Способ диагностики острой ожоговой токсемии у детей

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологической лабораторной диагностике, и может быть использовано для постановки диагноза острой ожоговой токсемии у детей. Способ заключается в следующем. В сыворотке крови больных детей определяют количество лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности CD3+; CD4+; CD8+, интерферон γ (INFγ) и интерлейкин 4 (IL-4). При снижении в 1,5 сигмальном интервале CD3+ до 51,7-59,9%; CD4+ - 20,3-31,1%; CD8+ - 13,8-19,6% и при повышении в 1,5 сигмальном интервале IL-4 в популяциях клеток CD4+ до 22,3-27,7%, IL-4 в клетках CD8+ - 27,4-31,6% и INFγ в клетках CD8+ - 13,2-18,0% ставят диагноз острой ожоговой токсемии у детей. Предложенный способ легко воспроизводим, не требует больших материальных затрат, в ранние сроки позволяет поставить диагноз заболевания и позволяет диагностировать острую ожоговую токсемию у детей в 95-100% случаев. 2 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно, к иммунологической лабораторной диагностике и может быть использовано для постановки диагноза острой ожоговой токсемии у детей.

До настоящего времени одной из наиболее сложных проблем здравоохранения является ожоговая патология, имеющая медицинскую и социально-экономическую значимость. Дети по сравнению со взрослыми чаще подвержены ожоговому травматизму и представляют собой особую группу риска. Они не способны распознавать и оценивать опасность окружающей среды, и поэтому в большей степени подвержены ожоговому травматизму. Термические ожоги у детей являются частым видом травм и составляют 10-50% детского бытового травматизма [Карваял Х.Ф. Ожоги у детей / Карваял Х.Ф., Парке Д.Х. - Пер. с англ. - М.: Медицина. - 1990. - 512 с.; Нуштаев И.А. Социально-медицинские аспекты ожогов у детей / И.А.Нуштаев, Нуштаев А.В. // Детская хирургия. - 1999. - №2. - С.22-24.].

По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) и Детского фонда ООН (ЮНИСЕФ), в мире от термических травм смертность у детей занимает 3-е место среди всех травматических факторов, после аварий на дорогах и утопления [Всемирный доклад о профилактике детского травматизма. - Всемирная организация здравоохранения и ЮНИСЕФ. -, Женева, 2008. - 39 с.]. В настоящее время летальность в результате ожогов у детей в стационарах России составляет около 1,2% [Алексеев А.А. Актуальные вопросы организации и состояние медицинской помощи пострадавшим от ожогов в Российской Федерации / Алексеев А.А., Лавров В.А. - II съезд комбустиологов России 2-5 июня 2008 года. Сборник научных трудов. - Москва. - 2008. - С.3-5]. При оценке летальности по периодам ожоговой болезни, в стадии острой ожоговой токсемии умирает наибольшее количество больных и достигает 45,5% [Будкевич Л.И., Воздвиженский С.И., Окатьев B.C., Степанович В.В. Летальность при термических поражениях у детей: состояние, причины и пути ее снижение. // Российский вестник перинатологии и педиатрии.-2004. - №4. - С.51-54.].

В настоящее время имеются единичные работы, посвященные изучению состояния иммунной системы у детей с термическими поражениями [Воздвиженский С.И. Прогностическое значение изменений иммунной системы у детей с термическими поражениями / С.И.Воздвиженский, А.П.Продеус, Т.С.Астамиров // Мат. науч. конф. «Актуальные проблемы травматологии и ортопедии», проводимой в рамках международного форума «Человек и травма». - Нижний Новгород, 2001. - С.189; Артемьев С.А. Состояние иммунитета и его коррекция стресспротекторами у детей с тяжелой ожоговой травмой / С.А. Артемьев, Н.И. Камзалакова, Г.В. Булыгин, И.П. Назаров // Сибирский медицинский журнал. - 2006. - №6. - С.53-54].

Всесторонний анализ иммунных нарушений, происходящих в организме больных с термическими поражениями, позволяет оценить тяжесть патогенетических изменений в организме, поставить объективный диагноз заболевания на основании иммунологических сдвигов в организме, а также оптимизировать проведение патогенетической терапии, снизить количество осложнений и летальность заболеваний.

Известен способ диагностики острой ожоговой токсемии на основании клинико-лабораторных исследований (повышение температуры тела, лейкоцитоз со сдвигом формулы влево, анемию, снижение белка крови за счет альбуминов, расстройство водно-электролитного баланса, нарушение моторной функции кишечника, расстройство функций ЦНС) [Пахомов С.П. Хирургия ожогов у детей. - Нижний Новгород. - 1997. С. 207]. Недостатками данного способа являются: субъективность оценки клинических данных и низкая достоверность диагностики за счет неполного объема лабораторного обследования пациента.

Описан способ диагностики ожоговой токсемии [патент RU №2424521 от 20.07.2011 г.] по результатам исследования физико-химических свойств сыворотки крови больного. Предложенный способ трудоемок, требует специально обученный персонал и использование сложных математических расчетов. Данный метод неприемлем для использования в клинических лабораториях медицинских учреждений.

В качестве прототипа выбран способ диагностики острой ожоговой токсемии у детей [Cytokine expression profile over time in severely burned pediatric patients // Shock. - 2006. - Vol.26. - №1. - P.13-19]. Способ основан на оценке иммунного статуса у больных детей. При повышении концентрации в сыворотке крови цитокинов IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12 p70, IL-13, IL-17, колониестимулирующих факторов, гранулоцита (G-CSM), макрофагального гранулоцита (GM-CSM), IFN-g, белока хемоаттрактанта моноцита 1 (МСР-1), макрофагального воспалительного белока 1β (MIP-1D и TNF) в сыворотке крови. Недостатками данного способа являются: трудоемкость проведения исследования сывороток крови, дороговизна реактивов, недостаточная специфичность и чувствительность, т.к. концентрация цитокинов в сыворотке зависит от плазмопотери при ожогах.

Задачей настоящего изобретения является повышение объективности, достоверности и точности диагностики в ранние сроки заболевания на основании оценки показателей иммунологических маркеров острой ожоговой токсемии у детей.

Технический результат - простой, не требующий больших материальных затрат и основан на исследовании лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности CQ3+, CD4+; CD8+, интерферон γ (INFγ) и интерлейкин 4 (IL-4), наиболее активно реагирующих при патогенетических изменениях в организме при острой ожоговой токсемии у детей. Техническое творчество включает анализ иммунологических тестов, характеризующих нарушения в иммунном статусе у ожоговых больных, и выбор наиболее существенных тестов, характеризующих патологический процесс при острой ожоговой токсемии у детей. Для оценки признаков острой ожоговой токсемии у детей использовали диапазон среднего квадратического отклонения в 1,5* от среднего арифметического значения (М), т.к. этот диапазон является наиболее предпочтительным при данной патологии [Патент RU №2134419 от 10.08.1999].

Технический результат предложенного нами способа основан на результатах анализа патогенетических и иммунологических сдвигов в организме больного. В сыворотке крови определяют количество лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности CD3+; CD4+; CD8+, интерферон γ (INFγ) и интерлейкин 4 (IL-4), а диагноз острой ожоговой токсемии у детей ставят на основании снижения в 1,5 сигмальном интервале CD3+ до 51,7-59,9%; CD4+ - 20,3-31,1%; CD8+ - 13,8-19,6% и повышения в 1,5 сигмальном интервале IL-4 в популяциях клеток CD4+ до 22,3-27,7%, IL-4 в клетках CD8+ - 27,4-31,6% и INFγ в клетках CD8+ - 13,2-18,0%.

Технический результат достигается тем, что согласно изобретения определяют в сыворотке крови больного количество лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности CD3+; CD4+; CD8+, интерферон γ (INFγ) и интерлейкин 4 (IL-4); при снижении в 1,5 сигмальном интервале CD3+ до 51,7-59,9%; CD4+ - 20,3-31,1%; CD8+ - 13,8-19,6% и при повышении в 1,5 сигмальном интервале IL-4 в популяциях клеток CD4+ до 22,3-27,7%, IL-4 в клетках CD8+ - 27,4-31,6% и INFγ в клетках CD8+ - 13,2-18,0% ставят диагноз острой ожоговой токсемии у детей.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образам. Забор крови у детей проводят в утренние часы на 3-7-е сутки после получения травмы. Определяют в сыворотке крови количество лимфоцитов с помощью панели моноклональных антител к поверхностным антигенам CD3, CD4, CD8 стандартным методом [Розенберг В.Я., Бутыльский А.Н. // Возрастные особенности иммунного статуса здоровых жителей Забайкалья // Иммунология. - 2007. - №3. - С.177-180]. Внутриклеточные цитокины интерлейкин 4 (IL-4) и интерферон γ (INFγ) определяют также стандартным методом [Лагерева Ю.Г., Богданова Л.В., Дружинина А.Ю., Меньшикова С.В., Бейкин Я.Б. // Содержание Т-лимфоцитов первого и второго порядка у детей разных возрастных групп. // Уральский медицинский журнал. - 2006. - №5. - С.3-7]. Диагностику острой ожоговой токсемии у детей проводят по содержанию лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности CD3+; CD4+; CD8+, интерферону γ (INFγ) и интерлейкину 4 (IL-4). Снижение CD3+ в 1,5 сигмальном интервале до 51,7-59,9%; CD4+ - 20,3-31,1%; CD8+ - 13,8-19,6% и повышение IL-4 в популяциях клеток CD4+ в 1,5 сигмальном интервале до 22,3-27,7%, IL-4 в клетках CD8+ в интервале - 27,4-31,6% и INFγ в клетках CD8+ в интервале - 13,2-18,0% свидетельствует об острой ожоговой токсемии у детей.

Примеры практического использования предлагаемого способа.

Пример 1.

Больной С-н Н.С. в возрасте 1 года (ист. б-ни №34685) поступил в ожоговое отделение ГБУЗ ТО «ОКБ №1» по поводу ожога горячей водой на площади 25% поверхности тела (ожог туловища, верхних конечностей, кистей, промежности, нижних конечностей, стоп II-IIIаб степени) в состоянии тяжелого ожогового шока.

Забор крови провели в утренние часы, на 3-е сутки после получения травмы. Определяли в сыворотке крови содержание лимфоцитов с помощью панели моноклональных антител к поверхностным антигенам CD3, CD4, CD8 по методу В.Я.Розенберга с соавт. (2007). Внутриклеточные цитокины интерлейкин 4 (IL-4) и интерферон γ (INFγ) определяли по методу Ю.Г. Лагеревой с соавт. (2006).

В 1,5 сигмальном интервале у больной определили в крови: CD3+53%; CD4+ 30%; CD8+ 18%; IL-4/4-24%; IL-4/8-28%, INFγ/8-15,9%, что свидетельствует об острой ожоговой токсемии. На 5-е сутки после получения ожога у больной диагностирована клинически выраженная картина острой ожоговой токсемии.

На основании клинических и иммунологических данных проведен комплекс лечебной терапии. Через 26 суток больной выписан в удовлетворительном состоянии из стационара.

Пример 2.

Больной Л-ин А.П. 13 лет (ист. б-ни №32141) поступил в ожоговое отделение ГБУЗ ТО «ОКБ №1» по поводу ожога пламенем на площади 45% поверхности тела (туловища, промежности, нижних конечностей, стоп II-IIIаб степени) в состоянии тяжелого ожогового шока.

Забор крови провели в утренние часы на 3-е сутки после получения травмы. Определили содержание лимфоцитов с помощью панели моноклональных антител к поверхностным антигенам CD3, CD4, CD8 по методу В.Я.Розенберга с соавт. (2007). Внутриклеточные цитокины интерлейкин 4 (IL-4) и интерферон γ (INFγ) определяли по методу Ю.Г. Лагеревой с соавт. (2006).

В 1,5 сигмальном интервале у больного определили в крови: CD3+ 52%; CD4+ 24%; CD8+ 18%; IL-4/4-23%; IL-4/8-28,4%, INFγ/8-15,6%, что свидетельствует об острой ожоговой токсемии. На 5-е сутки после получения ожога у больного диагностирована клинически выраженная картина острой ожоговой токсемии.

На основании клинических и иммунологических данных больному назначено патогенетическое лечение и комплекс лечебно-оздоровительных процедур. На 26-е сутки больной выписан из стационара в удовлетворительном состоянии.

Приведенные примеры иллюстрируют возможность применения данного способа для диагностики острой ожоговой токсемии у детей.

Способ диагностики острой ожоговой токсемии у детей апробирован на базе ожогового отделения ГБУЗ ТО «ОКБ №1». Под наблюдением находился 21 больной в возрасте от 1 до 17 лет с ожоговой поверхностью площади тела 15-45%.

В таблице 1 представлены данные обследования здоровых детей и больных с острой ожоговой токсемией в возрасте от 1 до 17 лет.

Преимущества предложенного способа по сравнению с прототипом представлены в таблице 2.

Предложенный способ лабораторной диагностики острой ожоговой токсемии у детей легко воспроизводим, не требует больших материальных затрат, в ранние сроки позволяет поставить диагноз заболевания, сокращает время проведения лабораторных исследований по сравнению с прототипом и выполним в условиях медицинских учреждений. Предложенный способ позволяет диагностировать острую ожоговую токсемию у детей в 95-100% случаев.

Общий экономический эффект на обследование 100 больных с ожоговой болезнью по сравнению с прототипом составил 352500 рублей.

Таблица 1
Иммунологические показатели (в %) у здоровых детей и больных острой ожоговой токсемией в возрасте от 1 года до 17 лет (n=21)
Иммунологические показатели Здоровые дети
М±m
Больные
М±m
δ Граничное значение (±1,5δ)
Минимальное Максимальное
CD3+ 75,7±0,9 55,8±0,7 2,7 51,7 59,9
CD4+ 43,2±0,8 25,7±1,4 3,6 20,3 31,1
CD8+ 26,7±0,8 16,7±0,9 1,9 13,8 19,6
INFγ/8+ 8,3±1,5 15,6±0,4 1,6 13,2 18,0
IL-4/4 1,1±0,4 23,5±0,7 1,8 22,3 27,7
IL-4/8 0,5±0,2 29,5±0,6 1,4 27,4 31,6

Способ диагностики острой ожоговой токсемии у детей, отличающийся тем, что определяют в сыворотке крови больного количество лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности CD3+; CD4+; CD8+, интерферон γ (INFγ) и интерлейкин 4 (IL-4); при снижении в 1,5 сигмальном интервале CD3+ до 51,7-59,9%; CD4+ - 20,3-31,1%; CD8+ - 13,8-19,6% и при повышении в 1,5 сигмальном интервале IL-4 в популяциях клеток CD4+ до 22,3-27,7%, IL-4 в клетках CD8+ - 27,4-31,6% и INFγ в клетках CD8+ - 13,2-18,0% ставят диагноз острой ожоговой токсемии у детей.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к неонатологии и педиатрии, и может быть использовано для определения жизнеспособности новорожденных с экстремально низкой массой тела (ЭНМТ) в первые сутки жизни.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования невынашивания беременности в ранние сроки. Сущность изобретения состоит в том, что у беременных женщин с выявленной урогенитальной инфекцией в 1 триместре проводят определение в слизи цервикального канала уровня MIP-1α.
Изобретение относится к клинической биохимии, и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения атерогенности крови по уровню содержания минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности (ММ-ЛПНП) в сыворотке или плазме крови человека.
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии и иммунологии, и предназначено для прогнозирования неэффективности консервативной терапии тяжелой формы язвенного колита при тотальном поражении толстой кишки.

Изобретение относится к области биохимии. Используют липосомы в качестве матрицы для активированного фермента - пероксидазы хрена.
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения антител к Mycobacterium leprae. Способ включает выявление в сыворотках крови антител к Mycobacterium leprae с помощью иммуноферментного метода.

Настоящее изобретение относится к иммунологии и биотехнологии. Предложены варианты антитела или его фрагмента, специфичных в отношении β-амилоидного белка.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано у больных гемобластозами для прогноза развития рецидива заболевания после проведения аутологичной трансплантации стволовых кроветворных клеток (АТСКК).

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, может быть использовано для диагностики скрытой активности туберкулеза у детей и подростков. Для этого проводят оценку состояния специфического клеточного иммунитета с помощью модифицированной реакции бластной трансформации лимфоцитов (мРБТЛ) с туберкулином (ППД-Л) и определение уровня интерферона-гамма (ИФН-γ) с ППД-Л с использованием малого объема (200 мкл) цельной крови и 4-х разведении антигена ППД-Л.

Группа изобретений относится к лабораторной диагностике и может быть использована для проведения анализов, основанных на реакции агглютинации частиц. Аналитический наконечник (100), предназначенный для выполнения визуально детектируемой реакции агглютинации после всасывания в него реактивов и образца, включает: первое отверстие (110) для приложения отрицательного или положительного давления к внутреннему объему аналитического наконечника; камеру для образца (120); по меньшей мере, одну боковую камеру (130), которая расположена по периметру камеры для образца; камеру детектирования (150), находящуюся в жидкостной связи с камерой для образца; переходную зону (140) между камерой детектирования и камерой для образца для вращательного перемешивания образца; второе отверстие (160) для всасывания реактивов и образца во внутренний объем аналитического наконечника или для удаления их оттуда.
Изобретение относится к клинической биохимии, и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения атерогенности крови по уровню содержания минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности (ММ-ЛПНП) в сыворотке или плазме крови человека.
Изобретение относится к области медицины, в частности к области авиационной, космической и морской медицины, может быть использовано в практике водолазной медицины для оценки калийуретической функции почек человека в условиях воздействия повышенного давления газовой среды, путем оценки клинических данных.
Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, гастроэнтерологии, и применяется для дифференциальной диагностики сальмонеллезного и алкогольного гастроэнтеритов.

Группа изобретений относится к медицине. Медицинское устройство реализует способ автоматического сбора и/или обнаружения данных для терапии диабета.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования развития постхолецистэктомического синдрома (ПХЭС) у пациентов, перенесших удаление желчного пузыря.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть использовано для выбора тактики лечения воспалительных заболеваний придатков - яичников и маточных труб.
Настоящее изобретение относится к клинической биохимии и описывает способ определения модифицированных липопротеинов низкой плотности (мЛПНП) в сыворотке (плазме) крови человека путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с последующей турбидиметрической регистрацией смеси, где обработку сыворотки или плазмы крови человека ведут 10% раствором ПВП-35000±5000 в 0,01 М Трис-HCl-буфере, рН 7,4, содержащем 0,15 М NaCl, при объемном соотношении сыворотка(плазма) : ПВП от (1:2) до (1:10), инкубируют 10 мин при комнатной температуре, измеряют светопоглощение в опытной и контрольной пробах, вычисляют разность между ними и при величине разности более 15 Е констатируют повышенный уровень атерогенных мЛПНП в крови и наличие атеросклеротического процесса у обследуемого человека.
Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано при диагностике осложненных форм гиперактивного мочевого пузыря (ГАМП) у детей. В новом способе диагностики осложненных форм гиперактивного мочевого пузыря у детей кроме клинико-лабораторных показателей определяют хронометрические показатели нестабилизированной цельной крови, а именно время формирования фибрин - тромбоцитарной структуры сгустка - Т и константу коагуляции K=r+k, где r - период реакции, a k - константа тромбина, и при показателях Т в пределах 51,90±1,35 минут и К в пределах 10,97±0,19 минут диагностируют неосложненную, а при Т в пределах 46,34±1,65 минут и менее, а К в пределах 8,85±0,70 минут и менее диагностируют осложненную форму гиперактивного мочевого пузыря.

Изобретение относится к области медицины, в частности к клинической лабораторной диагностике, а именно к способам определения целесообразности проведения иммунологического обследования у больных хроническими инфекционно-воспалительными заболеваниями (ХИВЗ) различной локализации.

Изобретение относится к детектированию, классификации и идентификации биологических и не биологических частиц в окружающей среде, в частности к мультиспектральным системам измерения, и может быть использована для обнаружения опасных частиц аэрозоля.
Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии. Для генетической диагностики неблагоприятных исходов у больных в течение одного года после острого коронарного синдрома с подъемом сегмента ST проводят анализ полиморфных генов-кандидатов сердечно-сосудистых заболеваний и стратификацию риска на основании бальной системы оценки. Определяют генотипы полиморфного варианта rs4291 гена ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ), полиморфного варианта rs6025 гена V свертывающего фактора (F5), а также генотипы полиморфного варианта rs5918 гена тромбоцитарного гликопротеина IIIa (IGTB3). Выявленный генотип ТТ по полиморфизму rs4291 (ген АСЕ) оценивают в 2 балла, генотип AT оценивают в 1 балл, генотип АА - 0 баллов; генотип ТТ по полиморфному rs6025 (ген F5) - 2 балла, генотип СТ - 1 балл, генотип СС - 0 баллов; генотипу СС полиморфизма rs5918 гена IGTB3 присваивают 2 балла, генотипу СТ - 1 балл, а генотипу ТТ - 0 баллов. Минимальный риск развития неблагоприятных событий определяют при сумме баллов 0-1, средний риск при сумме баллов 2, а высокий риск при сумме баллов, равной 3-4. Способ позволяет прогнозировать развитие неблагоприятных исходов через 12 месяцев у пациентов после острого коронарного синдрома с подъемом сегмента ST и стратификацию риска на основании бальной системы оценки по результатам исследования маркеров генов-кандидатов сердечно-сосудистых заболеваний. 3 табл., 2 пр.
Наверх