают два раза, используя по 50 мл насыщенного раствора поваренной соли, сушат сульфатом натрия и выпаривают их в вакууме досуха. Полученная смола кристаллизуется после прибавления небольшого количества ацетона. Фильтруют на нутче и промывают кристаллы смесью из равных частей ацетона и простого эфира. Сырой кристаллизат можно чистить дальше, прибавляя

1,2 мл 3 н. метанольного раствора натрий-аэтилгексаната к суспензии в 18 мл метанола, осветляя смесь при помощи небольшого количества диатомовой земли, сгущая в вакууме примерно до 8 мл и перекристаллизовывая чистую соль натрия О-дезацетил-О- ($-хлорэтилкарбамоил) - 7 - (тиазолинил - (2) -меркаптоацетиламино) цефалоспорановой кислоты при — 15 С. Она имеет в УФ-спектре Х,„„ .

255 нм (g 10850, в воде), (а) д + 99+ 1 . С помощью тонкослойной хроматографии получают следующие данные: для системы Rf„

035 для системы RfioiA 055 и для системы сложный уксусный эфир — пиридин — ледяная уксусная кислота — вода (62: 21: б: 11)

Rf 034.

Предмет изобретения

1. Способ получения производных 7-аминоцефалоспорановой кислоты общей формулы где Ri — пятичленный гетероциклический остаток, содержащий не менее двух гетероато