Способ получения арахидоновой кислоты

 

О ПИ САНИ Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Сотов Советских

Социанистинесиии

Республик (11) 585152. (51) М. Кл. (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено 310376(21) 2339452/23-04 с присоединением заявки М

С 07 С 57/02 .С 11 В 13/00 т иврщзитввииы1 иивитвт

Ваввта Мииивтраи COOP ив двлив иавврвтвии% и Втирытии (23) Приоритет (43) ОпУбликовано 25.12,77. Бтоллетень р(В 47 (53) УДХ 547, 39,07 (088. 8) (45) Дата опубликования описания,151277

Г.И.Мягкова, P .П. Евстигнеева, И. К. Сарычева, Л.A.ßêóøåâà и Е.П.Богословская (72) Авторы изобретения (71 Заявитель

Московский брдена Трудового Красного Энамени институт тонкой химической технологии им. М.В.Ломоносова (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АРАХИДОНОВОЙ КИСЛОТЫ

Изобретение относится к способам получения биопредшественника простагландинов g, и F а именно, к получению арахидоновой, цис-, цис цис-, цис-5,8,11,14-эйкоэатетраено- 5 вой кислоты(М). .

Известные ранее способы получения арахидоновой кислоты из надпочечных желез крупного рогатого скота путем фракционной кристаллизации концен- 10 тратов высших жирных кислот с последующей очисткой:арахидоновой кислоты методом бромироваиия .", дебромирования (1) или дробной кристаллизации Соединений включения с мочевиной (2 j, 15 не дают воэможности получить целевой продукт, не содержащий примесей.

Известен также способ получения арахидоновой кислоты (31, заключаю-.

1цийся в том, что липиды животных тка. > ней (надпочечные железы) омыляют .и после фракционной кристаллизации при

-70 -20 С обрабатывают мочевиной с дальнейшей кристаллизацией мочевинных комплексов при -75 — -20 С. После

0 разложения комплексов получают концентрат:арахидоновой кислоты, окончательную очистку которой проводят адсорбционной хроматографией на оки30 си алюминия. Выход арахидоновой кислоты (96% чистоты) 19-203. Недостатком способа является процесс изомериэации, протекающий на окиси алюминия, снижающий чистоту целевого продукта появлением изомерных примесей, являющихся ингибиторами биосинтеза простагландинов.

Целью изобретения является увеличение чистоты и выхода целевого продукта, Это достигается тем, что мочевинный комплекс после кристаллизации разлагают при рН 3 и прн температуре 40-45 С, полученную при этом смесь полиеновых кислот этерифицируют в присутствии кислых катализаторов, и полученные эфиры полиеновых кислот последовательно подвергают фракциони рованию при остаточном давлении 0,010,06 мм рт.ст.,омылению и фракционированию при 0,01-0,06 мм.рт.ст, Получение мочевинных комплексов проводят по способу описанному выше. Однако в качестве исходных веществ целесообразно использовать липиды поджелудочной железы — отход производства эндокринных препаратов. Выход целевого продукта - арахидоновой кислоты (97-98% чистоты) 27-28%.

585152

Пример. К перемешиваемой эмульсии 400 r липидов поджелудочной железы животных в 450 мл метилового спирта за 50 мин прибавляют раствор 107г едкого кали в 300 мл воды. Реакционную массу перемешивают 3,5 ч в токе азота, затем охлаждают до (-)5-О С и к отделенному фильтрату добавляют

200 мл толуола, подкисляют 175 мл

10Ъ-ной серной кислоты до рН 3, пе- 10 ремешивают 1 ч, отфильтровывают осадок и промывают его 50 мл толуола.

Органический слой отделяют от водного. Из водного слоя — вещество извлекают толуолом (2x50 мл). Объеди- 1я ненные толуольные экстракты обрабатывают 230 мл 15Ъ-ного водного раствора метабисульфнта натрия (2 часа).

Органический слой отделяют, сушат сернокислым натрием. Остаток 233,5 г смеси высших жирных кислот с содержанием Ar 3,1Ъ растворяют в 600 мл ацетона, охлаждают до -25 — -20 С, перемешивают 2 ч, осадок отделяют. С фильтратом (около 600 мл) проводят подобное разделение последовательно при -55 -45 С, -70 — -65 С. Конечный фильтрат отделяют, удаляют ацетон, а остаток (34,0 r смеси высших ненасыщенных жирных кислот с содержанием 3» 17,6Ъ) прибавляют за 15мин к нагретому до 60-65 раствору 1420r мочевины в 400 мл метилового спирта, перемешивают 20 мин, охлаждают до

18-20 и выстаивают 10 ч.Осадок отделяют, фильтрат упаривают до половины объема, охлаждают до -50 — -45, перемешивают 2 ч. Осадок отделяют, фильт" рат упаривают до 50-80 мл и снова перемешивают при -70 — -65 2 ч, осадок отделяют, фильтрат подкисляют 40

30 мл 10Ъ-ной соляной кислоты до рН 3.

Затем реакционную массу перемешивают в токе азота 45 минут при 40-45, ох» лаждают и обрабатывают толуолом (3x50 мл) . Органические экстракты 4ф отделяют, сушат сернокислым натрием и после удаления растворителя получают 11,2 г концентрата полиеновых кислот (А» 48,9Ъ), который растворяют в 60 мл безводного метилового ф) спирта в присутствии 2,5 г хлористого ацетила и перемешивают 1 ч при 65-67.

Затем реакционную массу охлаждают, метанол удаляют, остаток последовательно обрабатывают водой (10 мл), насы- щ щенным водным раствором бикарбоната натрия (2х20 мл) до рН 6-7 и вещество извлекают толуолом (5x50 мл), Толуольные экстракты сушат, остаток (10,8r) после отгонки растворителя перегоняют. Е

Получают 3 фракции: ) фр. 1,5 r, т.кип. 108-118 /0,06 мм, tt 0 1,4538;

Я фр. 2, 05 r, т.кип. 118-124 /О, Обмм, а 1. 4643; Щ фр. 6, 00 г, ткип. 124,5-15О /О, 06 мм, ng 1, 4745. Щ 65 фракцию снова фракционируют и получают

2 фракции: (фр. 1,8 r, т.кип. 118123 /О, 09 мм, рп 1, 4709, содержание

At 27, ОЪ; lJ фр. 3, 5 г, т.кип. 126130 /О, 09 мм, п о 1, 4755, содержание

Я» 73,1Ъ. Г1 фракцию (3,5 r) концентрата эфира арахидоновой кислоты прибавляют к раствору 0,87 г едкого натра в 50 мл метилового спирта. Реакционную массу перемешивают в токе азота 6 ч при 18-20, метанол отгоняют, к остатку добавляют 20 мл воды (рН 9-10), 30 мл толуола и подкисляют 2 н. серной кислотой (10-15 мл) до рН 2. Толуольный слой отделяют, водный слой - извлекают толуолом (3x30 мл). Толуольные экстракты с

20 мл 7Ъ-ного водного раствора мета" бисульфита натрия перемешивают 3 ч.

Толуольный слой отделяют, сушат и остаток (3,2 г) после отгонки растворителя перегоняют, получают 3 фракции: 1 фр. 0,6 г, т.кнп. 150-156 при 0,06 мм, п 1,4810; Й фр.

2 1 r, т.кип. 158-160 при 0,06 мм, 1,4870; 1и фр. 0,1 г, т.кип.

161-165 при 0,06 мм, tl 0 1,4910.

ll фракция после обработки на аргентированном силикагеле представля ет собой арахидоновую кислоту,9798,0Ъ чистоты (примесь /по данным

ГЖХ/ составляет цис-, цис-, цис-, цис-8,11,14,17-эйкозатетраеновая кисота) с(. 20 0 9245 и 1,4870

NR > 94,1 (найдено), MR 1 97,2 (вычислено) .

Найдено, Ъ! С 78,9; Н 10,51. и.ч. 32,5 °

С«H„O„r„

Вычислено, Ъ! С 78,95; Н 10,53. и.ч. 333,6.

Структура и индивидуальность целевого продукта подтверждена УФ-, ИК-, ПМР-спектрами и данными ГЖУ.

Формула изобретения

Способ получения арахидоновой кислоты из липидов животных тканей путем их омыления с последующей последовательной фракционной кристаллизацией полученной смеси высших жирных кислот при -70 — -20 С и обработкой мочевиной, дальнейшей кристаллизацией полу ченных мочевинных комплексов,при

20 С,отличающийся тем, что, с целью повышения. чистоты и увеличения выхода целевого продукта, мочевинный комплекс после крис таллизации разлагают при рН 3 и температуре 40-45 С, полученную при этом смесь полиеновых кислот этерифицируют в присутствии кислых катализаторов, и полученные эфиры полиеновых кислот последовательно подвергают фракционированию при остаточном давлении 0,01"585152

Составитель Н.Токарева (,,Заказ 4957/15 Тираж 553 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва Ж-35 Ра шская наб. . 4 5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

0,06 мм рт.ст., омылению и фракциони" рованию при 0,01-0,06 мм рт.ст.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

f. Эеочгл т.В. The highfgumsatu ted fatty асИ о% liver И ибе.The реферат сКюв of а асЫоо-, aic асЫ. XBkf Сажею.,1928- v.80, р. 455-460

Мои%.С., Взор Э.В. Some observations ñîh-

ce Ьзф the chemietm of awchidqnic асЫ

and its срапШайлче estimation. У.5iut.Chem„, 107,1 р. 615-622. 1934.

2. МсЕРэоц О.E., МсЬaughfin Jordan f., Ргееажж м.Е..Unsaturated fatty aciae.Ьом tem5 fxmtvw u опрРекаоУ po(vvnaturtgted аде Очи Ьочюе tiesue.т.km,Oit cheth.sac., 32, р. 286-290, 1955.

3. Пятнова Ю.Б. и др. Получение эйкоэатетраен-5,.8,11,14-овой, арахи: доновой кислоты, EOX 32, 142-144 . 1962.