Способ определения количества органической фазы в образцах биологических минерализованных тканей


 


Владельцы патента RU 2499259:

Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений Россельхозакадемии (ГНУ ВИЛАР Россельхозакадемии) (RU)

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к определению композиционного состава биологических минерализованных тканей. Способ включает исследование образцов в нативном состоянии и на различных этапах деорганификации гистоморфометрическим методом. При этом предварительно определяют последовательно меняющееся количество органической фазы в калибровочных образцах в нативном состоянии и на различных этапах деорганификации гистоморфометрическим методом, затем определяют энергию горения органической фазы в данных образцах методом дифференциально сканирующей калориметрии, по которой вычисляют удельную энергию горения, после этого определяют относительное изменение содержания органической фазы в калибровочных образцах по формуле dM=(MH-Q/(mобр×q))/MH, где dM - изменение содержания органической фазы в образце относительно нативного образца, МH - содержание органической фазы в нативном образце, отн.ед., Q - энергия горения органической фазы в образце, Дж, mобр - масса образца, г, q - удельная энергия горения органической фазы в образце, Дж/г, устанавливают корреляцию между количеством органической фазы в калибровочных образцах и его изменением относительно нативного образца в процессе деорганификации, после чего определяют энергию горения органической фазы в исследуемом образце методом дифференциально сканирующей калориметрии и вычисляют изменение содержания органической фазы относительно нативного образца по предложенной формуле. Методом интерполяции по полученному значению dM определяют массу органической фазы в исследуемом образце. Достигается повышение эффективности и надежности определения. 2 пр., 1 табл.

 

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к определению композиционного состава биологических минерализованных тканей, а также к оценке степени их деорганификации, и предназначено для использования при изготовлении деминерализованного костного матрикса при проведении реконструктивно-восстановительных операций с целью замещения дефектов костей, возникших в результате травмы или после резекции кости.

Костные трансплантаты широко используются при различных ортопедических манипуляциях: разрушении костей, медленном сращении или несращении переломов, а также в качестве имплантируемого материала при значительных дефектах костей. Трансплантационным материалом могут быть как деминерализованные, так и деорганифицированные фрагменты костной ткани.

Деминерализованный костный матрикс (ДКМ) представляет собой коллагеновую основу костной ткани, лишенную клеточного компонента (90%), и неколлагеновые протеины (10%). В деорганифицированном матриксе, наоборот, удалению подвергается минеральная фаза. Получение их возможно при использовании различных приемов физико-химической обработки.

Существуют различные способы изготовления аллотрансплантата. Например, известен способ, включающий подготовку образцов нативной кости (костный матрикс), механическую обработку до необходимого размера, промывку ее холодной водой, обезвоживание и обезжиривание по общепринятым методикам, вычисление количества минерального компонента и необходимое для деминерализации (поверхностной, частичной или полной) количество хлористоводородной кислоты, нейтрализацию остатков кислоты, лиофилизацию и стерилизацию заготовки / Савельев В.И. Деминерализованная кость как особая разновидность костно-пластического материала. Сборник научных трудов ЛНИИТО им P.P. Вредена. Заготовка и пересадка деминерализованной костной ткани в эксперименте и клинике. Л.: НИИТО, 1983, с.3-12 /. Качество, а именно степень деминерализации полученных образцов, контролируют гистоморфометрическим и рентгенологическим методами, а структуру - методом световой микроскопии и электронной микроскопии.

Существуют несколько методов определения состава биологических минерализованных тканей:

1. Метод определения состава костной ткани на основе измерения объемов пор одного и тоже же исследуемого образца в четырех меняющихся состояниях (нативном, с удаленными остатками жидких фракций, обезвоженном, с удаленной органикой). /.А.Е. Луньков, Г.Н. Амбросимов. Метод определения состава костной ткани // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. - 1991. - №2. - С.88-91/. К недостаткам этого метода следует отнести проведение множества операций: сушка, взвешивание, центрифугирование, пикнометрирование, что свидетельствует о его сложности и трудоемкости и их влиянии на точность определения состава костной ткани.

2. Гистоморфометрический метод определения количества содержащейся органики в костном образце для оценки степени деминерализации или деорганификации костных образцов по ширине зоны деминерализации (деорганификации) на поперечных срезах /Матвейчук И.В. Структурно-функциональная адаптация костной ткани как композита с учетом видовых, возрастных и функциональных особенностях: дисс. доктора биол. наук - Москва, 1998. - 285 с./. Недостатки метода заключаются в косвенном определении степени деминерализации (деорганификации), проба для анализа должна быть строго определенной геометрической формы.

3. Метод, заключающийся в выжигании органики в муфельной печи в течение 3 ч при температуре 500°С / Н.Г. Смирнов и др. Физико-химические характеристики ископаемых костных остатков млекопитающих и проблема оценки их относительного возраста, ч.1. Термический и масс-спектрометрический элементный анализ. Екатеринбург: "Гощицкий", 2009. - 118 с./, или определение по зольному остатку / Звягин В.Н. Массивность, объем, плотность и процент зольного веса костей черепа. Вопросы судебно-медицинской и экспериментальной практики. Чита, 1973. - вып.6. - С.37-41./. Существенным недостатком является массовые потери, включающие не только органику, но и потерю костью адсорбированной воды.

4. Гравиметрический способ, заключающийся в количественной оценке содержания основных компонентов костной ткани (органический, минеральный, водный) с использованием специальных растворов, максимально щадящих структуру костной ткани, при деминерализации (деорганификации), в том числе и после дегидратирующих воздействий. / Матвейчук И.В., Денисов-Никольский Ю.И. Влияние процесса деминерализации на механические характеристики образцов компактной кости взрослого человека // Современные проблемы биомеханики." 1987. - вып.4. - С.175-183/. Однако существенными недостатками получения данных о композиционном составе по использованию этого способа является значительная трудоемкость и необходимость иметь образцы нужной геометрической формы. В процессе физико-химических воздействий разрушению подвергается не только минеральная часть, но и органическая фаза, что влияет на точность полученных данных содержания органики.

В настоящее время отсутствует способ, максимально отвечающий современным требованиям определения композиционного состава биологических минерализованных тканей. Между тем для биологии и медицины значительный интерес представляет эффективный способ контроля содержания органической фазы, оценки продолжительности деорганификации, а также регистрации в депротеинизированном образце остаточного содержания органического компонента, что не позволяют другие способы.

Наиболее близким техническим решением к заявляемому способу относится способ определения органической фазы в биологической минерализованной ткани, включающий исследование образцов в нативном состоянии и на различных этапах деорганификации гистоморфометрическим методом. / Матвейчук И.В. Структурно-функциональная адаптация костной ткани как композита с учетом видовых, возрастных и функциональных особенностях: Автореф. дис. И.В. Матвейчук. - Москва, 1998. /. В известном способе при деорганификации костных образцов сохраняются основные закономерности, установленные при деминерализации - наличие видимой в световом микроскопе границы раздела области деорганифицированного костного матрикса и зоны с неизмененным композиционным составом кости, равномерное распределение ее от периферии к центру образца. Это позволяет осуществлять количественную оценку потери органической фазы. Недостатки данного гистоморфометрического метода указаны выше.

Технический результат предлагаемого изобретения направлен на устранение перечисленных существующих недостатков, что позволит оптимизировать технологический процесс получения образцов с заданной степенью деорганификации и обеспечить сокращение продолжительности анализа, высокий уровень воспроизводимости, использование при анализе небольшого количества костного вещества (несколько мг).

Технический результат достигается за счет использования способа определения органической фазы в биологической минерализованной ткани, включающего исследование образцов в нативном состоянии и на различных этапах деорганификации гистоморфометрическим методом. При этом предварительно определяют последовательно меняющееся количество органической фазы в калибровочных образцах в нативном состоянии и на различных этапах деорганификации гистоморфометрическим методом, затем определяют энергию горения органической фазы в данных образцах методом дифференциально сканирующей калориметрии, по которой вычисляют удельную энергию горения, после этого определяют относительное изменение содержания органической фазы в калибровочных образцах по формуле

dM=(Mн-Q/(mобр×q))/Mн,

где dM - изменение содержания органической фазы в образце относительно нативного образца, Mн - содержание органической фазы в нативном образце, отн. ед., Q - энергия горения органической фазы в образце, Дж, mобр - масса образца, г, q - удельная энергия горения органической фазы в образце, Дж/г, устанавливают корреляцию между количеством органической фазы в калибровочных образцах и его изменением относительно нативного образца в процессе деорганификации. После чего для определения органической фазы в исследуемом образце с неизвестным содержанием органического компонента измеряют энергию горения методом дифференциально сканирующей калориметрии и вычисляют изменение содержания органической фазы относительно нативного образца по предложенной формуле. Методом интерполяции по полученному значению dM определяют массу органической фазы в исследуемом образце.

Метод основан на регистрации тепловых свойств изучаемого костного образца (по сравнению с термоинертным веществом) при постепенном нагревании по заданной программе. Результатами измерения являются энергии горения органического вещества.

Используя предложенную формулу, полученную на основе экспериментальных данных и термодинамических показателей образца, можно определить относительное изменение количества органической фазы в образце биологической минерализованной ткани.

Предлагаемый способ может использоваться для оценки снижения количества органической фазы в образце в процессе хранения, деминерализации, деорганификации и др. технологических воздействий при которых происходит процесс деградации органического компонента биологической минерализованной ткани. Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Построение калибровочной таблицы

Образцы биологических минерализованных тканях для анализа получали с помощью полых фрез из внутренней, передней и боковой зон проксимального, центрального и дистального поясов диафиза бедренных костей мужчин возрастной группы (19-44 года). Причина смерти не была связана с заболеваниями костно-суставной системы. Деорганификации подвергали цилиндрические образцы диаметром 5 и высотой 30 мм.

Деорганификацию образцов проводили в 6% растворе гипохлорита натрия при 20°С, в течении двух, трех, пяти, шести, восьми и десяти дней. Полное удаление органической фазы из образца наблюдалось на 10-й день. Для каждого калибровочного образца после деорганификации и нативного образца определяли содержание органики в % гистоморфометрическим методом. Затем от каждого калибровочного образца и нативного образца брали пробу (10 мг), измельчали ее и с использованием дифференциальной термической калориметрии по стандартной методике измеряли энергию горения Q органической фазы. Определили удельную энергию горения q органической фазы в исследуемой биологической минерализованной ткани, которая для всех образцов вне зависимости от продолжительности деорганификации равна 10762,5 Дж/г. По предложенной математической формуле определяли содержание органической фазы в % для всех образцов. Данные свели в калибровочную таблицу. Исходный нативный образец (не подвергавшийся деградации органической фазы) содержал максимально возможное количество органики в костной ткани, а именно 27%.

Таблица
Показатели Калибровочные образцы
нативный 1 2 3 4 5 6
Продолжительность деорганификации, дни
0 2 3 5 6 8 10
Содержание органики в образце, %, М 27 24 23 16 11 6 полностью деорганифицированная
изменение органической фазы относительно нативного образца (dM) 0 0,09 0,10 0,39 0,58 0,69 0,713

Пример 2. Определение органической фазы в исследуемом образце

По калибровочной таблице методом интерполяции можно определить содержание органического компонента в испытуемом образце, используя только измеренное значение энергии горения органической фазы в данном образце.

Исследуемый образец биологической минерализованной ткани с неизвестным содержанием органической фазы и неизвестным сроком деорганификации - измельчали пробу, mобр 0,00898 г.

Для исследуемого образца с применением дифференциального сканирующего калориметра измерили Q - энергию горения органической фазы, которая составила 23,6 Дж. Зная из таблицы МH=27%, mобр, q=10762,5 Дж/г определили по формуле относительное изменение содержания количества органики в образце dM, которое равно 0,095

Ближайшие по таблице максимальное и минимальное значения изменения органической фазы относительно нативного образца равные 0,09 и 0,1, соответствуют содержанию органического вещества 24 и 23%. Методом линейной интерполяции по таблице найдем содержание органической фазы М для исследуемого образца. М=23,5%. Срок деорганификации составил 2-3 дн.

Таким образом, используя полученную информацию: значение энергии горения органической фазы исследуемого образца, калибровочную таблицу, можно определить содержание органической фазы образцов биологической минерализованной ткани в различные периоды деорганификации.

Приведенный пример осуществления изобретения показывает его применимость и достижение технического результата, подтверждают возможность использования выведенной в результате эксперимента формулы.

Предлагаемый способ позволяет выявлять стадию деорганификации исследуемого образца для оптимизации технологического процесса получения образцов с заданной степенью деорганификации. Кроме того, способ после проведения деорганификации образца позволяет регистрировать в нем остаточное содержание органического компонента даже в минимальном количестве, которое не определяется при гравиметрическом методе.

Способ определения органической фазы в биологической минерализованной ткани, включающий исследование образцов в нативном состоянии и на различных этапах деорганификации гистоморфометрическим методом, отличающийся тем, что предварительно определяют последовательно меняющееся количество органической фазы в калибровочных образцах в нативном состоянии и на различных этапах деорганификации гистоморфометрическим методом, затем определяют энергию горения органической фазы в данных образцах методом дифференциально сканирующей калориметрии, по которой вычисляют удельную энергию горения, после этого определяют относительное изменение содержания органической фазы в калибровочных образцах по формуле dM=(Mн-Q/(mобр·q))/Mн,
где dM - изменение содержания органической фазы в образце относительно нативного образца, Мн - содержание органической фазы в нативном образце, отн.ед., Q - энергия горения органической фазы в образце, Дж, mобр - масса образца, г, q - удельная энергия горения органической фазы в образце, Дж/г, устанавливают корреляцию между количеством органической фазы в калибровочных образцах и его изменением относительно нативного образца в процессе деорганификации, после чего определяют энергию горения органической фазы в исследуемом образце методом дифференциально сканирующей калориметрии и вычисляют изменение содержания органической фазы относительно нативного образца по предложенной формуле, затем методом интерполяции по полученному значению dM определяют массу органической фазы в исследуемом образце.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины и описывает способ оценки функционального состояния аморфной фазы минеральной компоненты костного матрикса. В качестве оценочного критерия используют гистограмму распределения значений I-фактора - разности между интенсивностями светового потока по каналам R и В, причем унимодальное распределение со сдвигом вправо рассматривают как свидетельство подготовки к кристаллизации, со сдвигом влево - как признак подготовки к деминерализации, а близкое к нормальному - как депозит аморфных минералов в качестве резерва, би- и полимодальные распределения рассматривают как признак разнонаправленности функционального предназначения аморфных минералов в той или иной структуре кости.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики синдрома Сезари от эритродермий. Для этого проводят гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования распространенного гнойного перитонита (РГП). Сущность способа состоит в том, что с помощью биолюминесцентного метода определяют активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ), малатдегидрогеназы (МДГ), НАДФ-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ) и глутатионредуктазы (ГР) в лимфоцитах периферической крови больных РГП.

Изобретение относится к медицинской технике. Устройство содержит источник стабилизированного тока, схему управления, кнопки "Пуск" и "Опрос", ключ, измеритель временных интервалов, три пороговых элемента, устройство записи и считывания информации, блок памяти, формирователь энергетических уровней, токовый корректор, коммутатор, зонд с двумя электродами, один из которых соединен с первым, а другой - со вторым участком цепи, при этом источник стабилизированного тока соединен первым выходом с общей шиной, вторым выходом - с первым входом ключа, выход которого подключен к первым входам первого и второго порогового элемента; первый вход схемы управления подключен к кнопке "Пуск", первый выход - ко второму входу ключа, второй выход - ко второму входу измерителя временных интервалов; выход первого порогового элемента подключен к первому входу измерителя временных интервалов, выход второго порогового элемента соединен с третьим входом измерителя временных интервалов и вторым входом схемы управления; первый вход устройства записи и считывания информации подключен к кнопке "Опрос", второй - к третьему выходу схемы управления, а выход соединен с первым входом блока памяти, связанному информационными шинами с информационными выходами-входами измерителя временных интервалов; первый выход формирователя энергетических уровней соединен со входом источника стабилизированного тока и вторыми входами первого и второго пороговых элементов, второй вход формирователя энергетических уровней соединен с четвертым выходом схемы управления, выход токового корректора соединен с первым входом формирователя энергетических уровней; третий пороговый элемент подключен выходом к третьему входу схемы управления, вторым входом к общей шине, при этом первый выход коммутатора подключен к первому участку цепи, второй выход - ко второму участку цепи, первый и четвертый вход - к общей шине, а второй и третий входы соединены с первым входом первого порогового элемента, а пятый вход - с пятым выходом схемы управления, причем устройство дополнительно снабжено фильтром, вход которого соединен со вторым и третьим входами коммутатора, а выход с первым входом третьего порогового элемента.

Изобретение относится к области визуализации биологических объектов с нанометками на основе люминесцентно-микроскопического анализа объектов, регистрации изображений в биологии и медицине.

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии, в частности к способу оценки состояния слизистых оболочек верхних дыхательных путей (ВДП).

Группа изобретений относится к центрифуге для разделения цельной крови на компоненты крови, а также к находящимся в жидкостном соединении контейнерам для вставления в центрифугу, а также к способу получения высокообогащенного тромбоцитного концентрата из цельной крови посредством центрифуги.

Изобретение относится к области медицины, а именно к токсикологии и клинической лабораторной диагностике. Для экспресс-диагностики отравлений гемолитическими ядами проводят исследование плазмы периферической, в том числе капиллярной, крови.
Изобретение относится к медицине и касается способа лабораторной диагностики развития инфекции у больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) в состоянии индуцированной нейтропении.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано в хирургии, реаниматологии, клинической иммунологии. Способ оценки исхода тяжелого и среднетяжелого острого панкриатита с преимущественным поражением хвоста поджелудочной железы заключается в том, что проводят КТ-ангиографию органов брюшной полости с болюстным контрастированием, при этом учитывают объем поражения поджелудочной железы в %: поражение до 30% от объема железы оценивают в 1 балл, 30-50% - в 2 балла, более 50% - в 3 балла; глубину некроза в сагиттальной плоскости в %: глубину некроза до 30% оценивают в 1 балл, 30-50% - в 2 балла, более 50% - в 3 балла; воспалительный инфильтрат парапанкреатической клетчатки от -20 до 0 ед.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству. Для дифференциальной диагностики гипертензивных состояний при беременности проводят исследование основных параметров гемодинамики, кислородного статуса и уровня лактата крови женщины в третьем триместре беременности. Определяют частоту сердечных сокращений (ЧСС), среднее артериальное давление (АД ср), сердечный индекс (СИ), уровень лактата в артериализованной капиллярной крови и коэффициент экстракции кислорода (КЭО2). Вычисляют диагностический индекс D по формуле D=0,039*P1-0,080*Р2+1,840*Р3-0,041*Р4+0,024*Р5-0,3, где Р1 - ЧСС, ударов в мин; Р2 - АД ср, мм рт.ст.; Р3 - СИ, л/мин/м2; Р4 - уровень лактата в артериализованной (капиллярной) крови, ммоль/л; Р5 - коэффициент экстракции кислорода (КЭО2), %. При D более 0 делают заключение о принадлежности беременной женщины к группе с хронической артериальной гипертензией, а при D менее 0 делают заключение о принадлежности беременной женщины к группе с тяжелой преэклампсией. Способ позволяет диагностировать гипертензивные состояния при беременности, а именно хроническую артериальную гипертензию (ХАГ) и преэклампсию, на основании исследования основных параметров гемодинамики, кислородного статуса и уровня лактата крови женщины в третьем триместре беременности. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности назначения лазеротерапии пациенту с угревой болезнью (акне). Для этого используют регрессионное уравнение: Кэфф=-8,03328-0,0710001 *кортизол-0,334017*эндорфины + 0,0526548*ЛПНП + 1,31453 *ДИАисх, где Кэфф - коэффициент эффективности динамики ДИА, кортизол - уровень кортизола в плазме крови до начала лечения, эндорфины - уровень эндорфинов в плазме крови до начала лечения, ЛПНП - уровень липопротеидов в плазме крови до начала лечения, ДИАисх. - значение индекса ДИА до начала лечения; если Кэфф. составляет 6,6 и менее, то дополнительное назначение лазеротерапии в комплексном лечении малоэффективно - не более 50% улучшения ДИА в процессе лечения; если Кэфф более 6,6, но менее 7,9, то назначение лазеротерапии среднеэффективно - прогнозируют снижение индекса ДИА в процессе лечения от 50 до 75%; если Кэфф. составляет 7,9 и более, то дополнительное назначение лазеротерапии по прогнозу будет сопровождаться динамикой снижения ДИА в процессе лечения более чем на 75%. Способ позволяет индивидуально спрогнозировать эффективность лазеротерапии у пациентов с угревой болезнью на основании биохимических показателей при его простоте.

Изобретение относится к медицине и предназначено для дифференциальной диагностики типа гепаторенального синдрома алкогольного генеза. Определяют уровни креатинина и альбумина в сыворотке крови. Определяют альбумин-креатининовый индекс как соотношение уровня альбумина к креатинину. При значении, равном или меньшем 155 условных единиц, диагностируют гепаторенальный синдром 1 типа. При значении выше 155 условных единиц диагностируют гепаторенальный синдром 2 типа. Способ позволяет повысить точность диагностики типа гепаторенального синдрома алкогольного генеза при обследовании пациентов с почечно-печеночной недостаточностью. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, а именно к способу дифференциальной диагностики гнойных и серозных менингитов у детей. Способ состоит в определении показателей микробицидной активности нейтрофильных лейкоцитов: ферментов миелопероксидазы, цитохромоксидазы, кислой фосфатазы в ликворе больных гнойным и серозным менингитами с помощью спектрофотометрического анализа. При значениях миелопероксидазы в пределах 0,18-0,2 усл.ед. диагностируют гнойный менингит, а при значениях 0,059-0,061 усл.ед. - серозный менингит. Показатель активности цитохромоксидазы в пределах 0,49-0,57 усл.ед. свидетельствует о гнойном менингите, в пределах 0,186-0,174 усл.ед. - о серозном менингите. Показатель активности кислой фосфатазы в ликворе в пределах 0,14-0,18 усл.ед. следует расценивать как гнойный менингит, а в пределах 0,069-0,071 усл.ед. - как серозный менингит. Использование заявленного способа позволяет повысить точность диагностики гнойных и серозных менингитов у детей. 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к областям биологии и медицины. Для диагностики бесплодия позвоночных животных и человека обоего пола сравнивают концентрации иммунореактивности уротензина 2 в крови, определяемой методом реакции прямой гемагглютинации между бесплодными особями и особями, способными к детородной функции. Диагностируют бесплодие особи при титре иммунореактивности уротензина 2 в 16-64 раза больше чем у приносящих потомство, у которых он колеблется в пределах 1:4-1:8. Способ позволяет диагностировать бесплодие позвоночных животных и человека обоего пола. 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии и иммунологии, и предназначено для прогнозирования неэффективности консервативной терапии тяжелой формы язвенного колита при тотальном поражении толстой кишки. Сущность способа состоит в определении в сыворотке крови больных антител к эпителиальной базальной мембране. Для этого выполняют иммуногистологическое исследование с использованием метода непрямой иммунофлюоресценции. На первом этапе сыворотку больного инкубируют на срезах ткани почек обезьян, на втором этапе проводят инкубацию с антивидовой козлиной флюоресцирующей сывороткой. Реакцию регистрируют методом люминесцентной микроскопии, определяя количество почечных канальцев с флюоресцирующей базальной мембраной и выражая результат в процентах. При показателе выше 15% прогнозируют значительное увеличение вероятности неэффективности консервативной терапии. Способ прост в исполнении, выполняется в течение 2 часов и не требует затрат дорогостоящих реактивов. 4 пр.

Изобретение относится к биохимическим методам исследования с использованием измерения по селективным ионам, характеризующим маркеры микроорганизмов, для молекулярного микробиологического анализа. Способ заключается в том, что проводят качественный и количественный хромато-масс-спектрометрический анализ исследуемого биологического материала на содержание жирных кислот и оксикислот, выделяют и производят идентификацию отдельного таксона микроорганизма по его (таксона) профильным и маркерным признакам, для чего определяют специфические ионы маркеров микроорганизмов методом масс-фрагментографии с последующим выявлением полного сообщества микроорганизмов (возбудителей, таксонов) в исследуемом материале биологического происхождения, используя метод внутреннего стандарта (шаблона) идентифицируют компоненты пробы по жирным кислотам и оксикислотам путем сравнения полученных данных со стандартной базой данных и определяют их количественное содержание, причем перед измерением серии рутинных клинических проб исследуемого материала собирают произвольную пробу фекалий, принимая ее в качестве эталонной смеси, на основе эталонной смеси строят хроматограмму и по полученным качественным и количественным характеристикам сообщества микроорганизмов пробы данной эталонной смеси осуществляют определение пиков специфических ионов на шкале времен удержания для дальнейшего расчета состава сообщества микроорганизмов в последующей серии клинических проб по маркерам этих микроорганизмов, причем качественные и количественные характеристики сообщества микроорганизмов произвольной пробы фекалий принимают за необходимое и достаточное количество, характеризующее любой исследуемый материал биологического происхождения, а идентификацию специфического иона осуществляют на основании детектирования пиков хроматограммы маркеров из стандартной (тестовой) базы данных. Достигается повышение точности и надежности, а также - упрощение калибровки. 12 з.п. ф-лы, 12 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для диагностики гипоксии плода в родах. Для этого за 30 минут до родов проводят кардиотокографию. Отбирают образец амниотической жидкости. Образец забирают при проведении операции кесарева сечения или в первом периоде родов вагинальной амниотомией при раскрытии шейки матки 4-5 см посредством иглы для проведения спинальной пункции. Затем в образце амниотической жидкости определяют концентрацию лактата, а также белка или креатинина. При получении результата менее 3,5 баллов при проведении кардиотокографии за 30 минут до родов, а также концентрации лактата в амниотической жидкости более 14,0 ммоль/л лактата на 1 г/л белка или концентрации лактата в амниотической жидкости более 0,05 ммоль/л на 1 мкмоль/л креатинина диагностируют гипоксию плода в родах. Способ обеспечивает повышение точности диагностики гипоксии плода в родах. 3 пр., 3 ил.
Изобретение относится к области биохимии и микробиологии и может быть использовано для определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий. Сущность способа состоит в том, что среда, содержит агарозу или агар (500 мг), неионный детергент (50 мкл), хлористый кальций (12,5 мг), 0,05 М Трис-HCl буфер pH 8,3 (до 100 мл), причем после застывания среды в ней делают лунки, в которые вносят исследуемый образец в объеме 10-50 мкл на одну лунку, затем среду с исследуемым образцом инкубируют при 37°C в течение 12 часов и визуально определяют наличие или отсутствие липолитической активности в исследуемом образце. При наличии липолитической активности наблюдают матовые ореолы вокруг лунки, при отсутствии липолитической активности среда вокруг лунки остается прозрачной. Использование заявленного способа позволяет просто, доступно и экономично определить липолитическую активность субклеточных фракций бактерий. 3 з.п. ф-лы, 6 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки. Сущность изобретения состоит в том, что у беременных женщин с выявленной урогенитальной инфекцией в 1 триместре проводят определение в слизи цервикального канала уровня MIP-1α. При значении уровня MIP-1α в цервикальной слизи выше 36,9 пг/мл прогнозируют высокий риск невынашивания беременности в 1 триместре. Использование заявленного изобретения позволяет повысить точность прогнозирования угрозы невынашивания беременности в 1 триместре при урогенитальной инфекции для назначения современных лечебных мероприятий. 3 пр.
Наверх