Гетероциклические соединения и способы применения



Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения
Гетероциклические соединения и способы применения

 


Владельцы патента RU 2525116:

ДЗЕ УОЛТЕР ЭНД ЭЛИЗА ХОЛ ИНСТИТЬЮТ ОФ МЕДИКАЛ РИСЕРЧ (AU)
ЭББВИ ИНК. (US)
ДЖЕНЕНТЕК, ИНК. (US)

Изобретение относится к соединениям или их фармацевтически приемлемым солям, где соединение имеет формулу I-а, в которой R1 и R3 отсутствуют, m представляет собой целое число от 1 до 2, n представляет собой целое число от 1 до 3, A представляет собой , B представляет собой или , где X2 представляет собой O или S, R4a отсутствует, R4b выбирают из группы, состоящей из:

, , , , и ; Rk выбирают из C1-6алкила и C1-6галогеналкила, L и E являются такими, как указано в п.1 формулы изобретения; или соединение является таким, как указано в b) п.1 формулы изобретения. Также изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей указанные соединения. Технический результат - соединения по п.1, обладающие ингибирующей активностью в отношении антиапоптозного белка Bcl-XL. 2 н. и 25 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 126 пр.

 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Настоящая заявка испрашивает приоритет предварительной заявки США № 61/139492, поданной 19 декабря 2008, содержание которой во всей ее полноте включено в настоящее описание в виде ссылки.

Уровень техники

Апоптоз признан в настоящее время как существенный биологический процесс для тканевого гомеостаза всех живущих особей. У млекопитающих, в частности, как было показано, он регулирует раннее эмбриональное развитие. Позднее при жизни гибель клеток является механизмом исключения, посредством которого устраняются потенциально опасные клетки (например, клетки, несущие раковые дефекты). Обнаружено несколько путей апоптоза, и один из наиболее важных затрагивает семейство Bcl-2 белков, которые являются ключевыми регуляторами митохондриального (так называемого "внутреннего") пути апоптоза. Смотри Danial, N.N. and Korsmeyer, S.J. Cell (2004) 116, 205-219. Домены структурной гомологии ВН1, ВН2, ВН3 и ВН4 являются характерными особенностями этого семейства белков. Семейство Bcl-2 белков может быть дополнительно классифицировано на три подсемейства в зависимости от того, сколько доменов гомологии содержит каждый белок, и от его биологической активности (т.е. имеет ли он про- или анти-апоптозную функцию).

Первая подгруппа содержит белки, имеющие все 4 домена гомологии, т.е. ВН1, ВН2, ВН3 и ВН4. Их основной эффект является анти-апоптозным, то есть это предохранение клетки от запуска процесса гибели клетки. Белки, такие как, например, Bcl-2, Bcl-w, Bcl-xL, Mcl-1 и Bfl-1/A1, являются членами этой первой подгруппы. Белки, принадлежащие ко второй подгруппе, содержат три домена гомологии ВН1, ВН2 и ВН3 и имеют про-апоптозный эффект. Два главных типичных белка этой второй подгруппы - Bax и Bak. И наконец, третья подгруппа состоит из белков, содержащих только домен ВН3, и члены этой подгруппы обычно упоминаются как "белки исключительно ВН3". Их биологическое воздействие на клетку является про-апоптозным. Bim, Bid, Bad, Bik, Noxa, Hrk, Bmf и Puma являются примерами этого третьего подсемейства белков. Точный механизм, посредством которого белки семейства Bcl-2 регулируют гибель клеток, полностью еще не известен, и понимание этого механизма является областью активного исследования для научного сообщества. По одной гипотезе регулирования гибели клеток белками семейства Bcl-2 белки исключительно ВН3 дополнительно отнесены к категориям белков или "активаторов" (например, Bim и Bid), или "сенсибилизаторов" (например, Bad, Bik, Noxa, Hrk, Bmf и Puma) в зависимости от их регуляторной функции.

Ключом к тканевому гомеостазу является достижение точного баланса во взаимодействиях между тремя подгруппами белков в клетках. Последние исследования были направлены на выяснение механизмов, посредством которых про-апоптозные и анти-апоптозные подгруппы белков семейства Bcl-2 взаимодействуют, чтобы дать возможность клетке подвергнуться запрограммированной гибели клетки. После получения интра- или экстра-клеточных сигналов в клетках происходит пост-трансляционная или транскрипционная активация белков исключительно ВН3. Белки исключительно ВН3 являются основными индукторами апоптозного каскада, который включает в качестве одной стадии активацию про-апоптозных белков Вах и Bak на митохондриальной мембране в клетках. При активации Вах и/или Bak, которые или уже прикреплены к митохондриальной мембране, или мигрируют к этой мембране, Вах и/или Bak олигомеризуются, что приводит к пермиабилизации митохондриальной внешней мембраны (МОМР), высвобождению цитохрома С и активации ниже по потоку эффекторных каспаз, в конечном счете к апоптозу клетки. Некоторые исследователи предполагают, что некоторые белки исключительно ВН3 (например, Puma, Bim, Bid) являются "активаторами", так как эти белки непосредственно связывают про-апатозные белки Вах и Bak, чтобы инициировать МОМР, тогда как другие белки исключительно ВН3 (напр Bad, Bik и Noxa) являются "сенсибилизаторами" и индуцируют олигомеризацию Вах и Bak опосредованно путем связывания анти-апоптозных белков (например, Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w, Mcl-1) и вытеснения и "отпускания" "активатора" белков исключительно ВН3, которые впоследствии связываются с про-апоптозными белками (например, Вах, Bak) и активируют их, вызывая гибель клетки. Другие исследователи выдвинули предположение, что анти-апоптозные белки связывают и секвестируют Вах и Bak непосредственно и все белки исключительно ВН3 регулируют это взаимодействие путем связывания с анти-апоптозными белками (например, Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w, Mcl-1), результатом чего является высвобождение Вах и Bak. Смотри Adams, J.M. and Cory S. Oncogene (2007) 26, 1324-1337; Willis, S.N. et al. Science (2007) 315, 856-859. Хотя точные взаимодействия, через которые анти- и про-апоптозные белки семейства Bcl-2 регулируют апоптоз, остаются предметом обсуждения, значительная часть научных доказательств показывает, что соединения, которые ингибируют связывание белков исключительно ВН3 с анти-апоптозными белками семейства Bcl-2, промотируют апоптоз в клетках.

Разупорядоченные апоптозные пути имеют следствием патологию многих значительных заболеваний, таких как нейродегенеративные состояния (ап-регулируемый апоптоз), такие как, например, болезнь Альцгеймера, и пролиферативные болезни (даун-регулируемый апоптоз), такие как, например, рак, аутоиммунные болезни и про-тромботические состояния.

В одном аспекте, вывод о том, что даун-регулируемый апоптоз (и более конкретно семейство белков Bcl-2) приводит к началу раковой злокачественности, открыл новый путь борьбы с этой все еще трудноизлечимой болезнью. Исследование показало, например, что анти-апоптозные белки, Bcl-2 и Bcl-xL, являются сверх-экспрессированными во многих типах раковых клеток. Смотри Zhang J.Y., Natura Reviews/Drug Discovery, (2002) 1, 101; Kirkin, V. et al. Biochimica et Biophysica Acta (2004) 1644, 229-249; и Amundson, S.A. et al. Cancer Research (2000) 60, 6101-6110. Эффектом этого прекращения регулирования является выживание измененных клеток, которые иначе должны были бы подвергнуться апоптозу в нормальных условиях. Повторение таких дефектов, связанных с нерегулируемой пролиферацией, как предполагается, является отправным моментом раковой эволюции. Дополнительно, исследование показало, что белки исключительно ВН3 могут действовать как супрессоры опухоли, когда они экспрессированы в организме больных животных.

Эти полученные данные, а также многие другие сделали возможным появление новых стратегий в поиске лекарства для борьбы с раком. Если бы малая молекула, которая могла бы имитировать эффект белков исключительно ВН3, была способна войти в клетку и преодолеть сверх-экспрессию анти-апоптозного белка, тогда стало бы возможным восстановить апоптозный процесс. Эта стратегия может иметь преимущество в том, что это может облегчить проблему лекарственной резистентности, которая обычно является следствием прекращения регулирования апоптоза (аномального выживания).

Исследователи также продемонстрировали, что тромбоциты также содержат необходимое апоптозное оснащение (например, Вах, Bak, Bcl-xL, Bcl-2, цитохром с, каспазу-9, каспазу-3 и APAF-1) для реализации запрограммированной гибели клетки по внутреннему апоптозному пути. Хотя продуцирование циркулирующих тромбоцитов является нормальным физиологическим процессом, многие болезни вызываются или обостряются избытком тромбоцитов или их нежелательной активацией. Вышеупомянутое наводит на мысль, что терапевтические агенты, способные к ингибированию анти-апоптозных белков в тромбоцитах и снижению численности тромбоцитов у млекопитающих, могут быть применимы при лечении про-тромботических состояний и болезней, которые характеризуются избытком тромбоцитов или их нежелательной активацией.

Abbott Laboratories Inc. разработан класс малых молекул миметиков белков исключительно ВН3, то есть АВТ-737 и АВТ-263, которые сильно связываются с подгруппой анти-апоптозных белков Bcl-2, включающей Bcl-2, Bcl-w и Bcl-xL, но только слабо с Mcl-1 и А1, и проявляют на основе этого механизма цитотоксичность. Эти соединения были испытаны в исследованиях на животных и продемонстрировали цитотоксичную активность на некоторых моделях ксенотрансплантата в качестве единственных агентов, а также усовершенствовали эффекты многих химиотерапевтических агентов на других моделях ксенотрансплантата, когда их применяли в сочетании. Смотри Tse, C. et al. Cancer Res (2008) 68, 3421-3428, и van Delft, M.F. et al Cancer Cell (2006) 10, 389-399. Эти исследования in vivo позволяют говорить о потенциальной полезности ингибиторов анти-апоптозных белков семейства Bcl-2 для лечения болезней, которые касаются разупорядоченного апоптозного пути.

Естественные уровни экспрессии анти-апоптозных белков членов семейства Bcl-2 различаются в различных типах клеток. Например, в молодых тромбоцитах белок Bcl-xL высоко экспрессирован и играет важную роль в регулируемой гибели клеток (жизненного отрезка) тромбоцитов. Также в некоторых типах раковых клеток выживание раковых клеток приписывается прекращению регуляции апоптозного пути, вызываемой сверх-экспрессией одного или нескольких членов анти-апоптозного семейства белка Bcl-2. Ввиду важной роли семейства Bcl-2 белков в регулировании апоптоза как в раковых, так и в нормальных (т.е. нераковых) клетках и общепризнанной вариабельности межклеточного типа экспрессии белка семейства Bcl-2, полезно иметь маломолекулярный ингибитор, который селективно выбирает цель и предпочтительно связывается с одним типом или подтипом анти-апоптозного белка(белков) Bcl-2, например, с членом анти-апоптозного семейства Bcl-2, который сверх-экспрессирован в конкретном типе рака. Такое селективное соединение может также давать некоторые преимущества в клиническом направлении путем предоставления, например, гибкости для выбора схемы лечения, уменьшенного токсического воздействия на цель в нормальных клетках среди прочих (например, лимфопения наблюдалась у мышей с дефицитом Bcl-2). Смотри Nakayama, K. et al. PNAS (1994) 91, 3700-3704.

Ввиду вышесказанного существует потребность в терапевтических средствах, имеющих малые молекулы, которые могут селективно ингибировать активность одного типа или подтипа анти-апоптозных белков Bcl-2, например, анти-апоптозного белка Bcl-xL. Данное изобретение восполняет по меньшей мере эту потребность.

Сущность изобретения

В одном аспекте данное изобретение относится к соединению формулы I

или его фармацевтически приемлемой соли. В формуле I Q выбран из группы, состоящей из -С(О)-, -СН2-, -СН(Ra)- и -С(Ra)2, где Ra означает С1-4 алкил или С1-4 галогеналкил. R1, если присутствует, означает независимо член, выбранный из группы, состоящей из таких членов, как галоген, =O, С1-6 алкил, С1-6 гетероалкил, С2-6 алкенил, С2-6 алкинил и С1-6 галогеналкил, X1a, X1b и X1c, каждый независимо, выбран из группы, состоящей из C(H), C(R2) и N, где по меньшей мере один из X1a, X1b и X1c представляет C(H) или C(R2). R2 независимо выбран из группы, состоящей из -ORb, -NRbRc, -SRb, -C(O)ORc, -C(O)NRbRc, -NRbC(O)Rd, -S(O)2Rd, -S(O)Rd, -S(O)2NRbRc, -Rd, галогена, -CN и -NO2, где Rb и Rc, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-4 алкила, C2-4 алкенила, C2-4 алкинила, С1-4 галогеналкила, или необязательно Rb и Rc, вместе с атомами, к которым каждый присоединен, объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S, в качестве атомов кольца, и Rd выбран из группы, состоящей из С1-4 алкила, C2-4 алкенила, С2-4 алкинила и С1-4 галогеналкила. В формуле I, X1d отсутствует или выбран из группы, состоящей из таких членов, как -O-, -NH-, -N(С1-4 алкил)- и -N(C(O)С1-4 алкил)-, нижний индекс m означает целое число 1-2 и нижний индекс n означает целое число от 1 до 3; где, если X1d присутствует, то нижний индекс n означает 2 или 3. В формуле I A представляет член, выбранный из группы, состоящей из:

где R3, если присутствует, независимо выбран из группы, состоящей из -NReRf, -ORe, -CN, -NO2, галогена, -C(O)ORe, -C(O)NReRf, -NReC(O)Rf, -NReS(O)2Rg, -NReS(O)Rg, -S(O)2Rg, -S(O)Rg и -Rg. Re и Rf в каждом случае, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из таких членов, как водород, С1-4 алкил, C2-4 алкенил, C2-4 алкинил, С1-4 галогеналкил и -(CH2)1-4 фенил, или Re и Rf, или Re и Rg, вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца, и Rg выбран из группы, состоящей из С1-4 алкила, C2-4 алкенила, C2-4 алкинила и С1-4 галогеналкила. В формуле I B представляет член, выбранный из группы, состоящей из:

где Y представляет N, C(H) или C(R4a); X2 означает -N(H)-, -N(С1-3 алкил)-, O или S. R4a, если присутствует, независимо выбран из С1-4 алкила, С1-4 галогеналкила, C2-4 алкенила, C2-4 алкинила, галогена и -CN; R4b независимо выбран из группы, состоящей из -C(O)ORj, -C(O)NRhRi, -C(O)Ri, -NRhC(O)Ri, -NRhC(O)NRhRi, -OC(O)NRhRi, -NRhC(O)ORj, -C(=NORh)NRhRi, -NRhC(=NCN)NRhRi, -NRhS(O)2NRhRi, -S(O)2Rj, -S(O)2NRhRi, -N(Rh)S(O)2Ri, -NRhC(=NRi)NRhRi, -C(=S)NRhRi, -C(=NRh)NRhRi, галогена, -NO2 и -CN, где Rh и Ri в каждом случае, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, С3-6 циклоалкила, С1-6 галогеналкила, фенила и -(CH2)1-4фенила. Rj выбран из группы, состоящей из С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, С1-6 галогеналкила, C3-7 циклоалкила, фенила и -(CH2)1-4 фенила. Rh и Ri или Rh и Rj, вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно объединены с образованием от 3 до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S, в качестве атомов кольца; или в качестве варианта, R4b выбран из группы, состоящей из:

в которых Rk выбран из С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, C3-7 циклоалкила и С1-6 галогеналкила. Для группы В в формуле I, группа a1 представляет место присоединения группы В к атому азота в формуле I и a2 представляет место присоединения группы B к группе L в формуле I. В формуле I, L отсутствует или является связывающей группой, выбранной из группы, состоящей из таких членов, как С6-10 арилен-С1-6 гетероалкилен, С5-9 гетероарилен-С1-6 гетероалкилен, С1-6 гетероалкилен, С1-6 алкилен, С1-6 галогеналкилен, С2-6 алкенилен, C2-6 алкинилен, -NH-, -S- и -O-, где алкиленовые, алкениленовые, алкиниленовые или гетероалкиленовые части группы L замещены 0-4 заместителями R5a, выбранными из группы, состоящей из галогена, -Rm и =O, и ароматические части группы L замещены 0-4 заместителями R5b, выбранными из группы, состоящей из галогена, -ORn, -NRnRo, -Rn, -NO2 и CN; где Rm выбран из группы, состоящей из С1-6 алкила, С2-6 алкенила, С2-6 алкинила, С1-6 гетероалкила, С3-6 гетероциклоалкил-С1-6 алкила, С3-7 гетероциклоалкил-С1-6 гетероциклоалкила и С1-6 галогеналкила. Необязательно любые два заместителя R5a, присоединенные к одному и тому же или к разным атомам L, могут быть объединены с образованием от 5- до 7-членного карбоциклического кольца или от 5- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца, и где Rn и Ro в каждом случае независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила и С1-6 галогеналкила, и где необязательно Rn и Ro вместе с атомами, к которым каждый присоединен, объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца. В формуле I, E представляет водород или галоген; или, в качестве варианта, E выбран из группы, состоящей из фенила, С5-6 гетероарила, C3-7 гетероциклоалкила и C3-7 циклоалкила, и необязательно с E конденсированы 1 или 2 кольца, независимо выбранные из группы, состоящей из от 3- до 7-членного карбоциклического кольца, от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, бензольного кольца и от 5- до 6-членного гетероароматического кольца, где Е и каждое кольцо, необязательно конденсированное с E, независимо замещены 0-5 заместителями R6, выбранными из группы, состоящей из галогена, -NRpRq, -SRP, -ORP, -C(O)ORP, -C(O)NRpRq, -C(O)RP, -NRpC(O)Rq, -OC(O)Rr, -NRpC(O)NRpRq, -OC(O)NRpRq, -NRpC(O)ORr, -C(=NORp)NRpRq, -NRpC(=N-CN)NRpRq, -NRpS(O)2NRpRq, -S(O)2Rr, -S(O)2NRpRq, -Rr, -Rs, -NO2, -N3, =O, -CN, -Z1-NRpRq, -Z1-SRp, -Z1-ORP, -Z1-C(O)ORP, -Z1-C(O)NRpRq, -Zl-C(O)Rp, -Z1-NRpC(O)Rq, -Z1-OC(O)Rr, -Z1-NRpC(O)NRpRq, -Z1-OC(O)NRpRq, -Z1-NRpC(O)ORr, -Z1-C(=NORp)NRpRq, -Z1-NRpC(=N-CN)NRpRq, -Z1-NRpS(O)2NRpRq, -Z1-S(O)2Rr, -Z1-S(O)2NRpRq, -Z1-NO2, -Z1-N3, -Z1-RS и -Z1-CN; где Z1 выбран из группы, состоящей из С1-6 алкилена, C2-6 алкенилена, C2-6 алкинилена, С1-6 гетероалкилена, С3-7 гетероциклоалкила и С3-7 циклоалкила; Rp и Rq, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6 алкила, С1-6 галогеналкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, C3-7 циклоалкила, C3-7 гетероциклоалкила, фенила и -(CH2)1-4-фенила; и Rr выбран из группы, состоящей из С1-6 алкила, С1-6 галогеналкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, С3-10 циклоалкила, С3-10 гетероциклоалкила, фенила и -(CH2)1-4-фенила. Необязательно в каждом R6 заместителе Rp и Rq или Rp и Rr вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, необязательно содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца; Rs выбран из группы, состоящей из фенила, С5-6 гетероарила, С3-7 гетероциклоалкила, C3-7 циклоалкила, и необязательно конденсированы с Rs 1 или 2 кольца, каждое независимо выбрано из группы, состоящей из от 5- до 7-членного карбоциклического кольца, 5- до 7-членного гетероциклического кольца, бензольного кольца и от 5- до 6-членного гетероароматического кольца, и где Rs и каждое кольцо, необязательно конденсированное с Rs, независимо замещены 0-5 заместителями R7, выбранными из группы, состоящей из галогена, -NRtRu, -SRt, -ORt, -C(O)ORt, -C(O)NRtRu, -C(O)Rt, -NRtC(O)Rv, -OC(O)Rv, -NRtC(O)NRtRu, -OC(O)NRtRr, -NRtC(O)ORv, -C(=NORt)NRtRu, -NRtC(=N-CN)NRtRu, -NRtS(O)2NRtRu, -S(O)2Rv, -S(O)2NRtRu, -Rv, -NO2, -N3, =O, -CN, -Z2-NRtRu, -Z2-SRt, -Z2-ORt, -Z2-C(O)ORt, -Z2-C(O)NRtRu, -Z2-C(O)Rv, -Z2-NRtC(O)Ru, -Z2-OC(O)Rv, -Z2-NRtC(O)NRtRu, -Z2-OC(O)NRtRu, -Z2-NRtC(O)ORv, -Z2-C(=NORt)NRtRu, -Z2-NRtC(=N-CN)NRtRu, -Z2-NRtS(O)2NRtRu, -Z2-S(O)2Rv, -Z2-S(O)2NRtRu, -Z2-NO2, -Z2-N3 и -Z2-CN. Z2 выбран из группы, состоящей из С1-6 алкилена, C2-6 алкенилена, C2-6 алкинилена, С1-6 гетероалкилена, Rt и Ru, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6 алкила, С1-6 галогеналкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, -(CH2)1-4-фенила, C3-7 циклоалкила и С3-7 гетероциклоалкила; Rv выбран из С1-4 алкила, С1-4 галогеналкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, -(CH2)1-4-фенила, С3-7 циклоалкила и C3-7 гетероциклоалкила, и в каждом R7 заместителе Rt и Ru или Rt и Rv вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, имеющего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца.

В другом аспекте, данное изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединения формулы I, а также к способам применения соединений формулы I для лечения болезней и состояний (например, рака, тромбоцитемии и т.д.), характеризующихся экспрессией или сверх-экспрессией анти-апоптозных белков Bcl-2, например, анти-апоптозных белков Bcl-xL.

ОПИСАНИЕ ФИГУР

Фиг. 1 показывает некоторые субформулы соединений по изобретению, например, субформулы IV-a, IV-b, IV-c, IV-d, IV-e, IV-f, IV-g, IV-h, IV-i, IV-k, IV-m, IV-n, IV-o и IV-p.

Фиг. 2A, фиг. 2B, фиг. 2C, фиг. 2D и фиг. 2E показывают некоторые варианты осуществления E групп для соединений формулы I.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

I. Определения

Используемый здесь термин "алкил", сам по себе или как часть другого заместителя, означает, если не обусловлено иное, углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью, имеющий указанное число атомов углерода (т.е. С1-8 означает от одного до восьми атомов углерода). Примеры алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил, н-пентил, н-гексил, н-гептил, н-октил и тому подобное. Термин "алкенил" относится к ненасыщенному алкильному радикалу, имеющему одну или несколько двойных связей, и, как подразумевается, он включает моно- и поли-галогенированные варианты. Подобным образом, термин "алкинил" относится к ненасыщенному алкильному радикалу, имеющему одну или несколько тройных связей, и, как подразумевается, включает моно- и поли-галогенированные варианты. Примеры таких ненасыщенных алкильных групп включают винил, 2-пропенил, кротил, 2-изопентенил, 2-(бутадиенил), 2,4-пентадиенил, 3-(1,4-пентадиенил), этинил, 1- и 3-пропинил, 3-бутинил и более высокие гомологи и изомеры. Термины "циклоалкил," "карбоциклический" и "карбоцикл" используются взаимозаменяемо и, когда использованы как таковые или как часть другого заместителя, относятся к углеводородным кольцам, имеющим указанное число атомов кольца (например, С3-6 циклоалкил) и являются полностью насыщенными или имеющими не более чем одну двойную связь между атомами кольца. Используемый здесь термин "циклоалкил," "карбоциклический" или "карбоцикл" означает, что относится также к бициклическим, полициклическим и спироциклическим углеводородным кольцам, таким как, например, бицикло[2.2.1]гептан, пинан, бицикло[2.2.2]октан, адамантан, норборнен, спироциклический С5-12 алкан и т.д. Кольцо "циклоалкила," "карбоциклическое" или "карбоцикла" может быть присоединено к остальной части молекулы через атомы углерода кольца, если установлено как таковое, в качестве варианта, кольцо "циклоалкила", "карбоциклическое" или "карбоцикла" может быть конденсировано с остальной частью молекулы. Неограничительные примеры кольца "циклоалкила", "карбоциклического" или "карбоцикла", которое конденсировано, например, с кольцом бензола, включают, 1,2,3,4-тетрагидронафталин, 2,3-дигидро-1H-инден, (Z)-6,9-дигидро-5H-бензо[7]аннулен и тому подобное.

Термин "гетероалкил", сам по себе или в сочетании с другим термином, означает, если не обусловлено иное, стабильный углеводородный радикал с прямой или разветвленной цепью, состоящий из установленного числа атомов углерода и из одного-трех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из O, N, Si и S и где атомы азота и серы необязательно могут быть окисленными и гетероатом азота необязательно может быть кватернизованным. Гетероатом(ы) O, N и S могут находиться при любом внутреннем положении гетероалкильной группы. Гетероатом Si может находиться при любом внутреннем положении гетероалкильной группы, включая положение, при котором алкильная группа присоединена к остальной части молекулы. "Гетероалкил" может содержать вплоть до трех единиц ненасыщенности (например, двойных или тройных связей) и также включает моно- и поли-галогенированные варианты или их сочетания. Примеры "гетероалкила" включают -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-O-CF3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH=N-OCH3 и -CH=CH=N(CH3)-CH3. Также у "гетероалкила" может быть вплоть до двух гетероатомов, таких как, например, -CH2-NH-OCH3 и -CH2-O-Si(CH3)3.

Термины "гетероциклоалкил", "гетероциклический" и "гетероцикл" используются взаимозаменяемо и, когда используются как таковые или или как часть другого заместителя, относятся к циклоалкильной группе, которая содержит от одного до пяти гетероатомов, выбранных из N, O и S, где атомы азота и серы необязательно окислены и атом(ы) азота необязательно кватернизованы. Специалистам будет понятно в отношении "гетероциклоалкила", "гетероциклического" и "гетероцикла", имеющих указанное число атомов углерода (например, "C3-7 гетероциклоалкил"), что по меньшей мере один и возможно вплоть до пяти, если это реально, указанных атомов углерода замещены гетероатом. Например, "C3 гетероциклоалкил" включает, наряду с другими возможностями, оксиранил, который имеет два атома углерода и плюс один атом кислорода в качестве членов кольца. Если не обусловлено иное, кольцо "гетероциклоалкила", "гетероциклическое" и "гетероцикла" может быть моноциклической, бициклической, спироциклической или полициклической кольцевой системой. Неограничительные примеры групп "гетероциклоалкила", "гетероциклической" и "гетероцикла" включают пирролидин, пиперидин, имидазолидин, пиразолидин, бутиролактам, валеролактам, имидазолидинон, гидантоин, диоксолат, фталимид, пиперидин, пиримидин-2,4(1H,3H)-дион, пиримидин-4-он, пиримидин-2-он, 1,4-диоксан, морфолин, тиоморфолин, тиоморфолин-S-оксид, тиоморфолин-S,S-оксид, пиперазин, пиран, пиридон, 3-пирролин, тиопиран, пирон, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, хинуклидин, тропан и тому подобное. Группа "гетероциклоалкил" "гетероциклическая" или "гетероцикл" может быть присоединена к остальной части молекулы через атом углерода кольца, гетероатом или, в качестве варианта, если это обусловлено, группа "гетероциклоалкил", "гетероциклическая" или "гетероцикл" может быть конденсирована с остальной частью молекулы. Неограничительные примеры кольца "гетероциклоалкила" "гетероциклического" или "гетероцикла", которое конденсировано, например, с кольцом бензола, включают, изохроман, 2,3-дигидробензофуран, (Z)-4,5-дигидро-1H-бензо[b]азепин и тому подобное. Если не обусловлено иное, кольца "гетероциклоалкила", "гетероциклическое" и "гетероцикла" включают их моно- и поли-галогенированные варианты.

Термин "алкилен", сам по себе или как часть другого заместителя, означает двухвалентный радикал, полученный из алкана или галогеналкана, как показано на примере -CH2CH2CH2CH2- и -CF2CF2-. Обычно группа алкила (или алкилена) будет иметь от 1 до 24 атомов углерода, причем предпочтительны в данном изобретении такие группы, имеющие не более 10 атомов углерода. "Алкенилен" и "алкинилен" относятся к ненасыщенным формам "алкилена", имеющим двойные или тройные связи, соответственно, включая моно и полигалогенированные варианты.

Термин "гетероалкилен", сам по себе или как часть другого заместителя, означает двухвалентный радикал, полученный из гетероалкила, как, например, -O-CH2-CH2-CH2-CH2-O-, -O-CH2, -CH2-O-, -CH2-CH2-S-CH2CH2- и -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-, -O-CH2-CH=CH-, -CH2-CH=C(H)CH2-O-CH2-, -O-CH2-CH≡CH-, -S-CH2-C≡C-, -CF2-O-. В группах гетероалкилена гетероатом может также занимать один из или оба конца цепи (например, алкиленокси, алкилендиокси, алкиленамино, алкилендиамино и тому подобное). Используемый здесь термин "гетероалкилен" также относится к моно- и поли-галогенированным вариантам.

Термины "алкокси", "алкиламино" и "алкилтио" (или тиоалкокси) применяются в их обычном смысле и относятся к таким алкильным группам, присоединенным к остальной части молекулы через атом кислорода, аминогруппу или атом серы, соответственно. Кроме того, в диалкиламиногруппах алкильные части могут быть одинаковыми или разными и могут быть также объединены с образованием 3-7-членного кольца с атомом азота, к которому каждый присоединен. Соответственно, группа, представленная как -NRiRii, как подразумевается, включает пиперидинил, пирролидинил, морфолинил, азетидинил и тому подобное.

Термины "гало" или "галоген," сами по себе или как часть другого заместителя, означают, если не обусловлено иное, атом фтора, хлора, брома или иода. Дополнительно, термины, такие как "галогеналкил," как подразумевается, включают моногалогеналкил и полигалогеналкил. Например, термин "С1-4 галогеналкил" предназначается, чтобы включать трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 4-хлорбутил, 3-бромпропил и тому подобное.

Термин "арил" означает, если не обусловлено иное, полиненасыщенную, обычно ароматическую, углеводородную группу, которая может быть из одного или нескольких колец (вплоть до трех колец), которые конденсированы друг с другом. Термин "гетероарил" относится к арильным группам (или кольцам), которые содержат от одного до пяти гетероатомов, выбранных из N, O и S, где атомы азота и серы необязательно окислены, и атом(ы) азота необязательно кватернизованы. Гетероарильная группа может быть присоединена к остальной части молекулы через гетероатом. Неограничительные примеры арильных групп включают фенил, нафтил и бифенил, тогда как неограничительные примеры гетероарильных групп включают пиридил, пиридазинил, пиразинил, пиримидинил, триазинил, хинолинил, хиноксалинил, хиназолинил, циннолинил, фталазиниил, бензотриазинил, пуринил, бензимидазолил, бензопиразолил, бензотриазолил, бензизоксазолил, изобензофурил, изоиндолил, индолизинил, бензотриазинил, тиенопиридинил, тиенопиримидинил, пиразолопиримидинил, имидазопиридинил, бензотиазолил, бензофуранил, бензотиенил, индолил, хинолил, изохинолил, изотиазолил, пиразолил, индазолил, птеридинил, имидазолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиадиазолил, пирролил, тиазолил, фурил, тиенил и тому подобное. Необязательные заместители для каждой из указанных арильных и гетероарильных кольцевых систем могут быть выбраны, но без ограничения, из группы приемлемых заместителей, описанных дополнительно ниже.

Используемый здесь термин "арилен" в общем относится к какому-либо арилу, который является двухвалентным радикалом. В качестве более конкретного примера, "фенилен" относится к двухвалентному радикалу фенильного кольца. Термины "1,2-арилен", "1,3-арилен" или "1,4-арилен" относятся к геометрическим изомерам конкретного арилена, в котором две группы, присоединенные к арилу, как указано в формуле, находятся в орто, мета или пара геометрической взаимосвязи с арилом, соответственно.

Используемый здесь термин "гетероарилен" в общем относится к какому-либо гетероарилу, который является двухвалентным радикалом. Более конкретно, например, "пиридилен" относится к двухвалентному радикалу кольца пиридила.

Специалисты будут понимать в отношении терминов "гетероарил" и "гетероарилен", имеющих указанное число атомов углерода (например, "C5-6 гетероарил" или "C5-9 гетероарилен"), что по меньшей мере один и, когда это реально, вплоть до пяти указанных атомов углерода замещены гетероатом. C5 гетероарилом, например, может быть пирролил или, в качестве другого примера, тиазолил, наряду с другими возможностями.

Используемый здесь комбинированный термин "арилен-гетероалкилен" в общем относится к двухвалентному радикалу, состоящему из арильной группы и гетероалкильной группы, которые ковалентно связаны друг с другом, и где арильная и алкильная группы, каждая, содержат дополнительный центр радикала, к которому может быть присоединена другая группа. Примеры арилен-гетероалкилена включают, но без ограничения:

Подобным образом, термин "гетероарилен-гетероалкилен" относится к двухвалентному радикалу, состоящему из гетероарильной группы и гетероалкильной группы, которые ковалентно связаны друг с другом, и где гетероарильная и гетероалкильная группа, каждая, содержит дополнительный центр радикала, к которому присоединена другая группа. Примеры гетероарилен-гетероалкилена включают, но без ограничения

Указанные термины (например, "алкил", "арил" и "гетероарил"), в некоторых вариантах осуществления, включают как замещенные, так и незамещенные формы указанного радикала. Предпочтительные заместители для каждого типа радикала приведены ниже.

Заместителями для алкильных радикалов (включая такие группы, часто упоминаемые как алкилен, алкенил, алкинил, гетероалкил, гетероциклоалкил и циклоалкил) могут быть разнообразные группы, включая, но без ограничения, -галоген, -OR', -NR'R", -SR', -SiR'R"R'", -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR"'C(O)NR'R", -NR"C(O)2R', -NHC(NH2)=NH, -NR'C(NH2)=NH, -NHC(NH2)=NR', -NR'"C(NR'R")=N-CN, -NR"'C(NR'R")=NOR', -NHC(NH2)=NR', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NR'S(O)2R", -NR'"S(O)2NR'R", -CN, =O, =S, =N-OH и -NO2 в количестве от ноля до (2m'+1), где m' означает общее число атомов углерода в таком радикале. R, R" и R'", каждый независимо, относятся к группам, включая, например, водород, незамещенный С1-6 алкил, незамещенный гетероалкил, незамещенный арил, арил, замещенный 1-3 атомами галогенов, незамещенным С1-6 алкилом, С1-6 алкокси или С1-6 тиоалкоксигруппами, или незамещенные арил-С1-4 алкильные группы, незамещенный гетероарил, замещенный гетероарил, наряду с прочими. Когда R' и R" присоединены к одному и тому же атому азота, они могут быть объединены с атомом азота с образованием 3-, 4-, 5-, 6- или 7-членного кольца. Например, -NR'R" предназначается для охвата 1-пирролидинила и 4-морфолинила. Другие заместители для алкильных радикалов, включая гетероалкил, алкилен, включают, например, =O, =NR', =N-OR', =N-CN, =NH, где R' включает заместители, которые описаны выше.

Подобным образом, заместители для арильной и гетероарильной групп изменяются и обычно выбраны из группы, включающей, но без ограничения, -галоген, -OR', -OC(O)R', -NR'R", -SR', -R', -CN, -NO2, -CO2R', -CONR'R", -C(O)R', -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR"C(O)2R', -NR'C(O)NR"R'", -NHC(NH2)=NH, -NR'C(NH2)=NH, -NHC(NH2)=NR', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NR'S(O)2R", -N3, перфтор-С1-4 алкокси и перфтор-С1-4 алкил, в количестве в пределах от ноля до общего числа открытых валентностей на ароматической кольцевой системе, и где R', R" и R'" могут быть независимо выбраны из водорода, С1-4 алкила, С1-6 галогеналкила, С3-6 циклоалкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, незамещенного арила и гетероарила, (незамещенный арил)-С1-4 алкила и незамещенный арилокси-С1-4 алкила. Другие подходящие заместители включают каждый из указанных выше заместителей арила, присоединенный к атому кольца алкиленовым мостиком из 1-4 атомов углерода.

Используемая здесь волнистая линия "", которая пересекает одинарную, двойную или тройную связь в какой-либо химической структуре, изображенной здесь, обозначает место присоединения одинарной, двойной или тройной связи к остальной части молекулы.

Используемый здесь термин "соединение по изобретению" относится к соединению формулы I в каком-либо конкретном варианте его осуществления, или к какому-нибудь стереоизомеру, геометрическому изомеру, таутомеру, сольвату, метаболитам или фармацевтически приемлемой соли или пролекарству соединения формулы I или варианта его осуществления.

Чтобы указать, сколько раз заместитель (например, R10) может быть присоединен к химической структуре, показанной в данном описании, заместитель (например, R10) написан в скобках и возможное число случаев указано как пределы нижнего индекса. Например, "-(R10)0-4" означает, что R10 группа может отсутствовать или может быть представлена во вплоть до четырех случаях.

Используемый здесь термин "гетероатом", как подразумевается, включает кислород (O), азот (N), серу (S) и кремний (Si).

II. Соединения

В одном аспекте, данное изобретение относится к соединению формулы I

или его фармацевтически приемлемой соли. В формуле I Q выбран из группы, состоящей из -C(O)-, -CH2-, -CH(Ra)- и -C(Ra)2-, где Ra означает С1-4 алкил или С1-4 галогеналкил. Rl, если присутствует, означает независимо член, выбранный из группы, состоящей из галогена, =O, С1-6 алкила, С1-6 гетероалкила, С2-6 алкенил, С2-6 алкинил и С1-6 галогеналкила. X1a, X1b и X1c, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из C(H), C(R2) и N, где по меньшей мере один из X1a, X1b и X1c означает C(H) или C(R2). R2 независимо выбран из группы, состоящей из -ORb, -NRbRc, -SRb, -C(O)ORC, -C(O)NRbRc, -NRbC(О)Rd, -S(O)2Rd, -S(O)Rd, -S(O)2NRbRc, -Rd, галогена, -CN и -NO2, где Rb и Rc, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-4 алкила, С2-4 алкенила, С2-4 алкинила, С1-4 галогеналкила, или необязательно Rb и Rc вместе с атомами, к которым каждый присоединен, объединены с образованием 3- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца, и Rd выбран из группы, состоящей из С1-4 алкила, C2-4 алкенила, C2-4 алкинила и С1-4 галогеналкила. В формуле I, X1d отсутствует или выбран из группы, состоящей из -O-, -NH-, -N(С1-4 алкила)- и -N(C(O)С1-4 алкила)-, нижний индекс m означает целое число от 1 до 2, и нижний индекс n означает целое число от 1 до 3; где, если X1d присутствует, то нижний индекс n означает 2 или 3. В формуле I A представляет член, выбранный из группы, состоящей из:

в которых R3, если присутствует, независимо выбран из группы, состоящей из -NReRf, -ORe, -CN, -NO2, галогена, -C(O)ORe, -C(O)NReRf, -NReC(O)Rf, -NReS(O)2Rg, -NReS(O)Rg, -S(O)2Rg, -S(O)Rg и -Rg. Re и Rf, в каждом случае каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-4 алкила, С2-4 алкенила, С2-4 алкинила, С1-4 галогеналкила и -(CH2)1-4 фенила, или Re и Rf, или Re и Rg, вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца, и Rg выбран из группы, состоящей из С1-4 алкила, С2-4 алкенила, C2-4 алкинила и С1-4 галогеналкила. В формуле I B представляет член, выбранный из группы, состоящей из:

в которых Y представляет N, C(H) или C(R4a); X2 означает -N(H)-, -N(С1-3 алкил)-, O или S. R4a, если присутствует, независимо выбран из С1-4 алкила, С1-4 галогеналкила, C2-4 алкенила, C2-4 алкинила, галогена и -CN; R4b независимо выбран из группы, состоящей из -C(O)ORj, -C(O)NRhRi, -C(O)Ri, -NRhC(O)Ri, -NRhC(O)NRhRi, -OC(O)NRhRi, -NRhC(O)ORj, -C(=NORh)NRhRi, -NRhC(=NCN)NRhRi, -NRhS(O)2NRhRi, -S(O)2Rj, -S(O)2NRhRi, -N(Rh)S(O)2Ri, -NRhC(=NRi)NRhRi, -C(=S)NRhRi, -C(=NRh)NRhRi, галогена, -NO2 и -CN, где Rh и Ri в каждом случае, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, С3-6 циклоалкила, С1-6 галогеналкила, фенила и -(CH2)1-4 фенила. Rj выбран из группы, состоящей из С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, С1-6 галогеналкила, C3-7 циклоалкила, фенила и -(CH2)1-4 фенила. Rh и Ri или Rh и Rj, вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца; или в качестве варианта, R4b выбран из группы, состоящей из:

в которых Rk выбран из С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, C3-7 циклоалкила и С1-6 галогеналкила. В некоторых вариантах осуществления R4b выбран из группы, состоящей из

в которых Rk выбран из С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, C3-7 циклоалкила и С1-6 галогеналкила. Для группы В в формуле I группа a1 представляет место присоединения группы В к атому азота в формуле I и a2 представляет место присоединения группы B к группе L в формуле I. В формуле I, L отсутствует или является связывающей группой, выбранный из группы, состоящей из таких членов, как С6-10 арилен-С1-6 гетероалкилен, С5-9 гетероарилен-С1-6 гетероалкилен, С1-6 гетероалкилен, С1-6 алкилен, С1-6 галогеналкилен, С2-6 алкенилен, C2-6 алкинилен, -NH-, -S- и -O-, где алкиленовые, алкениленовые, алкиниленовые или гетероалкиленовые части группы L замещены 0-4 заместителями R5a, выбранными из группы, состоящей из галогена, -Rm и =O, и ароматические части группы L замещены 0-4 заместителями R5b, выбранными из группы, состоящей из галогена, -ORn, -NRnRo, -Rn, -NO2 и CN; где Rm выбран из группы, состоящей из С1-6 алкила, С2-6 алкенила, С2-6 алкинила, С1-6 гетероалкила, С3-6 гетероциклоалкил-С1-6 алкила, С3-7 гетероциклоалкил-С1-6 гетероциклоалкила и С1-6 галогеналкила. Необязательно любые два заместителя R5a, присоединенные к одному и тому же или к разным атомам L, могут быть объединены с образованием от 5- до 7-членного карбоциклического кольца или от 5- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца, и где Rn и Ro в каждом случае независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила и С1-6 галогеналкила, и где необязательно Rn и Ro вместе с атомами, к которым каждый присоединен, объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца. В формуле I E представляет водород или галоген, или, в качестве варианта, E выбран из группы, состоящей из фенила, С5-6 гетероарила, C3-7 гетероциклоалкила и C3-7 циклоалкила, и необязательно с E конденсированы 1 или 2 кольца, независимо выбранные из группы, состоящей из от 5- до 7-членного карбоциклического кольца, от 5- до 7-членного гетероциклического кольца, бензольного кольца и от 5- до 6-членного гетероароматического кольца, где Е и каждое кольцо, необязательно конденсированное с E, независимо замещены 0-5 заместителями R6, выбранными из группы, состоящей из галогена, -NRpRq, -SRP, -ORP, -C(O)ORP, -C(O)NRpRq, -C(O)RP, -NRpC(O)Rq, -OC(O)Rr, -NRpC(O)NRpRq, -OC(O)NRpRq, -NRpC(O)ORr, -C(=NORp)NRpRq, -NRpC(=N-CN)NRpRq, -NRpS(O)2NRpRq, -S(O)2Rr, -S(O)2NRpRq, -Rr, -Rs, -NO2, -N3, =O, -CN, -Z1-NRpRq, -Z1-SRp, -Z1-ORP, -Z1-C(O)ORP, -Z1-C(O)NRpRq, -Zl-C(O)Rp, -Z1-NRpC(O)Rq, -Z1-OC(O)Rr, -Z1-NRpC(O)NRpRq, -Z1-OC(O)NRpRq, -Z1-NRpC(O)ORr, -Z1-C(=NORp)NRpRq, -Z1-NRpC(=N-CN)NRpRq, -Z1-NRpS(O)2NRpRq, -Z1-S(O)2Rr, -Z1-S(O)2NRpRq, -Z1-NO2, -Z1-N3, -Z1-RS и -Z1-CN; где Z1 выбран из группы, состоящей из С1-6 алкилена, C2-6 алкенилена, C2-6 алкинилена и С1-6 гетероалкилена, Rp и Rq, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6 алкила, С1-6 галогеналкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, C3-7 циклоалкила, C3-7 гетероциклоалкила, фенила и -(CH2)1-4-фенила, и Rr выбран из группы, состоящей из С1-6 алкила, С1-6 галогеналкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, С3-10 циклоалкила, С3-10 гетероциклоалкила, фенила и -(CH2)1-4-фенила. Необязательно в каждом R6 заместителе Rp и Rq или Rp и Rr вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, необязательно содержащего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца; Rs выбран из группы, состоящей из фенила, С5-6 гетероарила, С3-7 гетероциклоалкила, C3-7 циклоалкила, и необязательно конденсированы с Rs 1 или 2 кольца, каждое независимо выбрано из группы, состоящей из от 5- до 7-членного карбоциклического кольца, 5- до 7-членного гетероциклического кольца, бензольного кольца и от 5- до 6-членного гетероароматического кольца, и где Rs и каждое кольцо, необязательно конденсированное с Rs, независимо замещены 0-5 заместителями R7, выбранными из группы, состоящей из галогена, -NRtRu, -SRt, -ORt, -C(O)ORt, -C(O)NRtRu, -C(O)Rt, -NRtC(O)Rv, -OC(O)Rv, -NRtC(O)NRtRu, -OC(O)NRtRr, -NRtC(O)ORv, -C(=NORt)NRtRu, -NRtC(=N-CN)NRtRu, -NRtS(O)2NRtRu, -S(O)2Rv, -S(O)2NRtRu, -Rv, -NO2, -N3, =O, -CN, -Z2-NRtRu, -Z2-SRt, -Z2-ORt, -Z2-C(O)ORt, -Z2-C(O)NRtRu, -Z2-C(O)Rv, -Z2-NRtC(O)Ru, -Z2-OC(O)Rv, -Z2-NRtC(O)NRtRu, -Z2-OC(O)NRtRu, -Z2-NRtC(O)ORv, -Z2-C(=NORt)NRtRu, -Z2-NRtC(=N-CN)NRtRu, -Z2-NRtS(O)2NRtRu, -Z2-S(O)2Rv, -Z2-S(O)2NRtRu, -Z2-NO2, -Z2-N3 и -Z2-CN. Z2 выбран из группы, состоящей из С1-6 алкилена, C2-6 алкенилена, C2-6 алкинилена, С1-6 гетероалкилена, Rt и Ru, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6 алкила, С1-6 галогеналкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, -(CH2)1-4-фенила, C3-7 циклоалкила и С3-7 гетероциклоалкила; Rv выбран из С1-4 алкила, С1-4 галогеналкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, -(CH2)1-4-фенила, С3-7 циклоалкила и C3-7 гетероциклоалкила, и в каждом R7 заместителе Rt и Ru или Rt и Rv вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно объединены с образованием от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, имеющего 1-2 гетероатома, выбранные из N, O и S в качестве атомов кольца.

В первом варианте осуществления в соединениях формулы I A означает

Во втором варианте осуществления в соединениях формулы I или в первом варианте ее осуществления, соединение представлено формулой I-а

Во втором варианте осуществления, R1 означает галоген, С1-6 алкил, С1-6 гетероалкил или =O. Нижний индекс n означает целое число 2 или 3, и нижний индекс m означает целое число от 1 до 2. A означает

Также в этом втором варианте осуществления B означает член, выбранный из группы, состоящей из

в которых R4b выбран из группы, состоящей из

В третьем варианте осуществления, в соединениях формулы I или в первом варианте ее осуществления, соединение представлено формулой I-a

в которой R1 означает галоген, С1-6 алкил, С1-6 гетероалкил или =O; нижний индекс n означает целое число от 2 до 3, и нижний индекс m означает целое число от 1 до 2. В этом третьем варианте осуществления A означает

и В означает член, выбранный из группы, состоящей из

в которых R4b выбран из группы, состоящей из -C(O)ORj, -C(O)NRhRi, -C(O)Ri, -NRhC(O)Ri, -NRhC(O)NRhRi, -OC(O)NRhRi, -NRbC(O)ORj, -C(=NORh)NRhRi, -NRhC(=NCN)NRhRi, -NRhS(O)2NRhRi, -S(O)2Rj, -S(O)2NRhRi, -N(Rh)S(O)2Ri, -NRhC(=NRi)NRhRi, -C(=S)NRhRi, -C(=NRh)NRhRi, -Rj, галогена, -NO2 и -CN.

В четвертом варианте осуществления, в некоторых аспектах второго и третьего вариантов осуществления соединений формулы I, нижний индекс n равен 2 и нижний индекс m равен 1.

В пятом варианте осуществления, в некоторых аспектах второго варианта осуществления соединений формулы I, R1 отсутствует, и B означает

в которой R4a, если присутствует, выбран из галогена и С1-4 алкила; где нижний индекс n равен 2 и нижний индекс m равен 1.

В шестом варианте осуществления, в некоторых аспектах второго варианта осуществления соединений формулы I, R1 отсутствует, и B означает

в которой нижний индекс n равен 2 и нижний индекс m равен 1.

В седьмом варианте осуществления, в соединениях формулы I, или с первым, вторым или третьим вариантом их осуществления, соединение по изобретению представлено формулой, выбранной из группы, состоящей из

В восьмом варианте осуществления, в некоторых аспектах первого, второго, третьего, четвертого, пятого, шестого или седьмого варианта осуществления соединений по изобретению L отсутствует или является необязательно замещенной группой, выбранной из группы, состоящей из таких членов, как необязательно замещенный С6-10 арилен-С1-6 гетероалкилен и С5-9 гетероарилен-С1-6 гетероалкилен.

В девятом варианте осуществления, в некоторых аспектах восьмого варианта осуществления соединений формулы I L выбран из группы, состоящей из

В десятом варианте осуществления, в некоторых аспектах первого, второго, третьего, четвертого, пятого, шестого или седьмого варианта осуществления соединений формулы I L является необязательно замещенной группой, выбранной из группы, состоящей из таких членов, как необязательно замещенный С1-6 гетероалкилен, С1-6 алкилен, С2-6 алкенилен и С2-6 алкинилен.

В одиннадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах десятого варианта осуществления соединений формулы I L выбран из группы, состоящей из таких членов, как необязательно замещенный С1-4 алкиленокси, С2-4 алкениленокси, С2-4 алкиниленокси и С1-4 алкилен, где L замещен 0-4 группами Rm, и где какие-либо две Rm группы, расположенные на одном и том же или на разных атомах L, необязательно объединены с образованием от 5- до 7-членного карбоциклического кольца или от 5- до 7-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из N, O и S в качестве атомов кольца.

В двенадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах десятого варианта осуществления соединений формулы I L выбран из группы, состоящей из

В тринадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах второго, третьего, четвертого, пятого, шестого, седьмого, восьмого, девятого, десятого, одиннадцатого или двенадцатого варианта осуществления соединений формулы I E означает водород.

В четырнадцатом варианте осуществления и в некоторых аспектах второго, третьего, четвертого, пятого, шестого, седьмого, восьмого, девятого, десятого, одиннадцатого, двенадцатого или тринадцатого варианта осуществления соединений формулы I E выбран из группы, состоящей из фенила, С1-6 гетероарила и С3-7 гетероциклоалкила, и необязательно конденсированное с E кольцо независимо выбрано из от 5- до 7-членного карбоциклического кольца, от 5- до 7-членного гетероциклического кольца, бензольного кольца и от 5- до 6-членного гетероароматического кольца, где E и кольцо, необязательно конденсированное с ним, вместе замещены в целом 1-3 R6 заместителями, где одним R6 заместителем является -NRpRq, -Z1-NRpRq, -Rs или -Z1-Rs.

В пятнадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах четырнадцатого варианта осуществления соединений формулы I указанный один R6 заместитель представлен -NRpRq или -Z1-NRpRq.

В шестнадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах пятнадцатого варианта осуществления формулы I 1 или 2 R6 заместителя выбраны из группы, состоящей из фтора и хлора.

В семнадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах четырнадцатого варианта осуществления соединений формулы I указанный один R6 заместитель является Rs или -Z1-Rs, где Rs представлен формулой, выбраннойй из группы, состоящей из

В восемнадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах четырнадцатого, пятнадцатого, шестнадцатого или семнадцатого варианта осуществления соединений формулы I Z1 выбран из группы, состоящей из

В девятнадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах четвертого, десятого, одиннадцатого или двенадцатого варианта осуществления соединений формулы I соединение представлено формулой, выбранной из группы, состоящей из

в которых R4b выбран из группы, состоящей из

и E означает фенил, и замещен 1-3 заместителями R6.

В двадцатом варианте осуществления, в некоторых аспектах девятнадцатого варианта осуществления соединения формулы I R4b означает -C(O)OH.

В двадцать первом варианте осуществления, в некоторых аспектах первого, второго, третьего, четвертого, седьмого или девятнадцатого варианта осуществления соединений формулы I E представляет -фенил, в котором фенильная группа замещена при мета- или пара-положении необязательно замещенной Rs группой, представлен формулой, выбранной из группы, состоящей из:

В двадцать втором варианте осуществления, в некоторых аспектах семнадцатого или двадцать первого вариантов осуществления соединений формулы I по меньшей мере один R7, если присутствует, выбран из группы, состоящей из -NRtRu и -Z2-NRtRu.

В двадцать третьем варианте осуществления, в некоторых аспектах двадцать второго варианта осуществления соединений формулы I Z2 выбран ИЗ С1-4 алкилена, С2-4 алкенилена, С2-4 алкинилена и С1-4 гетероалкилена.

В двадцать четвертом варианте осуществления, в некоторых аспектах двадцать третьего варианта осуществления соединений формулы I Z2 выбран из группы, состоящей из

В двадцать пятом варианте осуществления, для соединений формулы I, соединение представлено формулой, выбранной из группы, показанной на фигуре 1.

В двадцать шестом варианте осуществления, для соединений формулы I, соединение представлено формулой, выбранной из группы, состоящей из формул IV-a, IV-b, IV-c, IV-e и IV-i на фигуре 1.

В двадцать седьмом варианте осуществления, в соединениях формулы I или в некоторых аспектах первого, второго, третьего, седьмого или девятнадцатого варианта их осуществления E выбран из группы, приведенной на фигуре 2A, фигуре 2B, фигуре 2C, фигуре 2D или фигуре 2E.

В двадцать восьмом варианте осуществления соединения формулы I выбраны из группы, приведенной в таблице 1 (ниже).

Таблица 1
Структура Наименование
1 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
2 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-феноксипропил)тиазол-4-карбоновая кислота
3 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(пиридин-4-илтио)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
4 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(трет-бутоксикарбониламино)фенокси)пропил)-тиазол-4-карбоновая кислота
5 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(3-(трет-бутоксикарбониламино)фенокси)пропил)-тиазол-4-карбоновая кислота
6 5-(3-(4-аминофенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
7 5-(3-(1H-пиразол-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
8 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(изохинолин-7-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
9 5-(3-(3-аминофенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
10 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(пиридин-4-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
11 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(3-(диметиламино)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
12 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(хинолин-8-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
13 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(хинолин-5-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
14 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоновая кислота
15 5-(3-(1H-бензо[d]имидазол-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
16 5-(3-(1H-имидазол-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
17 5-(3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
18 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(пирролидин-1-ил)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
19 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-морфолинопропил)тиазол-4-карбоновая кислота
20 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(пиперидин-1-ил)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
21 5-(3-(4-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
22 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2-((1S,4S)-l,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-илокси)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
23 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2-(4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил)бензо[d]тиазол-6-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
24 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(1-фенилциклопентил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
25 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(1-циано-1,2-дигидроциклобутабензол-4-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
26 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(1-цианоциклобутил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
27 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(1,2,3,5,6,7-гексагидропиридо[3,2,1-ij]хинолин-8-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
28 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(2-(((5,6-диметокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил)метил)(пропил)амино)этил)фенокси)-пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
29 5-(3-(4-(4-(бензо[d]тиазол-2-ил)пиперазин-1-ил)-2-метилфенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
30 (E)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(3-(2-циановинил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
31 5-(3-(4-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
32 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-циано-3-(4-гидроксифенил)-1H-пиразол-5-иламино)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
33 5-(3-(3-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
34 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(4-(гидроксиметил)фенил)тиазол-4-карбоновая кислота
35 5-(4-((4-(5-амино-4-циано-1H-пиразол-3-ил)фенокси)метил)фенил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
36 5-(3-(3-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)проп-1-инил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
37 5-(4-((3-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)фенил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
38 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоновая кислота
39 5-(3-(3-(5-амино-4-циано-1H-пиразол-3-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
40 5-(3-(4-(5-амино-4-циано-1H-пиразол-3-ил)фенокси)проп-1-инил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
41 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(пиридин-3-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
42 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(4-феноксибутил)тиазол-4-карбоновая кислота
43 5-(4-(4-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)бутил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
44 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-(изопропиламино)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
45 5-((4-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
46 5-((3-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
47 5-(3-(4-(5-амино-4-цианотиофен-3-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
48 5-(3-(4-(1H-пиразол-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
49 5-(2-(4-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
50 5-(2-(3-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
51 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-цианотиофен-3-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
52 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(9-изопропил-9H-пурин-6-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
53 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(5,6-дигидроимидазо[2,1-b]тиазол-3-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
54 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-(3-(диметиламино)пропиламино)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
55 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(бензилокси)этил)тиазол-4-карбоновая кислота
56 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-цианопиридин-2-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
57 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(6-(3-(диметиламино)проп-1-инил)пиридин-3-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
58 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(2-цианопиридин-3-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
59 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-морфолинофенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
60 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(5-(4-цианотиофен-3-ил)-2-гидроксибензил)тиазол-4-карбоновая кислота
61 5-(3-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
62 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((4-фенилпиперазин-1-ил)метил)тиазол-4-карбоновая кислота
63 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((4-фенилпиперидин-1-ил)метил)тиазол-4-карбоновая кислота
64 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
65 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(7-бромтиено[3,2-d]пиримидин-4-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
66 5-(3-(4-(1H-имидазол-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
67 5-(3-(4-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
68 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
69 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-(изопропиламино)тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
70 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(3-нитрофенилсульфонамидо)этил)тиазол-4-карбоновая кислота
71 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((2-фенилазетидин-1-ил)метил)тиазол-4-карбоновая кислота
72 5-(4-(1H-имидазол-1-ил)бутил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
73 5-(3-(4-(1H-пиразол-4-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
74 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
75 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(2-(диметиламино)этокси)фенокси)пропил)-тиазол-4-карбоновая кислота
76 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-феноксиэтил)тиазол-4-карбоновая кислота
77 5-(3-(4-(2-амино-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
78 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-(3-(пирролидин-1-ил)пропиламино)тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
79 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
80 5-(3-(4-((1S,2S,5R)-9-аминобицикло[3.3.1]нонан-2-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
81 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(пиримидин-2-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
82 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
83 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(1-(2-морфолиноэтил)-1H-пиразол-4-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
84 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропиламино)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
85 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(5-метил-4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)-1H-пиразол-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
86 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-цианопиразин-2-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
87 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
88 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(2-морфолиноэтокси)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
89 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
90 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
91 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-((1-(4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-ил)(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропил)амино)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
92 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(4-(3-(диметиламино)пропиламино)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
93 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидрозохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2-фтор-4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
94 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
95 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-ил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
96 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(пиримидин-2-ил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
97 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)пиколиновая кислота
98 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
99 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-гидроксипропил)пиколиновая кислота
100 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(3-(диметиламино)пропил)-2-фторфенокси)пропил)пиколиновая кислота
101 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(2-фтор-4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
124 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)оксазол-4-карбоновая кислота
122 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиримидин-4-карбоновая кислота
123 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-хлорпиримидин-4-карбоновая кислота
120 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколиновая кислота
125 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-фенилпиколиновая кислота
126 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-o-толилпиколиновая кислота
127 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-фенетилпиколиновая кислота
136 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(4-метоксибензилокси)пиколиновая кислота
137 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-фенилпропил)пиколиновая кислота
138 (E)-6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-фенилпроп-1-енил)пиколиновая кислота
121 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-феноксипропил)пиколиновая кислота
131 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(4-феноксибутил)пиколиновая кислота
132 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(2-(диметиламино)этокси)фенокси)пропил)-пиколиновая кислота
139 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-феноксипропил)-N-(пиридин-3-ил)тиазол-4-карбоксамид
134 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(бензилокси)этил)тиазол-4-карбоновая кислота
107 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)пропил)фенокси)пропил)-тиазол-4-карбоновая кислота
119 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2-хлор-4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
116 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
117 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-3-фторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
103 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)пропил)-2-фторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
118 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2,5-дифторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
114 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
108 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2,5-дифтор-4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота
115 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2,5-дифтор-4-(2-морфолиноэтиламино)фенокси)пропил)-тиазол-4-карбоновая кислота
135 (E)-6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-стирилпиколиновая кислота
109 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(2-хлорпиридин-4-илокси)пропил)пиколиновая кислота
128 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(2-(фенилтио)ацетамидо)пиколиновая кислота
129 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-фенилпропанамидо)пиколиновая кислота
130 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(2-(4-метоксифенил)ацетамидо)пиколиновая кислота
102 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(2-(диметиламино)этил)фенокси)пропил)-пиколиновая кислота
113 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(3-(2-(диметиламино)этокси)фенокси)пропил)-пиколиновая кислота
133 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
106 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
105 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
104 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(1-метилпиперидин-4-иламино)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
112 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиримидин-2-ил)фенокси)пропил)пиколиновая кислота
110 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((6-(3-морфолинопропокси)нафталин-2-ил)этинил)тиазол-4-карбоновая кислота
111 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(6-(3-морфолинопропокси)нафталин-2-ил)этил)тиазол-4-карбоновая кислота
140 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-циклогексилпиколиновая кислота
141 5-(3-(4-(аминометил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновая кислота
142 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)-N-(метилсульфонил)тиазол-4-карбоксамид
143 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)-N-гидрокситиазол-4-карбоксамид
144 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)-N-(1H-тетразол-5-ил)тиазол-4-карбоксамид
145 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)-N-(2-гидроксиэтил)тиазол-4-карбоксамид
146 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)-N-(2-(2-гидроксиэтокси)этил)тиазол-4-карбоксамид
147 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-N-(дифторметилсульфонил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоксамид
148 метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоксилат

Общие процедуры синтеза

Соединения по изобретению могут быть получены известными способами синтеза, некоторые из них описаны ниже для иллюстративных целей. N-Boc-8-гидроксикарбонил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин имеет CAS регистрационный номер 878798-87-9 и коммерчески доступен от ASW MedChem Products Inc, New Brunswick, New Jersey, или может быть получен путем следующей модифицированной процедуры, которая описана в Helvetica Chimica Acta, 68 (1985) 1828-1834, как показано на схеме 1 ниже.

Схема 1

Как показано на схеме 1 выше, соединения формулы I, имеющие тетрагидроизохинолиновое ядро, могут быть получены, начиная с бромирования тетрагидроизохинолина (i), например, Br2 в присутствии кислоты Льюиса (т.е. AlCl3), например, чтобы получить бромидное соединение ii, с последующим нитрованием до образования 5-бром-8-нитроизохинолина (iii). Замещение атома азота изохинолинового кольца защитнной группой (P), такой как, например, группа бензил, тозил, триметилсилилэтоксиметил (SEM) или 2-триметилсилилэтилсульфонил (SES), с последующим восстановлением полученного кольца пиридиния с использованием гидридного реагента, такого как, например, NaBH3CN, может обеспечить тетрагидроизохинолиновое соединение v. Дебромирование и восстановление нитрогруппы на v может быть осуществлено в условиях мягкого гидрирования, например, H2, Pd/C, чтобы получить аминосоединение vi. Обработка vi в условиях Sandmeyer, например, HNO2, CuCN, может обеспечить нитрил vii, который при кислотном гидролизе (HCl водн.) в спиртовом растворителе (R-OH, например, метанол, этанол) может предоставить сложный эфир viii. Условия, используемые для удаления защитной группы (P) на соединении viii, будут зависеть от характера защитной группы. Например, условия гидрирования (например, H2, Pt2O) могут быть использованы для удаления бензильной защитной группы; условия восстановления металлом (Na, нафталин) могут быть использованы для удаления тозильных групп; и условия десилилирования (например, CsF) могут быть использованы для удаления SES или SEM группы, чтобы получить вторичный амин ix. Удаление защиты ix с помощью Boc ангидрида с последующим гидролизом групп сложного эфира (-CO2R) в условиях основного характера (например, LiOH) может предоставить кислоту x с тетрагидроизохинолиновым ядром.

Соединения формулы I, имеющие тетрагидропиридинопиримидиновое ядро, могут быть получены, как показано ниже на схеме 2.

Схема 2

На схеме 2, бета-кетоэфир xii конденсируют с формамидин ацетатом, чтобы получить гидроксипиримидин xiii. Превращение гидроксигруппы в xiii в хлорную группу может быть осуществлено с использованием POCl3, чтобы получить хлорид xiv. Хлорид xiv может быть затем превращен в соответствующий нитрил xv путем взаимодействия с Zn(CN)2 в присутствии катализатора Pd(0) (например, Pd(PPh3)4). Гидролиз нитрильного продукта xv может быть осуществлен в кислотных условиях (например, HCl/MeOH), чтобы получить сложный эфир xvi, который может быть гидролизован в условиях основного характера (например, NaOH, MeOH), чтобы получить кислоту xvii.

Соединения формулы I, имеющие бензазепиновое ядро, могут быть получены с применением модифицированной процедуры, которая описана на схеме 3 ниже (смотри, Tetrahedron Letters, (1980), 1393; J Chem Soc Perkin Trans I, (1973), 782).

Схема 3

Бромбензальдегид xviii может быть обработан 3-гидроксипропиламином в условиях восстановительного аминирования, чтобы получить амин xix, который может быть циклизован в условиях алкилирования Фриделя-Крафтса (например, AlCl3), чтобы получить бензоазепин xx. Защита атома азота вторичного амина на xx ангидридом BOC может предоставить xxi. Обработка бромида xxi в условиях обмена литий-галоген и нейтрализация аниона лития xxi с применением CO2 может предоставить желательный бензоазепиновый продукт xxii.

Соединения формулы I, имеющие бензоохазепиновое, бензодиазепиновое или бензотиазепиновое ядро, могут быть получены, как описано на схеме 4 ниже.

Схема 4

На схеме 4, сложный эфир xxiii, в котором R группу представляет метил или этил, может быть формилирован обработкой гексамином и полифосфорной кислотой, чтобы получить альдегид xxiv. На схеме 4, символ "A" представляет нуклеофильную группу, например, NH2, SH, OH, NRH (где R означает алкил, ацил и т.д.). Алкилирование xxiv с применением трет-бутил 2-хлорэтилкарбамата будет давать xxv. Соединение xxv может быть обработано метанольной HCl, чтобы в результате удалить Boc группу xxvi. Внутримолекулярная циклизация xxvi в присутствии восстановителя (например, NaBH4) может обеспечить соединение xxvii, которое затем повторно защищают Boc ангидридом, чтобы получить N-Boc соединение xxviii. Гидролиз сложноэфирной группы может предоставить кислотное соединение xxix.

Как показано на схеме 5, тетрагидроизохинолиновое кислотное ядро xi может быть затем соединено с соответствующим ариламином (Ar-NH2) при использовании некоторых стандартных условий соединения аминокислот, так как, например, 1-O-бензотриазол-N,N,N',N'-тетраметил-уроний-гексафтор-фосфат и диэтилизопропиламин в DMF, чтобы получить амид xxx. Атом азота изохинолина может быть лишен защитной группы в кислотных условиях (например, 4 н. метанольная HCl), чтобы получить свободный вторичный амин xxxi.

Схема 5

Дополнительное синтетическое преобразование, которое может быть использовано, чтобы превратить соединение xxxi (и родственные соединения, такие как, например, xvii, xxii и xxix) в соединения формулы I, подробно описано в разделе Примеры.

III. Композиции

В дополнение к одному или нескольким соединениям, представленным выше (или их стереоизомерам, геометрическим изомерам, таутомерам, сольватам, метаболитам или фармацевтически приемлемым солям или пролекарстам), композиции для модулирования активности семейства белка Bcl-2 у людей и животных будут обычно содержать фармацевтический носитель или разбавитель. В одном варианте осуществления, изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель или наполнитель.

Используемый здесь термин "композиция" предназначается для охвата продукта, содержащего обусловленные ингредиенты в обусловленных количествах, а также любого продукта, который является результатом, прямо или косвенно, объединения обусловленных ингредиентов в обусловленных количествах. Под "фармацевтически приемлемым" подразумевается, что носитель, разбавитель или наполнитель должен быть совместимым с другими ингредиентами состава и не быть вредным для его реципиента.

Чтобы применять соединение по данному изобретению для терапевтического лечения (включая профилактическое лечение) пациента, соединение обычно готовят в соответствии со стандартной фармацевтической практикой в виде фармацевтической композиции. Типичную фармацевтическую композицию готовят путем смешивания соединения по данному изобретению и носителя, разбавителя или наполнителя. Подходящие носители, разбавители или наполнители хорошо известны специалистам в этой области и включают материалы, такие как углеводы, воски, растворимые и/или разбухающие в воде полимеры, гидрофильные или гидрофобные материалы, желатин, масла, растворители, воду и тому подобное. Конкретный используемый носитель, разбавитель или наполнитель будет зависеть от средств и цели, для которой соединение по данному изобретению применяется. Растворители обычно выбирают на основе растворителей, известных специалистам как безопасные (GRAS) для введения млекопитающим. Как правило, безопасными растворителями являются нетоксичные водные растворители, такие как вода и другие нетоксичные растворители, которые растворимы в воде или способны смешиваться с ней. Подходящие водные растворители включают воду, этанол, пропиленгликоль, полиэтиленгликоли (например, PEG 400, PEG 300 и т.п.) и их смеси. Составы могут также включать один или несколько буферов, стабилизирующих агентов, поверхностно-активных веществ, смачивающих агентов, смазывающих агентов, эмульгаторов, суспендирующих агентов, консервантов, антиоксидантов, глушителей, глидантов, технологических добавок, красителей, подслащивателей, отдушек, ароматизаторов и других известных добавок, чтобы обеспечить изысканное предоставление лекарства (т.е. соединения по данному изобретению или его фармацевтической композиции) или помочь в производстве фармацевтического продукта (т.е. медикамента).

Составы могут быть получены с применением традиционных процедур растворения и смешивания. Например, объемную лекарственную субстанцию (т.е. соединение по данному изобретению или стабилизированную форму соединения (например, комплекс с производным циклодестрина или другим известным комплексообразователем)) растворяют в подходящем растворителе в присутствии одного или нескольких наполнителей, описанных выше. Соединение по данному изобретению обычно вводят в состав фармацевтических дозированных форм, чтобы обеспечить легко контролируемую дозу лекарства и согласие пациента с предписанным режимом.

Фармацевтическая композиция (или состав) для применения может быть упакована разнообразными путями в зависимости от способа, применяемого для введения лекарства. Как правило, изделие для распространения включает контейнер, имеющий расположенный в нем фармацевтический состав в соответствующей форме. Подходящие контейнеры хорошо известны специалистам и включают материалы, такие как бутылки (пластмассовые или стеклянные), саше, ампулы, пластмассовые пакеты, металлические цилиндры и тому подобное. Контейнер может также включать защищающую от неумелого обращения сборку, чтобы предотвратить неосторожный доступ к содержимому упаковки. В дополнение контейнер имеет расположенную на нем этикетку, которая описывает содержимое контейнера. Этикетка может также включать соответствующие предупреждения.

Фармацевтические композиции соединения по данному изобретению могут быть приготовлены для различных путей и типов введения. Например, соединение по изобретению (например, соединение формулы I), имеющее желательную степень чистоты, может быть необязательно смешано с фармацевтически приемлемыми разбавителями, носителями, наполнителями или стабилизаторами (смотри Remington: The Science and Practice of Pharmacy: Remington The Science and Practice of Pharmacy (2005) 21st Edition, Lippincott Williams & Wilkins, Philidelphia, PA) в форме лиофилизованного состава, размолотого порошка или водного раствора. Композиции могут быть приготовлены смешиванием при температуре окружающей среды при соответствующем рН и при желательной степени чистоты с физиологически приемлемыми носителями, т.е. носителями, которые нетоксичны для реципиентов при используемых дозировках и концентрациях. рН состава зависит, главным образом, от конкретного применения и концентрации соединения, но может быть в пределах от около 3 до около 8. Состав в ацетатном буфере при рН 5 является подходящим вариантом осуществления.

Соединение по данному изобретению (например, соединение формулы I) для применения здесь является предпочтительно стерильным. В особенности композиции или составы, используемые для введения in vivo, должны быть стерильными. Такая стерилизация легко осуществима фильтрованием через стерильные фильтрационные мембраны.

Соединение по изобретению обычно может храниться как твердая композиция, лиофилизованный состав или как водный раствор.

Фармацевтическая композиция по изобретению будет составлена, дозированы и введена определенным образом, т.е. с количествами, концентрациями, предписаниями, курсом, носителями и путем введения, согласующимися с хорошей медицинской практикой. Факторы для рассмотрения в этом контексте включают конкретное расстройство, подвергаемое лечению, конкретное млекопитающее, подвергаемое лечению, клиническое состояние индивидуального пациента, причину расстройства, место доставки агента, способ введения, расписание введения и другие факторы, известные практикующим медикам. "Терапевтически эффективное количество" соединения, которое должно быть введено, будет обусловлено такими соображениями и является минимальным количеством необходимым, чтобы предотвратить, облегчить или лечить болезни, которые могут характеризоваться экспрессией или сверх-экспрессией белков Bcl-xL. Такое количество предпочтительно ниже количества, которое является токсичным для принимающего.

В качестве общего предложения начальное фармацевтически эффективное количество ингибиторного соединения по изобретению, вводимое парентерально, на дозу будет в пределах около 0,01-100 мг/кг, а именно около 0,1 до 20 мг/кг массы тела пациента в сутки, с типичным начальным диапазоном используемого соединения от 0,3 до 15 мг/кг/сутки.

Приемлемые разбавители, носители, наполнители и стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов при используемых дозировках и концентрациях и включают буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты; антиоксиданты, включающие аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как хлорид октадецилдиметилбензил аммония, хлорид гексаметония, хлорид бензалкония, хлорид бензетония, фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкил парабены, такие как метил или пропил парабен, катехол, резорцин, циклогексанол, 3-пентанол и м-крезол); низкомолекулярные (менее чем 10 остатков) полипептиды; белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включающие глюкозу, маннозу или декстрины; хелатообразователи, такие как EDTA; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, комплексы Zn-белок) и/или неионогенные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN™, PLURONICS™ или полиэтиленгликоль (PEG). Активный фармацевтический ингредиент по изобретению (например, соединение формулы I) может быть захвачен в приготовленных микрокапсулах, например, путем технологий коацервации или путем межфазной полимеризации, например, в микрокапсулах из гидроксиметилцеллюлозы или желатина и микрокапсулах из поли(метилметакрилата), соответственно; в коллоидальных системах доставки лекарства, например, липосомах, микросферах альбумина, микроэмульсиях, наночастицах и нанокапсулах, или в микроэмульсиях. Такие технологии описаны в Remington: The Science and Practice of Pharmacy: Remington The Science and Practice of Pharmacy (2005) 21st Edition, Lippincott Williams & Wilkins, Philidelphia, PA.

Композиции с замедленным высвобождением соединения по изобретению (например, соединения формулы I) могут быть приготовлены. Подходящие примеры композиций с замедленным высвобождением включают полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, содержащие соединение формулы I, эти матрицы являются формованными изделиями, например, пленками или микрокапсулами. Примеры матриц с замедленным высвобождением включают сложные полиэфиры, гидрогели (например поли(2-гидроксиэтил-метакрилат) или поли(виниловый спирт), полилактиды (патент США № 3773919), сополимеры L-глутаминовой кислоты и гамма-этил-L-глутамата, неразлагающийся этилен-винил ацетат, разлагающиеся сополимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT™ (микросферы для инъекций, состоящие из сополимера молочной кислоты и гликолевой кислоты и лейпролид ацетата) и поли-D-3-гидроксимасляная кислота.

Фармацевтические композиции включают композиции, подходящие для путей введения, подробно описанных здесь. Композиции могут быть легко предоставлены в унифицированной дозированной форме и могут быть приготовлены каким-либо из способов, известных в фармации. Технические приемы и составы обычно находят в Remington: The Science and Practice of Pharmacy: Remington The Science and Practice of Pharmacy (2005) 21st Edition, Lippincott Williams & Wilkins, Philidelphia, PA. такие способы включают стадию объединения активного ингредиента с носителем, который содержит один или несколько вспомогательных ингредиентов. Вообще составы готовят путем однородного и тесного объединения активного ингредиента с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями или и теми и другими и затем, если необходимо, формования продукта.

Фармацевтические композиции соединения по изобретению (например, соединения формулы I), подходящие для перорального введения, могут быть приготовлены в виде дискретных единиц, таких как пилюли, капсулы, саше или таблетки, каждая из которых содержит заданное количество соединения по изобретению.

Прессованные таблетки могут быть получены прессованием на соответствующей машине активного ингредиента в свободно сыпучей форме, такой как порошок или гранулы, необязательно смешанного со связующим, смазкой, инертным разбавителем, консервантом, поверхностно-активным или диспергирующим агентом. Формованные таблетки могут быть изготовлены формованием на соответствующей машине смеси порошкообразного активного ингредиента, увлажненного инертным жидким разбавителем. Таблетки необязательно могут быть покрыты или могут иметь на поверхности бороздки и необязательно составлены по рецептуре так, чтобы обеспечить замедленное или регулируемое высвобождение активного ингредиента из них.

Таблетки, пилюли, пастилки, водные или масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые или мягкие капсулы, например, желатиновые капсулы, сиропы или эликсиры могут быть приготовлены для перорального применения. Составы соединения по изобретению (например, соединения формулы I), предназначенные для перорального применения, могут быть приготовлены согласно любому способу, известному в производстве фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или несколько агентов, включая подслащиватели, ароматизаторы, красители и консерванты, чтобы обеспечить приятный на вкус препарат. Приемлемы таблетки, содержащие активный ингредиент в смеси с нетоксичным фармацевтически приемлемым наполнителем, который является подходящим для изготовления таблеток. Такими наполнителями могут быть, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция или натрия, лактоза, фосфат кальция или натрия, гранулирующие или дезинтегрирующие агенты, такие как кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, такие как крахмал, желатин или камедь акации, и смазывающие агенты, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут быть без покрытия или могут быть покрыты известными методами, включающими микроинкапсулирование для задержки дезинтеграции и адсорбции в желудочно-кишечном тракте и тем самым обеспечения замедленного действия в течение продолжительного периода. Например, может быть использован материал для задержки времени, такой как глицерил моностеарат или глицерил дистеарат один или с воском.

Для лечения глаз или других наружных тканей, например, глотки или кожи, составы предпочтительно наносят как мазь или крем для местного применения, содержащие активный ингредиент(ы) в количестве, например, от 0,075 до 20% мас./мас. Когда состав приготовлен в виде мази, активный ингредиент может быть использован или с парафиновой, или со смешивающейся с водой основой мази. В качестве варианта, активные ингредиенты могут быть введены в состав крема с основой крема типа масло-в-воде.

Если желательно, водная фаза основы крема может содержать многоатомный спирт, например, спирт, имеющий две или более гидроксильных групп, такой как пропиленгликоль, бутан-1,3-диол, маннит, сорбит, глицерин и полиэтиленгликоль (включая PEG 400) и их смеси. Составы для местного применения могут содержать желательно соединение, которое улучшает абсорбцию или проникновение активного ингредиента через кожу или другие пораженные участки. Примеры таких улучшителей проницаемости через кожу включают диметилсульфоксид и родственные аналоги.

Масляная фаза эмульсий по данному изобретению может быть составлена из различных ингредиентов известным образом. Хотя фаза может содержать только эмульгатор, желательно, чтобы она содержала смесь по меньшей мере одного эмульгатора с жиром или маслом или с обоими и с жиром, и с маслом. Предпочтительно, гидрофильный эмульгатор вводят в состав вместе с липофильным эмульгатором, который действует как стабилизатор. Предпочтительно также вводить в состав и масло, и жир. Вместе, эмульгатор(ы) со стабилизатором (стабилизаторами) или без составляют так называемый эмульгирующий воск, и воск вместе с маслом и жиром составляют так называемую эмульгирующую основу мази, которая образует масляную дисперсную фазу составов крема. Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, подходящие для применения в составе по изобретению, включают Tween® 60, Span® 80, цетестеариловый спирт, бензиловый спирт, миристиловый спирт, глицерил моностеарат и лаурилсульфат натрия.

Водные суспензии соединения по изобретению (например, соединения формулы I) содержат активные материалы в смеси с наполнителями, подходящими для получения водных суспензий. Такие наполнители включают суспендирующий агент, такой как натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, кроскармеллоза, повидон, метилцеллюлоза, гидроксипропил метилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и камедь акации, и диспергирующие или смачивающие агенты, такие как встречающийся в природе фосфатид (например, лецитин), продукт конденсации алкиленоксида с жирной кислотой (например, полиоксиэтилен стеарат), продукт конденсации этиленоксида с длинноцепочечным алифатическим спиртом (например, гептадекаэтиленоксицетанол), продукт конденсации этиленоксида с неполным сложным эфиром, полученным из жирной кислоты и гекситол ангидрида (например, моноолеат полиоксиэтилен сорбитана). Водная суспензия может также содержать один или несколько консервантов, таких как этил или н-пропил п-гидроксибензоат, один или несколько красителей, один или несколько ароматизаторов и один или несколько подслащивателей, таких как сахароза или сахарин.

Фармацевтическая композиция соединения по изобретению (например, соединения формулы I) может быть в форме стерильного препарата для инъекций, такого как стерильная водная или масляная суспензия для инъекций. Такая суспензия может быть приготовлена согласно известным способам с использованием тех подходящих диспергирующих или смачивающих агентов, которые упоминались выше. Стерильная композиция для инъекций может быть также стерильным раствором или суспензией для инъекций в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-бутандиоле, или может быть приготовлена к виде лиофилизованного порошка. К числу приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, относятся вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла могут быть удобно использованы в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этой цели может быть использовано любое нераздражающее нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. К тому же, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, могут быть подобным образом использованы для приготовления препаратов для инъекций.

Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с несущим материалом, чтобы получить единичную дозированную форму, будет изменяться в зависимости от подвергаемого лечению субъекта и конкретного способа введения. Например, композиция с высвобождением с привязкой ко времени, предназначенная для перорального введения людям, может содержать приблизительно от 1 до 1000 мг активного материала, смешанного с соответствующим и подходящим количеством несущего материала, которое может изменяться от около 5 до около 95% от общей композиции (масса:масса). Фармацевтическая композиция может быть приготовлена так, чтобы обеспечивать легко отмериваемые количества для введения. Например, водный раствор, предназначенный для внутривенного вливания, может содержать от около 3 до около 500 мкг активного ингредиента на миллилитр раствора для того, чтобы могло происходить вливание соответствующего объема при скорости около 30 мл/ч.

Композиции, подходящие для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты и растворенные вещества, которые делают состав изотоничным с кровью соответствующего реципиента, и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты и загустители.

Композиции, подходящие для местного введения в глаз, также включают глазные капли, где активный ингредиент растворен или суспендирован в соответствующем носителе, особенно в водном растворителе для активного ингредиента. Активный ингредиент предпочтительно присутствует в таких составах в концентрации от около 0,5 до 20% мас./мас., например, около 0,5 до 10% мас./мас., например, около 1,5% мас./мас.

Композиции, подходящие для местного применения в глотке, включают пастилки, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, обычно сахарозе и камеди акации или трагаканта; пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и камедь акации, и полоскания для горла, содержащие активный ингредиент в подходящем жидком носителе.

Композиции для ректального введения могут быть представлены в виде суппозитория с соответствующей основой, содержащей какао-масло или салицилат.

Композиции, подходящие для внутрилегочного или назального введения, имеют размер частиц, например, в пределах от 0,1 до 500 микрометров (включая размеры частиц в диапазоне между 0,1 и 500 микрометрами с приращениями в микрометрах, таких как 0,5, 1, 30 микрометров, 35 микрометров и т.д.), их вводят путем быстрой ингаляции через носовой проход или путем ингаляции через глотку так, чтобы достичь альвеолярных мешочков. Подходящие составы включают водные или масляные растворы активного ингредиента. Составы, подходящие для введения аэрозоля или сухого порошка, могут быть приготовлены согласно традиционным способам и могут быть доставлены с другими терапевтическими агентами, такими как соединения, прежде используемые для лечения или профилактики расстройств, которые описаны ниже.

Композиции, подходящие для вагинального введения, могут быть представлены как пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или распыляемые составы, содержащие в дополнение к активному ингредиенту такие носители, которые известны по опыту как подходящие.

Фармацевтические композиции могут быть упакованы в контейнерах на одну или несколько доз, например герметичные ампулы и пузырьки, и могут храниться в высушенном замораживанием (лиофилизованном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например воды, для инъекции непосредственно перед применением. Приготовленные для немедленного применения растворы и суспензии для инъекций получают из стерильных порошков, гранул и таблеток, ранее описанного вида. Предпочтительными унифицированными дозированными составами являются такие, которые содержат суточную дозу или унифицированную суточную суб-дозу, как упоминалось здесь выше, или соответствующую ее часть, активного ингредиента.

Изобретение дополнительно относится к ветеринарным композициям, содержащим по меньшей мере один активный ингредиент (например, соединение формулы I), как указано выше, вместе с ветеринарным носителем. Ветеринарными носителями являются материалы, используемые с целью введения композиции, и они могут быть твердыми, жидкими или газообразными материалами, которые к тому же являются инертными или приемлемыми в ветеринарии и совместимы с активным ингредиентом. Такие ветеринарные композиции могут быть введены парентерально, перорально или любым другм желательным путем.

IV. Способы применения

Соединения по изобретению (например, соединения формулы I) (или их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, сольваты, метаболиты или фармацевтически приемлемые соли или пролекарства) связываются с анти-апоптозными белками семейства Bcl-2 и ингибируют их активность, и в некоторых аспектах конкретно с анти-апоптозными белками Bcl-xL, и, следовательно, применимы для лечения болезней, состояний и/или расстройств, включая, но без ограничения, те болезни, которые характеризуются экспрессией или сверх-экспрессией анти-апоптозных белков членов семейства Bcl-2, и, в некоторых вариантах осуществления, таких болезней, которые характеризуются экспрессией или сверх-экспрессией белков Bcl-xL. Соответственно, конкретный аспект данного изобретения относится к способу лечения болезней или состояний пациента, которые могут быть охарактеризованы экспрессией или сверх-экспрессией анти-апоптозных белков членов семейства Bcl-2. В этом аспекте в некоторых вариантах осуществления, болезнь или состояние является раком. Соединения по изобретению могут селективно связываться с подгруппой анти-апоптозных белков Bcl-2, например преимущественно c белками Bcl-xL по сравнению с Bcl-2, Bcl-w или Mcl-1. В некоторых вариантах осуществления, соединения по изобретению проявляют по меньшей мере 2-кратную, 10-кратную, 20-кратную, 50-кратную, 100-кратную, 1000-кратную, 10000-кратную, 20000-кратную или 30000-кратную селективность связывания белка Bcl-xL по отношению к белку Bcl-2. В некоторых вариантах осуществления, соединения по изобретению проявляют по меньшей мере 2-кратную, 10-кратную, 20-кратную, 50-кратную, 100-кратную, 1000-кратную, 10000-кратную, 20000-кратную или 30000-кратную селективность связывания белка Bcl-xL по отношению к белку Mcl-1. В некоторых вариантах осуществления, соединения по изобретению проявляют по меньшей мере 2-кратную, 10-кратную, 20-кратную, 50-кратную, 100-кратную, 1000-кратную, 10000-кратную, 20000-кратную или 30000-кратную селективность связывания белка Bcl-xL по отношению к белку Bcl-w. В одном варианте осуществления способ содержит введение пациенту при необходимости этого терапевтически эффективного количества соединения по изобретению, например, соединения формулы I (или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера, сольвата, метаболита или фармацевтически приемлемой соли или пролекарства). В другом варианте осуществления, данное изобретение относится к способам лечения болезней или состояний пациента, которые характеризуются экспрессией или сверх-экспрессией анти-апоптозного белка Bcl-xL, указанные способы содержат введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтической композиции. В одном аспекте указанные композиции для лечения болезней или состояний, во время которых экспрессируется или сверх-экспрессируется анти-апоптозный белок Bcl-xL, содержат наполнитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы I.

Изобретение также относится к применению соединения по изобретению, например, соединения формулы I (или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера, сольвата, метаболита или фармацевтически приемлемой соли или пролекарства) для получения медикамента для лечения описанных здесь болезней и состояний у пациента, страдающего от такого расстройства.

Соединения по изобретению могут быть введены любым путем, соответствующим состоянию, которое требует лечения. Подходящие пути включают пероральный, парентеральный (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный, внутриартериальный, внутрикожный, интратекальный и эпидуральный), чрескожный, ректальный, назальный, местный (включая буккальный и лингвальный), вагинальный, интраперитонеальный, внутрилегочный и интраназальный. Для местного иммуносупрессивного лечения соединения могут быть введены интралезиональным введением, включая перфузию или иное контактирование трансплантата с ингибитором перед трансплантацией. Следует учитывать, что предпочтительный путь может изменяться, например, с состоянием реципиента. Когда соединение вводят перорально, оно может быть приготовлено как пилюля, капсула, таблетка и т.п. с фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем. Когда соединение вводят парентерально, оно может быть приготовлено с фармацевтически приемлемым парентеральным носителем и в унифицированной дозируемой форме для инъекций, как описано ниже.

Доза для лечения людей может быть в пределах от около 10 мг до около 1000 мг соединения формулы I. Типичная доза может быть около 100 мг до около 300 мг соединения. Доза может быть введена раз в день (QID), дважды в день (BID) или более часто в зависимости от фармакокинетических и фармакодинамических свойств, включая абсорбцию, распределение, метаболизм и выведение конкретного соединения. Кроме того, факторы токсичности могут влиять на дозировку и режим введения. При пероральном введении пилюля, капсула или таблетка может потребляться ежедневно или реже в течение определенного периода времени. Режим может быть повторен в течение нескольких циклов лечения.

В другом варианте осуществления, данное изобретение относится к композициям, содержащим фармацевтически приемлемый наполнитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы I, для лечения болезней или состояний аномального роста клеток и/или разупорядоченного апоптоза, таких как рак, мезотиолома, рак мочевого пузыря, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы или шеи, кожная или внутриглазная меланома, рак яичников, рак молочной железы, рак матки, карцинома фаллопиевых труб, карцинома эндометрия, карцинома шейки матки, карцинома влагалища, карцинома вульвы, костный рак, рак яичников, цервикальный рак, рак толстой кишки, ректальный рак, рак анального региона, рак желудка, желудочно-кишечный (желудочный, колоректальный и дуоденальный), хронический лимфолейкоз, эзофагеальный рак, рак тонкой кишки, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечников, саркома мягкой ткани, рак уретры, рак пениса, рак яичек, гепатоцеллюлярный рак (печеночных и желчных протоков), первичная или вторичная опухоль центральной нервной системы, первичная или вторичная опухоль головного мозга, болезнь Ходжкина, хронический или острый лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, лимфоцитарная лимфома, лимфобластный лейкоз, фолликулярная лимфома, лимфоидные злокачественные образования Т-клеточного или В-клеточного происхождения, меланома, множественная миелома, рак рта, рак яичников, немелкоклеточный рак легких, первичная или вторичная опухоль простаты, мелкоклеточный рак легких, рак почек и мочеточника, почечно-клеточная карцинома, карцинома почечных лоханок, новообразования центральной нервной системы, первичная лимфома центральной нервной системы, неходжскинская лимфома, опухоли позвоночника, глиома ствола мозга, аденома гипофиза, адренокортикальный рак, рак желчного пузыря, рак селезенки, холангиокарцинома, фибросаркома, нейробластома, ретинобластома или их сочетания.

В другом варианте осуществления, данное изобретение относится к способу лечения мезотиоломы, рака мочевого пузыря, рака поджелудочной железы, рака кожи, рака головы или шеи, кожной или внутриглазной меланомы, рака яичников, рака молочной железы, рака матки, карциномы фаллопиевых труб, карциномы эндометрия, карциномы шейки матки, карциномы влагалища, карциномы вульвы, костного рака, цервикального рака, рака толстой кишки, ректального рака, рака анального региона, рака желудка, желудочно-кишечного (желудочного, колоректального и дуоденального), хронического лимфолейкоза, эзофагеального рака, рака тонкой кишки, рака эндокринной системы, рака щитовидной железы, рака паращитовидной железы, рака надпочечников, саркомы мягкой ткани, рака уретры, рака пениса, рака яичек, гепатоцеллюлярного рака (печеночных и желчных протоков), первичной или вторичной опухоли центральной нервной системы, первичной или вторичной опухоли головного мозга, болезни Ходжкина, хронического или острого лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, лимфоцитарной лимфомы, лимфобластного лейкоза, фолликулярной лимфомы, лимфоидных злокачественных образований Т-клеточного или В-клеточного происхождения, меланомы, множественной миеломы, рака рта, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака простаты, мелкоклеточного рака легких, рака почек и мочеточника, почечно-клеточной карциномы, карциномы почечных лоханок, новообразований центральной нервной системы, первичной лимфомы центральной нервной системы, неходжскинской лимфомы, опухолей позвоночника, глиомы ствола мозга, аденомы гипофиза, адренокортикального рака, рака желчного пузыря, рака селезенки, холангиокарциномы, фибросаркомы, нейробластомы, ретинобластомы или сочетания одного или нескольких из указанных типов рака у пациента, указанный способ содержит введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

В еще одном варианте осуществления данное изобретение относится к способам лечения аутоиммунной болезни у млекопитающего, содержащим введение ему терапевтически эффективного количества соединения формулы I. Вовлеченность белков Bcl-2 в иммунные и аутоиммунные болезни описана в Puck, J.M. et al. (2003), Current Allergy and Asthma Reports, 3, 378-384; Shimazaki, K. et al. (2000), British Journal of Haematology, 110(3), 584-90; Rengan, R. et al. (2000), Blood, 95(4), 1283-92, и Holzelova, E. et al. (2004), New England Journal of Medicine, 351(14), 1409-1418.

Аутоиммунные растройства включают синдром приобретенного иммунодефицита (AIDS), аутоиммунный лимфопролиферативный синдром, гемолитическую анемию, воспалительные болезни и тромбоцитопению, острую или хроническую иммунную болезнь, связанную с трансплантацией органа, Аддисонову (бронзовую) болезнь, аллергические болезни, алопецию, очаговую алопецию, атероматозную болезнь/атеросклероз, атеросклероз, артрит (включая остеоартрит, ювенильный хронический артрит, септический артрит, артрит Лайма, псориазный артрит и реактивный артрит), аутоиммунную буллезную болезнь, абеталипопротемию, болезни, относящиеся в приобретенному иммунодефициту, острую иммунную болезь, связанную с трансплантацией органа, приобретенный акроцианоз, острые и хронические паразитарные или инфекционные процессы, острый панкреатит, острую почечную недостаточность, острый ревматизм, острый поперечный миелит, аденокарциному, воздушные эктопические систолы, (острый) респираторный дистресс-синдром взрослых, комплекс AIDS деменции, алкогольный цирроз, вызываемое алкоголем поражение печени, вызываемый алкоголем гепатит, аллергический конъюктивит, аллергический контактный дерматит, аллергический ринит, аллергию и астму, отторжение аллотрансплантата, недостаточность альфа-1-антитрипсина, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз, анемию, стенокардию, связанную с анкилозирующим спондилитом болезнь легких, дегенерацию клеток переднего рога спинного мозга, опосредуемую антителом цитотоксичность, антифосфолипидный синдром, реакции анти-рецепторной гиперчувствительности, аортальные и периферические аневризмы, аортальное рассечение, артериальную гипертензию, артериосклероз, артерио-венозную фистулу, артропатию, астению, астму, атаксию, атопическую аллергию, мерцание предсердий (замедленное или пароксизмальное), трепетание предсердий, предсердно-желудочковую блокаду, атрофический аутоиммунный гипотироидизм, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный гепатит типа-1 (классический аутоиммунный или люпоидный гепатит), аутоиммунно опосредуемую гипогликемию, аутоиммунную нейтропению, аутоиммунную тромбоцитопению, аутоиммунную болезнь щитовидной железы, В-клеточную лимфому, отторжение костного трансплантата, отторжение трансплантата костного мозга (ВМТ), облитерирующий бронхиолит, межжелудочковую блокаду пучка Гиса, ожоги, худосочие, сердечные аритмии, сердечный вызывающий временную потерю сознания синдром, сердечные опухоли, кардиомиопатию, воспалительную реакцию на сердечно-легочный шунт, отторжение хрящевого трансплантата, дегенерации коры мозжечка, мозжечковые расстройства, хаотичную или многофокальную атриальную тахикардию, связанные с химиотерапией расстройства, хламидиоз, холестаз, хронический алкоголизм, хронический активный гепатит, синдром хронической усталости, хроническую иммунную болезнь, связанную с трансплантацией органа, хроническую эозинофильную пневмонию, хронические воспалительные патологии, хронические слизисто-кожные кандидамикозы, хроническую обструктивную легочную болезнь (COPD), хроническую интоксикацию салицилатом, колоректальный неклассифицируемый вариабельный иммунодефицит (неклассифицируемую вариабельную гипогаммаглобулинемию), конъюктивит, связанный с болезнью соединительной ткани интерстициальный легочный процесс, контактный дерматит, Coombs положительную гемолитическцю анемию, легочное сердце, болезнь Якоба-Крейтцфельдта, эндогенный аутоиммунный гепатит, эндогенный фиброзирующий альвеолит, культурально негативный сепсис, кистозный фиброз, расстройства, связанные с цитокиновой терапией, болезнь Крона, демениции pugilistica, демиелинизирующие болезни, геморрагическую лихорадку денге, дерматит, склеродермальный дерматит, дерматологические состояния, связанную с дерматомиозитом/полимиозитом легочную болезнь, диабеты, диабетическую артериосклоротическую болезнь, сахарный диабет, диффузную болезнь телец Леви, дилатационную кардиомиопатию, дилатационную застойную кардиомиопатию, дискоидную красную волчанку, расстройства подкорковых узлов, диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови, синдром Дауна в среднем возрасте, лекарственный интерстициальный легочный процесс, лекарственный гепатит, лекарственные расстройства движения, вызываемые лекарствами, которые блокируют допаминовые рецепторы ЦНС, чувствительность к лекарству, экзему, энцефаломиелит, эндокардит, эндокринопатию, энтеропатический синовит, эпиглотит, инфекцию вируса Эпштейна-Барра, эритромелалгию, экстрапирамидальные и мозжечковые расстройства, наследственный гематофагоцитарный лимфогистиоцитоз, отторжение имплантата эмбрионального тимуса, атаксию Фридрайха, функциональные периферические артериальные расстройства, женское бесплодие, фиброз, фиброзную легочную болезнь, грибковый сепсис, газовую гангрену, язву желудка, гигантоклеточный артериит, клубочковый нефрит, гломерулонефрит, синдром Гудпасчера, зобный аутоиммунный гипотироидизм (болезнь Хасимото), подагрический артрит, отторжение трансплантата какого-либо органа или ткани, гомологичную болезнь, грам-отрицательный сепсис, грам-положительный сепсис, гранулему из-за внутриклеточных организмов, инфекцию стрептококка группы В (CBS), болезнь Грейвса, связанную с гемосидерозом легочную болезнь, лейкоз ворсистых клеток, болезнь Галлервордена-Шпатца, тироидит Хасимото, сенную лихорадку, отторжение сердечного трансплантата, гемахроматоз, гематопоэтические злокачественности (лейкоз и лимфому), гемолитическую анемию, гемолитический уремический синдром/тромболитическую тромбоцитопеническую багряницу, кровоизлияние, багряницу Геноха-Шенлейна, гепатит А, гепатит В, гепатит С, ВИЧ инфекцию/ВИЧ невропатию, болезнь Ходжкина, гипопаратироидизм, хорею Хантингтона, гиперкинетические расстройства движения, реакции гиперчувствительности, гиперчувствительный пневмонит, гипертироидизм, гипокинетические расстройства движения, определение системы гипоталамус-гипофиз-надпочечники, идиопатическую болезнь Аддисона, идиопатическую лейкопению, идиопатический легочный фиброз, идиопатическую тромбоцитопению, идиосинкразическую болезнь печени, инфантильную спинальную мышечную атрофию, инфекционные болезни, воспаление аорты, воспалительную болезнь кишечника, инсулинзависимый сахарный диабет, внутритканевый пневмонит, иридоциклит/увеит/оптический неврит, ишемическое-реперфузионное повреждение, ишемический удар, ювенильную злокачественную анемию, ювенильный ревматоидный артрит, ювенильную спинальную мышечную атрофию, саркому Капоши, болезнь Кавасаки, отторжение почечного трансплантата, легионеллу, лейшманиоз, проказу, поражения кортико-спинальной системы, IgA болезнь, липидемию, отторжение печеночного трансплантата, болезнь Лайма, лимфедему, лимфоцитарную инфильтративную легочную болезнь, малярию, мужское бесплодие идиопатическое или NOS, злокачественный гистиоцитоз, злокачественную меланому, менингит, менингококкемию, микроскопический васкулит почек, головную боль мигрени, митохондриальное мульти-системное расстройство, смешанную соединительнотканную болезнь, связанную со смешанной соединительнотканной болезнью легочную болезнь, моноклональную граммопатию, множественную миелому, дегенерации множественных систем (Mencel Dejerine-Thomas Shi-Drager и Machado-Joseph), миалгический энцефалит/Royal Free болезнь, миастению тяжелой степени, микроскопический васкулит почек, внутриклеточный mycobacterium avium, микобактериальный туберкулез, синдром миелодисплазии, инфаркт миокарда, ишемические расстройства миокарда, назофарингеальную карциному, неонатальную хроническую легочную болезнь, нефрит, нефроз, нефротический синдром, нейродегенеративные болезни, нейрогенные I мышечные атрофии, нейтропеническую лихорадку, неалкоголный стеатогепатит, окклюзию брюшной аорты и ее ветвей, окклюзивные артериальные расстройства, отторжение трансплантата органа, орхит/эпидидимит, орхит/вазэктомические инверсионные процедуры, органомегалию, остеоартроз, остеопороз, поражение яичников, отторжение трансплантата поджелудочной железы, паразитарные болезни, отторжение трансплантата паращитовидной железы, болезнь Паркинсона, тазовую воспалительную болезнь, пузырчатку обыкновенную, пузырчатку листовидную, пемфигоид, перенниальный ринит, болезнь перикарда, периферическую атеросклеротическую болезнь, периферические сосудистые расстройства, перитонит, злокачественную анемию, факогенный увеит, пневмоцитозную пневмонию, пневмонию, POEMS синдром (синдром полиневропатии, органомегалии, эндокринопатии, моноклональной гаммапатии и патологии кожи), пост-перфузионный синдром, пост-нагнетальный синдром, пост-MI кардиотомический синдром, пост-инфекционную внутритканевую легочную болезнь, преждевременное яичниковое повреждение, первичный билиарный цирроз печени, первичный склерозирующий гепатит, первичную микседему, первичную легочную гипертензию, первичный склерозирующий холангит, первичный васкулит, прогрессирующий супрануклеарный паралич, псориаз, псориаз типа 1, псориаз типа 2, псориазную артропатию, легочную гипертензию вторичную по отношению к соединительнотканной болезни, легочное проявление нодозного полиартрита, пост-воспалительную внутритканевую легочную болезнь, радиационный фиброз, радиационную терапию, феномен и болезнь Рейно, виброболезнь, регулярную QRS тахикардию, болезнь Рейтера, почечную болезнь NOS, реноваскулярную гипертензию, реперфузионное повреждение, рестриктивную кардиомиопатию, связанную с ревматоидным артритом внутритканевую легочную болезнь, ревматоидный спондилит, саркоидоз, синдром Шмидта, склеродерму, сенильную хорею, сенильную деменцию типа телец Леви, септический синдром, септический шок, серонегативные артропатии, удар, серповидноклеточную анемию, связанную с болезнью Шегрена легочную болезнь, синдром Шегрена, отторжение кожного аллотрансплантата, синдром патологий кожи, отторжение трансплантата тонкого кишечника, аутоиммунность спермы, рассеянный склероз (все подтипы), спинальную атаксию, спинально-мозжечковые дегенерации, спондилоартропатию, спорадическую полигландулярную типа I, спорадическую полигландулярную типа II недостаточность, болезнь Стилла, стрептококковый миозит, удар, структурные повреждения мозжечка, подострый склерозирующий панэнцефалит, метастатическую офтальмию, обморок, сифилис сердечно-сосудистой системы, системную анафилаксию, синдром системной воспалительной реакции, системный начинающийся в юности ревматоидный артрит, системную красную волчанку, связанную с системной красной волчанкой легочную болезнь, системный склероз, связанную с системным склерозом интерстициальную легочную болезнь, Т-клеточную или FAB ALL, болезнь Такаясу/артериит, телеангиэктазию, опосредуемые типом Th2 и типом Th1 болезни, облитерирующий тромбангиит, тромбоцитопению, тироидит, токсичность, синдром токсического шока, трансплантаты, травма/кровотечение, аутоиммунный гепатит типа 2 (гепатит анти-LKM антитела), инсулиновую резистентность типа В с акантокератодермией, реакции гипертензивности типа III, гипертензивность типа IV, язвенную колитную артропатию, язвенный колит, нестабильную стенокардию, уремию, уросепсис, крапивницу, увеит, болезни клапанов сердца, варикозные вены, васкулит, васкулитную диффузную легочную болезнь, венозные болезни, тромбоз вен, вентрикулярную фибрилляцию, витилиго, острую болезнь печени, вирусные и грибковые инфекции, витальный энцефалит/асептический менингит, витальный-ассоциированный гемафагоцитарный синдром, грануломатоз Вегенера, синдром Вернике-Корсакова, болезнь Вильсона, отторжение ксенотрансплантата какого-либо органа или ткани, связанную с иерсинией или сальмонеллой артропатию и тому подобное.

В одном варианте осуществления, соединение по изобретению (например, соединение формулы I) или его стереоизомер, геометрический изомер, таутомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемая соль или пролекарство используют в качестве противоракового агента или в качестве вспомогательного агента для лечения рака в комбинированной терапии. Специалист способен легко определить, действует или нет кандидатное соединение на раковое состояние для какого-либо конкретного типа клеток, или одно или в сочетании. В конкретных аспектах этого варианта осуществления, соединения по изобретению применяют в приложении к терапевтическим средствам, включая традиционную хирургию, радиотерапию и химиотерапию, для лечения рака.

Такие терапевтические средства могут включать одну или несколько из следующих категорий противораковых агентов: алкилирующие агенты, ингибиторы ангиогенеза, антитела, антиметаболиты, антимитотические агенты, антипролиферативные агенты, ингибиторы aurora-киназы, промотеры апоптоза (например ингибиторы Bcl-xL, Bcl-w и Bfl-1), активаторы губительного рецепторного пути, ингибиторы Bcr-Abl киназы, антитела BiTE (Bi-специфический Т-клеточный энгейджер), модификаторы ответной биологической реакции, ингибиторы циклин-зависимой киназы, ингибиторы клеточного цикла, ингибиторы циклооксигеназы-2, связывающие белки с дуальным вариабельным доменом, (DVD), ингибиторы лейкозного вирусного онкогенного гомологичного (ErbB2) рецептора, ингибиторы фактора роста, ингибиторы белка теплового удара (HSP)-90, ингибиторы гистон деацетилазы (HDAC), гормональные терапевтические средства, иммунологические средства, ингибиторы антибиотиков, интеркалирующих апоптозные белки (IAP), ингибиторы киназы, млекопипающий объект ингибиторов рапамицина, ингибиторы киназы, регулируемой внеклеточным сигналом, активируемым микромитогеном RNA, многовалентные связывающие белки, нестероидные противовоспалительные лекарства (NSAID), ингибиторы полимеразы поли ADP (аденозин дифосфат)рибозы (PARP), платиновые химиотерапевтические средства, ингибиторы поло-подобной киназы (Plk), ингибиторы протеосомы, пуриновые аналоги, пиримидиновые аналоги, ингибиторы рецепторной тиризин-киназы, ретиноиды/дельтоиды растительные алкалоиды, малые ингибиторные рибонуклеиновые кислоты (siRNA), ингибиторы топоизомеразы, их сочетания и тому подобное.

Антитела BiTE являются биспецифическими антителами, которые направляют Т-клетки на борьбу с раковыми клетками путем одновременного связывания двух клеток. Т-клетки затем атакуют целевую раковую клетку. Примеры антител BiTE включают адекатумумаб (Micromet MT201), блинатумомаб (Micromet MT103) и тому подобное. Без ограничения теорией, одним из механизмов по которому Т-клетки вызывают апоптоз целевой раковой клетки, является экзоцитоз цитолитических гранулированных компонентов, которые включают перфорин и гранзим В. В этом отношении, Bcl-2, как было показано, смягчает индукцию апоптоза как перфорином, так и гранзимом В. Эти данные предполагают, что ингибирование Bcl-2 могло бы усовершенствовать цитотоксические эффекты, вызываемые Т-клетками, когда они нацелены на раковые клетки (V.R. Sutton, D.L. Vaux and J.A. Trapani (1997) J. of Immunology. 158 (12): 5783).

siRNA являются молекулами, имеющими эндогенные основания RNA или химически модифицированные нуклеотиды. Модификации не отменяют клеточную активность, но вернее придают повышенную стабильность и/или повышенную клеточную силу. Примеры химических модификаций включают фосфоротионатные группы, 2'-дезоксинуклеотид, 2'-ОСН3-содержащие рибонуклеотиды, 2'-F-рибонуклеотиды, 2'-метоксиэтил рибонуклеотиды, их сочетания и тому подобное. siRNAs могут иметь варьирующиеся длины (например, 10-200 п.о.) и структуры (например, шпильки, одинарные двойные нити, петли, ники/гэпы, несогласования) и преобразуются в клетках, чтобы обеспечить молчание активного гена. Двухнитевая siRNA (dsRNA) может иметь одно и то же число нуклеотидов на каждой нити (тупые концы) или асимметричные концы (выступы). Выступ из 1-2 нуклеотидов может быть на смысловой и/или антисмысловой нити, а также на 5'- и/или 3'-концах данной нити. Например, siRNA, нацеливающие Mcl-1, как было показано, усовершенствуют активность АВТ-263 (т.е. N-(4-(4-((2-(4-хлорфенил)-5,5-диметил-1-циклогекс-1-ен-1-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоил)-4-(((1R)-3-морфолин-4-ил)-1-((фенилсульфанил)метил)пропил)амино)-3-((трифторметил)сульфонил)бензолсульфонамид) или АВТ-737 (т.е. N-(4-(4-((4'-((4-хлор(1,1'-бифенил)-2-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоил)-2-ил)-4-(((1R)-3-(диметиламино)-1-((фенилсульфанил)метил)пропил)амино)-3-нитробензолсульфонамид) во многих линиях опухолевых клеток (Tse et al. (2008) Cancer Research 68(9):3421 и имеющиеся там ссылки).

Многовалентные связывающие белки являются связывающими белками, содержащими два или более сайтов связывания антигена. Многовалентные связывающие белки созданы с тем, чтобы они имели три или более сайтов связывания антигена, и обычно являются антителами, которые в природе не встречаются. Термин "мультиспецифический связывающий белок" означает связывающий белок, способный к связыванию двух или более родственных или неродственных мишеней. Связывающие белки с дуальным вариабельным доменом (DVD) являются четырехвалентными или многовалентными связывающими белками, содержащими два или более сайтов связывания антигена. Такие DVD могут быть моноспецифическими (т.е. способными к связыванию одного антигена) или мультиспецифическими (т.е. способными к связыванию двух или более антигенов). DVD связывающие белки, содержащие два DVD полипептида с тяжелой цепью и два DVD полипептида с легкой цепью, упоминаются как Ig DVD. Каждая половина DVD Ig содержит DVD полипептид с тяжелой цепью, DVD полипептид с легкой цепью и два сайта связывания антигена. Каждый сайт связывания содержит вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи в целом с 6 CDR, вовлекаемыми в связывание антигена, на сайт связывания антигена.

Алкилирующие агенты включают алтретамин, AMD-473, AP-5280, аразиквон, бендамустин, бросталлицин, бусулфан, карбоквон, кармустин (BCNU), хлорамбуцил, CLORETAZINE® (ларомустин, VNP-40101M), циклофосамид, декарбазин, эстрамустин, фотемустин, глуфосфамид, ифосфамид, KW-2170, ломустин (CCNU), мафосфамид, мелфалан, митобронитол, митолактол, нимустин, нитроген мустард N-оксид, ранимустин, темозоломид, тиотепа, TRENDA® (бендамустин), треосульфан, рофосфамид и тому подобное.

Ингибиторы ангиогенеза включают ингибиторы эндотелий-специфической рецепторной тирозин киназы (Tie-2), ингибиторы рецептора эпидермального ростового фактора (EGFR), ингибиторы рецептора инсулинового ростового фактора-2 (IGFR-2), ингибиторы матричной металлопротеиназы-2 (MMP-2), ингибиторы матричной металлопротеиназы-9 (MMP-9), ингибиторы рецептора выделенного из тромбоцитов ростового фактора (PDGFR), аналоги тромбоспондина, ингибиторы тирозин киназы рецептора сосудистого эндотелиального ростового фактора (VEGFR) и тому подобное.

Антиметаболиты включают ALIMTA® (пеметрексед динатрий, LY231514, MTA), 5-азацитид, XELODA® (капецитабин), кармофур, LEUSTAT® (кладрибин), клофарабин, цитарабин, цитарабин окфосфат, цитозин арабинозид, децитабин, дефороксамин, доксифлуридин, эфдорнитин, EICAR (5-этинил-1-β-D-рибофуранозилимидазол-4-карбоксамид), эноцитабин, этинилцитидин, флурадабин, 5-фторурацил отдельно или в сочетании с лейковорином, GEMZAR® (гемцитабин), гидроксимочевинуа, ALKERAN® (мелфалан), меркаптопурин, 6-меркаптопурин рибозид, метотрексат, микофеноловую кислоту, неларабин, нолатрексед, окфосфат, пелитрексол, пентостатин, ралтрексед, рибавирин, триапин, триметрексат, S-1, тиазофурин, тегафур, TS-1, видарабин, UFT и тому подобное.

Ингибиторы Aurora киназы включают AZD-1152, MLN-8054, VX-680 и тому подобное.

Ингибиторы белка семейства Bcl-2 включают AT-101 ((-)госсипол), GENASENSE® (G3139 или облимерсен (Bcl-2-направленный антисмысловой олигонуклеотид)), IPI-194, IPI-565, N-(4-(4-((4'-хлор(1,1'-бифенил)-2-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоил)-4-(((1R)-3-(диметиламино)-1-((фенилсульфанил)метил)пропил)амино)-3-нитробензолсульфонамид) (ABT-737), N-(4-(4-((2-(4-хлорфенил)-5,5-диметил-1-циклогекс-1-ен-1-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоил)-4-(((1R)-3-(морфолин-4-ил)-1-(фенилсульфанил)метил)пропил)амино)-3-((трифторметил)сульфонил)бензолсульфонамид (ABT-263), GX-070 (обатоклакс) и тому подобное.

Ингибиторы Bcr-Abl киназы включают DASATINIB® (BMS-354825), GLEEVEC® (иматиниб) и тому подобное.

Ингибиторы CDK включают AZD-5438, BMI-1040, BMS-032, BMS-387, CVT-2584, флавопиридол, GPC-286199, MCS-5A, PD0332991, PHA-690509, селициклиб (CYC-202, R-росковитин), ZK-304709 и тому подобное.

Ингибиторы COX-2 включают ABT-963, ARCOXIA® (эторикоксиб), BEXTRA® (валдекоксиб), BMS347070, CELEBREX® (целекоксиб), COX-189 (лумеракоксиб), CT-3, DERAMAXX® (деракоксиб), JTE-522, 4-метил-2-(3,4-диметилфенил)-1-(4-сульфамоилфенил-1H-пиррол), MK-663 (эторикоксиб), NS-398, парекоксиб, RS-57067, SC-58125, SD-8381, SVT-2016, S-2474, T-614, VIOXX® (рофекоксиб) и тому подобное.

Ингибиторы EGFR включают ABX-EGF, анти-EGFR иммунолипосомы, EGF-вакцину, EMD-7200, ERBITUX® (цетуксимаб), HR3, IgA антитела, IRESSA® (гефитиниб), TARCEVA® (эрлотиниб или OSI-774), TP-38, EGFR слитый белок, TYKERB® (лапанитиб) и тому подобное.

Ингибиторы рецептора ErbB2 включают CP-724-714, CI-1033 (канертиниб), HERCEPTIN® (трастузунаб), TYKERB® (лапанитиб), OMNITARG® (2C4, петузумаб), TAK-165, GW-572016 (ионафарниб), GW-282974, EKB-569, PI-166, dHER2 (HER2 вакцина), APC-8024 (HER-2 вакцина), анти-HER/2neu биспецифическое антитело, B7.her2IgG3, AS HER2 трифункциональные биспецифмческие антитела, mAB AR-209, mAB 2B-1 и тому подобное.

Ингибиторы гистон деацетилазы включают депсипептид, LAQ-824, MS-275, трапоксин, субероиланилид гидроксамовую кислоту (SAHA), TSA, вальпроивую кислоту и тому подобное.

Ингибиторы HSP-90 включают 17-AAG-nab, 17-AAG, CNF-101, CNF-1010, CNF-2024, 17-DMAG, гелдапамицин, IPI-504, KOS-953, MYCOGRAB® (человеческое рекомбинантное антитело к HSP-90), NCS-683664, PU24FC1, PU-3, радицикол, SNX-2112, STA-9090 VER49009 и тому подобное.

Активаторы пути гибельного рецептора включают TRAIL, антитела или другие агенты, которые направлены на гибельные рецепторы (например, DR4 и DR5), такие как апомаб, конатумумаб, ETR2-ST01, GDC0145, лексатумумаб, HGS-1029, LBY-135, PRO-1762 и трастузумаб.

Ингибиторы MEK включают ARRY-142886, ARRY-438162 PD-325901, PD-98059 и тому подобное.

Ингибиторы mTOR включают AP-23573, CCI-779, эверолимус, RAD-001, рапамицин, темсиролимус и тому подобное.

Нестероидные противовоспалительные лекарства включают AMIGESIC® (салсалат), DOLOBID® (дифлунизал), MOTRIN® (ибупрофен), ORUDIS® (кетопрофен), RELAFEN® (набуметон), FELDENE® (пироксикам), ибупрофен крем, ALEVE® (напроксен) и NAPROSYN® (напроксен), VOLTAREN® (диклофенас), INDOCIN® (индометацин), CLINORIL® (сулиндак), TOLECTIN® (толметин), LODINE® (этоладак), TORADOL® (кеторолак), DAYPRO® (оксапрозин) и тому подобное.

Ингибиторы PDGFR включают C-451, CP-673, CP-868596 и тому подобное.

Платиновые химиотерапевтические средства включают цис-платин, ELOXATIN® (оксалиплатин), эптаплатин, лобаплатин, недаплатин, PARAPLATIN® (карбоплатин), сатраплатин, пикоплатин и тому подобное.

Ингибиторы polo-подобной киназы включают BI-2536 и тому подобное.

Аналоги тромбоспондина включают ABT-510, ABT-567, ABT-898, TSP-1 и тому подобное.

Ингибиторы VEGFR включают AVASTIN® (бевацизумаб), ABT-869, AEE-788, ANGTOZYME™ (рибозим, который ингибирует ангиогенез (Ribozyme Pharmaceuticals (Boulder, CO.) и Chiron, (Emeryville, CA)), аксинтиб (AG-13736), AZD-2171, CP-547,632, IM-862, MACUGEN (пегаптамиб), NEXAVAR® (сорафениб, BAY43-9006), пазопаниб (GW-786034), ваталаниб (PTK-787, ZK-222584), SUTENT® (санитиниб, SU-11248), VEGF trap, ZACTIMA™ (вандетаниб, ZD-6474) и тому подобное.

Антибиотики включают интеркалирующие антибиотики акларубицин, актиномицин D, амрубицин, аннамицин, адриамицин, BLENOXANE® (блеомицин), даунорубицин, CAELYX® или MYOCET® (липосомный доксорубицин), элсамитруцин, эпирбуцин, гларбуицин, ZAVEDOS® (идарубицин), митомицин C, неморубицин, неокарциностатин, пепломицин, пирарубицин, ребеккамицин, стималамер, стрептозоцин, VALSTAR® (валрубицин), циностатин и тому подобное.

Ингибиторы тороизомеразы включают акларубицин, 9-аминокамптотецин, амонафид, амсакрин, бекатесарин, белотекан, BN-80915, CAMPTOSAR® (иринотекан гидрохлорид), камптотецин, CARDIOXAN® (дексразоксин), дифломотекан, эдотекарин, ELLENCE® или PHARMORUBICIN® (эпирубицин), этопозид, эксатекан, 10-гидроксикамптотецин, гиметекан, луртотекан, митоксантрон, оратецин, пирарбуцин, пиксантрон, рубитекан, собузоксан, SN-38, тафлупозид, топотекан и тому подобное.

Антитела включают AVASTIN® (бевацизумаб), CD40-специфические антитела, chTNT-1/B, денозумаб, ERBITUX® (цетуксимаб), HUMAX-CD4® (занолимумаб), IGF1R-специфические антитела, линтузумаб, PANOREX® (эдреколомаб), RENCAREX® (WX G250), RITUXAN® (ритуксимаб), тицилимумаб, трастузумаб и тому подобное.

Гормональные лечебные средства включают ARIMIDEX® (анастрозол), AROMASIN® (эксеместан), арзоксифен, CASODEX® (бисалутамид), CETROTIDE® (цетрореликс), дегареликс, деслорелин, DESOPAN® (трилостан), дексаметазон, DROGENIL® (флутамид), EVISTA® (ралоксифен), AFEMA™ (фадрозол), FARESTON® (торемифен), FASLODEX® (фулвестрант), FEMARA® (летрозол), форместан, глюкокортикоиды, HECTOROL® (доксеркальциферол), RENAGEL® (севеламер карбонат), лазоксифен, лейпролид ацетат, MEGACE® (мегестрол), MIFEPREX® (мифепристон), NILANDRON™ (нилутамид), NOLVADEX® (тамоксифен цитрат), PLENAXIS™ (абареликс), преднизон, PROPECIA® (финастерид), рилостан, SUPREFACT® (бусерелин), TRELSTAR® (гормон, высвобождающий лютенизирующий гормон (LHRH)), VANTAS® (гистерилин имплант), VETORYL® (трилостан или модрастан), ZOLADEX® (фосрелин, госерелин) и тому подобное.

Дельтоиды и ретиноиды включают сеокальцитол (EB1089, CB1093), лексакальцитол (KH1060), фенретинид, PANRETIN® (алиретиноин), ATRAGEN® (липосомный третиноин), TARGRETIN® (гексаротен), LGD-1550 и тому подобное.

Ингибиторы PARP включают ABT-888, олапариб, KU-59436, AZD-2281, AG-014699, BSI-201, BGP-15, INO-1001, ONO-2231 и тому подобное.

Растительные алкалоиды включают, но без ограничения, винкристин, винбластин, виндезин, винорелбин и тому подобное.

Ингибиторы протеосомы включают VELCADE® (бортезомиб), MG132, NPI-0052, PR-171 и тому подобное.

Примеры иммунологических средств включают интерфероны и другие улучшающие иммунитет агенты. Интерфероны включают интерферон альфа, интерферон альфа-2a, интерферон альфа-2b, интерферон бета, интерферон гамма-1a, ACTIMMUNE® (интерферон гамма-1b), или интерферон гамма-n1, их сочетания и тому подобное. Другие агенты включают ALFAFERONE®, (IFN-α), BAM-002 (окисленный глутатион), BEROMUN® (тазонермин), BEXXAR® (тозитумомаб), CAMPATH® (алемтузумаб), CTLA4 (цитотоксичный лимфоцитарный антиген 4), декарбазин, денилейкин, эпратузумаб, GRANOCYTE® (ленограстим), лентинан, лейкоцитарный альфа интерферон, имиквимод, MDX-010 (анти-CTLA-4), вакцину меланомы, митумомаб, молграмостим, MYLOTARG™ (гемтузумаб озогамицин), NEUPOGEN® (филграстим), OncoVAC-CL, OVAREX® (ореговомаб), пентумомаб (Y-muHMFG1), PROVENGE® (сипулейцел-T), саргарамостим, сизофилан, тецелейкин, THERACYS® (Bacillus Calmette-Guerin), убенимекс, VIRULIZIN® (иммунотерапевтическое средство, Lorus Pharmaceuticals), Z-100 (специфическая субстанция от Maruyama (SSM)), WF-10 (тетрахлордекаоксид (TCDO)), PROLEUKIN® (алдеслейкин), ZADAXIN® (тималфазин), ZENAPAX® (даклизумаб), ZEVALIN® (90Y-либритумомаб тиуксетан) и тому подобное.

Модификаторы биологической ответной реакции являются агентами, которые модифицируют защитные механизмы живых организмов или биологические ответные реакции, такие как долговечность, рост или дифференциация клеток ткани, в направлении приобретения ими противоопухолевой активности, и к ним относятся крестин, лентинан, сизофиран, пицибанил PF-3512676 (CpG-8954), убенимекс и тому подобное.

Аналоги пиримидина включают цитарабин (ара C или арабинозид C), цитозин арабинозид, доксифлуридин, FLUDARA® (флударабин), 5-FU (5-фторурацил), флоксиридин, GEMZAR® (гемцитабин), TOMUDEX® (ратитрексед), TROXATYL™ (триацетилуридин троксацитабин) и тому подобное.

Аналоги пурина включают LANVIS® (тиогуанин) и PURI-NETHOL® (меркаптопурин).

Антимитотические агенты включают батабулин, эпотилон D (KOS-862), N-(2-((4-гидроксифенил)амино)пиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид, иксаберилон (BMS 247550), паклитаксел, TAXOTERE® (доцетаксел), PNU100940 (109881), патупилон, XRP-9881 (ларотаксел), винфлунин, ZK-EPO (синтетический эпотилон) и тому подобное.

Соединения по данному изобретению могут быть также использованы в качестве радиосенсибилизирующих средств, которые повышают эффективность радиотерапии. Примеры радиотерапии включают радиотерапию внешним пучком, телетерапию, брахитерапию и радиотерапию герметизированным, негерметизированным источником и тому подобное.

Дополнительно, соединения, имеющие формулу I, могут быть объединены с другими химиотерапевтическими агентами, такими как ABRAXANE™ (ABI-007), ABT-100 (ингибитор фарнезил трансферазы), ADVEXIN® (Ad5CMV-p53 вакцина), ALTOCOR® или MEVACOR® (ловастатин), AMPLIGEN® (поли I:поли C12U, синтетическая RNA), APTOSYN® (эксисулид), AREDIA® (памидроновая кислота), арглабин, L-аспарагиназа, атаместан (1-метил-3,17-дион-андроста-1,4-диен), AVAGE® (тазаротен), AVE-8062 (производное комбрестатина) BEC2 (митимомаб), кахектин или кахексин (фактор некроза опухоли), канваксин (вакцина), CEAVAC® (раковая вакцина), CELEUK® (целмолейкин), CEPLENE® (гистамин дигидрохлорид), CERVARIX® (вакцина папилломавируса человека), CHOP® (C: CYTOXAN® (циклофосфамид); H: ADRIAMYCIN® (гидроксидоксорубицин); O: винкристин (ONCOVIN®); P: преднизон), CYPAT™ (ципротерон ацетат), комбрестатин A4P, DAB(389)EGF (каталитические и транслокационные домены токсина дифтерии, связанные посредством линкера His-Ala с человеческим эпидермальным ростовым фактором), или TransMID-107R™ (токсины дифтерии), декарбазин, дактиномицин, 5,6-диметилксантенон-4-уксусная кислота (DMXAA), энилурацил, EVIZON™ (скваламин лактат), DIMERICINE® (T4N5 липосомный лосьон), дискодермолид, DX-8951f (эксатекан мезилат), энзастаурин, EPO906 (эпитилон B), GARDASIL® (четырехвалентная рекомбинантная вакцина папилломавируса человека (типы 6, 11, 16, 18)), GASTRIMMUNE®, GENASENSE®, GMK (ганглиозидная конъюгатная вакцина), GVAX® (вакцина рака простаты), галофугинон, гистерелин, гидроксикарбамид, ибандроновая кислота, IGN-101, IL-13-PE38, IL-13-PE38QQR (цинтредекин бесудотокс), IL-13-экзотоксин псевдомонад, интерферон-α, интерферон-γ, JUNOVAN™ или MEPACT™ (мифамуртид), лонафарниб, 5,10-метилентетрагидрофолат, милтефозин, (гексадецилфосфохолин), NEOVASTAT® (AE-941), NEUTREXIN® (триметрексат гликуронат), NIPENT® (пентостатин), ONCONASE® (фермент рибонуклеаза), ONCOPHAGE® (лечение вакциной меланомы), ONCOVAX® (IL-2 вакцина), ORATHECIN™ (рубитекан), OSIDEM® (клеточное лекарство на основе антитела), OVAREX® MAb (мышиное моноклональное антитело), паклитаксел, PANDIMEX™ (агликоновые сапонины из жень-шеня, содержащие 20(S)протопанаксадиол (aPPD) и 20(S) протопанаксатриол (aPPT)), панитумумаб, PANVAC®-VF (исследовательская раковая вакцина), пегаспаргаза, PEG интерферон A, феноксидиол, прокарбазин, ребимастат, REMOVAB® (катумаксомаб), REVLIMID® (леналидомид), RSR13 (эфапроксирал), SOMATULINE® LA (ланреотид), SORIATANE® (ацитретин), стауроспорин (стауроспоры Streptomyces), телабостат (PT100), TARGRETIN (бексаротен), TAXOPREXIN® (DHA-паклитаксел), TELCYTA® (канфосфамид, TLK286), темилифен, TEMODAR® (темозоломид), тесмилифен, талидомид, THERATOPE® (STn-KLH), тимитак (2-амино-3,4-дигидро-6-метил-4-оксо-5-(4-пиридилтио)хиназолин дигидрохлорид), TNFERADE™ (аденовектор: DNA носитель, содержащий ген фактора-α некроза опухоли), TRACLEER® или ZAVESCA® (босентан), треонин (ретин-A), тетрандрин, TRISENOX® (мышьяковый триоксид), VIRULIZIN®, украин (производное растительных алкалоидов из чистотела), витаксин (анти-альфавбета3 антитело), XCYTRIN® (мотексафин гадолиний), XINLAY™ (атрасентан), XYOTAX™ (паклитаксел полиглумекс), YONDELIS® (трабектедин), ZD-6126, ZINECARD® (декстразоксан), ZOMETA® (золендроновая кислота), зорубицин и тому подобное.

Комбинированная терапия может быть проведена как в одновременном, так и в последовательном режиме. При последовательном введении комбинация может быть введена в два или несколько введений. Комбинированное введение включает совместное введение с использованием отдельных составов или одного фармацевтического состава и последовательное введение в любом порядке, когда предпочтительно существует период времени, в течение которого оба (или все) активные агенты одновременно оказывают свое биологическое действие.

Соответственно, в другом варианте осуществления, данное изобретение относится к композициям для лечения болезней, во время которых экспрессируется или сверх-экспрессируется анти-апоптозный белок Bcl-xL, указанные композиции содержат наполнитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы I и терапевтически эффективное количество одного дополнительного терапевтического агента или более чем одного дополнительного терапевтического агента.

В другом варианте осуществления, данное изобретение относится к способам лечения болезней, во время которых экспрессируется или сверх-экспрессируется анти-апоптозный белок Bcl-xL, указанные способы содержат введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I и терапевтически эффективного количества одного дополнительного терапевтического агента или более чем одного дополнительного терапевтического агента.

В другом варианте осуществления, данное изобретение относится к способам лечения мезотиоломы, рака мочевого пузыря, рака поджелудочной железы, рака кожи, рака головы или шеи, кожной или внутриглазной меланомы, рака яичников, рака молочной железы, рака матки, карциномы фаллопиевых труб, карциномы эндометрия, карциномы шейки матки, карциномы влагалища, карциномы вульвы, костного рака, рака яичников, цервикального рака, рака толстой кишки, ректального рака, рака анального региона, рака желудка, желудочно-кишечного (желудочного, колоректального и дуоденального), хронического лимфолейкоза, эзофагеального рака, рака тонкой кишки, рака эндокринной системы, рака щитовидной железы, рака паращитовидной железы, рака надпочечников, саркомы мягкой ткани, рака уретры, рака пениса, рака яичек, гепатоцеллюлярного рака (печеночных и желчных протоков), первичной или вторичной опухоли центральной нервной системы, первичной или вторичной опухоли головного мозга, болезни Ходжкина, хронического или острого лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, лимфоцитарной лимфомы, лимфобластного лейкоза, фолликулярной лимфомы, лимфоидных злокачественных образований Т-клеточного или В-клеточного происхождения, меланомы, множественной миеломы, рака рта, рака яичников, немелкоклеточного рака легких, рака простаты, мелкоклеточного рака легких, рака почек и мочеточника, почечно-клеточной карциномы, карциномы почечных лоханок, новообразований центральной нервной системы, первичной лимфомы центральной нервной системы, неходжскинской лимфомы, опухоли позвоночника, глиомы ствола мозга, аденомы гипофиза, адренокортикального рака, рака желчного пузыря, рака селезенки, холангиокарциномы, фибросаркомы, нейробластомы, ретинобластомы или сочетаний одного или нескольких указанных типов рака у пациента, указанные способы, содержат введение терапевтически эффективных количеств соединения формулы I или его композиции и одного или более чем одного из этопозида, винкристина CHOP, ритуксимаба, рапамицина, R-CHOP или бортезомиба.

Подходящие дозировки для любого из указанных совместно вводимых агентов являются такими как ранее используемые и могут быть снижены благодаря объединенному действию (синергии) вновь установленного агента и других химиотерапевтических агентов или способов лечения.

Комбинированная терапия может обеспечивать "синергию" и обладает "синергическим" эффектом, т.е. эффект, достигаемый, когда активные ингредиенты применяют вместе, является более значительным, чем сумма эффектов, которые являются результатами применения соединений раздельно. Синергический эффект может быть достигнут, когда активными ингредиентами являются: (1) совместно введенные в состав и вводимые или доставляемые одновременно в объединенном унифицированном дозированном составе; (2) доставляемые путем чередования или параллельно как отдельные составы, или (3) по какой-либо другой схеме. При лечении путем переменной доставки синергический эффект может быть достигнут, когда соединения вводят или доставляют последовательно, например, путем различных инъекций отдельными шприцами, отдельными пилюлями или капсулами или в отдельных препаратах для вливания. Как правило, во время переменной терапии эффективную дозировку каждого активного ингредиента вводят последовательно, т.е. сериями, тогда как в комбинированной терапии эффективные дозировки двух или более активных ингредиентов вводят вместе.

В еще одном варианте осуществления данное изобретение относится к способам лечения болезней или состояний, вызываемых, обостряемых или являющихся результатом избытка или нежелательной активации тромбоцитов у пациента, содержащим введение ему соединения формулы I или его фармацевтической композиции.

Болезни, вызываемые или обостряемые избытком или нежелательной активацией тромбоцитов, включают, но без ограничения, идиопатическую тромбоцитемию, истинную полицитемию, М7 острый миелогенный лейкоз, рестеноз, сердечно-сосудистую болезнь, периоперационную антитромбоцитарную терапию, связанный с устройством тромб и связанные с этим осложнения и тому подобное. Участие тромбоцитов в идиопатической тромбоцитемии отражено в Seminars in Hematology (2005), 42(4), 230-238 и также в New Eng. J. Med., 2005, 353:1, 33-45. Участие тромбоцитов в истинной полицитемии описано в Seminars in Thrombosis and Haemostatis (2006), 32(3), 267-275. О вовлеченности тромбоцитов в рестеноз сообщается в Journal of Clinical Pathology (2006), 59(3), 232-239. Вмешательство тромбоцитов в сердечно-сосудистую болезнь описано в International Journal of Clinical Practice (2003), 57(10), 898-905. О вовлеченности тромбоцитов в периоперативную антитромбоцитарную терапию сообщается в Journal of Thrombosis Thrombolysis. Болезни или состояния, которые являются результатом повышенных уровней тромбоцитов, включают кровотечение, тромбоз или другое тромбоэмболическое осложнение, начало или ухудшение других болезней или расстройств крови, таких как синдром "липкого тромбоцита".

В одном варианте осуществления данное изобретение относится к способам снижения числа тромбоцитов у пациента и лечения про-тромботических состояний и болезней, которые характеризуются избытком или нежелательной активацией тромбоцитов, путем введения ему соединения формулы I.

В другом варианте осуществления данное изобретение относится к способам лечения идиопатической тромбоцитемии у пациента, содержащему введение ему соединения формулы I. В конкретных аспектах этого варианта осуществления, в одном варианте осуществления данное изобретение относится к способу снижения числа тромбоцитов у пациента и лечения идиопатической тромбоцитемии.

В другом варианте осуществления данное изобретение относится к способам лечения истинной полицитемии у пациента, содержащему введение ему соединения формулы I, которое ингибирует активность белка члена семейства Bcl-xL. В конкретных аспектах этого варианта осуществления, в одном варианте осуществления данное изобретение относится к способам снижения числа тромбоцитов у пациента и лечения истинной полицитемии.

В некоторых аспектах данное изобретение относится к применению соединения, которое описано здесь, (например, соединения формулы I) или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера, сольвата, метаболита или фармацевтически приемлемой соли или пролекарства для лечения болезни или состояния. Типичные болезни или состояния включают, например, какую-либо из болезней или состояний, вызываемых, обостряемых или являющихся результатом избытка или нежелательной активации тромбоцитов, обсуждавшихся выше, каким-либо из типов рака, обсуждавшихся выше, или какую-либо из аутоиммунных болезней, обсуждавшихся выше. В некоторых вариантах осуществления предложенных применений, соединение (например, соединение формулы I) или его стереоизомер, геометрический изомер, таутомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемая соль или пролекарство используют отдельно. В других вариантах осуществления, соединение (например, соединение формулы I) или его стереоизомер, геометрический изомер, таутомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемую соль или пролекарство используют как часть комбинированной терапии, как обсуждалось выше.

В некоторых аспектах, соединение или фармацевтическая композиция, используемые в каждом из указанных способов по изобретению, является соединением или фармацевтической композицией, содержащей соединение, выбранное из таблицы 1.

Следующие примеры приведены для пояснения изобретения, но не должны рассматриваться как ограничивающие изобретение каким-либо образом.

V. Примеры

В приведенных ниже примерах, если не указано иное, все температуры даны в градусах Цельсия. Реагенты приобретали у коммерческих поставщиков, таких как Aldrich Chemical Company, Lancaster, TCI или Maybridge и использовали без дополнительной очистки, если не указано иное. Реакции, приведенные ниже проводили обычно при положительном давлении азота или аргона или с осушительным патроном (если не указано иное) в безводных растворителях, и реакционные колбы обычно оснащали каучуковой мембраной для введения веществ и реагентов посредством шприца. Стеклянную посуду сушили в печи и/или теплом. Колоночную хроматографию проводили на системе Biotage (производитель: Dyax Corporation), имеющей селикагелевую колонку, или на картридже SEPPAK® с диоксидом кремния (Waters) или на хроматографической системе ISCO (производитель: Teledyne ISCO), имеющей селикагелевую колонку, или вручную с использованием стеклянной колонки, следуя, в основном, методам, описанным W.C. Still (смотри Still W.C., Kahn, M., Mitra, A.J. Org. Chem. 1978, 43(14), 2923-2925). Спектр 1Н ЯМР регистрировали на Varian UNITY или Inova (500 МГц), Varian UNITY (400 МГц) или Varian UNITY plus или Mercury (300 МГц), или на подобном приборе, работающем при 300 или 400 МГц. Химические сдвиги даны как величины δ (м.д.) относительно TMS в качестве внутреннего стандарта. Спектр 1Н ЯМР в растворах дейтеризованного CDCl3, d6-DMSO, CH3OD или d6-ацетона (дана в м.д.). Мультиплетности даны как обычно и, когда приведены пиковые мультиплетности, использованы следующие сокращения: s (синглет), d (дублет), t (триплет), m (мультиплет), br (широкий), dd (дублет дублетов), dt (дублет триплетов). Константы взаимодействия, когда даны, представлены в Герцах (Гц). Когда возможно, образование продукта в реакционных смесях могли отслеживать по LC/MS, осуществляемым на Agilent 1200 Series LC, связанном с 6140 квадрупольным масс-спектрометром с использованием колонки Supelco Ascentis Express CIS с линейным градиентом 5%-95% ацетонитрил/вода (с 0,1% трифторуксусной кислотой в каждой подвижной фазе) в течение 1,4 минуты и выдерживали при 95% в течение 0,3 минуты, или на PE SCIEX API 150 EX с использованием PHENOMENEX DNYC монолитной C18 колонки с линейным градиентом 5%-95% ацетонитрил/вода (с 0,1% трифторуксусной кислотой в каждой подвижной фазе) в течение 5 минут и выдерживали при 95% в течение 1 минуты, или на подобной системе. В качестве варианта, аналитическую LC-MS осуществляли на масс-спектрометре Finnigan Navigator и Agilent 1100 ВЭЖХ system с программным обеспечением Xcalibur 1,2 и Open-Access 1.3. Масс-спектрометр эксплуатировали в условиях положительной APCI ионизации. Система ВЭЖХ содержала Agilent Quaternary насос, дегазатор, колоночное отделение и автоматический пробоотборник и диодный матричный детектор с испарительным светорассеивающим детектором Sedere Sedex 75. Используемой колонкой была PHENOMENEX LUNA COMBI-HTS C8(2) 5 мкм 100Å (2,1 мм × 30 мм). Способ TFA (Способ A): Градиент 10-100% ацетонитрил (растворитель 1) и 0,1% трифторуксусную кислоту в воде (растворитель 2) использовали при расходе 2 мл/мин (0-0,1 мин 10% растворитель 1, 0,1-2,6 мин 10-100% растворитель 1, 2,6-2,9 мин 100-10% растворитель 1, 2,9-3,0 мин 100-10% растворитель 1). Аммониевый способ (способ B): Градиент 10-100% ацетонитрил (растворитель 1) и 10 мМ NH4OAc в воде (растворитель 2) использовали при расходе 1,5 мл/мин (0-0,1 мин 10% растворитель 1, 0,1-3,1 мин 10-100% растворитель 1, 3,1-3,9 мин 100-10% растворитель 1, 3,9-4,0 мин 100-10% растворитель 1).

Масс-спектральные анализы GC-MS проводили на масс-спектрометре Finnigan SSQ7000 GC/MS, используя различные методики, включая электрораспылительную ионизацию (ESI) и химическую ионизацию при атмосферном давлении (APCI), как указано для отдельных соединений. Точное масс-измерение осуществляли на масс-спектрометре FINNIGAN FTMS NEWSTAR T70. Соединение определяют как "согласующееся" с химической формулой, если точное масс-измерение находится в пределах 5,0 м.д. относительной масс-ошибки (RME) точной моноизотопной массы.

Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой проводили на конкретных соединениях и осуществляли на автоматизированной системе Gilson ВЭЖХ, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм и при расходе 25 мл/мин; =214, 245 нм; мобильную фазу A, 0,1% TFA в Н2О; мобильную фазу B, CH3CN; линейный градиент 0-70% B за 40 мин.

Все используемые сокращения описанных реагентов, условий реакции или используемого оборудования согласуются с определениями, приведенными в "List of standard abbreviations and acronyms", опубликованным ранее в Journal of Organic Chemistry (an American Chemical Society journal). Следующие используемые здесь сокращения имеют следующие значения: rt = комнатная температура, DMAP = 2,6-диметиламинопиридин; EDCI, DCM = дихлорметан, THF = тетрагидрофуран, TEA = триэтиламин, EtOAc = этилацетат, TFA = трифторуксусная кислота, LC/MS = жидкостная хроматография/масс-спектрометрия, APCI = химическая ионизация при атмосферном давлении, DCI = десорбционная химическая ионизация, MS = масс-спектрометрия, MeOH = метанол, DMA = N,N-диметилацетамид, EtOH = этанол, Hex = гексан(ы), NBS = N-бромсукцинимид, NIS = N-иодсукцинимид, SEMCl = 2-(триметилсилил)этоксиметил хлорид, DME = диметоксиэтан, DEAD = дибензилазодикарбоксилат, DMF = N,N-диметилформамид, DCE = дихлорэтан и Et3N = триэтиламин.

Пример 1

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (1):

Стадия 1: Получение трет-бутил 8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилата (1A):

К раствору 2-(трет-бутоксикарбонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоновой кислоты (6,8 г, 24,5 ммоль) и бензо[d]тиазол-2-амина (5,52 г, 36,8 ммоль) в DCM (80 мл) добавляли EDCI (9,4 г, 49,04 ммоль) и DMAP (6 г, 49 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли DCM (400 мл), промывали 5% водн. HCl, водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении, получая 8,5 г желательного продукта трет-бутил 8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилата (1A): 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ м.д. 7,83 (1H, м), 7,48 (1H, д), 7,34 (4H, м), 7,19 (1H, т), 4,91 (2H, м), 3,67 (2H, т), 2,92 (2H, т), 1,47 (9H, м). MS (ESI(+)): m/z 410 (M+H).

Стадия 2: Получение N-(бензо[d]тиазол-2-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоксамид дигидрохлорида (1B):

К раствору трет-бутил 8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилата (1A) (8,5 г, 20,75 ммоль) в DCM (80 мл) добавляли 2 н. HCl в простом эфире (80 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи и концентрировали при пониженном давлении, получая желательный продукт N-(бензо[d]тиазол-2-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоксамид дигидрохлорид (1B): LC/MS(APCI): m/z 309,9 (M+H).

Стадия 3: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоксилата (1C):

К раствору N-(бензо[d]тиазол-2-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоксамид дигидрохлорида (1B) (5,3 г, 13,86 ммоль) и метил 2-хлортиазол-4-карбоксилата (2,5 г, 14 ммоль) в DMA (60 мл) добавляли Cs2CO3 (25 г, 70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до к.т., подкисляли 5% HCl, экстрагировали DCM, промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 5% MeOH в DCM, получая 4,2 г (67%) желательного продукта метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоксилата (1C): LC/MS (APCI): m/z 451,0 (M+H).

Стадия 4: Получение указанного в заголовке соединения 1:

Указанное в заголовке соединение 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновую кислоту (1) получали по следующей процедуре. К раствору метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоксилата (1C) (180 мг, 4 ммоль) в THF (4 мл) и MeOH (2 мл) добавляли 2 н. NaOH (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 4 часов и нейтрализовали медленным добавлением 5% водн. HCl. Осадок затем отфильтровывали, сушили, растворяли в DMSO/MeOH (1:1) и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая желательный продукт 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновую кислоту (1): 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 7,99 (1H, д), 7,76 (1H, д), 7,69 (1H, дд), 7,52 (1H, с), 7,38 (4H, м), 4,91 (2H, с), 3,75 (2H, т), 3,05 (2H, т). MS (ESI(+)): m/z 437 (M+H).

Пример 2

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-феноксипропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (2):

Стадия 1: Получение этил 3-бром-6-хлор-2-оксогексаноата (2A):

К этил 6-хлор-2-оксогексаноату (2,9 г, 15 ммоль) в тетрахлориде углерода (30 мл) добавляли бром (0,85 мл, 16,5 ммоль) и перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали раствором Na2S2O3, водой, насыщенным раствором соли, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 10% EtOAc в гексанах, получая желательный продукт этил 3-бром-6-хлор-2-оксогексаноат (2A) с 95% выходом. 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 5,25 (1H, дд), 4,29 (2H, кв.), 3,71 (2H, т), 2,16 (1H, м), 1,91 (1H, м), 1,29 (3H, т).

Стадия 2: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-хлорпропил)тиазол-4-карбоксилата (2B):

К N-(бензо[d]тиазол-2-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоксамид дигидрохлориду (1B) (11,5 г, 30 ммоль) в DMF (125 мл) добавляли TEA (16,7 мл, 120 ммоль) и перемешивали при к.т. в течение 15 минут. Ди(1Н-имидазол-1-ил)метантион (6,53 г, 33 ммоль) добавляли и реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 часа. 7 н. раствор аммиака в MeOH (171 мл, 1,2 моль) добавляли и смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, чтобы удалить аммиак, TEA и MeOH. К концентрату добавляли раствор этил 3-бром-6-хлор-2-оксогексаноата (2A) (11,4 г, 42 ммоль) в EtOH (40 мл). Реакционную смесь нагревали при 50°C в атмосфере азота в течение 4,5 часов. Дополнительный этил 3-бром-6-хлор-2-оксогексаноат (2A) (0,815 г, 3 ммоль) в EtOH (3 мл) добавляли и нагревание продолжали в течение 1,5 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, чтобы удалить EtOH, и затем экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Концентрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 30 до 50% EtOAc в гексанах, получая желательный продукт этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-хлорпропил)тиазол-4-карбоксилат (2B) c 69% выходом. 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,42 (4H, м), 4,83 (2H, с), 4,19 (2H, кв.), 3,72 (2H, т), 3,64 (2H, т), 3,13 (2H, м), 3,04 (2H, т), 2,00 (2H, м), 1,21 (3H, т).

Стадия 3: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-иодпропил)тиазол-4-карбоксилата (2C):

К этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-хлорпропил)тиазол-4-карбоксилату (2B) (9,3 г, 17,2 ммоль) в ацетонитриле (125 мл) добавляли иодид натрия (25,8 г, 172 ммоль). Реакционную смесь продували азотом дважды. Реакционную смесь затем нагревали при 90°C в течение 5 часов, охлаждали до к.т. и концентрировали при пониженном давлении. Концентрат разбавляли EtOAc, промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал перемешивали в Et2O, фильтровали, промывали дополнительным Et2O и сушили при пониженном давлении, получая желательный продукт этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-иодпропил)тиазол-4-карбоксилат (2C) с 93% выходом. 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,66 (1H, д), 7,43 (4H, м), 4,83 (2H, с), 4,19 (2H, кв.), 3,72 (2H, т), 3,26 (2H, т), 3,06 (4H, м), 2,03 (2H, м), 1,21 (3H, т).

Стадия 4: Получение указанного в заголовке соединения 2:

Указанное в заголовке соединение 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-феноксипропил)тиазол-4-карбоновую кислоту (2) получали по следующей процедуре. К фенолу (22,6 мг, 0,24 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли NaH (60% масляная дисперсия) (24 мг, 0,6 ммоль). После перемешивания при к.т. в течение 5 минут добавляли этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-иодпропил)тиазол-4-карбоксилат (2C) (127 мг, 0,2 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 1 часа. Реакционную смесь подкисляли 1 н. HCl и осадок отфильтровывали и промывали водой. Осадок перемешивали в Et2O, отфильтровывали и промывали дополнительным Et2O. Полученное твердое вещество очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 2% MeOH в DCM. К очищенному материалу в DMF (1 мл) добавляли NaOH (4 н. водн.) (0,5 мл, 2 ммоль), нагревали при 50°C в течение 5 часов, охлаждали до к.т. и подкисляли 1 н. HCl. Осадок отфильтровывали, промывали водой, суспендировали в Et2O, фильтровали, промывали Et2O и сушили в вакуумной печи, получая желательный продукт 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-феноксипропил)тиазол-4-карбоновую кислоту (2) с 37% выходом. 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (с, 1H), 12,49 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,44 (4H, м), 7,25 (2H, м), 6,88 (3H, м), 4,82 (2H, с), 3,96 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,17 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,00 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 571 (M+H).

Пример 3

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(пиридин-4-илтио)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (3):

Указанное в заголовке соединение 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(пиридин-4-илтио)пропил)тиазол-4-карбоновую кислоту (3) получали по следующей процедуре. Указанное в заголовке соединение получали путем замещения пиридин-4-тиолом фенола на стадии 4 примера 2. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-90% B за 40 минут), получая 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(пиридин-4-илтио)пропил)тиазол-4-карбоновую кислоту (3) с 30% выходом. 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,81 (1H, с), 8,48 (2H, д), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,59 (2H, м), 7,41 (4H, м), 4,83 (2H, с), 3,73 (2H, т), 3,18 (4H, м), 3,03 (2H, т), 1,95 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 588 (M+H).

Пример 4

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-(трет-бутоксикарбониламино) фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (4):

Указанное в заголовке соединение 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-(трет-бутоксикарбониламино)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновую кислоту (4) получали по следующей процедуре. Указанное в заголовке соединение получали путем замены трет-бутил 4-гидроксифенилкарбаматом фенола на стадии 4 примера 2. Когда добавление 1 н. HCl не давало отделяемых фильтрованием твердых веществ для стадий либо алкилирования, либо гидролиза, реакционные смеси экстрагировали EtOAc. Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очистку на каждой стадии сопровождали как в примере 2 дополнительным промыванием MeOH конечного твердого вещества, получаемого как желательное соединение, а именно 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-(трет-бутоксикарбониламино)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновая кислота (4) с 58% выходом. 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 12,52 (1H, с), 9,08 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,45 (2H, м), 7,35 (4H, м), 6,80 (2H, м), 4,83 (2H, с), 3,91 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,15 (2H, м), 3,03 (2H, т), 1,97 (2H, м), 1,45 (9H, с). MS (ESI(+)): m/z 686 (M+H).

Пример 5

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(3-(трет-бутоксикарбониламино)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (5):

Указанное в заголовке соединение 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(3-(трет-бутоксикарбониламино)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновую кислоту (5) получали по следующей процедуре. Указанное в заголовке соединение получали путем замещения трет-бутил 3-гидроксифенилкарбаматом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,81 (1H, с), 9,24 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,46 (2H, м), 7,36 (2H, м), 7,09 (2H, м), 6,97 (1H, д), 6,50 (1H, дд), 4,84 (2H, с), 3,91 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,16 (2H, м), 3,03 (2H, т), 1,99 (2H, м), 1,45 (9H, с). MS (ESI(+)): m/z 686 (M+H).

Пример 6

Синтез 5-(3-(4-аминофенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (6):

Указанное в заголовке соединение 5-(3-(4-аминофенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновую кислоту (6) получали по следующей процедуре. К 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-(трет-бутоксикарбониламино)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоте (4) (20 мг, 0,029 ммоль) в MeOH (1 мл) добавляли TFA (1 мл, 13 ммоль) и перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Реакционную смесь очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-70% B за 40 минут), получая желательный продукт 5-(3-(4-аминофенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновую кислоту с 48% выходом. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,77 (1H, с), 9,04 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,47 (2H, м), 7,37 (2H, м), 7,09 (2H, д), 6,92 (2H, м), 4,83 (2H, с), 3,95 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,17 (2H, м), 3,03 (2H, т), 1,99 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 586 (M+H).

Пример 7

Синтез 5-(3-(1Н-пиразол-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (7):

Указанное в заголовке соединение 5-(3-(1Н-пиразол-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновую кислоту (7) получали по следующей процедуре. Указанное в заголовке соединение получали путем замещения 1H-пиразолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,85 (1H, с), 12,55 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,68 (2H, м), 7,47 (2H, м), 7,37 (3H, м), 6,19 (1H, т), 4,83 (2H, с), 4,12 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,04 (2H, т), 2,99 (2H, м), 2,05 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 545 (M+H).

Пример 8

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(изохинолин-6-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (8):

Стадия 1: Получение метил 2-амино-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8A):

К раствору метил 2-аминотиазол-4-карбоксилата (5,6 г, 35,4 ммоль) в DCM (60 мл) добавляли NIS (9,56 г, 42,5 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 24 часов и затем разбавляли EtOAc (200 мл) и промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении, получая 9,5 г (94%) желательного продукта метил 2-амино-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8A): LC/MS(APCI): m/z 284,9 (M+H).

Стадия 2: Получение метил 2-хлор-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8B):

К раствору метил 2-амино-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8A) (9 г, 31,7 ммоль) в ацетонитриле (60 мл) добавляли CuCl (4,75 г, 48 ммоль), а затем трет-бутил нитрит (6,19 г, 60 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Затем NH4Cl добавляли медленно к перемешиваемой смеси, чтобы погасить реакцию. Смесь экстрагировали EtOAc и объединенные экстракты промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 5% EtOAc в гексанах, получая 7,5 г (78%) желательного продукта метил 2-хлор-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8B): LC/MS (APCI): m/z 304,0 (M+H).

Стадия 3: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8C):

К раствору N-(бензо[d]тиазол-2-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоксамид дигидрохлорида (1B) (2 г, 5,23 ммоль) и метил 2-хлор-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8B) (1,66 г, 5,23 ммоль) в DMA (10 мл) добавляли Cs2CO3 (8,52 г, 26,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение ночи, охлаждали до к.т., подкисляли 5% HCl, экстрагировали DCM, промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле и элюировали 5% MeOH в DCM, получая 2,0 г (65%) желательного продукта 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8C): LC/MS (APCI): m/z 577,0 (M+H)

Стадия 4: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоксилата (8D):

К раствору метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-иодтиазол-4-карбоксилата (8C) (1,2 г, 2,03 ммоль) и проп-2-ин-1-ола (336 мг, 6 ммоль) в THF (20 мл) добавляли Pd(Ph3P)4 (231 мг, 0,2 ммоль), CuI (76 мг, 0,121 ммоль), DIEA (520 мг, 4 ммоль). Смесь перемешивали в атмосфере азота при к.т. в течение ночи. Смесь затем разбавляли DCM (400 мл) и промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, элюируя 5% MeOH в DCM, получая 0,76 г (73%) желательного продукта метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоксилата (8D): LC/MS (APCI): m/z 505,1 (M+H)

Стадия 5: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоксилата (8E):

К раствору метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоксилата (8D) (1,2 г, 2,31 ммоль) в EtOAc (20 мл) добавляли PtO2 (120 мг, 0,53 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в атмосфере водорода в течение ночи. После этого времени смесь фильтровали и фильтрат концентрировали, получая желательный продукт метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоксилат (8E): LC/MS(APCI): m/z 509,2 (M+H).

Стадия 6: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(тозилокси)пропил)тиазол-4-карбоксилата (8F):

К раствору метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоксилата (0,5 г, 0,96 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли TsCl (182 мг, 1 ммоль), TEA (97 мг, 1 ммоль) и каталитическое количество DMAP. Смесь перемешивали при к.т. в течение 4 часов. Смесь разбавляли EtOAc и промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении, получая желательный продукт метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(тозилокси)пропил)тиазол-4-карбоксилат (8F), который использовали без дополнительной очистки. LC/MS (APCI): m/z 663,0 (M+H)

Стадия 7: Получение указанного в заголовке соединения 8:

Указанное в заголовке соединение 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(изохинолин-6-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновую кислоту (8) получали по следующей процедуре. К раствору метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(тозилокси)пропил)тиазол-4-карбоксилата (8F) (133 мг, 0,2 ммоль) и 5-гидроксиизохинолина (45 мг, 0,3 ммоль) в DMA (3 мл) добавляли Cs2CO3 (50 мг, 0,3 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи и разбавляли 2 н. NaOH (4 мл) и перемешивали при 50°C в течение 4 часов. Реакционную смесь нейтрализовали 5% HCl и осадок отфильтровывали и сушили. Остаток затем растворяли в DMSO/MeOH (1:1) и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая желательный продукт 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(изохинолин-6-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновую кислоту (8): 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 9,16 (1H, с), 8,34 (1H, д), 7,94 (1H, д), 7,85 (1H, д), 7,71 (4H, м), 7,38 (8H, м), 4,88 (2H, с), 4,14 (2H, т), 3,71 (2H, т), 3,00 (2H, т), 2,27 (1H, м), 2,09 (2H, м), LC/MS (APCI): m/z 622,2 (M+H).

Пример 9

Синтез 5-(3-(3-аминофенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (9):

Указанное в заголовке соединение 9 получали, следуя процедуре, описанной в примере 6, но заменяя соединение 4 в примере 6 соединением 5: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 8,03 (1H, м), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, м), 7,42 (4H, м), 7,02 (1H, м), 6,33 (3H, м), 4,83 (2H, с), 3,90 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,16 (2H, м), 3,03 (2H, т), 1,98 (2H, м); MS (ESI(+)): m/z 586 (M+H).

Пример 10

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(пиридин-4-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (10):

Соединение 10 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения 4-гидроксипиридином фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 12,55 (1H, с), 8,66 (1H, м), 8,44 (1H, д), 8,04 (1H, м), 7,79 (1H, д), 7,68 (1H, д), 7,43 (5H, м), 7,01 (1H, д), 4,82 (2H, с), 4,29 (2H, м), 3,74 (2H, м), 3,19 (2H, м), 3,04 (2H, м), 2,08 (2H, м); MS (ESI(+)): m/z 572 (M+H).

Пример 11

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(3-(диметиламино)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (11):

Соединение 11 обычно получали, как описано в примере 2 путем замещения 3-(диметиламино)фенолом фенола на стадии 4 примера 2 с той модификацией, что, когда добавление 1 н. HCl не давало отделимых фильтрованием твердых веществ для стадии алкилирования, реакционную смесь экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Затем процедуру продолжали как на стадии 4 примера 2: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 7,93 (1H, д), 7,71 (2H, м), 7,37 (3H, м), 7,26 (1H, т), 7,02 (1H, т), 6,28 (1H, м), 6,19 (2H, м), 4,90 (2H, с), 3,93 (2H, т), 3,70 (2H, м), 3,17 (2H, м), 3,02 (2H, м), 2,83 (6H, с), 1,96 (2H, м); MS (ESI(+)): m/z 614 (M+H).

Пример 12

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(хинолин-5-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (12):

Соединение 12 получали, используя такую же процедуру, как описано в примере 8, путем замещения 4-гидроксихинолином 5-гидроксиизохинолина на стадии 7 примера 8: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,88 (1H, с), 8,85 (1H, д), 8,32 (1H, дд), 8,04 (1H, д), 7,78 (1H, д), 7,52 (11H, м), 7,19 (1H, д), 4,82 (2H, с), 4,20 (2H, т), 3,71 (2H, т), 3,02 (1H, м), 2,17 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 622 (M+H).

Пример 13

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(хинолин-8-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (13):

Соединение 13 получали, используя такую же процедуру, как описано в примере 8, путем замещения 8-гидроксихинолином 5-гидроксиизохинолина на стадии 7 примера 8: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 8,93 (1H, д), 8,63 (1H, д), 8,04 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,53 (12H, м), 7,08 (1H, д), 4,82 (2H, с), 4,22 (2H, т), 3,70 (2H, м), 3,31 (2H, т), 3,03 (2H, м), 2,17 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 622 (M+H).

Пример 14

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоновой кислоты (14):

Соединение 14 получали из соединения 8D, используя такую же процедуру гидролиза и очистки, как описано на стадии 7 примера 8: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,91 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,52 (5H, м), 4,90 (2H, с), 4,30 (2H, м), 3,74 (2H, т), 3,06 (2H, т); MS (ESI(+)): m/z 491 (M+H).

Пример 15

Синтез 5-(3-(1H-бензо[d]имидазол-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (15):

Соединение 15 получали путем замещения бензимидазолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 7,99 (1H, д), 7,75 (1H, д), 7,69 (1H, дд), 7,62 (1H, м), 7,56 (1H, м), 7,39 (5H, м), 7,19 (2H, м), 4,85 (2H, с), 4,27 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,04 (4H, м), 2,09 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 595 (M+H).

Пример 16

Синтез 5-(3-(1H-имидазол-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (16):

Соединение 16 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения имидазолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 12,53 (1H, с), 8,03 (1H, м), 7,86 (1H, с), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, м), 7,41 (4H, м), 7,26 (1H, с), 6,99 (1H, с), 4,83 (2H, с), 4,01 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,02 (4H, м), 2,01 (2H, т). MS (ESI(+)): m/z 545 (M+H).

Пример 17

Синтез 5-(3-(1H-пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (17):

Соединение 17 получали путем замещения 7-азаиндолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 12,54 (1H, с), 8,20 (1H, дд), 8,03 (1H, м), 7,92 (1H, дд), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, м), 7,54 (1H, д), 7,44 (4H, м), 7,03 (1H, дд), 6,43 (1H, д), 4,81 (2H, с), 4,29 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,03 (4H, м), 2,10 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 595 (M+H).

Пример 18

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(пирролидин-1-ил)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (18):

Соединение 18 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения пирролидином фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-70% B за 40 минут), получая соединение 18 с 18% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 12,66 (1H, с), 9,33 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,68 (1H, д), 7,42 (4H, м), 4,83 (2H, с), 3,76 (2H, т), 3,53 (2H, м), 3,10 (6H, м), 2,96 (2H, м), 1,93 (4H, м), 1,82 (2H, м); MS (ESI(+)): m/z 548 (M+H).

Пример 19

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-морфолинопропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (19):

Соединение 19 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения морфолином фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-70% B за 40 минут), получая соединение 19 с 5% выходом. 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 9,49 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,68 (1H, д), 7,42 (4H, м), 4,83 (2H, с), 3,92 (2H, м), 3,76 (2H, т), 3,62 (2H, м), 3,07 (10H, м), 1,95 (2H, м); LCMS (APCI): m/z 564 (M+H).

Пример 20

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(пиперидин-1-ил)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (20):

Указанное в заголовке соединение 20 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения пиперидином фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP 18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-70% B за 40 минут), получая соединение 20 с 17% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 8,85 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, м), 7,68 (1H, д), 7,43 (4H, м), 4,83 (2H, с), 3,76 (2H, т), 3,05 (7H, м), 2,82 (2H, м), 1,93 (2H, м), 1,77 (2H, м), 1,60 (3H, м), 1,34 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 562 (M+H).

Пример 21

Синтез 5-(3-(4-(1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (21):

Стадия 1: Получение 5-амино-1-(4-бромфенил)-1H-пиразол-4-карбоновой кислоты (21A):

Смесь (Z)-этил 2-циано-3-этоксиакрилата (2,099 г, 12,41 ммоль), 4-бромфенилгидразин гидрохлорида (2,76 г, 12,41 ммоль) и Na2CO3 (0,789 г, 7,44 ммоль) в EtOH (30 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч и слабо концентрировали. Осадок собирали фильтрованием, промывали простым эфиром и сушили, получая сложный эфир. Сложный эфир растворяли в THF (5 мл) и MeOH (25 мл). Добавляли 154 мл 10% раствора NaOH. Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи и концентрировали. Небольшое количество воды добавляли и полученный раствор нейтрализовали HCl до pH 6. Белый осадок собирали, промывали водой и сушили, получая соединение 21A: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) м.д. 12,09 (1H, с), 7,72 (2H, д), 7,52 (2H, д), 6,35 (2H, с).

Стадия 2: Получение 1-(4-бромфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (21B):

К раствору 1,3,5-триазина (0,575 г, 7,09 ммоль) и соединения 21A (2 г, 7,09 ммоль) в DMSO (30 мл) добавляли эфират трифторида бора (1,078 мл, 8,51 ммоль). Полученную смесь нагревали при 120°C в течение 20 ч, охлаждали, разбавляли EtOAc и промывали 1% NaOH и насыщенным раствором соли. Органический слой сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток растирали с небольшим количеством EtOAc и осадок собирали, получая желательный продукт: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 9,47 (1H, с), 9,16 (1H, с), 8,68 (1H, с), 8,22 (2H, д), 7,80 (2H, д).

Стадия 3: Получение 1-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (21С):

Смесь соединения 21B (500 мг, 1,817 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолана) (508 мг, 1,999 ммоль), аддукта PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (74,2 мг, 0,091 ммоль) и ацетата калия (535 мг, 5,45 ммоль) в DMSO (15 мл) продували азотом и затем нагревали при 80°C в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором соли. Органический слой сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя от 0 до 20% EtOAc в DCM, получая желательный продукт 21C: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 9,49 (1H, с), 9,20 (1H, с), 8,70 (1H, с), 8,33 (2H, д), 7,90 (2H, д), 1,33 (12H, с).

Стадия 4: Получение 4-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенола (21D):

К раствору соединения 21C (100 мг, 0,31 ммоль) в THF (5 мл) добавляли NaOH (0,248 мл, 0,621 ммоль) и пероксид водорода (0,048 мл, 0,466 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и концентрат растворяли в 8 мл воды. Водный раствор подкисляли разбавленной HCl. Белый осадок собирали, промывали водой и сушили, получая желательный продукт 21D: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 9,75 (1H, с), 9,44 (1H, с), 9,09 (1H, с), 8,59 (1H, с), 7,82-7,99 (2H, м), 6,83-7,05 (2H, м).

Стадия 5: Получение указанного в заголовке соединения 21:

К раствору соединения 21D (106 мг, 0,498 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли гидрид натрия (56,9 мг, 1,423 ммоль). Полученную смесь перемешивали при к.т. в течение 30 минут и добавляли соединение 2C (300 мг, 0,474 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа и добавляли 10% гидроксид натрия (1,897 мл, 4,74 ммоль), THF (5 мл) и MeOH (3 мл). Полученную смесь перемешивали при 70°C в течение ночи, охлаждали и фильтровали. Фильтрат подкисляли HCl до pH 4. Осадок собирали и сушили, получая желательный продукт: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,85 (1H, с), 9,45 (1H, с), 9,10 (1H, с), 8,61 (1H, с), 7,98-8,06 (3H, м), 7,78 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,42-7,50 (2H, м), 7,32-7,40 (2H, м), 7,09-7,16 (2H, м), 4,84 (2H, с), 4,06 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,14-3,24 (2H, м), 3,03 (2H, т), 1,98-2,12 (2H, м); LCMS (APCI): m/z 687 (M+H).

Пример 22

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(2-((1S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-илокси)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (22):

Указанное в заголовке соединение 22 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения 2-((1S,4S)-l,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-илокси)фенолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. Конечный продукт подвергали дополнительному промыванию MeOH, получая желательное соединение 22 с 76% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 7,85 (1H, д), 7,76 (1H, дд), 7,64 (1H, д), 7,33 (3H, м), 7,20 (1H, м), 6,84 (4H, м), 4,93 (2H, с), 4,04 (1H, м), 3,91 (2H, т), 3,69 (2H, т), 3,18 (2H, м), 3,00 (2H, т), 1,96 (2H, м), 1,76 (2H, м), 1,62 (2H, м), 1,47 (1H, м), 1,07 (2H, м), 1,04 (3H, с), 0,93 (3H, с), 0,77 (3H, с); MS (ESI(+)): m/z 723 (M+H).

Пример 23

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(2-(4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил)бензо[d]тиазол-6-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (23):

Указанное в заголовке соединение 23 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения 2-(4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил)бензо[d]тиазол-6-олом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения с применением 1 н. HCl конечный продукт дополнительно очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 10% MeOH в CH2Cl2, получая указанное в заголовке соединение 23 с 39% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 8,12 (1H, дд), 8,03 (1H, м), 7,72 (3H, м), 7,41 (6H, м), 7,08 (1H, д), 6,88 (1H, дд), 6,79 (1H, дд), 4,83 (2H, с), 3,98 (2H, м), 3,75 (6H, д), 3,69 (4H, м), 3,19 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,01 (2H, м); MS (ESI(+)): m/z 789 (M+H).

Пример 24

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-(1-фенилциклопентил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (24):

Указанное в заголовке соединение 24 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения 4-(1-фенилциклопентил)фенолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. Конечный продукт подвергали дополнительному промыванию MeOH, получая желательное соединение 24 с 67% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 12,56 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, м), 7,42 (5H, м), 7,16 (6H, м), 6,77 (2H, м), 4,82 (2H, с), 3,91 (2H, т), 3,72 (2H, м), 3,14 (2H, м), 3,01 (2H, м), 2,20 (4H, м), 1,96 (2H, м), 1,59 (4H, м). MS (ESI(+)): m/z 715 (M+H).

Пример 25

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(1-циано-1,2-дигидроциклобутабензол-4-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (25):

Указанное в заголовке соединение 25 получали путем замещения 4-гидрокси-1,2-дигидроциклобутабензол-1-карбонитрилом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали. Гидролиз сложного эфира проводили при температуре окружающей среды и конечный продукт подвергали дополнительному промыванию MeOH, получая желательный продукт 25 с 50% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 12,55 (1H, с), 8,03 (1H, м), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,42 (4H, м), 7,16 (1H, д), 6,82 (2H, м), 4,83 (2H, с), 4,44 (1H, м), 3,95 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,58 (1H, дд), 3,37 (1H, м), 3,16 (2H, м), 3,03 (2H, т), 1,99 (2H, м); MS (ESI(+)): m/z 622 (M+H).

Пример 26

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(1-цианоциклобутил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (26):

Указанное в заголовке соединение 26 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения 1-(4-гидроксифенил)циклобутанкарбонитрилом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали. Гидролиз сложного эфира проводили при температуре окружающей среды и конечный продукт подвергали дополнительному промыванию MeOH, получая желательный продукт 26 с 45% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,72 (1H, с), 8,02 (1H, м), 7,78 (1H, д), 7,67 (1H, м), 7,41 (6H, м), 6,95 (2H, м), 4,84 (2H, с), 3,99 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,17 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,69 (2H, м), 2,56 (2H, м), 2,23 (2H, м), 1,97 (2H, м); MS (ESI(+)): m/z 650 (M+H).

Пример 27

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(1,2,3,5,6,7-гексагидропиридо[3,2,1-ij]хинолин-8-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (27):

Указанное в заголовке соединение 27 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения 1,2,3,5,6,7-гексагидропиридо[3,2,1-ij]хинолин-8-олом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения с применением 1 н. HCl, конечный продукт дополнительно очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 12% MeOH в CH2Cl2, получая соединение 27 c 20% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,43 (4H, м), 6,61 (1H, д), 6,09 (1H, д), 4,82 (2H, с), 3,86 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,17 (2H, т), 3,00 (6H, м), 2,58 (4H, м), 1,96 (2H, м), 1,81 (4H, м); MS (ESI(+)): m/z 666 (M+H).

Пример 28

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-(2-(((5,6-диметокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил)метил)(пропил)амино)этил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (28):

Указанное в заголовке соединение 28 обычно получали, как описано в примере 2, используя 4-(2-(((5,6-диметокси-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил)метил)(пропил)амино)этил)фенол,HCl вместо фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-90% В за 40 минут), получая указанное в заголовке соединение с 7% выходом: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 8,91 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,47 (2H, м), 7,36 (2H, м), 7,25 (1H, д), 7,18 (1H, д), 6,97 (1H, м), 6,89 (3H, м), 4,83 (2H, с), 3,96 (2H, м), 3,77 (3H, д), 3,72 (2H, т), 3,67 (3H, д), 3,26 (6H, м), 3,16 (3H, м), 3,03 (2H, т), 2,91 (2H, м), 2,72 (1H, м), 2,58 (1H, м), 1,99 (2H, м), 1,74 (6H, м), 0,94 (3H, м). MS (ESI(+)): m/z 860 (M+H).

Пример 29

Синтез 5-(3-(4-(4-(бензо[d]тиазол-2-ил)пиперазин-1-ил)-2-метилфенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (29):

Указанное в заголовке соединение 29 обычно получали, как описано в примере 2, используя 4-(4-(бензо[d]тиазол-2-ил)пиперазин-1-ил)-2-метилфенол,2HCl вместо фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-90% В за 40 минут), получая указанное в заголовке соединение 29 с 12% выходом: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,78 (2H, т), 7,66 (1H, д), 7,47 (2H, м), 7,44 (1H, м), 7,36 (2H, м), 7,29 (1H, м), 7,08 (1H, м), 6,94 (1H, д), 6,54 (1H, д), 6,43 (1H, дд), 4,82 (2H, с), 3,99 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,68 (4H, м), 3,21 (6H, м), 3,02 (2H, т), 2,03 (3H, с), 2,00 (2H, м); MS (ESI(+)): m/z 802 (M+H).

Пример 30

Синтез (E)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(3-(2-циановинил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (30):

Указанное в заголовке соединение 30 обычно получали, как описано в примере 2, путем замещения (E)-3-(2-(1,2,4-оксадиазол-3-ил)винил)фенолом фенола на стадии 4 примера 2. В дополнение к желательному алкилированию происходило взаимодействие NaH с оксадиазолильной частью молекулы с образованием в результате цианогруппы вместо оксадиазолильной части молекулы. Этот промежуточный продукт не изолировали перед гидролизом сложного эфира, который проводили при температуре окружающей среды. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя Symmetry Prep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-90% В за 40 минут), получая указанное в заголовке соединение 30 с 14% выходом: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 12,55 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,58 (1H, д), 7,47 (2H, м), 7,37 (2H, м), 7,30 (1H, д), 7,22 (1H, м), 7,18 (1H, д), 7,00 (1H, дд), 6,47 (1H, д), 4,82 (2H, с), 4,01 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,18 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,01 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 622 (M+H).

Пример 31

Синтез 5-(3-(4-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (31):

Стадия 1: Получение 4-(бензилокси)бензоил хлорида (31A):

4-(Бензилокси)бензойную кислоту (4,73 г, 20,72 ммоль) суспендировали в CH2Cl2 (50 мл). Суспензию охлаждали до 0°C. К этой суспензии добавляли оксалил хлорид (3,63 мл, 41,4 ммоль), а затем N,N-диметилформамид (0,24 мл, 3,11 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, разбавляли толуолом и концентрировали при пониженном давлении. Изолированное твердое вещество использовали непосредственно для следующей реакции без дополнительной очистки.

Стадия 2: Получение 2-(4-(бензилокси)бензоил)малононитрила (31B):

NaH (1,657 г, 60%, 41,4 ммоль) суспендировали в THF (10 мл). К этой суспензии добавляли малононитрил (1,368 г, 20,71 ммоль) в THF (10 мл) при 0°C по каплям в течение 10 минут. Суспензию перемешивали дополнительные 20 минут. К этому раствору добавляли соединение 31A (5,11 г, 20,71 ммоль) в THF (40 мл) порциями. После этого раствор нагревали до к.т. и перемешивали в течение 30 минут. pH растворителя доводили до 1 концентрированной HCl. Реакционную смесь концентрировали и распределяли между водой и EtOAc. Водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали в смеси 1:1 гекс/EtOAc (50 мл), получая твердое вещество, которое собирали фильтрованием, получая 3,7 г желательного продукта 31B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 7,60-7,63 (м, 2H), 7,32-7,47 (м, 5H), 7,03-7,07 (м, 2H), 5,16 (с, 2H). MS (DCI(+)): m/z 294 (M+NH4).

Стадия 3: Получение 2-((4-(бензилокси)фенил)(метокси)метилен)малононитрила (31C):

Соединение 31B (3,7 г, 13,39 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (30 мл) и воде (5 мл). К этому раствору добавляли бикарбонат натрия (9,0 г, 107 ммоль) порциями, чтобы ограничить газообразование. К полученной суспензии добавляли диметил сульфат (8,96 мл, 94 ммоль). Реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и распределяли между водой и EtOAc. Водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя 7:3/гексаны:EtOAc, получая 3,1 г желательного продукта: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 7,64-7,68 (м, 2H), 7,34-7,69 (м, 5H), 7,22-7,26 (м, 2H), 5,22 (с, 2H), 3,92 (с, 3H). MS (DCI(+)): m/z 308 (M+NH4).

Стадия 4: Получение 5-амино-3-(4-(бензилокси)фенил)-1H-пиразол-4-карбонитрила (31D):

Соединение 31C (3,1 г, 10,68 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). К этому раствору добавляли гидразин гидрат (0,622 мл, 12,81 ммоль). Реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 часов. Растворитель удаляли и остаток забирали в EtOAc. Затем его промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над MgSO4 и концентрировали при пониженном давлении, получая 2,72 г желательного продукта: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,64 и 11,99 (с, 1H), 7,71-7,74 (м, 2H), 7,32-7,48 (м, 5H), 7,09-7,10 (шир., 2H), 6,38 (с, 2H), 5,15 (с, 2H). MS (DCI(+)): m/z 291 (M+H).

Стадия 5: Получение трет-бутил 5-амино-3-(4-(бензилокси)фенил)-4-циано-1H-пиразол-1-карбоксилата (31E):

К смеси соединения 31D (1,6 г, 5,51 ммоль) и ди-трет-бутил дикарбоната (1,44 г, 6,61 ммоль) в THF (15 мл) добавляли N,N-диметилпиридин-4-амин (0,808 г, 6,61 ммоль) при к.т. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя 5:1/гексаны:EtOAc, получая 2,03 г желательного продукта: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 7,78 (д, J=8,9 Гц, 2H), 7,68 (с, 2H), 7,32-7,48 (м, 5H), 7,15 (д, J=8,9 Гц, 2H), 5,17 (с, 2H), 1,59 (с, 9H). MS (DCI(+)): m/z 391 (M+H).

Стадия 6: Получение трет-бутил 5-амино-4-циано-3-(4-гидроксифенил)-1Н-пиразол-1-карбоксилата (31F):

Смесь соединения 31E (1,3 г, 3,33 ммоль) и Pd/C (0,071 г) в EtOH (15 мл) гидрогенизировали с применением баллона водорода при к.т. в течение 6 часов. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя 1:1/гексаны:EtOAc, получая 0,85 г желательного продукта 31F: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,88 (с, 1H), 7,67 (д, J=8,9 Гц, 2H), 7,64 (с, 2H), 6,87 (д, J=8,9 Гц, 2H), 1,59 (с, 9H). MS (DCI(+)): m/z 301 (M+H).

Стадия 7: Получение указанного в заголовке соединения 31:

К соединению 31F (0,132 г, 0,44 ммоль) в DMF (4 мл) добавляли 60% гидрид натрия (0,048 г, 1,2 ммоль) при 0°C. Раствор перемешивали в течение 10 минут. К этому раствору добавляли соединение 2C. Раствор перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Раствор разбавляли конц. HCl (0,5 мл) и нагревали при 60°C в течение 30 минут. Смесь разбавляли DMSO (5 мл) и MeOH (9 мл). Твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат затем очищали преп. ВЭЖХ, получая 12 мг желательного продукта: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,03 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,67-7,71 (м, 4H), 7,33-7,49 (м, 5H), 7,00 (д, J=8,59 Гц, 2H), 4,84 (с, 2H), 4,03 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,71-3,74 (м, 2H), 3,17-3,20 (м, 2H), 3,01-3,05 (м, 2H), 2,02 (м, 2H). MS (ESI(+)): 677 (M+H).

Пример 32

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-циано-3-(4-гидроксифенил)-1Н-пиразол-5-иламино)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (32):

Указанное в заголовке соединение 32 изолировали как побочный продукт синтеза соединения 31: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,02 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,67 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,59-7,61 (м, 2H), 7,33-7,49 (м, 5H), 6,80-6,82 (м, 2H), 4,84 (с, 2H), 4,03 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,93-3,95 (м, 2H), 3,71-3,74 (м, 2H), 3,02-3,08 (м, 4H), 1,94-1,98 (м, 2H). MS (ESI(+)): 677 (M+H).

Пример 33

Синтез 5-(3-(4-(1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил) фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (33):

Стадия 1: Получение 5-амино-1-(3-бромфенил)-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты (33A):

Соединение 33A получали, используя ту же процедуру, как описанная на стадии 1 примера 21, заменяя 4-бромфенилгидразин гидрохлорид 3-бромфенилгидразин гидрохлоридом: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,13 (1H, с), 7,74 (1H, т), 7,70 (1H, с), 7,57-7,62 (2H, м), 7,49 (1H, т), 6,41 (2H, с).

Стадия 2: Получение 1-(3-бромфенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидина (33B):

Соединение 33B получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 21, заменяя соединение 21A соединением 33A: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 9,49 (1H, с), 9,20 (1H, с), 8,71 (1H, с), 8,51 (1H, т), 8,25-8,30 (1H, м), 7,55-7,63 (2H, м).

Стадия 3: Получение 1-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидина (33C):

Указанное в заголовке соединение 33C получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 3 примера 21, заменяя соединение 21B соединением 33B: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 9,48 (1H, с), 9,18 (1H, с), 8,68 (1H, с), 8,47 (1H, д), 8,36-8,40 (1H, м), 7,68-7,71 (1H, м), 7,64 (1H, т), 1,34 (12H, с).

Стадия 4: Получение 3-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенола (33D):

Указанное в заголовке соединение 33D, получали используя такую же процедуру, как описанная на стадии 4 примера 21, заменяя соединение 21C соединением 33C: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 9,86 (1H, с), 9,46 (1H, с), 9,16 (1H, с), 8,64 (1H, с), 7,72 (1H, т), 7,67-7,70 (1H, м), 7,38 (1H, т), 6,80 (1H, дд).

Стадия 5: Получение указанного в заголовке соединения 33:

Указанное в заголовке соединение 33 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 5 примера 21, заменяя соединение 21D соединением 33D: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 12,53 (1H, с), 9,46 (1H, с), 9,15 (1H, с), 8,64 (1H, с), 8,02 (1H, д), 7,76-7,84 (3H, м), 7,66 (1H, д), 7,33-7,49 (5H, м), 6,93-6,97 (1H, м), 4,82 (2H, с), 4,09 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,18-3,26 (2H, м), 3,02 (2H, т), 2,01-2,13 (2H, м); LCMS (APCI): m/z 687 (M+H).

Пример 34

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(4-(гидроксиметил)фенил)тиазол-4-карбоновой кислоты (34):

Стадия 1: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (34A):

Соединение 34A получали аналогично синтезу стадии 3 примера 1 путем замещения метил 2-хлортиазол-4-карбоксилата этил 2-хлортиазол-4-карбоксилатом: MS (ESI(+)): 465 (M+H).

Стадия 2: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-бромтиазол-4-карбоксилата (34B):

К соединению 34A в ацетонитриле добавляли 1,05 экв. NBS. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 3:2 гексаны/EtOAc, получая желательный продукт: MS (ESI(+)): 544 (M+H).

Стадия 3: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-бромтиазол-4-карбоксилата (34C):

К смеси соединения 34B (0,815 г, 1,5 ммоль) и SEMC1 (0,318 мл, 1,8 ммоль) в THF (6 мл) добавляли TEA (0,65 мл, 4,5 ммоль) при к.т. Реакционную смесь перемешивали в течение 20 минут, концентрировали при пониженном давлении и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 3:1/гексаны:EtOAc, получая 0,95 г желательного продукта в виде смеси двух неразделимых изомеров: MS (ESI(+)): m/z 657 (M+H).

Стадия 4: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(4-(гидроксиметил)фенил)тиазол-4-карбоксилата (34D):

Смесь соединения 34C (0,135 г, 0,2 ммоль), 4-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты (0,033 г, 0,22 ммоль), Pd(PPh3)4 (0,012 г, 0,01 ммоль) и CsF (0,091 г, 0,6 ммоль) в DME (2 мл) и MeOH (1 мл) нагревали микроволновым излучением (110°C, 20 минут). Реакционную смесь концентрировали и распределяли между водой и EtOAc. Водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя 1:1/гексаны:EtOAc, получая 0,085 г желательного продукта 34D, который также был смесью двух региоизомеров. MS (ESI(+)): m/z 701 (M+H).

Стадия 5: Получение указанного в заголовке соединения 34:

К соединению 34D (0,14 г) в 1,4-диоксане (2 мл) добавляли 4 н. HCl в 1,4-диоксане (2 мл) и MeOH (0,5 мл). Раствор перемешивали в течение 1 часа при к.т., концентрировали при пониженном давлении и добавляли 1,0 н. LiOH (2 мл) в 1,4-диоксане (2 мл). Раствор перемешивали при 60°C в течение 1 часа, концентрировали при пониженном давлении и очищали преп. ВЭЖХ, получая желательный продукт 34: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,02 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,69 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,29-7,49 (м, 8H), 4,90 (с, 2H), 4,50 (с, 2H), 3,78 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,98 (т, J=5,98 Гц, 2H); MS (ESI(+)): m/z 543 (M+H).

Пример 35

Синтез 5-(4-((4-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)фенил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (35):

Стадия 1: Получение этил 5-(4-((4-(5-амино-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)фенил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (35A):

Смесь соединения 34D (0,14 г, 0,2 ммоль), PPh3 (0,079 г, 0,3 ммоль) и соединения 31F (0,066 г, 0,022 ммоль) растворяли в THF (3 мл). Раствор охлаждали до 0°C. К этому раствору добавляли DEAD. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя 2:1/гексаны:EtOAc, получая 0,13 г указанного в заголовке соединения в виде смеси двух неразделимых изомеров. MS (ESI(+)): m/z 982 (M+NH42О).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 35:

Указанное в заголовке соединение 35 получали аналогично синтезу из примера 34 путем замещения соединения 34D соединением 35A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,02 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,29 Гц, 1H), 7,68-7,74 (м, 3H), 7,37-7,49 (м, 9H), 7,12 (д, J=8,59 Гц, 2H), 4,90 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 4,91 (с, 2H), 3,79 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,08 (т, J=5,83 Гц, 2H). MS (ESI(+)): m/z 725 (M+H).

Пример 36

Синтез 5-(3-(3-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)проп-1-инил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (36):

Стадия 1: Получение трет-бутил 5-амино-4-циано-3-(3-гидроксифенил)-1Н-пиразол-1-карбоксилата (36A):

Соединение 36A получали аналогично синтезу соединения 31F путем замещения 4-(бензилокси)бензойной кислоты 3-(бензилокси)бензойной кислотой: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,70 (с, 1H), 7,68 (с, 2H), 7,25-7,32 (м, 3H), 6,86-6,89 (м, 1H), 1,60 (с, 9H). MS (ESI(+)): m/z 322 (M+Na).

Стадия 2: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоксилата (36B):

Смесь соединения 34C (0,38 г, 0,564 ммоль), проп-2-ин-1-ола (0,047 г, 0,846 ммоль), CuI (0,011 г, 0,056 ммоль), Et3N (1,57 мл, 11 ммоль) и Pd(PPh3)2Cl2 (0,02 г, 0,028 ммоль) в DMF (2 мл) нагревали при 90°C в течение 2 часов. После охлаждения реакционную смесь разбавляли CH2Cl2. Твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя 3:2/гексаны:EtOAc, получая 0,19 г желательного продукта 36B в виде смеси двух неразделимых изомеров: MS (ESI(+)): m/z 649 (M+H).

Стадия 3: Получение этил 5-(3-(3-(5-амино-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)проп-1-инил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (36C):

Соединение 36C получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F соединением 36B и соединением 36A, соответственно, в виде смеси двух неразделимых изомеров: MS (ESI(+)): m/z 932 (M+H).

Стадия 4: Получение указанного в заголовке соединения 36:

Указанное в заголовке соединение 36 получали аналогично синтезу соединения 34 путем замещения соединения 34D соединением 36C на стадии 5 примера 34: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,03 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,66-7,68 (м, 1H), 7,35-7,48 (м, 8H), 5,08 (с, 2H), 4,91 (с, 2H), 3,70-3,73 (м, 2H), 3,46-3,49 (м, 2H), 3,05-3,07 (м, 2H). MS (ESI(+)): m/z 670 (M-H).

Пример 37

Синтез 5-(4-((3-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)фенил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (37):

Стадия 1: Получение этил 5-(4-((3-(5-амино-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)фенил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (37A):

Указанное в заголовке соединение 37A получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 31F соединением 36A в виде смеси двух неразделимых изомеров: MS (ESI(+)): m/z 984 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 37:

Указанное в заголовке соединение 37 получали аналогично синтезу соединения 34 путем замещения соединения 34D соединением 37A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,02 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,78 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,33-7,49 (м, 11H), 7,05-7,08 (м, 1H), 5,15 (с, 2H), 4,91 (с, 2H), 3,78 (т, J=6,14 Гц, 2H), 3,08 (т, J=5,83 Гц, 2H). MS (ESI(+)): m/z 725 (M+H).

Пример 38

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (38):

Стадия 1: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (38A):

К раствору метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоксилата (14 г, 31,1 ммоль) в THF (150 мл) добавляли TEA (6,3 г, 62,1 ммоль) и 2-(триметилсилил)этоксиметил хлорид (7,77 г, 46,6 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 4 ч. Смесь разбавляли EtOAc (400 мл) и промывали 3% HCl, водой и насыщенным раствором соли. Выпаривание растворителя давало 18,2 г продукта. LC/MS (APCI): m/z 580,9 (M+H).

Стадия 2: Получение трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (38B):

К перемешиваемому раствору метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (38A) (14 г, 24,1 ммоль) в трет-бутил ацетате (200 мл) добавляли 2 мл t-BuOK в THF (2M) в вакууме. 3×2 мл t-BuOK добавляли к перемешиваемому раствору в вакууме, чтобы довести реакцию до завершения. Смесь затем подкисляли до нейтральности и промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 5% EtOAc в гексанах, получая 3,5 г желательного продукта 38B: 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ м.д. 8,29 (1H, м), 7,71 (1H, д), 7,62 (2H, м), 7,49 (2H, т), 7,34 (3H, м), 6,02 (2H, с), 5,20 (2H, с), 4,02 (2H, м), 3,71 (3H, м), 3,08 (2H, м), 1,59 (9H, т), 0,97 (2H, м), -0,09 (9H, м). MS (ESI(+)): m/z 623,0 (M+H).

Стадия 3: Получение трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-иодтиазол-4-карбоксилата (38C):

К раствору трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоксилата (38B) (2,2 г, 3,53 ммоль) в DCM (30 мл) добавляли NIS (0,795 г, 3,53 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь затем разбавляли EtOAc (300 мл) и промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 5% EtOAc в гексанах, получая 2,6 г желательного продукта. LC/MS (APCI): m/z 749,2 (M+H).

Стадия 4: Получение трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоксилата (38D):

К раствору трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-иодтиазол-4-карбоксилата (38C) (2,5 г, 3,34 ммоль) и проп-2-ин-1-ола (562 мг, 10 ммоль) в THF (20 мл) добавляли Pd(Ph3P)4 (193 мг, 0,167 ммоль), CuI (64 мг, 0,334 ммоль), DIEA (863 мг, 6,7 ммоль). Смесь перемешивали в атмосфере азота при к.т. в течение ночи. Смесь затем разбавляли DCM (400 мл) и промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, элюируя 5% MeOH в DCM, получая 2,0 г (88%) желательного продукта: 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ м.д. 8,31 (1H, м), 7,72 (1H, д), 7,59 (1H, м), 7,49 (1H, д), 7,34 (3H, м), 6,01 (2H, с), 5,18 (2H, с), 4,53 (2H, д), 4,00 (2H, т), 3,74 (2H, т), 3,07 (2H, т), 1,61 (9H, с), 0,98 (2H, т), 0,01 (9H, м). MS (ESI(+)): m/z 677 (M+H).

Стадия 5: Получение трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоксилата (38E):

К раствору метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоксилата (38D) (2,0 г, 3,96 ммоль) в EtOAc (20 мл) добавляли PtO2 (240 мг, 1,1 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в токе водорода (баллон) в течение ночи. Смесь затем фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая желательный продукт 38E: 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ м.д. 8,30 (1H, м), 7,71 (1H, д), 7,59 (1H, м), 7,49 (1H, м), 7,35 (3H, м), 6,00 (2H, с), 5,14 (2H, с), 3,95 (2H, м), 3,75 (2H, т), 3,63 (2H, м), 3,17 (2H, т), 3,07 (2H, т), 2,40 (1H, т), 1,89 (2H, м), 1,58 (9H, д), 0,98 (2H, т), 0,01 (9H, м). MS (ESI(+)): m/z 681 (M+H).

Стадия 6: Получение указанного в заголовке соединения 38:

К раствору трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоксилата (38E) (68 мг, 0,1 ммоль) в DCM (2 мл) добавляли 2 мл 2 н. HCl в простом эфире. Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. MeOH (0,5 мл) добавляли к смеси, чтобы растворить твердое вещество. Смесь перемешивали при к.т. в течение еще 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, получая желательный продукт в виде соли HCl: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,41 (5H, м), 4,83 (2H, с), 3,73 (4H, т), 3,50 (2H, т), 3,41 (2H, т), 3,04 (4H, т), 1,69 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 495 (M+H).

Пример 39

Синтез 5-(3-(3-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (39):

Стадия 1: Получение трет-бутил 5-(3-(3-(5-амино-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (39A):

Указанное в заголовке соединение 39A получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F соединением 38E и соединением 36A, соответственно, в виде смеси двух неразделимых изомеров: MS (ESI(+)): 934 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 39:

Указанное в заголовке соединение 39 получали аналогично процедуре, которая описана на стадии 5 примера 34, путем замещения соединения 34D соединением 39A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,03 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,65-7,67 (м, 2H), 7,32-7,49 (м, 6H), 6,94-6,96 (м, 1H), 4,84 (с, 2H), 4,01 (т, J=6,14 Гц, 2H), 3,70-3,73 (м, 4H), 3,19 (т, J=7,52 Гц, 2H), 3,01-3,03 (м, 2H), 2,01-2,05 (м, 2H). MS (ESI(+)): m/z 677 (M+H).

Пример 40

Синтез 5-(3-(4-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)проп-1-инил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (40):

Стадия 1: Получение этил 5-(3-(4-(5-амино-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)проп-1-инил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил(трет-бутоксикарбонил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (40A):

Соединение 40A получали аналогично синтезу, описанному на стадии 1 примера 35, путем замещения соединения 34D соединением 36B в виде смеси двух неразделимых изомеров: MS (ESI(+)): m/z 932 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 40:

Указанное в заголовке соединение 40 получали аналогично синтезу соединения 34 путем замещения соединения 34D соединением 40A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,03 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,60-7,80 (м, 5H), 7,34-7,50 (м, 6H), 7,32-7,49 (м, 6H), 7,12 (д, J=8,9 Гц, 2H), 5,10 (с, 2H), 4,91 (с, 2H), 3,73-3,75 (м, 2H), 3,05-3,07 (м, 2H). MS (ESI(+)): m/z 673 (M+H).

Пример 41

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-(пиридин-3-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (41):

Стадия 1: Получение трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-иодфенокси)пропил)тиазол-4-карбоксилата (41A):

К раствору трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоксилата (92 мг, 0,135 ммоль), трифенилфосфина (35,4 мг, 0,135 ммоль) и 4-иодфенола (29,7 мг, 0,135 ммоль) в THF (2 мл) добавляли DEAD (32 мг, 0,135 ммоль). Смесь перемешивали при к.т. в течение 4 часов. LC/MS показали ожидаемый продукт как единственный пик. Смесь разбавляли EtOAc и промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 3% EtOAc в гексанах, получая 110 мг (92%) желательного продукта: 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ м.д. 8,30 (1H, м), 7,72 (1H, д), 7,54 (4H, м), 7,34 (3H, м), 6,67 (2H, д), 6,00 (2H, с), 5,14 (2H, с), 3,96 (4H, м), 3,75 (2H, т), 3,22 (2H, т), 3,06 (2H, т), 2,13 (2H, м), 1,59 (9H, с), 0,97 (2H, т), 0,01 (9H, м). MS (ESI(+)): m/z 833 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 41:

К смеси трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-иодфенокси)пропил)тиазол-4-карбоксилата (20 мг, 0,023 ммоль) и пиридин-3-бороновой кислоты (41A) (2,83 мг, 0,23 ммоль) в DME/MeOH (2:1, 3 мл) добавляли Pd(Ph3P)4 (1,37 мг, 0,115 мкмоль) и CsF (12 мг, 0,069 ммоль). Смесь перемешивали при 100°C в течение 30 минут при микроволновом нагревании (Smith Synthesizer). Смесь разбавляли EtOAc (200 мл) и промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией, элюируя 5% EtOAc в гексанах, получая 17 мг (90%) продукта, который сразу же лишали защитной группы, используя такую же процедуру, как описанная в примере 38, получая указанное в заголовке соединение 41: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 9,15 (1H, с), 8,77 (1H, д), 8,71 (1H, д), 8,02 (1H, д), 7,98 (1H, м), 7,80 (2H, д), 7,67 (1H, д), 7,41 (5H, м), 7,10 (2H, д), 4,84 (2H, м), 4,07 (2H, м), 3,73 (2H, м), 3,21 (4H, м), 3,04 (2H, т), 2,06 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 648 (M+H).

Пример 42

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(4-феноксибутил)тиазол-4-карбоновой кислоты (42A):

Стадия 1: Получение этил 3-бром-7-хлор-2-оксогептаноата (42A):

Указанное в заголовке соединение 42A получали путем замещения этил 7-хлор-2-оксогептаноатом этил 6-хлор-2-оксогексаноата на стадии 1 примера 2: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 5,18 (1H, дд), 4,29 (2H, кв.), 3,66 (2H, т), 2,03 (1H, м), 1,90 (1H, м), 1,78 (2H, м), 1,63 (1H, м), 1,48 (1H, м), 1,29 (3H, т).

Стадия 2: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(4-хлорбутил)тиазол-4-карбоксилата (42B):

Указанное в заголовке соединение 42B получали путем замещения соединением 42A соединения 2A на стадии 2 примера 2: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,88 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,66 (1H, д), 7,42 (4H, м), 4,82 (2H, с), 4,19 (2H, кв.), 3,72 (2H, т), 3,63 (2H, т), 3,03 (4H, м), 1,70 (4H, м), 1,20 (3H, т).

Стадия 3: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(4-иодбутил)тиазол-4-карбоксилата (42C):

Указанное в заголовке соединение 42C получали путем замещения соединением 42B соединения 2B на стадии 3 примера 2: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,66 (1H, д), 7,41 (4H, м), 4,82 (2H, с), 4,19 (2H, кв.), 3,72 (2H, т), 3,27 (2H, т), 3,03 (4H, м), 1,77 (2H, м), 1,63 (2Н, м), 1,20 (3H, т).

Стадия 4: Получение указанного в заголовке соединения 42:

Указанное в заголовке соединение 42 получали путем замещения соединением 42C соединения 2C на стадии 4 примера 2: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,86 (1H, с), 8,02 (1H, д), 7,78 (1H, д), 7,66 (1H, д), 7,46 (2H, м), 7,36 (2H, м), 7,23 (2H, т), 6,88 (3H, м), 4,81 (2H, с), 3,94 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,09 (2H, м), 3,02 (2H, т), 1,70 (4H, м). MS (ESI(+)): m/z 585 (M+H).

Пример 43

Синтез 5-(4-(4-(1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)бутил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (43):

Указанное в заголовке соединение 43 получали, используя такую же процедуру, как описанная в примере 21, заменяя соединение 2C соединением 42C: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 9,45 (1H, с), 9,10 (1H, с), 8,61 (1H, с), 7,92-8,10 (3H, м), 7,78 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,42-7,48 (2H, м), 7,31-7,41 (2H, м), 7,07-7,16 (2H, м), 4,83 (2H, с), 4,05 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,12 (2H, т), 3,03 (2H, т), 1,68-1,83 (4H, м). LCMS (APCI) 703 (M+H).

Пример 44

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-(3-(4-(4-(изопропиламино)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (44):

Стадия 1: Получение этил 5-амино-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-4-карбоксилата (44A)

Смесь (Z)-этил 2-циано-3-этоксиакрилата (9,64 г, 57,0 ммоль), 4-метоксифенилгидразин гидрохлорида (9,95 г, 57,0 ммоль) и Na2CO3 (6,04 г, 57,0 ммоль) в EtOH (480 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч и перемешивали в течение ночи при к.т. Нерастворимый материал отфильтровывали и фильтрат концентрировали и твердое вещество осаждали. Осадок собирали и промывали MeOH и промывали большим количеством воды. Не совсем белое твердое вещество сушили, получая желательный продукт: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 7,65 (1H, с), 7,42 (2H, д), 7,07 (2H, д), 6,15 (2H, с), 4,14-4,26 (2H, м), 3,81 (3H, с), 1,27 (3H, т).

Стадия 2: Получение 1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4(3aH)-она (44B):

Смесь соединения 44A (7 г, 26,8 ммоль) и формамида (64,1 мл, 1607 ммоль) нагревали при 180°C в течение ночи и охлаждали. Осадок собирали, промывали водой и сушили, получая желательный продукт: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,35 (1H, с), 8,28 (1H, с), 8,15 (1H, с), 7,85-7,93 (2H, м), 7,09-7,14 (2H, м), 3,82 (3H, с).

Стадия 3: Получение 4-хлор-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидина (44C):

Смесь соединения 44B (2 г, 8,26 ммоль) и фосфорил трихлорида (11,51 мл, 124 ммоль) нагревали при 100°C в течение 2 часов и охлаждали. Реакционную смесь медленно выливали на лед. Осадок собирали, промывали водой и сушили, получая желательный продукт. MS (APCI): m/z 261 (M+H).

Стадия 4: Получение 4-(4-(изопропиламино)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенола (44D):

К смеси соединения 44C (388 мг, 1,48 ммоль) и пропан-2-амина (0,14 мл, 1,63 ммоль) в THF (10 мл) добавляли TEA (0,456 мл, 3,27 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 30°C в течение ночи и разбавляли EtOAc. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4, концентрировали при пониженном давлении и сушили. К сырому материалу добавляли иодтриметилсилан (1,0 мл, 7,06 ммоль) в тетраметилен сульфоне (5 мл). Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение ночи. Реакционную смесь медленно выливали на лед с водой (5 мл). Осадок собирали, промывали водой и очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-50% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 40 минут), получая указанное в заголовке соединение: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 9,68 (1H, с шир.), 8,55 (1H, с шир.), 8,39 (1H, с), 8,35 (1H, с), 7,82 (2H, д), 6,88-6,94 (2H, м), 4,34-4,46 (1H, м), 1,28 (6H, д).

Стадия 5: Получение указанного в заголовке соединения 44:

Указанное в заголовке соединение 44 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 5 примера 21, заменяя соединение 21D соединением 44D: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 8,45 (1H, с), 8,39 (1H, с), 8,34 (1H, с), 8,01 (1H, д), 7,98 (2H, д), 7,79 (1H, д), 7,65-7,73 (2H, м), 7,43-7,49 (2H, м), 7,32-7,41 (2H, м), 7,07 (2H, д), 4,84 (2H, с), 4,09-4,20 (1H, м), 4,04 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,20 (2H, т), 3,03 (2H, т), 2,00-2,08 (2H, м), 1,28 (3H, с), 1,27 (3H, с). LCMS (APCI): m/z 746 (M+H).

Пример 45

Синтез 5-((4-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (45):

Стадия 1: Получение N-(бензо[d]тиазол-2-ил)-2-(4-хлор-5-формилтиазол-2-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоксамида (45A):

Смесь соединения 1B (3,82 г, 10 ммоль), 2,4-дихлортиазол-5-карбальдегида (1,82 г, 10 ммоль) и Cs2CO3 (9,77 г, 30 ммоль) в DMA (30 мл) нагревали при 60°C в течение 8 часов, охлаждали до к.т. и затем выливали в воду (500 мл). Твердое вещество собирали фильтрованием и сушили в вакуумной печи в течение ночи (60°C), получая 4,2 г желательного продукта (45A): 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,66 (с, 1H), 9,69 (с, 1H), 8,00 (д, J=7,82 Гц, 1H), 7,77 (д, J=8,06 Гц, 1H), 7,73 (д, J=7,58 Гц, 1H), 7,40-7,49 (м, 3H), 7,33-7,36 (м, 1H), 5,04 (с, 2H), 3,82 (т, J=5,92 Гц, 2H), 3,11 (т, J=6,16 Гц, 2H). MS (ESI(+)): m/z 455 (M+H).

Стадия 2: Получение (E)-2-(4-хлор-5-формилтиазол-2-ил)-N-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиден)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоксамида (45B):

Соединение 45B получали аналогично синтезу соединения 34C путем замещения соединения 34B соединением 45A на стадии 3 примера 34. Соединение 45B изолировали в виде белого твердого вещества путем растирания смеси двух изомеров со смесью 1:4 гексаны:EtOAc. Другой изомер изолировали из маточной жидкости: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,71 (с, 1H), 8,24 (д, J=7,82 Гц, 1H), 7,92 (д, J=7,58 Гц, 1H), 7,70 (д, J=8,06 Гц, 1H), 7,53-7,56 (м, 1H), 7,36-7,46 (м, 3H), 6,01 (с, 2H), 5,35 (с, 2H), 3,85 (т, J=5,92 Гц, 2H), 3,72-3,75 (м, 2H), 3,11 (т, J=6,04 Гц, 2H). MS (ESI(+)): m/z 585 (M+H).

Стадия 3: (E)-метил 5-формил-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилат (45C):

Соединение 45B (4,6 г, 7,86 ммоль) в MeOH (50 мл) добавляли к Pd-dppf (0,288 г, 0,393 ммоль) и NEt3 (2,191 мл, 15,72 ммоль) в 250 мл SS толстостенную бутылку. Создавали давление на смесь нагнетанием CO (60 фунт/кв.дюйм) и перемешивали при 100°C в течение 7 ч. Твердое вещество отфильтровывали и затем фильтрат концентрировали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 3:1/гексаны:EtOAc, получая 4,45 г желательного продукта 45C: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 10,16 (с, 1H), 8,27 (д, J=6,74 Гц, 1H), 7,96 (д, J=7,14 Гц, 1H), 7,72 (д, J=8,33 Гц, 1H), 7,53-7,56 (м, 1H), 7,37-7,42 (м, 3H), 6,01 (с, 2H), 5,32 (с, 2H), 3,85-3,88 (м, 5H), 3,66-3,71 (м, 2H), 3,09 (т, J=5,95 Гц, 2H), 0,85-0,91 (м, 2H), -0,19 (с, 9H). MS (ESI(+)): m/z 609 (M+H).

Стадия 4: Получение (E)-метил 5-(гидроксиметил)-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (45D):

К соединению 45C (2,08 г, 3,42 ммоль) в MeOH (50 мл) и THF (20 мл) добавляли NaBH4 (0,259 г, 6,83 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°C в течение 2 часов. Растворитель удаляли и остаток распределяли между EtOAc и водой. Органический слой изолировали и водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 1:l/гексаны:EtOAc, получая 1,86 г желательного продукта: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,24-8,26 (м, 1H), 7,94 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,70 (д, J=8,20 Гц, 1H), 7,52-7,56 (м, 1H), 7,34-7,42 (м, 3H), 6,00 (с, 2H), 5,77 (т, J=5,52 Гц, 1H), 5,13 (с, 2H), 4,83 (д, J=5,52 Гц, 2H), 3,67-3,75 (м, 7H), 3,03 (т, J=5,98 Гц, 2H), 0,87-0,91 (м, 2H), -0,18 (с, 9H). MS (ESI(+)): m/z 611 (M+H).

Стадия 5: Получение (E)-метил 5-((4-(5-амино-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (45E):

Соединение 45E получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D соединением 45D на стадии 1 примера 35: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,24 (дд, J=7,52, 1,38 Гц, 1H), 7,94 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,70 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,67 (с, 2H), 7,53-7,57 (м, 1H), 7,34-7,43 (м, 3H), 7,10-7,14 (м, 2H), 6,00 (с, 2H), 5,57 (с, 2H), 5,17 (с, 2H), 3,81 (с, 3H), 3,76 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,66-3,70 (м, 2H), 3,04 (т, J=6,14 Гц, 2H), 0,85-0,89 (м, 2H), -0,20 (с, 9H). MS (ESI(+)): m/z 892 (M+NH4-H2O).

Стадия 6: Получение указанного в заголовке соединения 45:

Указанное в заголовке соединение 45 получали аналогично синтезу соединения 34 путем замещения соединения 34D соединением 45E: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,02 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,78 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,59-7,71 (м, 3H), 7,33-7,48 (м, 4H), 7,05 (д, J=7,59 Гц, 1H), 6,83 (д, J=7,67 Гц, 1H), 5,54 (с, 2H), 4,77-4,86 (м, 4H), 3,74 (т, J=5,68 Гц, 2H), 3,04 (т, J=5,83 Гц, 2H). MS (ESI(+)): m/z 647 (M-H).

Пример 46

Синтез 5-[3-(5-амино-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)-феноксметил]-2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]тиазол-4-карбоновой кислоты (46):

Стадия 1: Получение (E)-метил 5-((3-(5-амино-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-циано-1Н-пиразол-3-ил)фенокси)метил)-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (46A):

Указанное в заголовке соединение (46A) получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F соединением 45D и соединением 36A, соответственно, на стадии 1 примера 35: LCMS (ESI(+)): m/z 892 (M+NH4-H2O).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 46:

Указанное в заголовке соединение 46 получали аналогично синтезу соединения 34 путем замещения соединения 34D соединением 46A на стадии 5 примера 34: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,83 (с, 1H), 7,96 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,72 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,61 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,27-7,42 (м, 7H), 6,95 (д, J=7,93 Гц, 1H), 5,47 (с, 2H), 4,72-4,81 (м, 4H), 3,74 (т, J=5,68 Гц, 2H), 2,98 (т, J=5,65 Гц, 2H). MS (ESI(+)): m/z 649 (M+H).

Пример 47

Синтез 5-{3-[4-(5-амино-4-циано-тиофен-3-ил)-фенокси]пропил}-2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-тиазол-4-карбоновой кислоты (47):

Стадия 1: Получение 2-(1-(4-(бензилокси)фенил)этилиден)малононитрила (47A):

Гексаметилдисилазан (2,50 мл, 1,937 г, 12,0 ммоль) добавляли к 1-(4-(бензилокси)фенил)этанону (2,263 г, 10 ммоль) в уксусной кислоте (6 мл) при скорости, обеспечивающей внутреннюю температуру ниже 74°C. После завершения добавления в раствор добавляли малононитрил (1,32 г, 20 ммоль) в уксусной кислоте (6 мл). Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 12 часов. После охлаждения реакционную смесь выливали на лед с водой, экстрагировали EtOAc, сушили и концентрировали при пониженном давлении, получая сырой продукт. Твердое вещество растирали со смесью 1:9 EtOAc/гексаны, получая 2,74 г желательного продукта. 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 7,72-7,75 (м, 2H), 7,35-7,49 (м, 5H), 7,18-7,21 (д, 2H), 5,22 (с, 2H), 2,61 (с, 3H). MS (ESI(+)): m/z 291 (M+NH4).

Стадия 2: Получение 2-амино-4-(4-(бензилокси)фенил)тиофен-3-карбонитрила (47B):

К смеси соединения 47A (2,74 г, 9,99 ммоль) и серы (0,374 г, 11,99 ммоль) в THF (20 мл) добавляли бикарбонат натрия (0,839 г, 9,99 ммоль). Реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 часов и концентрировали при пониженном давлении. Остаток распределяли между EtOAc и водой. Органический слой изолировали и водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO4 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 3:1/гексаны:EtOAc, получая 2,42 г желательного продукта: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 7,33-7,48 (м, 7H), 7,19 (с, 2H), 7,07 (д, J=8,73 Гц, 2H), 6,42 (с, 1H), 5,14 (с, 2H). MS (ESI(+)): m/z 307 (M+H).

Стадия 3: Получение 2-амино-4-(4-гидроксифенил)тиофен-3-карбонитрила (47С):

К соединению 47B (1,1 г, 3,59 ммоль) в DCM (80 мл) добавляли 1,0 M BBr3 (36 мл, 36 ммоль) в DCM при к.т. Осадок образовывался при добавлении и постепенно исчезал после перемешивания при к.т. в течение 2 часов. Растворитель удаляли и остаток распределяли между водой и EtOAc. Органический слой изолировали. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 3:2/гексаны:EtOAc, получая 0,65 г желательного продукта 47C: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,58 (с, 1H), 7,35 (д, J=8,73 Гц, 2H), 7,15 (с, 2H), 6,80 (д, J=8,73 Гц, 2H), 6,34 (с, 1H); MS (ESI(+)): m/z 217 (M+H).

Стадия 4: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-иодтиазол-4-карбоксилата (47D):

Соединение 47D получали аналогично синтезу соединения 34C путем замещения соединения 34B соединением 8C на стадии 3 примера 34: APCI (+)/LC/MS: 707 (M+H).

Стадия 5: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-гидроксипроп-1-инил)тиазол-4-карбоксилата (47E):

Соединение 47E получали аналогично синтезу соединения 36B путем замещения соединения 34C соединением 47D на стадии 2 примера 34: LCMS (APCI): m/z 635 (M+H).

Стадия 6: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-гидроксипропил)тиазол-4-карбоксилата (47F):

Указанное в заголовке соединение (47F) получали аналогично синтезу соединения 8E путем замещения соединения 8D соединением 47E: LC/MS (APCI): m/z 639 (M+H).

Стадия 7: Получение метил 5-(3-(4-(5-амино-4-цианотиофен-3-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (47G):

Соединение 47G получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34B и соединения 31F соединением 47F и соединением 47C, соответственно: MS (ESI(+)): m/z 838 (M+H).

Стадия 8: Получение указанного в заголовке соединения 47H:

Указанное в заголовке соединение 47H получали аналогично синтезу соединения 34 путем замещения соединения 34D соединением 47G: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 7,95 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,72 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,60 (д, J=6,75 Гц, 1H), 7,26-7,44 (м, 6H), 6,87-6,90 (м, 2H), 6,32 (с, 1H), 4,77 (с, 2H), 3,94 (т, J=6,14 Гц, 2H), 3,64-3,67 (м, 2H), 3,10-3,13 (м, 2H), 2,96 (т, J=5,83 Гц, 2H), 1,93-1,96 (м, 2H). MS (ESI(+)): m/z 693 (M+H).

Пример 48

Синтез 5-(3-(4-(1Н-пиразол-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (48):

Указанное в заголовке соединение 48 получали путем замещения 4-(1H-пиразол-1-ил)фенолом фенола на стадии 4 в примере 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-90% В за 40 минут), получая указанное в заголовке соединение 48 с 29% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 8,35 (1H, д), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,69 (4H, м), 7,42 (4H, м), 7,02 (2H, м), 6,49 (1H, м), 4,84 (2H, с), 4,02 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,19 (2H, т), 3,03 (2H, т), 2,02 (2H, м). MS (ESI(+)): m/z 637 (M+H).

Пример 49

Синтез 5-(2-(4-(1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (49):

Стадия 1: Получение N-(бензо[d]тиазол-2-ил)-2-карбамотиоил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-8-карбоксамида (49A):

К смеси соединения 1B (3,25 г, 8,50 ммоль) в DMF (50 мл) добавляли TEA (4,71 мл, 34,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 10 минут и добавляли ди(1H-имидазол-1-ил)метантион (1,818 г, 10,20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 30 минут. Аммиак (7 н. в MeOH) (48,6 мл, 340 ммоль) добавляли и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, чтобы удалить аммиак и MeOH. Раствор DMF использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS (APCI): m/z 369 (M+H).

Стадия 2: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)тиазол-4-карбоксилата (49В):

К раствору 3-(трет-бутилдиметилсилилокси)пропаналя (1 г, 5,31 ммоль) и этил 2,2-дихлорацетата (0,651 мл, 5,31 ммоль) в Et2O (4 мл) при 0° по каплям добавляли этанолат натрия (0,397 г, 5,84 ммоль) в EtOH (4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1,5 часа и разбавляли Et2O. Полученную смесь промывали насыщенным раствором соли и органический слой сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили в вакууме и растворяли в EtOH (8 мл). К полученному раствору добавляли соединение из примера 49A (1 экв.) в DMF. Реакционную смесь нагревали при 50°C в течение 8 часов и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в DCM и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 0% до 17% EtOAc в гексанах, затем 0% до 15% EtOAc в DCM, получая желательный продукт 49B: LCMS (APCI): m/z 623 (M+H).

Стадия 3: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)тиазол-4-карбоксилата (49C 1) и (Z)-этил 5-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (49C 2):

К смеси соединения примера 49B (365 мг, 0,586 ммоль) и (2-(хлорметокси)этил)триметилсилана (0,109 мл, 0,615 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли TEA (0,163 мл, 1,172 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 10 минут. Желательный продукт был представлен как два региоизомера (49C 1 и 49C 2). Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Сырой материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-гидроксиэтил)тиазол-4-карбоксилата (49D 1) и (Z)-этил 5-(2-гидроксиэтил)-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (49D 2):

К раствору соединения 49C 1 и 49C 2 (400 мг, 0,531 ммоль) в DCM (2 мл) добавляли MeOH (50 мл). 1% HCl в MeOH (3,87 мл, 1,062 ммоль) добавляли по каплям. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 5 часов и разбавляли EtOAc (250 мл) и промывали 50% NaCl. Органический слой сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в DCM и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 0% до 25% EtOAc в DCM, получая желательные соединения 49D 1 и 49D 2: LCMS (APCI): m/z 639 (M+H).

Стадия 5: Получение этил 5-(2-(4-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (49E 1) и (Z)-этил 5-(2-(4-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденскарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (49E 2):

Соединение 21D (27,8 мг, 0,131 ммоль) растворяли в THF (1,5 мл) при нагревании. Раствор охлаждали до к.т. и затем добавляли соединения 49D 1 и 49D 2 (55,7 мг, 0,087 ммоль) и трифенилфосфин (11,43 мг, 0,044 ммоль) с последующим добавлением (E)-ди-трет-бутил диазен-1,2-дикарбоксилата (10,04 мг, 0,044 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и промывали 2% NaOH, 5% HCl и водой. Органический слой сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 25% EtOAc в DCM, получая желательные соединения 49E 1 и 49E 2: LCMS (APCI): m/z 834 (M+H).

Стадия 6: Получение 5-(2-(4-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (49):

К раствору соединения 49E 1 и соединения 49E 2 (100 мг, 0,120 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли 2 н. HCl в простом эфире (0,60 мл, 1,20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 15 минут и концентрировали при пониженном давлении. К сырому материалу добавляли 10% NaOH (0,17 мл, 0,427 ммоль) и воду (5 мл) в THF (5 мл) и MeOH (5 мл) и нагревали до 50°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали и фильтровали. Фильтрат подкисляли HCl и осадок собирали фильтрованием, промывали водой и сушили, получая желательный продукт 49: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 9,44 (1H, с), 9,09 (1H, с), 8,60 (1H, с), 7,97-8,02 (3H, м), 7,77 (1H, д), 7,66 (1H, д), 7,28-7,47 (4H, м), 7,13-7,17 (2H, м), 4,84 (2H, с), 4,23 (2H, т), 3,75 (2H, т), 3,53 (2H, т), 3,04 (2H, т). LCMS (APCI): m/z 675 (M+H).

Пример 50

Синтез 5-(2-(3-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (50):

Стадия 1: Получение этил 5-(2-(3-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (50A 1) и (Z)-этил 5-(2-(3-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)этил)-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (50A 2):

Соединение 50A 1 и 50A 2 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 5 примера 49, заменяя соединение 21D соединением 33D: LCMS (APCI): m/z 834 (M+H).

Стадия 2: Получение 5-(2-(3-(1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1 -ил)фенокси)этил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (50):

Соединение 50 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 5 примера 49, заменяя соединение 49E 1 и соединение 49E 2 соединением 50A 1 и соединением 50A 2 : 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,84 (1H, с), 9,44 (1H, с), 9,14 (1H, с), 8,62 (1H, с), 8,01 (1H, д), 7,76-7,84 (3H, м), 7,66 (1H, д), 7,32-7,50 (5H, м), 6,98 (1H, дд), 4,84 (2H, с), 4,25 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,54 (2H, т), 3,03 (2H, т). LCMS (APCI): m/z 675 (M+H).

Пример 51

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(4-циано-тиофен-3-ил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (51):

Стадия 1: Получение 4-(4-гидроксифенил)тиофен-3-карбонитрила (51A):

Соединение 51A получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты 4-бромтиофен-3-карбонитрилом и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,68 (с, 1H), 8,62 (д, J=3,38 Гц, 1H), 7,73 (д, J=3,07 Гц, 1H), 7,44 (д, J=8,59 Гц, 2H), 6,86 (д, J=8,59 Гц, 2H). MS (ESI(+)): m/z 200 (M-H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 51:

К соединению 51A (0,095 г, 0,015 ммоль) в DMF (4 мл) добавляли 60% гидрид натрия (0,036 г, 0,9 ммоль) при 0°C. Раствор перемешивали в течение 10 минут. К этому раствору добавляли соединение 2C. Раствор перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Реакционную смесь гасили MeOH (1 мл). Добавляли конц. HCl (0,5 мл) и раствор фильтровали через шприцевый фильтр. Фильтрат затем очищали преп. ВЭЖХ, получая желательный продукт 51: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,57 (д, J=3,38 Гц, 1H), 7,95 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,71-7,72 (м, 2H), 7,60 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,45-7,48 (м, 2H), 7,26-7,41 (м, 4H), 6,95-6,97 (м, 2H), 4,77 (с, 2H), 3,97 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,66 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,11-3,14 (м, 2H), 2,96 (т, J=5,98 Гц, 2H), 1,93-2,00 (м, 2H); MS (ESI(+)): m/z 678 (M+H).

Пример 52

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(9-изопропил-9H-пурин-6-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (52):

Стадия 1: Получение 6-хлор-N4-изопропилпиримидин-4,5-диамина (52A):

4,6-Дихлорпиримидин-5-амин (492 мг, 3 ммоль), пропан-2-амин (284 мкл, 3,3 ммоль) и Et2N (836 мкл, 6 ммоль) объединяли и нагревали при кипении с обратным холодильником. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 дней и каждый день добавляли дополнительный изопропиламин (0,77 мл, 9 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали, суспендировали в воде, фильтровали, промывали дополнительной водой и сушили при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение 52A в виде желтовато-коричневого твердого вещества: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 7,72 (1H, с), 6,53 (1H, д), 5,02 (2H, с), 4,20 (1H, октет), 1,18 (6H, д).

Стадия 2: Получение 6-хлор-9-изопропил-9H-пурина (52B):

Соединение 52A (268 мг, 1,44 ммоль), триэтил ортоформиат (2,4 мл, 14,36 ммоль) и п-толуолсульфоновую кислоту (27,3 мг, 0,144 ммоль) объединяли и нагревали при 115°C в течение ночи. Осаждение происходило при охлаждении до комнатной температуры. Осадок собирали фильтрованием, промывали диэтиловым простым эфиром и сушили при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение 52B: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 8,81 (1H, с), 8,78 (1H, с), 4,89 (IH, м), 1,58 (6H, д).

Стадия 3: Получение 9-изопропил-6-(4-(тетрагидро-2H-пиран-2-илокси)фенил)-9H-пурина (52C):

Соединение 52B (165 мг, 0,84 ммоль) в толуоле (5 мл) обрабатывали последовательно 4-(тетрагидро-2H-пиран-2-илокси)фенилбороновой кислотой (280 мг, 1,26 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладием(0) (48,6 мг, 0,042 ммоль) и карбонатом натрия (2 н. водн.) (1,26 мл, 2,52 ммоль). Реакционный сосуд продували азотом и нагревали при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc, промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Концентрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 5% MeOH в CH2C12: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 8,92 (1H, с), 8,83 (2H, м), 8,74 (1H, с), 7,22 (2H, м), 5,63 (1H, т), 4,92 (1H, септет), 3,79 (1H, ддд), 3,60 (1H, м), 1,82 (4H, м), 1,60 (6H, д), 1,55 (2H, м).

Стадия 4: Получение 4-(9-изопропил-9H-пурин-6-ил)фенола (52D):

Соединение 52C (149 мг, 0,44 ммоль) в диоксане (3 мл) обрабатывали HCl (4 н. в диоксане) (0,55 мл, 2,2 ммоль) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и сушили, получая светло-серое твердое вещество 52D с 94% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 10,16 (1H, с), 8,90 (1H, с), 8,76 (1H, м), 8,73 (2H, м), 6,97 (2H, м), 4,91 (1H, септет), 1,60 (6H, д).

Стадия 5: Получение указанного в заголовке соединения 52:

Указанное в заголовке соединение 52 получали путем замещения соединением 52D фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 60% EtOAc в CH2Cl2. Остальная процедура следовала стадии 4 примера 2: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 8,89 (1H, с), 8,81 (2H, д), 8,72 (1H, с), 8,00 (1H, д), 7,77 (1H, д), 7,65 (1H, д), 7,45 (2H, м), 7,35 (2H, м), 7,11 (2H, д), 4,90 (1H, м), 4,83 (2H, с), 4,09 (2H, м), 3,71 (2H, м), 3,20 (2H, м), 3,02 (2H, м), 2,04 (2H, м), 1,59 (6H, д). MS (ESI(+)) m/e 731 (M+H).

Пример 53

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(5,6-дигидроимидазо[2,1-b]тиазол-3-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (53):

Указанное в заголовке соединение 53 получали, используя 4-(5,6-дигидроимидазо[2,1-b]тиазол-3-ил)фенол,HBr вместо фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 5 до 60% EtOAc в гексанах. Процедуру сопровождали, как описано на стадии 4 примера 2 за исключением того, что гидролиз сложного эфира проводили при температуре окружающей среды: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 12,57 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,68 (1H, д), 7,42 (6H, м), 7,03 (2H, д), 6,75 (1H, с), 4,83 (2H, с), 4,39 (2H, м), 4,23 (2H, м), 4,04 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,19 (2H, т), 3,03 (2H, т), 2,03 (2H, м). MS (ESI(+)) m/e 695 (M+H).

Пример 54

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-(3-(диметиламино)пропиламино)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (54):

Стадия 1: Получение 4-(4-(3-(диметиламино)пропиламино)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенола (54A):

Указанное в заголовке соединение 54A получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 4 примера 44, заменяя изопропиламин диметиламинопропиламином: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 9,54 (1H, с), 8,63 (1H, т), 8,36 (1H, с), 8,31 (1H, с), 7,85 (2H, д), 6,92 (2H, д), 3,60 (2H, кв.), 3,12-3,18 (2H, м), 2,80 (6H, с), 1,95-2,03 (2H, м).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 54:

К раствору соединения 54A (160 мг, 0,512 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли гидрид натрия (102 мг, 2,56 ммоль) (60%). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин и добавляли соединение 2C (194 мг, 0,307 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 1 часа и добавляли метанол (3 мл), 10% NaOH (3 мл) и воду (1 мл). Полученную смесь перемешивали в течение ночи, подкисляли TFA и концентрировали. Остаток растворяли в смеси DMSO-метанол и очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-55% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 60 мин), получая указанное в заголовке соединение: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,84 (1H, с), 9,34 (1H, с), 8,53 (1H, т), 8,36 (1H, с), 8,32 (1H, с), 7,96-8,03 (3H, м), 7,78 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,42-7,49 (2H, м), 7,32-7,41 (2H, м), 7,05-7,10 (2H, м), 4,84 (2H, с), 4,04 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,60 (2H, кв.), 3,12-3,26 (4H, м), 3,03 (2H, т), 2,80 (6H, с), 1,93-2,08 (4H, м). LCMS (APCI) m/e 789 (M+H).

Пример 55

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(бензилокси)этил)тиазол-4-карбоновой кислоты (55):

Стадия 1: Получение этил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(бензилокси)этил)тиазол-4-карбоксилата (55A):

Соединение 55A получали, используя такую же последовательность, как описанная для стадии 2 примера 49, заменяя 3-(трет-бутилдиметилсилилокси)пропаналь 3-(бензилокси)пропаналем: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,88 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,66 (1H, д), 7,43-7,51 (2H, м), 7,33-7,41 (2H, м), 7,26-7,30 (4H, м), 7,16-7,23 (1H, м), 4,82 (2H, с), 4,46 (2H, с), 4,17 (2H, кв.), 3,73 (2H, т), 3,61 (2H, т), 3,26-3,30 (2H, м), 3,04 (2H, т), 1,18 (3H, т); LCMS (APCI) m/e 599 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 55:

Соединение 55A (138 мг, 0,230 ммоль) в THF (3 мл) и MeOH (3 мл) обрабатывали 10% гидроксидом натрия (0,46 мл, 1,152 ммоль) в течение 1 дня. Реакционную смесь концентрировали и подкисляли конц. HCl. Осадок собирали фильтрованием и сушили, получая указанное в заголовке соединение: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,89 (2H, с), 8,03 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,42-7,51 (2H, м), 7,33-7,42 (2H, м), 7,25-7,31 (4H, м), 7,17-7,21 (1H, м), 4,82 (2H, с), 4,46 (2H, с), 3,74 (2H, т), 3,60 (2H, т), 3,28-3,35 (2H, м), 3,03 (2H, т); LCMS (APCI) m/e 571.

Пример 56

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(3-циано-пиридин-2-ил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (56)

Стадия 1: Получение 2-(4-гидроксифенил)никотинонитрил (56A):

Соединение 56A получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты 2-хлорникотинонитрилом и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: ESI (+)/LC/MS: 197 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 56:

Указанное в заголовке соединение 56 получали аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 56A на стадии 2 примера 51: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,86 (дд, J=4,76, 1,69 Гц, 1H), 8,34 (дд, J=7,82, 1,69 Гц, 1H), 8,01 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,82 (д, J=8,9 Гц, 2H), 7,77 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,66 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,32-7,53 (м, 5H), 7,07 (д, J=8,9 Гц, 2H), 4,83 (с, 2H), 4,07 (т, J=6,14 Гц, 2H), 3,70-3,73 (м, 2H), 3,18-3,22 (м, 2H), 3,01-3,03 (м, 2H), 2,00-2,08 (м, 2H). ESI (+)/MS: 673 (M+H)+.

Пример 57

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(6-(3-(диметиламино)проп-1-инил)пиридин-3-илокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (57):

Стадия 1: Получение 2-хлор-5-((2-(триметилсилил)этокси)метокси)пиридина (57A):

Указанное в заголовке соединение 57A получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 3 примера 49, заменяя соединение 49B 6-хлорпиридин-3-олом: LCMS (APCI) m/e 260 (M+H).

Стадия 2: Получение N,N-диметил-3-(5-((2-(триметилсилил)этокси)метокси)пиридин-2-ил)проп-2-ин-1-амина (57B):

К смеси соединения 57A (154 мг, 0,593 ммоль), N,N-диметилпроп-2-ин-1-амина (0,190 мл, 1,778 ммоль), (PPh3)2PdCl2 (62,4 мг, 0,089 ммоль), TEA (0,413 мл, 2,96 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли иодид меди(I) (11,29 мг, 0,059 ммоль). Полученную смесь нагревали при 150°C в Smith микроволновом синтезаторе в течение 30 мин и очищали флэш-хроматографией, получая желательное соединение 57B; LCMS (APCI) m/e 307.

Стадия 3: Получение 6-(3-(диметиламино)проп-1-инил)пиридин-3-ола (57C):

Соединение 57B (40 мг, 0,131 ммоль) в MeOH (3 мл) обрабатывали 2 н. хлоридом водорода в простом эфире (0,1 мл, 0,200 ммоль) в течение 1 ч и смесь концентрировали, получая указанное в заголовке соединение 57C. LCMS (APCI) m/e 177 (M+H).

Стадия 4: Получение указанного в заголовке соединения (57):

Указанное в заголовке соединение 57 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 54, заменяя соединение 54A соединением 57C: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 10,25 (1H, с), 8,28 (1H, д), 8,04 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,58 (1H, д), 7,43-7,50 (2H, м), 7,34-7,43 (3H, м), 4,83 (2H, с), 4,34 (2H, с), 4,10 (2H, т), 3,69-3,76 (2H, м), 3,16-3,24 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,73 (6H, с), 1,98-2,07 (2H, м); LCMS (APCI) m/e 654 (M+H).

Пример 58

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(2-циано-пиридин-3-ил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (58):

Стадия 1: Получение 3-(4-гидроксифенил)пиколинонитрила (58A):

Указанное в заголовке соединение 58A получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты 3-хлорпиколинонитрилом и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно. ESI (+)/LC/MS: 197 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 58:

Указанное в заголовке соединение 58 получали аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 58A на стадии 2 примера 51: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,84 (дд, J=4,6, 1,53 Гц, 1H), 7,98 (дд, J=7,98, 1,53 Гц, 1H), 7,95 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,27-7,7 (м, 9H), 7,01-7,03 (м, 2H), 4,77 (с, 2H), 4,01 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,66 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,12-3,16 (м, 2H), 2,97 (т, J=5,98 Гц, 2H), 1,95-2,02 (м, 2H). ESI (+)/MS: 673 (M+H)+.

Пример 59

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-[3-(4-морфолин-4-ил-фенокси)пропил]тиазол-4-карбоновой кислоты (59):

Указанное в заголовке соединение получали аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A 4-морфолинофенолом на стадии 2 примера 51: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 7,96 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,72 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,06 Гц, 1H), 7,27-7,42 (м, 4H), 6,88 (д, J=8,9 Гц, 2H), 6,75-6,79 (м, 2H), 4,76 (с, 2H), 3,85 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,64-3,68 (м, 6H), 3,07-3,11 (м, 2H), 2,95-2,98 (м, 6H), 1,87-1,94 (м, 2H). ESI (+)/MS: 656 (M+H)+.

Пример 60

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-[5-(4-циано-тиофен-3-ил)-2-гидрокси-бензил]тиазол-4-карбоновой кислоты (60):

Стадия 1: Получение (E)-метил 5-(5-(4-цианотиофен-3-ил)-2-гидроксибензил)-2-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (60A):

Указанное в заголовке соединение 60A получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F соединением 45D и соединением 51A, соответственно: ESI (+)/LC/MS: 892 (M+NH4-H2O)+: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,99 (с, 1H), 8,58 (с, 1H), 8,21 (д, J=6,71 Гц, 1H), 7,92 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,66-7,68 (м, 2H), 7,52-7,55 (м, 1H), 7,32-7,41 (м, 5H), 6,92 (д, J=8,24 Гц, 1H), 5,97 (с, 2H), 5,08 (с, 2H), 4,35 (с, 2H), 3,78 (с, 3H), 3,64-3,68 (м, 2H), 2,98 (т, J=5,8 Гц, 2H), 0,84-0,87 (м, 2H), -0,22 (с, 9H). ESI (+)/MS: 794 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 60:

Указанное в заголовке соединение 60 получали аналогично синтезу соединения 34 путем замещения соединения 34D соединением 60A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,92 (с, 1H), 8,55 (д, J=3,07 Гц, 1H), 8,00 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,77 (д, J=8,29 Гц, 1H), 7,63-7,66 (м, 2H), 7,29-7,48 (м, 6H), 6,90 (д, J=8,29 Гц, 1H), 4,79 (с, 2H), 4,34 (с, 2H), 3,66 (д, J=5,98 Гц, 2H), 2,99 (т, J=5,83 Гц, 2H). ESI (+)/MS: 650 (M+H)+.

Пример 61

Синтез 5-(3-[4-(4-ацетил-пиперазин-1-ил)фенокси]пропил}-2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]тиазол-4-карбоновой кислоты (61):

Указанное в заголовке соединение 61 получали аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A 1-(4-(4-гидроксифенил)пиперазин-1-ил)этаноном на стадии 2 примера 51: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,02 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,78 (д, J=8,29 Гц, 1H), 7,66 (д, J=7,06 Гц, 1H), 7,33-7,49 (м, 4H), 6,90-6,92 (м, 2H), 6,80-6,82 (м, 2H), 4,82 (с, 2H), 3,90 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,71 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,53-3,56 (м, 2H), 3,13-3,17 (м, 2H), 3,02 (т, J=5,37 Гц, 4H), 2,94-2,96 (м, 2H), 2,02 (с, 3H), 1,92-1,99 (м, 2H). ESI (+)/MS: 697 (M+H)+.

Пример 62

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((4-фенилпиперазин-1-ил)метил)тиазол-4-карбоновой кислоты (62):

Стадия 1: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((4-фенилпиперазин-1-ил)метил)тиазол-4-карбоксилата (62A):

К раствору соединения 45C (55 мг, 0,090 ммоль) в DCE (3,5 мл) добавляли 1-фенилпиперазин (14,57 мг, 0,090 ммоль) и триацетоксиборгидрид натрия (28,7 мг, 0,136 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 дней и концентрировали. Остаток растирали с метанолом и белый осадок собирали, получая указанное в заголовке соединение: LCMS (APCI) m/e 756 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 62:

Соединение 62A (50 мг, 0,066 ммоль) в DCM (3,5 мл) обрабатывали 2 н. хлоридом водорода в простом эфире (3,31 мл, 6,62 ммоль) в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали и остаток растворяли в THF (3 мл) и метаноле (3 мл). NaOH (10% водн., 1 мл) добавляли. Полученную смесь перемешивали в течение ночи и концентрировали. Остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-70% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 40 мин), получая указанное в заголовке соединение: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,91 (1H, с), 8,02 (1H, д), 7,78 (1H, д), 7,70 (1H, д), 7,44-7,50 (2H, м), 7,41 (1H, т), 7,35 (1H, т), 7,20-7,27 (2H, м), 6,96 (2H, д), 6,84 (1H, т), 4,89 (2H, с), 4,73 (2H, с), 3,82 (2H, т), 3,45 (8H, с), 3,07 (2H, т). LCMS (APCI) m/e 611 (M+H).

Пример 63

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((4-фенилпиперидин-1-ил)метил)тиазол-4-карбоновой кислоты (63):

Стадия 1: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((4-фенилпиперидин-1-ил)метил)тиазол-4-карбоксилата (63A):

Соединение получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 1 примера 62, заменяя 1-фенилпиперазин 4-фенилпиперидином. LCMS (APCI) m/e 755 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 63:

Указанное в заголовке соединение 63 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 62, заменяя соединение 62A соединением 63A: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,94 (1H, с), 9,32 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,78 (1H, д), 7,71 (1H, д), 7,45-7,50 (2H, м), 7,41 (1H, т), 7,29-7,38 (3H, м), 7,21 (3H, т), 4,89 (2H, с), 4,76 (2H, с), 3,83 (2H, т), 3,48-3,59 (2H, м), 3,11-3,21 (2H, м), 3,07 (2H, т), 2,78-2,90 (1H, м), 1,76-2,02 (4H, м),); LCMS (APCI) m/e 610 (M+H).

Пример 64

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-[3-(4-пиперазин-1-ил-фенокси)пропил]тиазол-4-карбоновой кислоты (64):

Соединение 61 (25 мг) в диоксане (2 мл) и MeOH (2 мл) обрабатывали 1,0 н. LiOH (2 мл). Реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником до тех пор, пока не расходовалось соединение 61, что отслеживали путем TLC. Растворители удаляли и остаток очищали преп. ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение 64 в виде соли TFA: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,56 (с, 2H), 7,96 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,72 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,27-7,43 (м, 4H), 6,92-6,95 (м, 2H), 6,75-6,77 (м, 2H), 4,76 (с, 2H), 3,84 (т, J=6,14 Гц, 2H), 3,65 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,07-3,14 (м, 8H), 2,96 (т, J=5,98 Гц, 2H), 1,86-1,94 (м, 2H). ESI (+)/MS: 655 (M+H)+.

Пример 65

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(5-бром-тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил)-фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (65):

Стадия 1: Получение 7-бром-4-хлортиено[3,2-d]пиримидина (65A):

7-Бромтиено[3,2-d]пиримидин-4(3H)он (0,9 г, 3,89 ммоль) в POCl3 нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 часов и избыток POCl3 удаляли при пониженном давлении. Остаток распределяли между водой и EtOAc. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,91 г соединения 65A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,15 (с, 1H), 8,78 (с, 1H). ESI (+)/MS: 248 (M-H)+.

Стадия 2: Получение 4-(7-бромтиено[3,2-d]пиримидин-4-ил)фенола (65B):

Указанное в заголовке соединение получали, используя подобные условия, как описано для синтеза соединения 34D, путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты соединением 65A и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,27 (с, 1H), 8,73 (с, 1H), 8,08-8,10 (м, 2H), 7,01-7,03 (м, 2H); ESI (-)/MS: 308 (M-H)-.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 65:

Указанное в заголовке соединение 65 получали аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 65B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,29 (с, 1H), 8,73 (с, 1H), 8,13 (д, J=8,59 Гц, 2H), 7,99 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,76 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,66 (д, J=7,06 Гц, 1H), 7,31-7,47 (м, 4H), 7,17 (J=8,9 Гц, 2H), 4,82 (с, 2H), 4,11 (т, J=6,14 Гц, 2H), 3,71-3,74 (м, 2H), 3,19-3,22 (м, 2H), 3,02 (т, J=5,37 Гц, 2H), 2,05-2,07 (м, 2H). ESI (+)/MS: 527 (M+H)+.

Пример 66

Синтез 5-(3-(4-(1H-имидазол-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (66):

Указанное в заголовке соединение 66 получали путем замещения 4-(1H-имидазол-1-ил)фенолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе Gilson ВЭЖХ, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 20-90% В за 40 мин), получая указанное в заголовке соединение с 45% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,88 (1H, с), 12,52 (1H, с), 9,34 (1H, с), 8,10 (1H, д), 8,02 (1H, м), 7,78 (2H, м), 7,66 (3H, м), 7,42 (4H, м), 7,13 (2H, м), 4,83 (2H, с), 4,07 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,20 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,04 (2H, м); MS (ESI(+)) m/e 637 (M+H).

Пример 67

Синтез 5-(3-(4-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (67):

Указанное в заголовке соединение получали путем замещения 4-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)фенолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 20-90% В за 40 мин), получая указанное в заголовке соединение 67 с 43% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,88 (1H, с), 9,14 (1H, с), 8,17 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,72 (2H, м), 7,66 (1H, д), 7,42 (5H, м), 7,07 (2H, м), 4,83 (2H, с), 4,04 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,19 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,02 (2H, м). MS (ESI(+)) m/e 638 (M+H).

Пример 68

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (68):

Указанное в заголовке соединение 68 получали путем замещения 4-(4-метил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)фенолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм х 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 20-90% В за 40 мин), получая указанное в заголовке соединение 68 с 56% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,89 (1H, с), 8,73 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,66 (3H, м), 7,42 (4H, м), 7,09 (2H, м), 4,83 (2H, с), 4,07 (2H, т), 3,73 (5H, м), 3,20 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,04 (2H, м). MS (ESI(+)) m/e 652 (M+H).

Пример 69

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(4-изопропиламино-тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (69):

Стадия 1: Получение 7-бром-N-изопропилтиено[3,2-d]пиримидин-4-амина (69A):

Смесь соединения 65A (0,125 г, 0,5 ммоль) и пропан-2-амина (0,148 г, 2,5 ммоль) в этаноле (10 мл) нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 15 часов. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле элюируя 1:1 EtOAc/гексаны, получая 0,13 г указанного в заголовке соединения: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,50 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 7,87 (д, J=7,46 Гц, 1H), 4,40-4,51 (м, 1H), 1,23 (д, J=6,78 Гц, 6H). ESI (+)/MS: 273 (M-H)+.

Стадия 2: Получение 4-(4-(изопропиламино)тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил)фенола (69B):

Указанное в заголовке соединение 69B получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты соединением 69A и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,49 (с, 1H), 8,50 (с, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,88-7,91 (м, 2H), 7,57 (д, J=7,67 Гц, 1H), 6,83-6,86 (м, 2H), 4,44-4,53 (м, 1H), 1,25 (д, J=6,75 Гц, 6H). ESI (+)/MS: 286 (M-H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 69:

Указанное в заголовке соединение 69 получали аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 69B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,59 (с, 1H), 8,25 (с, 1H), 8,00 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,66-7,79 (м, 4H), 7,32-7,48 (м, 4H), 7,03 (д, J=8,59 Гц, 2H), 4,84 (с, 2H), 4,41-4,47 (м, 1H), 4,05 (т, J=6,14 Гц, 2H), 3,72-3,75 (м, 2H), 3,19-3,22 (м, 2H), 3,03 (т, J=5,98 Гц, 2H), 2,00-2,08 (м, 2H), 1,28 (д, J=6,44 Гц, 6H). ESI (+)/MS: 762 (M+H)+.

Пример 70

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-[2-(3-нитро-бензолсульфониламино)этил]тиазол-4-карбоновой кислоты (70):

Стадия 1: Получение (E)-этил 5-(2-(3-нитрофенилсульфонамидо)этил)-2-(8-(2-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиден)ацетил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (70A):

Указанное в заголовке соединение 70A получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F соединением 49D и 3-нитробензолсульфонамидом, соответственно: ESI (+)/LC/MS: 823 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 70:

Указанное в заголовке соединение 70 получали аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 70A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,39-8,44 (м, 2H), 8,11-8,15 (м, 2H), 8,04 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,78-7,84 (м, 2H), 7,68 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,34-7,50 (м, 4H), 6,90 (д, J=8,29 Гц, 1H), 4,79 (с, 2H), 3,69 (д, J=5,98 Гц, 2H), 3,06-3,10 (м, 4H), 3,03 (т, J=5,98 Гц, 2H). ESI (+)/MS: 665 (M+H)+.

Пример 71

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил]-5-(2-фенил-азетидин-1-илметил)тиазол-4-карбоновой кислоты (71):

Стадия 1: Получение (E)-метил 5-((2-фенилазетидин-1-ил)метил)-2-(8-(2-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиден)ацетил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (71A):

Указанное в заголовке соединение 71A получали аналогично синтезу соединения 62A путем замещения фенилепиперазина 2-фенилазетидином: ESI (+)/LC/MS: 726 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 71:

Указанное в заголовке соединение получали аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 71A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,89 (с, 1H), 8,04 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,80 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,70 (д, J=7,37 Гц, 1H), 7,34-7,54 (м, 9H), 5,47 (шир., 1H), 4,70-4,95 (м, 4H), 4,40 (шир.с, 1H), 3,88 (шир., 1H), 3,76 (д, J=5,83 Гц, 2H), 2,60-2,8 (шир.с, 2H). ESI (+)/MS: 582 (M+H)+.

Пример 72

Синтез 5-(4-(1H-имидазол-1-ил)бутил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (72):

Указанное в заголовке соединение 72 получали путем замещения соединением 42C соединения 2C и имидазолом фенола на стадии 4 примера 2. Промежуточный продукт алкилирования не изолировали перед гидролизом сложного эфира. После осаждения желательного продукта твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 20-90% В за 40 мин), получая указанное в заголовке соединение с 34% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,91 (1H, с), 12,55 (1H, с), 9,06 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,77 (2H, м), 7,66 (2H, м), 7,43 (4H, м), 4,82 (2H, с), 4,19 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,05 (4H, м), 1,83 (2H, м), 1,53 (2H, м). MS (ESI(+)) m/e 559 (M+H).

Пример 73

Синтез 5-(3-(4-(1H-пиразол-4-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (73):

Стадия 1: Получение трет-бутил 5-(3-(4-(1H-пиразол-4-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоксилата (73A):

Смесь соединения 41A (90 мг, 0,102 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (29,7 мг, 0,153 ммоль), Na2CO3 (108 мкл, 0,102 ммоль) (1M) и (Ph3P)2Cl2Pd (7,15 мг, 10,19 мкмоль) в EtOH-DME-H2O (7:3:2, 4 мл) нагревали в Smith микроволновом синтезаторе при 120°C в течение 30 мин и затем концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией, получая соединение 73A. LCMS (APCI) m/e 824 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 73:

Соединение 73A (30 мг) в DCM (1 мл) обрабатывали HCl 2 н. в простом эфире (5 мл) в течение 2 дней. Осадок собирали и сушили, получая указанное в заголовке соединение 73: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 8,09 (2H, с), 8,02 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,68 (1H, д), 7,51 (2H, д), 7,44-7,48 (2H, м), 7,33-7,42 (2H, м), 6,91 (2H, д), 4,87 (2H, с), 3,99 (2H, т), 3,75 (2H, т), 3,19 (2H, т), 3,04 (2H, т); LCMS (APCI) m/e 637 (M+H).

Пример 74

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(3-диметиламино-проп-1-инил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (74)

Стадия 1: Получение 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (74А):

К смеси 4-иодфенола (750 мг, 3,41 ммоль), N,N-диметилпроп-2-ин-1-амина (1,090 мл, 10,23 ммоль), (PPh3)4Pd (192 мг, 0,166 ммоль), TEA (1,425 мл, 10,23 ммоль) в DMF (12 мл) добавляли иодид меди(I) (97 мг, 0,511 ммоль). Полученную смесь нагревали в Smith микроволновом синтезаторе при 100°C в течение 25 мин и затем концентрировали. Остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-30% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 30 мин), получая соединение в виде соли TFA: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 10,06 (1H, с), 7,35 (2H, д), 6,80 (2H, д), 4,25 (2H, с), 2,85 (6H, с).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 74:

Указанное в заголовке соединение 74 получали, используя такую же процедуру, как описанная для примера 54, заменяя соединение 54A соединением 74A на стадии 2 примера 54: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,86 (1H, с), 10,19 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,33-7,50 (6H, м), 6,95 (2H, д), 4,83 (2H, с), 4,29 (2H, с), 4,02 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,11-3,21 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,87 (6H, с), 1,96-2,07 (2H, м); LCMS (APCI) m/e 652 (M+H).

Пример 75

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(2-диметиламино-этокси)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (75):

Стадия 1: Получение 2-(4-(бензилокси)фенокси)-N,N-диметилэтанамина (75A):

Соединение 75A получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F 2-(диметиламино)этанолом и 4-(бензилокси)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 7,31-7,44 (м, 5H), 6,84-6,94 (м, 4H), 5,03 (с, 2H), 3,94-3,98 (м, 2H), 2,57 (д, J=5,93 Гц, 2H), 2,19 (с, 6H). ESI (+)/MS: 272 (M+H)+.

Стадия 2: Получение 4-(2-(диметиламино)этокси)фенола (75B):

Соединение 75B получали аналогично синтезу соединения 31F путем замещения соединения 31E соединением 75A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,86 (с, 1H), 6,72-6,76 (м, 2H), 6,64-6,68 (м, 2H), 3,92 (д, J=5,83 Гц, 2H), 2,56 (д, J=5,83 Гц, 2H), 2,19 (с, 6H). ESI (+)/MS: 182 (M+H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 75:

Указанное в заголовке соединение 75 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 75B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,85 (с, 1H), 9,58 (с, 1H), 8,03 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,67 (д, J=7,06 Гц, 1H), 7,33-7,50 (м, 4H), 6,86-6,93 (м, 4H), 4,83 (с, 2H), 4,21-4,24 (м, 2H), 3,92 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,73 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,15-3,18 (м, 2H), 3,03 (т, J=5,98 Гц, 2H), 2,85 (с, 6H), 1,94-2,01 (м, 2H). ESI (+)/MS: 658 (M+H)+.

Пример 76

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-феноксиэтил)тиазол-4-карбоновой кислоты (76):

Соединение 49D (51 мг, 0,08 ммоль), фенол (11 мг, 0,12 ммоль) и трифенилфосфин (31 мг, 0,12 ммоль) объединяли с THF (2 мл) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 минут. Ди-трет-бутил азодикарбоксилат (21 мг, 0,092 ммоль) добавляли и перемешивание продолжали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Концентрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 10-50% EtOAc в гексанах. Полученный материал забирали в диоксан (2 мл), обрабатывали HCl (4 н. в диоксане) (0,4 мл, 1,6 ммоль) и нагревали при 70°C в течение нескольких часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Концентрат забирали в диоксан (2 мл), обрабатывали NaOH (4 н. водный) (0,2 мл, 0,8 ммоль) и нагревали при 50°C в течение четырех часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и обрабатывали 1 н. HCl (водн.), чтобы вызвать осаждение продукта. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой, суспендировали в Et2O, фильтровали, промывали Et2O, суспендировали в смеси 1:1 DMSO/MeOH, фильтровали и промывали MeOH, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,88 (1H, с), 12,66 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,66 (1H, д), 7,43 (4H, м), 7,22 (2H, м), 6,90 (3H, м), 4,83 (2H, с), 4,13 (2H, т), 3,73 (2H, т), 3,47 (2H, т), 3,03 (2H, т). MS (ESI(+)) m/e 557 (M+H).

Пример 77

Синтез 5-(3-(4-(2-амино-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (77):

Стадия 1: Получение 4-(2-(N-ацетилацетамидо)-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)фенил ацетата (77A):

4-(2-Амино-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)фенол (0,113 г, 0,5 ммоль) в смеси дихлорметана (2 мл) и THF (1 мл) обрабатывали уксусным ангидридом (0,47 мл, 5 ммоль) и DMAP (0,031 г, 0,25 ммоль) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая желательный продукт: LCMS m/e 352 (M+H).

Стадия 2: Получение N-(1-(4-гидроксифенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)ацетамида (77B):

Соединение 77A (176 мг, 0,5 ммоль) в MeOH (4 мл) обрабатывали K2CO3 (69,1 мг, 0,5 ммоль) и перемешивали при температуре окружающей среды около 40 минут. Реакционную смесь концентрировали, чтобы удалить MeOH, разбавляли EtOAc и подкисляли до pH 5 с применением 1 н. раствора HCl. Смесь выливали в делительную воронку и слои разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (2×40 мл). Объединенные органические слои сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая указанное в заголовке соединение 77B в виде не совсем белого твердого вещества с 67% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 10,26 (1H, с), 9,84 (1H, с), 7,63 (1H, м), 7,20 (5H, м), 6,93 (2H, м), 1,94 (3H, с).

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 77:

Соединение 77B (32 мг, 0,12 ммоль) в DMF (1 мл) обрабатывали NaH (60% масляная дисперсия) (12 мг, 0,3 ммоль). После перемешивания при температуре окружающей среды в течение 5 минут добавляли соединение 2C (63 мг, 0,1 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 1 часа. Дополнительный NaH (60% масляная дисперсия) (12 мг, 0,3 ммоль) добавляли и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение ночи. NaOH (4 н. водн.) (0,25 мл, 1 ммоль) добавляли и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 4 часов. HCl (4 н. в диоксане) (2,5 мл, 10 ммоль) добавляли и смесь нагревали при 70°C в течение нескольких часов. Когда реакция была завершена, как было показано LCMS, реакционную смесь концентрировали, добавляли 1 н. HCl, чтобы вызвать дополнительное осаждение продукта. Твердое вещество отфильтровывали и промывали водой. Твердое вещество перемешивали в Et2O, фильтровали и промывали дополнительным Et2O. Твердое вещество растворяли в смеси 1:1 DMSO/MeOH, фильтровали через шприцевый фильтр, чтобы удалить нерастворенные соли и примеси и очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя Symmetry Prep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 20-90% В за 40 мин), получая указанное в заголовке соединение 77 с 31% выходом в виде не совсем белого твердого вещества: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 12,83 (1H, с), 8,44 (2H, с), 8,02 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,68 (1H, д), 7,41 (8H, м), 7,17 (3H, м), 6,93 (1H, д), 4,84 (2H, с), 4,10 (2H, т), 3,74 (2H, т), 3,23 (2H, м), 3,04 (2H, т), 2,07 (2H, м). MS (ESI(+)) m/e 702 (M+H).

Пример 78

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-(3-{4-[4-(3-пирролидин-1-ил-пропиламино)тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил]фенокси}пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (78):

Стадия 1: Получение 7-бром-N-(3-(пирролидин-1-ил)пропил)тиено[3,2-d]пиримидин-4-амина (78A):

Соединение 78A получали аналогично синтезу соединения 69A путем замещения пропан-2-амина 3-(пирролидин-1-ил)пропан-1-амином: APCI (+)LC/MS: 342 (M+H)+.

Стадия 2: Получение 4-(4-(3-(пирролидин-1-ил)пропиламино)тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил)фенола (78B):

Соединение 78B получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил) фенилбороновой кислоты соединением 77A и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,53 (с, 1H), 8,54 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,96 (д, J=5,68 Гц, 1H), 7,88-7,92 (м, 2H), 6,84-6,87 (м, 2H), 3,58-3,63 (м, 2H), 3,15-3,19 (м, 2H), 1,99-2,09 (м, 2H), 1,91-1,93 (м, 4H). ESI (+)/MS: 355 (M+H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 78:

Указанное в заголовке соединение 78 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 78B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,82 (с, 1H), 9,53 (с, 1H), 8,52 (с, 1H), 8,22 (с, 1H), 8,03-8,07 (м, 1H), 8,01 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,69 (д, J=8,59 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,67 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,32-7,49 (м, 4H), 7,01 (д, J=8,9 Гц, 2H), 4,84 (с, 2H), 4,04 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,73 (т, J=5,83 Гц, 2H), 3,18-3,24 (м, 4H), 3,01-3,05 (м, 4H), 1,78-2,07 (м, 6H). ESI (+)/MS: 831 (M+H)+.

Пример 79

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-(3-{4-[4-(4-метил-пиперазин-1-ил)тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил]фенокси}пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (79):

Стадия 1: Получение 7-бром-4-(4-метилпиперазин-1-ил)тиено[3,2-d]пиримидина (79A):

Соединение 79A получали аналогично синтезу, как описано на стадии 1 примера 69, путем замещения пропан-2-амина 1-метилпиперазином: ESI (+)LC/MS: 314 (M+H)+.

Стадия 2: Получение 4-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)тиено[3,2-d]пиримидин-7-ил)фенола (79B):

Соединение 79B получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил) фенилбороновой кислоты соединением 79A и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,56 (с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 7,85-7,89 (м, 2H), 6,84-6,88 (м, 2H), 4,06 (шир., 4H), 2,91 (шир., 4H), 2,53 (с, 3H). ESI (+)/MS: 327 (M+H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 79:

Указанное в заголовке соединение 79 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 79B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,86 (с, 1H), 9,98 (с, 1H), 8,69 (с, 1H), 8,40 (с, 1H), 8,01 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,69 (д, J=8,9 Гц, 2H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,67 (д, J=7,36 Гц, 1H), 7,32-7,49 (м, 4H), 7,02 (д, J=8,9 Гц, 2H), 4,78-4,84 (м, 4H), 4,05 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,73 (т, J=6,14 Гц, 2H), 3,57 (шир., 6H), 3,18-3,22 (м, 2H), 3,03 (т, J=5,83 Гц, 2H), 2,87 (с, 3H), 2,00-2,09 (м, 2H). ESI (+)/MS: 803 (M+H)+.

Пример 80

Синтез 5-(3-(4-((1S,2S,5R,9S)-9-аминобицикло[3.3.1]нонан-2-ил)фенокси)пропил)-2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)тиазол-4-карбоновой кислоты (80):

Стадия 1: Получение трет-бутил (1S,2S,5R,9S)-2-(4-гидроксифенил)бицикло[3.3.1]нонан-9-илкарбамата (80A):

4-((1S,2S,5R,9S)-9-аминобицикло[3.3.1]нонан-2-ил)фенол,HCl соль (92 мг, 0,344 ммоль) в THF (2 мл) обрабатывали ди-трет-бутил дикарбонатом (0,088 мл, 0,38 ммоль) и Et3N (0,19 мл, 1,37 ммоль) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение трех часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Концентрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 5% MeOH в CH2C12: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 9,09 (1H, с), 7,01 (2H, м), 6,68 (2H, м), 3,53 (1H, м), 3,01 (1H, м), 2,09 (3H, м), 1,69 (10H, м), 1,42 (9H, с).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 80:

Трет-бутил(1S,2S,5R,9S)-2-(4-гидроксифенил)бицикло[3.3.1]нонан-9-илкарбамат 80A (40,5 мг, 0,11 ммоль) в DMF (1 мл) обрабатывали NaH (12 мг, 0,3 ммоль). После перемешивания при температуре окружающей среды в течение 5 минут соединение 2C (63 мг, 0,1 ммоль) добавляли и перемешивание продолжали в течение 1,5 часов. HCl (4 н. HCl в диоксане) (2,5 мл, 10 ммоль) добавляли и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем при 60°C в течение 6 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток суспендировали с 1 н. HCl, фильтровали, промывали водой, суспендировали в Et2O, фильтровали и промывали дополнительным Et2O. Твердое вещество очищали колоночной хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 5% MeOH в CH2C12. Твердое вещество растворяли в диоксане (2 мл), обрабатывали NaOH (4 н. водный) (0,25 мл, 1 ммоль) и перемешивали в течение ночи при к.т. Реакционную смесь подкисляли 1 н. HCl, чтобы вызвать осаждение продукта. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой, суспендировали в Et2O, фильтровали и промывали дополнительным Et2O. Твердое вещество очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 20-90% В за 40 мин), получая указанное в заголовке соединение 80 с 7% выходом в виде не совсем белого твердого вещества: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,85 (1H, с), 12,50 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,97 (2H, д), 7,67 (1H, д), 7,47 (2H, м), 7,37 (2H, м), 7,13 (2H, д), 6,88 (2H, м), 4,83 (2H, с), 3,95 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,17 (2H, м), 3,02 (2H, м), 2,19 (2H, м), 1,98 (5H, м), 1,80 (5H, м), 1,59 (2H, м), 1,40 (3H, м). MS (ESI(+)) m/e 708 (M+H).

Пример 81

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-[3-(4-пиримидин-2-ил-фенокси)пропил]тиазол-4-карбоновой кислоты (81):

Стадия 1: Получение 4-(пиримидин-2-ил)фенола (81A):

Соединение 81A получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил) фенилбороновой кислоты 2-бромпиримидином и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,92 (с, 1H), 8,80 (д, J=4,6 Гц, 2H), 8,22-8,26 (м, 2H), 7,31 (т, J=4,6 Гц, 1H), 6,89-6,89 (м, 2H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 81:

Указанное в заголовке соединение 81 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 81A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,83 (д, J=4,88 Гц, 2H), 8,32 (д, J=8,85 Гц, 2H), 8,03 (д, J=4,88 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,85 Гц, 1H), 7,67 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,34-7,49 (м, 5H), 7,04 (д, J=8,85 Гц, 2H), 4,84 (с,2H), 4,07 (т, J=6,26 Гц, 2H), 3,72 (т, J=5,95 Гц, 2H), 3,18-3,12 (м, 2H), 3,03 (т, J=5,64 Гц, 2H), 2,01-2,07 (м, 2H). ESI (+)/MS: 649 (M+H)+.

Пример 82

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(4-метил-пиперазин-1-ил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (82):

Стадия 1: Получение 4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенола (82A):

Соединение 82A получали аналогично синтезу соединения 62A путем замещения соединения 42C и фенилпиперазина параформальдегидом и 4-(пиперазин-1-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 6,74-6,78 (м, 2H), 6,61-6,65 (м, 2H), 2,93-2,95 (м, 4H), 2,41-2,44 (м, 4H), 2,22 (с, 3H). ESI (+)/MS: 193 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 82:

Указанное в заголовке соединение 82 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 82A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,90 (с, 1H), 9,58 (с, 1H), 8,04 (д, J=7,63 Гц, 2H), 7,80 (д, J=7,93 Гц, 2H), 7,67 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,35-7,50 (м, 4H), 6,90-6,92 (м, 2H), 6,82-6,85 (м, 2H), 4,83 (с,2H), 3,91 (т, J=6,26 Гц, 2H), 3,14-3,17 (м, 2H), 3,03 (т, J=5,95 Гц, 2H), 2,82-2,86 (м, 5H), 1,94-2,00 (м, 2H). ESI (+)/MS: 669 (M+H)+.

Пример 83

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(1-(2-морфолиноэтил)-1H-пиразол-4-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (83):

Стадия 1: Получение трет-бутил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(1-(2-морфолиноэтил)-1H-пиразол-4-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоксилата (83A):

Соединение 83A получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 1 примера 73, заменяя 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол 4-(2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил)этил)морфолином: LCMS (APCI) m/e 936 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 83:

Указанное в заголовке соединение 83 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 73, заменяя соединение 73A соединением 83A: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 8,12 (1H, с), 8,02 (1H, д), 7,89 (1H, с), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,33-7,50 (6H, м), 6,91 (2H, д), 4,84 (2H, с), 4,52 (2H, т), 3,98 (2H, т), 3,77-3,93 (2H, м), 3,73 (2H, т), 3,51-3,65 (2H, м), 3,40-3,50 (2H, м), 3,13-3,25 (6H, м), 3,03 (2H, т), 1,95-2,07 (2H, м); LCMS (APCI) 751 (M+H).

Пример 84

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(4-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропиламино)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (84):

Стадия 1: Получение 4-(4-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропиламино)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенола (84A):

Указанное в заголовке соединение 84A получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 4 примера 44, заменяя изопропиламин 3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропан-1-амином: LCMS (APCI) m/e 368 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 84:

Указанное в заголовке соединение 84 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 54, заменяя соединение 54A соединением 84A. 1H ЯМР (500 МГц, ПИРИДИН-D5) δ м.д. 8,69 (1H, с), 8,44-8,50 (1H, м), 8,41 (2H, д), 8,31 (1H, с), 7,95 (1H, д), 7,89 (1H, д), 7,78 (1H, дд), 7,43 (1H, т), 7,25-7,31 (3H, м), 7,14 (2H, д), 5,15 (2H, с), 4,09 (2H, т), 3,76-3,84 (4H, м), 3,48 (2H, т), 2,90 (2H, т), 2,71 (8H, дд), 2,61 (2H, т), 2,38 (3H, с), 2,14-2,23 (2H, м), 1,93-2,00 (2H, м).

Пример 85

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(5-метил-4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)-1Н-пиразол-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (85):

Стадия 1: Получение 4-(5-метил-4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)-1Н-пиразол-1-ил)фенола (85A):

К раствору 1-(4-метоксифенил)-3-метил-1Н-пиразол-4-карбальдегида (232 мг, 1,073 ммоль) в DCE (3,5 мл) добавляли 1-метилпиперазин (0,119 мл, 1,073 ммоль) и триацетоксиборгидрид натрия (455 мг, 2,146 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи и разбавляли этилацетатом, промывали насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток в тетраметилен сульфоне (5 мл) обрабатывали иодтриметилсиланом (1,327 мл, 9,32 ммоль) при 80°C в течение ночи и охлаждали. Реакционную смесь разбавляли метанолом и очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-30% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 30 мин), получая указанное в заголовке соединение как соль TFA; LCMS (APCI) m/e 287 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 85:

Указанное в заголовке соединение 85 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 54, заменяя соединение 54A соединением 85A: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,87 (1H, с), 8,02 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,57 (1H, д), 7,43-7,51 (2H, м), 7,33-7,41 (4H, м), 7,01-7,07 (2H, м), 4,84 (2H, с), 4,04 (2H, т), 3,97 (2H, с), 3,68-3,79 (4H, м), 3,46-3,53 (2H, м), 3,12-3,26 (7H, м), 3,04 (4H, т), 2,76 (2H, с), 2,25 (3H, с).

Пример 86

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(3-циано-пиразин-2-ил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (86):

Стадия 1: Получение 3-(4-гидроксифенил)пиразин-2-карбонитрила (86A):

Соединение 86A получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты 3-хлорпиразин-2-карбонитрилом и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 10,14 (с, 1H), 8,95 (д, J=2,45 Гц, 1H), 8,73 (д, J=2,45 Гц, 1H), 7,83-7,85 (м, 2H), 6,95-6,99 (м, 2H). ESI (+)/MS: 211 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 86:

Указанное в заголовке соединение 86 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 86A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,96 (д, J=2,45 Гц, 1H), 8,76 (д, J=2,45 Гц, 1H), 8,02 (д, J=7,98 Гц, 2H), 7,90-7,93 (д, J=7,98 Гц, 2H), 7,78 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,67 (d J=7,67 Гц, 1H), 7,33-7,49 (м, 4H), 7,11-7,15 (м, 2H), 4,84 (с,2H), 4,1 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,70-3,74 (м, 2H), 3,19-3,23 (м, 2H), 3,03 (т, J=5,83 Гц, 2H), 2,02-2,09 (м, 2H). ESI (+)/MS: 674 (M+H)+.

Пример 87

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[3-(4-метил-пиперазин-1-ил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (87):

Стадия 1: Получение 3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенола (87A):

Соединение 87A получали аналогично синтезу соединения 62A путем замещения соединения 45C и фенилпиперазина параформальдегидом и 3-(пиперазин-1-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,07 (с, 1H), 6,94-6,98 (м, 1H), 6,36 (д, J=8,13, 2,4 Гц, 2H), 8,28-8,29 (м, 1H), 6,18-6,21 (м, 1H), 3,04-3,07 (м, 4H), 2,41-2,43 (м, 4H), 2,21 (с, 3H). ESI (+)/MS: 193 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 87:

Указанное в заголовке соединение 87 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 87A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,85 (с, 1H), 9,65 (с, 1H), 8,03 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 2H), 7,67 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,34-7,50 (м, 4H), 7,12 (т, J=8,13 Гц, 1H), 6,54 (дд, J=8,13, 2,3 Гц, 1H), 6,50 (т, J=2,15 Гц, 1H), 6,42 (дд, J=8,29, 2,15 Гц, 1H), 4,83 (с,2H), 3,96 (т, J=6,29 Гц, 2H), 3,73 (т, J=5,83 Гц, 2H), 3,10-3,18 (м, 5H), 3,03 (т, J=5,98 Гц, 2H), 2,90-2,98 (м, 2H), 2,85 (с, 3H), 1,95-2,02 (м, 2H). ESI (+)/MS: 669 (M+H)+.

Пример 88

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(2-морфолин-4-ил-этокси)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (88):

Стадия 1: Получение 4-(2-(4-(бензилокси)фенокси)этил)морфолина (88A):

Соединение 88A получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34B и соединения 31F 2-морфолиноэтанолом и 4-(бензилокси)фенолом, соответственно: ESI (+)LC/MS: 314 (M+H)+.

Стадия 2: Получение 4-(2-морфолиноэтокси)фенола (88B):

Соединение 88B получали аналогично синтезу соединения 31F путем замещения соединения 31E соединением 88A: 1H ЯМР (DMSO-d6): S 8,84 (с, 1H), 6,72-6,75 (м, 2H), 6,64-6,67 (м, 2H), 3,96 (д, J=5,83 Гц, 2H), 3,55-3,58 (м, 4H), 2,63 (д, J=5,83 Гц, 2H), 2,42-2,46 (м, 4H). ESI (+)/MS: 224 (M+H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 88:

Указанное в заголовке соединение 88 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 88B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,86 (с, 1H), 9,96 (с, 1H), 8,03 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 2H), 7,67 (д, J=7,36 Гц, 1H), 6,86-6,94 (м, 4H), 4,83 (с,2H), 4,25-4,27 (м, 2H), 3,91-4,02 (м, 4H), 3,73 (т, J=5,98 Гц, 2H), 3,14-3,22 (м, 4H), 3,03 (т, J=5,98 Гц, 2H), 1,94-2,01 (м, 2H). ESI (+)/MS: 700 (M+H)+.

Пример 89

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[4-(4-метил-пиперазин-1-илметил)фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (89):

Стадия 1: Получение 4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)фенола (89A):

Соединение 89A получали аналогично синтезу соединения 62A путем замещения соединения 45C и фенилпиперазина 4-гидроксибензальдегидом и 1-метилпиперазином, соответственно: ESI (+)/MS: 207 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 89:

Указанное в заголовке соединение 89 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 89A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,03 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,67 (д, J=7,06 Гц, 1H), 7,34-7,50 (м, 4H), 7,28 (д, J=8,59 Гц, 2H), 6,93 (д, J=8,59 Гц, 2H), 4,83 (с, 2H), 3,98 (д, J=6,29 Гц, 2H), 3,16-3,19 (м, 4H), 3,03 (т, J=5,83 Гц, 2H), 2,76 (с, 3H), 1,97-2,03 (м, 2H). ESI (+)/MS: 683 (M+H)+.

Пример 90

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-(3-{4-[5-(2-диметиламино-этокси)пиридин-2-ил]фенокси}пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (90):

Стадия 1: Получение 2-(6-хлорпиридин-3-илокси)-N,N-диметилэтанамина (90A):

Соединение 90 получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34C и соединения 31F 2-(диметиламино)этанолом и 6-хлорпиридин-3-олом, соответственно.

Стадия 2: 4-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-ил)фенол (90B):

Соединение 90B получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил) фенилбороновой кислоты соединением 90A и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,56 (с, 1H), 8,29 (д, J=2,76 Гц, 1H), 7,83 (д, J=8,59 Гц, 2H), 7,74 (д, J=8,59 Гц, 2H), 7,41 (дд, J=8,59, 2,76 Гц, 2H), 6,82 (д, J=8,29 Гц, 2H), 4,14 (т, J=5,68 Гц, 2H), 2,64 (т, J=5,68 Гц, 2H), 2,22 (с, 6H). ESI (+)/MS: 258 (M+H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 90:

Указанное в заголовке соединение 90 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 90B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,60 (с, 1H), 8,09 (д, J=2,76 Гц, 1H), 8,02 (д, J=7,37 Гц, 1H), 7,93 (д, J=8,9 Гц, 2H), 7,85 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,29 Гц, 1H), 7,67 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,33-7,51 (м, 5H), 6,99 (д, J=8,9 Гц, 2H), 4,84 (с, 2H), 4,42-4,45 (м, 2H), 4,04 (д, J=6,29 Гц, 2H), 3,83 (д, J=5,83 Гц, 1H), 3,55 (шир., 2H), 3,16-3,21 (м, 2H), 3,03 (т, J=5,83 Гц, 2H), 2,89 (с, 6H), 1,99-2,07 (м, 2H). ESI (+)/MS: 735 (M+H)+.

Пример 91

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-((1-(4-гидроксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-ил)(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропил)амино)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (91):

К раствору соединения 84A (50 мг, 0,136 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли гидрид натрия (27,2 мг, 0,680 ммоль)(60%). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин и добавляли соединение 2C (77 мг, 0,122 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 1 часа и добавляли метанол (3 мл), 10% NaOH и воду (1 мл). Смесь перемешивали в течение ночи, подкисляли TFA и концентрировали. Остаток растворяли в смеси DMSO-метанол и очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-60% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 60 мин), получая указанное в заголовке соединение 91 как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, ПИРИДИН-D5) δ м.д. 8,62 (1H, с), 8,41 (1H, с), 8,35 (2H, д), 7,94 (1H, д), 7,89 (1H, д), 7,77-7,81 (1H, м), 7,43 (1H, т), 7,24-7,33 (5H, м), 5,15 (2H, с), 3,93-4,01 (2H, м), 3,87 (2H, д), 3,81 (2H, т), 3,45 (2H, т), 2,92 (2H, т), 2,79-2,85 (4H, м), 2,62-2,69 (4H, м), 2,42-2,47 (5H, м), 2,18-2,28 (2H, м), 1,89-1,98 (2H, м); LCMS (APCI) m/e 844 (M+H).

Пример 92

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(4-(3-(диметиламино)пропиламино)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (92):

Стадия 1: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(4-(3-(диметиламино)пропиламино)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)фенокси)пропил)пиколината (92A):

К раствору соединения 54A (100 мг, 0,320 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли гидрид натрия (60%, 38,4 мг, 0,960 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин и добавляли соединение 96D (168 мг, 0,256 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 1 часа и очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-70% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 70 мин), получая указанное в заголовке соединение 92A как соль TFA. LCMS (APCI) m/e 839 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 92:

Соединение 92A (90 мг, 0,107 ммоль) и триэтилсилан (37,4 мг, 0,322 ммоль) в DCM (1 мл) обрабатывали TFA (3 мл, 38,9 ммоль) течение 4 ч. Смесь концентрировали и остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-60% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 70 мин), получая указанное в заголовке соединение как соль TFA: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,82 (1H, с), 9,37 (1H, с), 8,55 (1H, т), 8,34 (1H, д), 8,03 (1H, д), 7,96-8,01 (2H, м), 7,79 (1H, д), 7,55-7,63 (2H, м), 7,44-7,50 (2H, м), 7,39-7,43 (1H, м), 7,35 (2H, т), 7,05-7,09 (2H, м), 6,97 (1H, д), 4,93 (2H, с), 3,99 (2H, кв.), 3,87 (2H, т), 3,43-3,70 (2H, м), 3,12-3,18 (2H, м), 2,99 (2H, т), 2,82-2,87 (2H, м), 2,80 (6H, с), 1,91-2,05 (4H, м). LCMS (APCI) 783 (M+H).

Пример 93

Синтез 2-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-5-{3-[2-фтор-4-(4-метил-пиперазин-1-ил)-фенокси]пропил}тиазол-4-карбоновой кислоты (93):

Стадия 1: Получение 1-(бензилокси)-4-бром-2-фторбензола (93A):

4-Бром-2-фторфенол (2,557 г, 13,39 ммоль) и (бромметил)бензол (1,590 мл, 13,39 ммоль) в DMF (20 мл) обрабатывали K2CO3 (3,70 г, 26,8 ммоль) в течение ночи. Реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом и промывали водой. Органический слой сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая указанное в заголовке соединение. LCMS (APCI) m/e 282 (M+H).

Стадия 2: Получение 1-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-4-метилпиперазина (93B):

В высушенный в печи сосуд загружали t-BuONa (360 мг, 3,75 ммоль), Pd2(dba)3 (51,5 мг, 0,056 ммоль) и (S)-BINAP (105 мг, 0,169 ммоль). Толуол (5 мл), соединение 93A (527 мг, 1,875 ммоль) и 1-метилпиперазин (416 мкл, 3,75 ммоль) добавляли. Полученную смесь продували азотом и сосуд герметизировали и нагревали при 80°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-50% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 40 мин), получая указанное в заголовке соединение как соль TFA: LCMS (APCI) m/e 301 (M+H).

Стадия 3: Получение 2-фтор-4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенола (93C):

Соединение 93B (230 мг, 0,766 ммоль) в MeOH (5 мл) обрабатывали 10% Pd/C (48 мг, 0,045 ммоль) в атмосфере H2 в течение ночи. Нерастворимый материал удаляли фильтрованием через целит и фильтрат концентрировали. Остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-30% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 30 мин), получая указанное в заголовке соединение как соль TFA: LCMS (APCI) m/e 211 (M+H).

Стадия 4: Получение указанного в заголовке соединения 93:

Указанное в заголовке соединение 92 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 54, заменяя соединение 54A соединением 93: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,85 (1H, с), 9,64 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,43-7,51 (2H, м), 7,33-7,42 (2H, м), 7,03 (1H, т), 6,92 (1H, дд), 6,70 (1H, дд), 4,83 (2H, с), 3,98 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,40-3,55 (2H, м), 3,33-3,39 (2H, м), 3,09-3,20 (4H, м), 3,03 (2H, т), 2,85-2,95 (2H, м), 2,84 (3H, с), 1,93-2,02 (2H, м). LCMS (APCI) m/e 687 (M+H).

Пример 94

Синтез 6-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-3-{3-[4-(4-метил-пиперазин-1-ил)фенокси]пропил}пиридин-2-карбоновой кислоты (94):

Стадия 1: Получение трет-бутил 3-бром-6-хлорпиколината (94A):

Тозил хлорид (7,7 г, 40,4 ммоль) добавляли к раствору 2-хлор-5-бром пиколиновой кислоты (4 г, 17 ммоль) и пиридина (9,2 мл, 114 ммоль) в 33 мл t-BuOH при 0°C. Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Затем добавляли NaHCO3 (насыщ.) и смесь экстрагировали этилацетатом (3 раза). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором соли и сушили над Na2SO4. Выпаривание органического растворителя давало желательное соединение 94A, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 8,27 (1H, д), 7,63 (1H, д), 1,57 (9H, с).

Стадия 2: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-бромпиколината (94B):

Cs2CO3 (4,1 г, 12,6 ммоль) и сита 4Å сушили в высоком вакууме при 150°C в течение 6-10 часов перед началом реакции. После охлаждения до комнатной температуры соединение 94A (0,736 г, 2,53 ммоль) и соединение 1B (1,62 г, 3 ммоль) переносили в реакционный сосуд и создавали в нем атмосферу азота. 12 мл безводного DMA затем добавляли и реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 12 часов. Охлажденную реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом и 10% лимонной кислотой. Органическую фазу промывали три раза лимонной кислотой, один раз водой и насыщенным раствором соли и сушили над Na2SO4. Концентрирование давало оранжевую пленку/пену. Очистка на Flash Master (SiO2, этилацетат/петролейный эфир 0:100 до 40:60) давала белое твердое вещество (1,15 г, 80% выход): 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,84 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,77 (2H, м), 7,58 (1H, д), 7,40 (4H, м), 6,86 (1H, д), 4,92 (2H, с), 3,78 (2H, т), 3,01 (2H, т), 1,34 (9H, с).

Стадия 3: Получение (Z)-трет-бутил 3-бром-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (94C):

Соединение 94B (350 мг, 0,62 ммоль) растворяли в THF. NEt3 (127 мкл, 0,91 ммоль) и SEMCl (135 мкл, 0,74 ммоль) добавляли последовательно. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем ее концентрировали. Остаток забирали в этилацетат и воду. Водный слой экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и сушили над Na2SO4. После концентрирования остаток очищали флэш-хроматографией, используя flash master: SiO2, этилацетат/петролейный эфир 0:100 до 30:70. Бледно-желтое пенистое твердое вещество 94B получали как смесь двух неразделимых изомеров (276 мг, 64%).

Стадия 4: Получение (Z)-трет-бутил 3-(2-(1,3-диоксолан-2-ил)этил)-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (94D):

Смесь соединения 94C (2,97 г, 4,27 ммоль), дициклогексил(2',6'-диметоксибифенил-2-ил)фосфина (0,35 г, 0,854 ммоль) и ацетата палладия (0,096 г, 0,427 ммоль) в THF (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. К этому раствору добавляли 0,5 M (2-(1,3-диоксолан-2-ил)этил)цинк(II) бромид (17,08 мл, 8,54 ммоль) по каплям при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи. К раствору добавляли 2',6'-диметоксибифенил-2-ил)фосфин (170 мг), ацетат палладия (42 мг) и (2-(1,3-диоксилан-2-ил)этил)цинк(II) бромид (15 мл). Полученную смесь перемешивали в течение еще 6 часов и концентрировали. Остаток загружали на силикагелевую колонку и элюировали смесью 7:3/гексаны:EtOAc, получая 2,75 г желательного продукта 94D, который является смесью двух изомеров. APCI (+) LC/MS: 717 (M+H)+.

Стадия 5: Получение (Z)-трет-бутил 3-(3-оксопропил)-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (94E):

Соединение 94D (1,47 г) растворяли в THF (30 мл). К этому раствору добавляли 5% HCl (10 мл). Реакционную смесь нагревали при 48°C в течение 90 мин. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO3 до прекращения выделения CO2. Раствор концентрировали в вакууме. Остаток повторно растворяли в EtOAc и обрабатывали водой (100 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc (три раза). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 7:3/Hex:EtOAc, получая 1,10 г указанного в заголовке соединения 94E (80%): APCI (+)LC/MS: 673 (М+Н)+

Стадия 6: Получение (Z)-трет-бутил 3-(3-гидроксипропил)-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (94F):

Соединение 94E (0,91 г, 1,351 ммоль) в THF (30 мл) и метаноле (5 мл) обрабатывали NaBH4 (0,102 г, 2,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 1 часа. Растворители удаляли в вакууме. Остаток повторно растворяли в EtOAc и обрабатывали водой. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией, получая 0,75 г указанного в заголовке соединения 94F (82%): APCI (+)LC/MS: 675 (M+H)+.

Стадия 7: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)пиколината (94G):

Указанное в заголовке соединение 94G получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F соединением 94F и соединением 82A, соответственно: ESI (+)LC/MS: 849 (M+H2O-NH4)+.

Стадия 8: Получение указанного в заголовке соединения 94:

Соединение 94G (0,012 г) в диоксане (2 мл) обрабатывали 4 н. HCl в диоксане (2 мл) и метаноле (0,5 мл). Раствор перемешивали при 60°C в течение 6 часов. Растворитель удаляли и остаток очищали преп. ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение 94 как соль TFA: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,85 (д, J=7,02 Гц, 1H), 9,70 (д, J=9,46 Гц, 1H), 8,04 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,55 (д, J=8,85 Гц, 1H), 7,34-7,50 (м, 4H), 6,96 (д, J=8,54 Гц, 1H), 6,90-6,93 (м, 2H),6,81-6,84 (м, 2H), 4,92 (с, 2H), 3,85-3,87 (м, 4H), 3,62-3,64 (м, 2H), 3,12-3,18 (м, 2H), 2,98 (т, J=5,8 Гц, 2H), 2,79-2,86 (м, 7H), 1,86-1,93 (м, 2H), 1,26-1,28 (м, 2H). ESI (+)LC/MS: 663 (M+H)+.

Пример 95

Синтез 6-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-3-(3-{4-[5-(2-диметиламино-этокси)пиридин-2-ил]фенокси}пропил)пиридин-2-карбоновой кислоты (95):

Стадия 1: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-ил)фенокси)пропил)пиколината (95A):

Соединение 95A получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F соединением 94F и соединением 90B, соответственно: ESI (+)LC/MS: 915 (M+H2O-NH4)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 95:

Указанное в заголовке соединение 95 получали аналогично синтезу примера 94 путем замещения соединения 94G соединением 95A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,80 (с, 1H), 9,69 (с, 1H), 8,39 (д, J=3,07 Гц, 1H), 8,03 (д, J=7,67 Гц, 1H), 7,93 (д, J=8,59 Гц, 2H), 7,86 (д, J=8,59 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,98 Гц, 1H), 7,33-7,61 (м, 7H), 6,96-7,00 (м, 1H), 4,93 (с, 2H), 4,43-4,45 (м, 2H), 3,99 (д, J=6,6 Гц, 2H), 3,69 (д, J=5,98 Гц, 2H), 2,98 (т, J=5,83 Гц, 2H), 2,82-2,89 (м, 8H), 1,93-2,01 (м, 2H). ESI (+)/MS: 729 (M+H)+.

Пример 96

Синтез 6-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-3-[3-(4-пиримидин-2-ил-фенокси)пропил]пиридин-2-карбоновой кислоты (96):

Стадия 1: Получение трет-бутил 3-(2-(1,3-диоксилан-2-ил)этил)-6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (96A):

Смесь соединения 94B (8,0 г, 14,15 ммоль), дициклогексил(2',6'-диметоксибифенил-2-ил)фосфина (1,162 г, 2,83 ммоль) и ацетата палладия (0,318 г, 1,415 ммоль) в THF (60 мл) перемешивали при комнатной температуре в течеие 5 мин. К этому раствору добавляли 0,5 M (2-(1,3-диоксолан-2-ил)этил)цинк(II) бромид (56,6 мл, 28,3 ммоль) через капельную воронку при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток загружали на колонку диоксида кремния и элюировали 7:3/гексаны: EtOAc, получая 7,58 г желательного продукта 96A: APCI (+)LC/MS: 587 (M+H)+.

Стадия 2: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-оксопропил) пиколината (96B):

Соединение 96A (7,58 г) растворяли в THF (120 мл). К этому раствору добавляли 5% водн. HCl (100 мл). Реакционную смесь нагревали при 48°C в течение 90 мин. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь гасили насыщ. раствором NaHCO3 до прекращения выделения CO2. Раствор концентрировали в вакууме. остаток повторно растворяли в EtOAc и обрабатывали водой (500 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc (три раза). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, элюируя 7:3/Hex:EtOAc, получая 5,5 г указанного в заголовке соединения 96B (78%): APCI (+)LC/MS: 543 (M+H)+.

Стадия 3: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-гидроксипропил)пиколината (96C):

Соединение 96B (5,5 г, 10,14 ммоль) в THF (100 мл) и метаноле (20 мл) обрабатывали NaBH4 (0,767 г, 20,28 ммоль). Реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 1 часа. Растворители удаляли в вакууме. Остаток повторно растворяли в EtOAc и обрабатывали водой. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали дополнительным EtOAc. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией, получая 5,13 г указанного в заголовке соединения 96C (93%): APCI (+)LC/MS: 545 (M+H)+.

Стадия 4: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-иодпропил)пиколината (96D):

Соединение 96D получали аналогично синтезу соединения 98A путем замещения соединения 94F соединением 96C; APCI (+)LC/MS: 655(M+H)+.

Стадия 5: Получение указанного в заголовке соединения 96:

Указанное в заголовке соединение 96 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 96D: ESI (+)/MS: 643 (M+H)+; 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,84 (с, 1H), 8,863 (д, J=4,48, 2H), 8,32 (д, J=8,85 Гц, 2H), 8,03 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,57-7,61 (м, 2H), 7,46-7,49 (м, 1H), 7,34-7,37 (м, 3H), 7,03 (д, J=9,15 Гц, 2H), 6,98 (д, J=8,54 Гц, 1H), 4,93 (с, 2H), 4,01-4,04 (м, 2H), 3,87 (д, J=5,95 Гц, 2H), 2,99 (д, J=5,65 Гц, 2H), 2,83-2,86 (м, 2H), 1,95-2,01 (м, 2H). ESI (+)/MS: 643 (M+H)+.

Пример 97

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)пиколиновой кислоты (97):

Стадия 1: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил-((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-бром-2-фторфенокси)пропил)пиколината (97A 1) и (Z)-трет-бутил 3-(3-(4-бром-2-фторфенокси)пропил)-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (97A 2):

К раствору соединения 94F (110 мг, 0,163 ммоль), 4-бром-2-фторфенола (62,3 мг, 0,326 ммоль) и трифенилфосфина (64,1 мг, 0,244 ммоль) в THF (3 мл) добавляли (E)-ди-трет-бутил диазен-1,2-дикарбоксилат (56,3 мг, 0,244 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч и добавляли воду (0,5 мл). Смесь концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией, элюируя DCM, получая соединение 97A 1 и соединение 97A 2; LCMS (APCI) m/e 848 (M+H).

Стадия 2: Получение (Z)-трет-бутил 3-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (97B 1) и трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)пиколината (97B 2):

К смеси соединения 97A 1 и соединения 97A 2 (90 мг, 0,106 ммоль), N,N-диметилпроп-2-ин-1-амина (0,034 мл, 0,318 ммоль), (PPh3)2PdCl2 (22,35 мг, 0,032 ммоль), TEA (0,074 мл, 0,531 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли иодид меди(I) (2,022 мг, 0,01 ммоль). Полученную смесь нагревали при 100°C на масляной бане в течение ночи и очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 10%-95% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 60 мин), получая соединения 97B 1 и 97B 2 как соли TFA: LCMS (APCI) m/e 850 (M+H).

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 97:

Соединение 97B 1 и соединение 97B 2 (60 мг, 0,071 ммоль) в DCM (2 мл) обрабатывали 2 н. хлоридом водорода в простом эфире (0,15 мл, 0,423 ммоль) в течение 2 часов и реакционную смесь концентрировали. Остаток в THF (2 мл) и MeOH (2 мл) обрабатывали 10% гидроксидом натрия (256 мкл, 0,639 ммоль) при 70°C в течение ночи и концентрировали. Остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-70% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 60 мин), получая указанное в заголовке соединение 97 как соль TFA: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,79 (1H, с), 10,17 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,53-7,63 (2H, м), 7,45-7,50 (1H, м), 7,39-7,44 (2H, м), 7,28-7,38 (3H, м), 7,17 (1H, т), 6,96 (1H, д), 4,93 (2H, с), 4,30 (2H, с), 4,06 (2H, т), 3,87 (2H, т), 2,99 (2H, т), 2,78-2,90 (8H, м), 1,91-2,05 (2H, м); LCMS (APCI) m/e 664 (M+H).

Пример 98

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (98):

Стадия 1: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-иодпропил)пиколината (98A 1) и (Z)-трет-бутил 3-(3-иодпропил)-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (98A 2):

Соединение 94F (874 мг, 1,3 ммоль) в диэтиловом простом эфире (6,5 мл) и ацетонитриле (2,2 мл) обрабатывали последовательно имидазолом (203 мг, 2,98 ммоль), трифенилфосфином (509 мг, 1,94 ммоль) и иодом (493 мг, 1,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение пяти минут между добавлениями, чтобы дать возможность добавленному реагенту полностью раствориться. Когда все реагенты были добавлены, реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 45 минут, разбавляли EtOAc, промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Концентрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом 5 до 30% EtOAc в гексанах, получая желательные соединения с 89% выходом в виде не совсем белого твердого вещества: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 8,12 (1H, дд), 7,95 (1H, д), 7,70 (1H, д), 7,54 (2H, м), 7,37 (3H, м), 6,90 (1H, д), 5,98 (2H, с), 5,20 (2H, с), 3,82 (2H, т), 3,68 (2H, м), 3,23 (2H, т), 2,98 (2H, т), 2,61 (2H, дд), 1,97 (2H, м), 1,45 (9H, с), 0,88 (2H, м), -0,19 (9H, с).

Стадия 2: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)фенокси)пропил)пиколината (98B 1) и (Z)-трет-бутил 3-(3-(4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)фенокси)пропил)-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (98B 2):

(4-Гидроксифенил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанон (66,1 мг, 0,3 ммоль) в DMF (2 мл) обрабатывали NaH (24 мг, 0,6 ммоль). После перемешивания при температуре окружающей среды в течение 15 минут добавляли соединения 98A 1 и 98A 2 (157 мг, 0,2 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Концентрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 5% MeOH в CH2C12, получая 97,5 мг (56% выход) желательных продуктов 98B 1 и 98B 2: LCMS m/e 877 (M+H).

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 98:

Соединение 98B 1 и соединение 98B 2 обрабатывали последовательно триэтилсиланом (0,177 мл, 1,1 ммоль) и TFA (1,5 мл, 19,5 ммоль). Минимальное количество дихлорметана (0,1 мл) добавляли, чтобы сделать реакционную смесь гомогенной. Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 6 часов. Материал очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе ВЭЖХ Gilson, используя SymmetryPrep Shield RP18 prep картридж, 250 мм × 21,20 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в Н2О; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 10-70% В за 40 мин), получая указанное в заголовке соединение 98 с 63% выходом в виде не совсем белого твердого вещества: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,84 (1H, с), 9,70 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,59 (2H, т), 7,41 (6H, м), 6,97 (3H, м), 4,93 (2H, с), 4,18 (2H, м), 3,99 (2H, т), 3,87 (2H, т), 3,24 (4H, м), 3,08 (2H, м), 2,99 (2H, т), 2,82 (5H, м), 1,96 (2H, м). MS (ESI(+)) m/e 691 (M+H).

Пример 99

Синтез 6-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-3-(3-гидрокси-пропил)пиридин-2-карбоновой кислоты (99):

К раствору соединения 84A (60 мг, 0,163 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли гидрид натрия (32,7 мг, 0,816 ммоль)(60%). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин и добавляли соединение 96D (107 мг, 0,163 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 3 часов и очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-50% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 70 мин), получая указанное в заголовке соединение 99: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,81 (1H, с), 8,04 (1H, дд), 7,79 (1H, д), 7,60 (1H, д), 7,53 (1H, д), 7,45-7,50 (1H, м), 7,39-7,43 (1H, м), 7,32-7,38 (2H, м), 6,95 (1H, д), 4,92 (2H, с), 3,86 (2H, т), 3,37 (2H, т), 2,99 (2H, т), 2,63-2,70 (2H, м), 1,58-1,69 (2H, м). LCMS (APCI) 489 (M+H).

Пример 100

Синтез 6-[8-(бензотиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-3-{3-[4-(3-диметиламино-пропил)-2-фтор-фенокси]пропил}пиридин-2-карбоновой кислоты (100):

Стадия 1: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(3-(диметиламино)пропил)-2-фторфенокси)пропил)пиколината (100A 1) и (Z)-трет-бутил 3-(3-(4-(3-(диметиламино)пропил)-2-фторфенокси)пропил)-6-(8-(3-((2-(триметилсилил)этокси)метил)бензо[d]тиазол-2(3H)-илиденкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (100A 2):

Соединения 97B 1 и 97B 2 (25 мг, 0,029 ммоль) в MeOH (5 мл) обрабатывали оксидом платины(IV) (5,34 мг, 0,024 ммоль) в течение ночи. Нерастворимый материал отфильтровывали через целит и фильтрат концентрировали, получая соединения 100A 1 и 100A 2: LCMS (APC1) m/e 854 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 100:

Соединение 99 (20 мг, 0,023 ммоль) в DCM (0,5 мл) и MeOH (0,5 мл) обрабатывали 2 н. HCl в простом эфире (5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней и концентрировали. Остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (подвижная фаза: 0%-70% ацетонитрил в 0,1% водном растворе TFA в течение 60 мин), получая указанное в заголовке соединение 100 как соль TFA: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,82 (1H, с), 9,34 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,60 (1H, д), 7,56 (1H, д), 7,45-7,51 (1H, м), 7,39-7,43 (1H, м), 7,33-7,38 (2H, м), 7,01-7,11 (2H, м), 6,92-6,97 (2H, м), 4,93 (2H, с), 3,94-4,01 (2H, м), 3,87 (2H, т), 2,95-3,04 (4H, м), 2,79-2,85 (2H, м), 2,76 (3H, с), 2,75 (3H, с), 2,52-2,58 (2H, м), 1,84-1,98 (4H, м). LCMS (APCI) m/e 668 (M+H).

Пример 101

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(2-фтор-4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (101):

Указанное в заголовке соединение 101 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 54, заменяя соединение 54A и соединение 2C соединением 93 и соединением 96D, соответственно: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,80 (1H, с), 9,61 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,60 (1H, д), 7,55 (1H, д), 7,44-7,51 (1H, м), 7,39-7,43 (1H, м), 7,33-7,38 (2H, м), 7,02 (1H, т), 6,90-6,98 (2H, м), 6,70 (1H, дд), 4,93 (2H, с), 3,93 (2H, т), 3,86 (2H, т), 3,67-3,75 (2H, м), 3,26-3,37 (2H, м), 3,06-3,20 (2H, м), 2,99 (2H, т), 2,76-2,93 (7H, м), 1,86-1,99 (2H, м); LCMS (APCI) m/e 681 (M+H).

Пример 102

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(2-(диметиламино)этил)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (102):

4-(2-(Диметиламино)этил)фенол хлороводородную кислоту (60,5 мг, 0,300 ммоль) в DMF (2 мл) обрабатывали Et3N (84 мкл, 0,60 ммоль), перемешивали в течение 10 минут и затем обрабатывали NaH (24,0 мг, 0,60 ммоль). После перемешивания в течение 15 минут реакционную смесь обрабатывали соединением 98A 1 и 98A 2 (157 мг, 0,2 ммоль) и перемешивали в течение 5 часов. По истечении этого времени реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Концентрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 6% MeOH в CH2Cl2. Хроматографированный материал обрабатывали последовательно триэтилсиланом (220 мкл, 1,377 ммоль) и TFA (1 мл, 12,98 ммоль). Дихлорметан (0,3 мл) добавляли по каплям до тех пор, пока реакционная смесь не становилась гомогенной. Реакционную смесь перемешивали в атмосфере N2 при температуре окружающей среды в течение 6 часов. После этого растворители выпаривали и соединение очищали ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляли на автоматизированной системе Waters ВЭЖХ, используя SunFire CIS prep картридж, 250 мм × 50 мм внутр. диаметр, 10 мкм, и расход 25 мл/мин; λ=214, 245 нм; подвижная фаза A, 0,1% TFA в H2O; подвижная фаза B, CH3CN; линейный градиент 0-70% В за 30 мин), получая продукт в виде светло-желтого твердого вещества с 10% выходом: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,84 (1H, с), 9,29 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,61 (1H, м), 7,56 (1H, д), 7,48 (1H, м), 7,42 (1H, м), 7,36 (2H, м), 7,17 (2H, м), 6,96 (1H, д), 6,88 (2H, м), 4,92 (2H, с), 3,89 (4H, м), 3,24 (4H, м), 2,98 (2H, м), 2,87 (2H, м), 2,81 (6H, д), 1,93 (2H, м). MS (ESI(+)) m/e 636 (M+H).

Пример 103

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)пропил)-2-фторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (103):

Стадия 1: Получение 3-(4-(бензилокси)-3-фторфенил)-N,N-диметилпроп-2-ин-1-амина (103A):

Указанное в заголовке соединение 103A получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 97, заменяя соединение 97A соединением 93A: LCMS (APC1) 284 (M+H).

Стадия 2: Получение 4-(3-(диметиламино)пропил)-2-фторфенола (103B):

Указанное в заголовке соединение 103B получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 3 примера 93, заменяя соединение 93B соединением 103A: LCMS (APC1) 198 (M+H).

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 103:

Указанное в заголовке соединение 103 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 54, заменяя соединение 54A соединением 103B. Указанное в заголовке соединение 103 получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,90 (2H, шир.с), 9,43 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,43-7,50 (2H, м), 7,34-7,42 (2H, м), 7,02-7,10 (2H, м), 6,94 (1H, д), 4,83 (2H, с), 4,02 (2H, т), 3,68-3,76 (2H, м), 3,14-3,20 (2H, м), 2,96-3,06 (4H, м), 2,76 (3H, с), 2,75 (3H, с), 2,51-2,58 (2H, м), 1,97-2,04 (2H, м), 1,84-1,91 (2H, м). LCMS (APCI) 674 (M+H).

Пример 104

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(1-метилпиперидин-4-иламино)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (104)

Стадия 1: Получение 4-(1-метилпиперидин-4-иламино)фенола (104A):

Соединение 104A получали аналогично синтезу соединения 62A путем замещения 1-фенилпиперазина и соединения 45C 4-аминофенолом и 1-метилпиперидин-4-оном, соответственно: ESI (+)/LC/MS: 207 (M+H)+.

Стадия 2: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(1-метилпиперидин-4-иламино)фенокси)пропил)пиколината (104B):

Соединение 104B получали как соль TFA аналогично синтезу на стадии 2 примера 51, путем замещения соединения 51A и соединения 2C соединением 104A и соединением 96D, соответственно: APCI (+)/LC/MS: 733 (M+H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 104:

Указанное в заголовке соединение 104 получали аналогично синтезу соединения 94 путем замещения соединения 94G соединением 104B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,84 (с, 1H), 9,40 (с, 1H), 8,04 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,24 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,55 (д, J=8,85 Гц, 1H), 7,34-7,49 (м, 4H), 6,96 (д, J=8,85 Гц, 1H), 6,60-6,79 (м, 1H), 4,92 (с, 2H), 3,81-3,88 (м, 4H), 2,97-3,00 (м, 4H), 2,74-2,80 (м, 4H), 2,10-2,13 (м, 2H), 1,87-1,92 (м, 4H). ESI (+)/MS: 677 (M+H)+.

Пример 105

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (105):

Соединение 87A (0,032 г, 0,017 ммоль) в DMF (3 мл) обрабатывали 60% гидридом натрия (0,018 г, 0,46 ммоль) при 0°C. Раствор перемешивали в течение 10 мин. К этому раствору добавляли соединение 96D (0,10 г, 0,15 ммоль). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь затем нагревали при 60°C в течение 4 часов. Затем ее гасили метанолом (1 мл). Конц. HCl (0,5 мл) добавляли и раствор фильтровали через шприцевый фильтр. Фильтрат затем очищали преп. ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение 105 как соль TFA: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,85 (с, 1H), 9,61 (с, 1H), 8,04 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,79 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,55 (д, J=8,85 Гц, 1H), 7,34-7,49 (м, 4H), 7,13 (т, J=8,24 Гц, 1H), 6,97 (д, J=8,24 Гц, 1H), 6,55 (дд, J=8,39, 1,98 Гц, 1H), 6,50 (с, 1H), 6,42 (д, J=8,24, 2,14 Гц, 1H), 4,93 (с, 2H), 3,82-3,92 (м, 6H), 3,09-3,13 (м, 2H), 2,99 (т, J=5,64 Гц, 1H), 2,90-2,94 (м, 2H), 2,79-2,85 (м, 4H), 1,89-1,95 (м, 2H). ESI (+)/MS: 663 (M+H)+.

Пример 106

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (106):

Стадия 1: Получение 1-(2-(4-(бензилокси)фенокси)этил)пирролидина (106A):

Соединение 106A получали аналогично синтезу соединения 35A путем замещения соединения 34D и соединения 31F 2-(пирролидин-1-ил)этанолом и 4-(бензилокси)фенолом, соответственно: DCI (+)MS: 298 (M+H)+.

Стадия 2: Получение 4-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенола (106B):

Соединение 106B получали аналогично синтезу соединения 31F путем замещения соединения 31E соединением 106A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 8,88 (с, 1H), 6,72-6,75 (м, 2H), 6,64-6,67 (м, 2H), 3,94 (д, J=6,1 Гц, 2H), 2,72 (д, J=5,95 Гц, 2H), 2,48-2,51 (м, 4H), 1,65-1,68 (м, 4H) ESI (+)/MS: 208 (M+H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 106:

Указанное в заголовке соединение 106 получали аналогично синтезу соединения 105 путем замещения соединения 87C соединением 106B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,84 (с, 1H), 9,68 (с, 1H), 8,04 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,24 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,56 (д, J=8,54 Гц, 1H), 7,34-7,50 (м, 4H), 6,86-6,97 (м, 6H), 4,92 (с, 2H), 4,19-4,21 (м, 2H), 3,86-3,89 (м, 6H), 3,08-3,13 (м, 4H), 2,98 (т, J=5,8 Гц, 1H), 2,79-2,82 (м, 2H), 1,87-2,05 (м, 6H) ESI (+)/MS: 678 (M+H)+.

Пример 107

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)пропил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (107):

Стадия 1: Получение 4-(3-(диметиламино)пропил)фенола (107A):

Соединение 107A получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 1 примера 100, заменяя соединение 97B 1 и соединение 97B 2 соединением 74A: LCMS (APCI) 180 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 107:

Указанное в заголовке соединение 107 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 54, заменяя соединение 54A соединением 107A. Указанное в заголовке соединение 107 получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,90 (2H, шир., с), 9,41 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,44-7,50 (2H, м), 7,34-7,41 (2H, м), 7,10 (2H, д), 6,84 (2H, д), 4,83 (2H, с), 3,94 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,17 (2H, т), 2,96-3,06 (4H, м), 2,76 (3H, с), 2,75 (3H, с), 2,51-2,56 (2H, м), 1,96-2,02 (2H, м), 1,83-1,90 (2H, м); LCMS (APCI) 656 (M+H).

Пример 108

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2,5-дифтор-4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (108):

Стадия 1: Получение 1-(бензилокси)-4-бром-2,5-дифторбензола (108A):

Соединение 108A получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 1 примера 93, заменяя 4-бром-2-фторфенол 4-бром-2,5-дифторфенолом.

Стадия 2: Получение 1-(4-(бензилокси)-2,5-дифторфенил)-4-метилпиперазина (108B):

Соединение 108B получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 93, заменяя соединение 93A соединением 108A: LCMS (APCI) 319 (M+H).

Стадия 3: Получение 2,5-дифтор-4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенола (108C):

Соединение 108C получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 3 примера 93, заменяя соединение 93B соединением 108B: LCMS (APCI) 229 (M+H).

Стадия 4: Получение указанного в заголовке соединения 108:

Указанное в заголовке соединение 108 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 2 примера 54, заменяя соединение 54A соединением 108C. Указанное в заголовке соединение 108 получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,89 (2H, с), 9,64 (1H, с), 8,03 (1H, д), 7,79 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,43-7,50 (2H, м), 7,33-7,41 (2H, м), 7,05-7,16 (2H, м), 4,83 (2H, с), 4,02 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,45-3,56 (2H, м), 3,34-3,48 (2H, м), 3,11-3,24 (4H, м), 3,03 (2H, т), 2,87-2,98 (2H, м), 2,85 (3H, д), 1,94-2,03 (2H, м). LCMS (APCI) 705 (M+H).

Пример 109

Синтез трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(2-хлорпиридин-4-илокси)пропил)пиколината (109):

Стадия 1: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(2-хлорпиридин-4-илокси)пропил)пиколината (109A):

Соединение 109A получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A и соединения 2C соединением 96D и 2-хлорпиридин-4-олом, соответственно: APCI (+)/LC/MS: 657 (M+H)+.

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 109B:

Указанное в заголовке соединение 109 получали аналогично синтезу соединения 94 путем замещения соединения 94G соединением 109A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,85 (с, 1H), 8,17 (д, J=5,8 Гц, 1H), 8,04 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,24 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,56 (д, J=8,85 Гц, 1H), 7,34-7,49 (м, 4H), 7,09 (д, J=2,44 Гц, 1H), 6,94-6,97 (м, 2H), 4,93 (с, 2H), 4,06 (т, J=6,26 Гц, 2H), 3,87 (т, J=5,95 Гц, 2H), 2,98 (т, J=5,8 Гц, 2H), 2,78-2,82 (м, 2H), 1,92-1,98 (м, 2H); ESI (+)/MS: 600 (M+H)+.

Пример 110

2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((6-(3-морфолинопропокси)нафталин-2-ил)этинил)тиазол-4-карбоновая кислота (110):

Стадия 1: Получение 6-((триметилсилил)этинил)нафталин-2-ола (110A):

К смеси 6-бромнафталин-2-ола (3,8 г, 17,04 ммоль), этинилтриметилсилана (7,08 мл, 51,1 ммоль), (PPh3)2PdCl2 (1,79 г, 2,56 ммоль), TEA (12 мл, 85 ммоль) в THF (12 мл) добавляли иодид меди(I) (0,324 г, 1,70 ммоль). Полученную смесь нагревали при 70°C на масляной бане в течение ночи и охлаждали. К смеси добавляли силикагель (40 г) и полученную смесь сушили в вакууме. Порошок геля загружали на колонку силикагеля, элюировали DCM, получая соединение 110A.

Стадия 2: Получение 6-этинилнафталин-2-ола (110B):

Соединение 110A (770 мг, 3,20 ммоль) в MeOH ( 5 мл) и THF (10 мл) обрабатывали К2СО3 (885 мг, 6,41 ммоль) при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали водой. Органический слой концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией, элюировали DCM, получая соединение 110В.

Стадия 3: Получение 4-(3-(6-этинилнафталин-2-илокси)пропил)морфолина (110C):

К смеси соединения 110B (57 мг, 0,34 ммоль), 3-морфолинопропан-1-ола (98 мг, 0,68 ммоль) и трифенилфосфина (133 мг, 0,508 ммоль) в THF (1,5 мл) добавляли (E)-ди-трет-бутил диазен-1,2-дикарбоксилат (117 мг, 0,508 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч и нерастворимый материал отфильтровывали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (градиент: 0-55% ацетонитрил в 0,1% водной TFA/40 мин), получая соединение 110C: LCMS (APCI) 296 (M+H).

Стадия 4: Получение метил 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-((6-(3-морфолинопропокси)нафталин-2-ил)этинил)тиазол-4-карбоксилата (110D):

К смеси соединения 47D (200 мг, 0,283 ммоль), соединения 110C, (PPh3)2PdCl2 (49,7 мг, 0,071 ммоль), TEA (0,394 мл, 2,83 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли иодид меди(I) (5,40 мг, 0,028 ммоль). Полученную смесь нагревали при 120°C на масляной бане в течение 5 ч. Реакционную смесь концентрировали и очищали ВЭЖХ с обращенной фазой, элюируя 10-95% ацетонитрилом в 0,1% водной TFA в течение 70 мин, получая соединение 110D: LCMS (APCI) 875 (M+H).

Стадия 5: Получение указанного в заголовке соединения 110:

Указанное в заголовке соединение 110 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 3 примера 97, заменяя соединение 97B 1 и соединение 97B 2 соединением 110D. Указанное в заголовке соединение 110 получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,88-13,12 (с, шир., 1H), 12,94 (с, 1H), 9,64-9,69 (шир.с, 1H), 8,04-8,06 (м, 2H), 7,88 (д, J=9,0 Гц, 1H), 7,83 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,78-7,83 (м, 1H), 7,69-7,72 (м, 1H), 7,46-7,52 (м, 3H), 7,43 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,35-7,38 (м, 2H), 7,22 (дд, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 4,94-4,95 (шир.с, 2H), 4,21 (т, J=5,9 Гц, 2H), 3,98-4,06 (м, 2H), 3,78-3,81 (м, 2H), 3,62-3,68 (м, 2H), 3,48-3,54 (м, 2H), 3,01-3,15 (м, 6H), 2,17-2,24 (м, 2H); LCMS (APCI); 730 (M+H).

Пример 111

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(6-(3-морфолинопропокси)нафталин-2-ил)этил)тиазол-4-карбоновой кислоты (111):

Стадия 1: Получение 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(2-(6-(3-морфолинопропокси)нафталин-2-ил)этил)тиазол-4-карбоновой кислоты (111A):

Указанное в заголовке соединение 111A получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 1 примера 100, заменяя соединения 97B 1 и соединение 97B 2 соединением 110D: LCMS (APCI) 879 (M+H).

Стадия 2: Получение указанного в заголовке соединения 111:

Указанное в заголовке соединение 111 получали, используя такую же процедуру, как описанная на стадии 3 примера 97, заменяя соединение 97B 1 и соединение 97B 2 соединением 111A. Указанное в заголовке соединение 111 получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,87-12,94 (с, шир., 1H), 12,27-12,80 (с, шир., 1H), 9,65-9,71 (с, шир., 1H), 8,05 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,80 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,74 (д, J=9,2 Гц, 1H), 7,72 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,67 (д, J=6,7 Гц, 1H), 7,63-7,64 (м, 1H), 7,46-7,50 (м, 1H), 7,43-7,46 (м, 1H), 7,34-7,42 (м, 3H), 7,28 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,12 (дд, J=8,9, 2,5 Гц, 1H), 4,81 (с, 2H), 4,16 (т, J=5,8 Гц, 2H), 4,01 (д, J=12,2 Гц, 2H), 3,71 (т, J=6,0 Гц, 2H), 3,65 (т, J=12,1 Гц, 2H), 3,50 (д, J=11,9 Гц, 2H), 3,07-3,16 (м, 2H), 2,96-3,04 (м, 3H), 2,15-2,22 (м, 2H). LCMS (APCI) 734 (M+H).

Пример 112

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиримидин-2-ил)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (112):

Стадия 1: Получение 2-хлорпиримидин-5-ола (112A):

2-Хлор-5-метоксипиримидин (0,46 г, 3,18 ммоль) в метилен хлориде (10 мл) обрабатывали 1,0 н. трибромидом бора (16 мл, 16 ммоль) при комнатной температуре. Раствор перемешивали в течение ночи. После этого реакционную смесь распределяли между насыщенным NaHCO3 и DCM. Водный слой экстрагировали дополнительным DCM. Объединенные органические слои сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, получая 0,26 г соединения 112A (62%): 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 10,03 (с, 1H), 8,30 (с, 2H). ESI (-)/MS: 129 (M-H)-.

Стадия 2: Получение 2-(2-хлорпиримидин-5-илокси)-N,N-диметилэтанамина (112B):

Соединение 112B получали аналогично синтезу на стадии 1 примера 35 путем замещения соединения 34D и соединения 31F 2-(диметиламино)этанолом и соединением 112A, соответственно: ESI (+)MS: 201 (M+H)+.

Стадия 3: Получение 4-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиримидин-2-ил)фенола (112C):

Соединение 112C получали аналогично синтезу соединения 34D путем замещения соединения 34C и 4-(гидроксиметил) фенилбороновой кислоты соединением 112B и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенолом, соответственно: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,80 (с, 1H), 8,56 (с, 2H), 8,12-8,15 (м, 1H), 6,83-6,86 (м, 2H), 4,23 (т, J=5,8 Гц, 2H), 2,65 (т, J=5,65 Гц, 2H), 2,22 (с, 6H); ESI (+)/MS: 259 (M+H)+.

Стадия 4: Получение 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(4-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиримидин-2-ил)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (112D):

Указанное в заголовке соединение 112D получали аналогично синтезу соединения 105 путем замещения соединения 87A соединением 112C: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,84 (с, 1H), 9,70 (с, 1H), 8,64 (с, 2H), 8,23 (д, J=8,85 Гц, 2H), 8,04 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,24 Гц, 1H), 7,57-7,61 (м, 2H), 7,34-7,49 (м, 4H), 7,02 (т, J=8,85 Гц, 2H), 6,97 (д, J=8,85 Гц, 1H), 4,93 (с, 2H), 4,52-4,54 (м, 2H), 4,01 (т, J=6,41 Гц, 2H), 3,87 (т, J=5,95 Гц, 2H), 2,95 (т, J=5,8 Гц, 2H), 2,82-2,85 (м, 2H), 1,95-2,00 (м, 2H); ESI (+)/MS: 730 (M+H)+.

Пример 113

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-(3-(2-(диметиламино)этокси)фенокси)пропил)пиколиновой кислоты (113):

Стадия 1: Получение 2-(3-(бензилокси)фенокси)-N,N-диметилэтанамина (113A):

Соединение 113A получали аналогично синтезу на стадии 1 примера 35 путем замещения соединения 34D и соединения 31F 2-(диметиламино)этанолом и 3-(бензилокси)фенолом, соответственно: DCI (+)MS: 272 (M+H)+.

Стадия 2: Получение 3-(2-(диметиламино)этокси)фенола (113B):

Соединение 113B получали аналогично синтезу соединения 31F путем замещения соединения 31E соединением 113A: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 9,34 (с, 1H), 7,03 (т, J=8,03 Гц, 1H), 6,30-6,36 (м, 3H), 3,96 (д, J=5,95 Гц, 2H), 2,58 (д, J=5,8 Гц, 2H), 2,20 (с, 2H) ESI (+)/MS: 182 (M+H)+.

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 113:

Указанное в заголовке соединение 113 получали аналогично синтезу соединения 105 путем замещения соединения 87A соединением 113C: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,85 (с, 1H), 9,59 (с, 1H), 8,64 (с, 2H), 8,04 (д, J=7,63 Гц, 1H), 7,80 (д, J=8,24 Гц, 1H), 7,61 (д, J=7,32 Гц, 1H), 7,56 (д, J=8,54 Гц, 1H), 7,34-7,49 (м, 4H), 7,19 (т, J=8,09 Гц, 1H), 6,96 (д, J=8,85 Гц, 1H), 4,93 (с, 2H), 4,27-4,29 (м, 2H), 3,92 (т, J=6,56 Гц, 2H), 3,87 (т, J=5,95 Гц, 2H), 2,99 (т, J=5,8 Гц, 2H), 2,79-2,82 (м, 2H), 1,91-1,97 (м, 2H); ESI (+)/MS: 652 (M+H)+.

Пример 114

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (114):

Указанное в заголовке соединение 114 получали как соль TFA аналогично синтезу соединения 51 путем замещения соединения 51A соединением 106B: 1H ЯМР (DMSO-d6): δ 12,90 (с, 1H), 9,75 (с, 1H), 8,04 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,80 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,68 (д, J=7,32 Гц, 2H), 7,35-7,50 (м, 4H), 6,86-6,93 (м, 4H), 4,83 (с, 2H), 4,19-4,21 (м, 2H), 3,92 (д, J=6,26 Гц, 2H), 3,72 (д, J=5,95 Гц, 1H), 3,55 (шир., 4H), 3,10-3,18 (м, 4H), 3,03 (т, J=5,8 Гц, 2H), 1,85-2,02 (м, 6H). ESI (+)/MS: 684 (M+H)+.

Пример 115

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2,5-дифтор-4-(2-морфолиноэтиламино)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (115):

Указанное в заголовке соединение 115 получали, используя такую же процедуру, как описанная для примера 108, заменяя 1-метилпиперазин 2-морфолиноэтанамином. Указанное в заголовке соединение получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, ПИРИДИН-D5) δ м.д. 8,05 (1H, д), 7,98 (1H, д), 7,85 (1H, д), 7,50 (1H, т), 7,26-7,38 (3H, м), 7,12 (1H, дд), 6,81 (1H, дд), 5,20 (2H, с), 4,11 (2H, т), 3,83 (1H, с), 3,79 (2H, т), 3,65-3,73 (4H, м), 3,52-3,59 (2H, м), 3,21 (2H, т), 2,88 (2H, т), 2,58 (2H, т), 2,42 (4H, шир., с), 2,18-2,27 (2H, м). LCMS (APCI) 735 (M+H).

Пример 116

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2-фторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (116):

Указанное в заголовке соединение 116 получали, используя такую же процедуру, как описанная для стадии 3 примера 97, заменяя соединение 94F соединением 47F. Указанное в заголовке соединение получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 10,12 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,34-7,50 (5H, м), 7,31 (1H, д), 7,18 (1H, т), 4,83 (2H, с), 4,30 (2H, с), 4,10 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,12-3,23 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,87 (6H, с), 1,97-2,09 (2H, м); LCMS (APCI) 670 (M+H).

Пример 117

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-3-фторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (117):

Указанное в заголовке соединение 117 получали, используя такую же процедуру, как описанная в примере 97, заменяя 4-бром-2-фторфенол и соединение 94F 4-бром-3-фторфенолом и соединением 47F, соответственно. Указанное в заголовке соединение получали как соль TFA: 1H ЯМР (SOO МГЦ, DMSO-D6) δ м.д. 12,91 (1H, с), 10,13 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,68 (1H, д), 7,44-7,51 (3H, м), 7,34-7,42 (2H, м), 7,03 (1H, дд), 6,77-6,82 (1H, м), 4,83 (2H, с), 4,32 (2H, с), 4,08 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,15-3,24 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,86 (6H, с), 1,98-2,08 (2H, м). LCMS (APCI) 670 (M+H).

Пример 118

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)-2,5-дифторфенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (118):

Указанное в заголовке соединение 118 получали, используя такую же процедуру, как описанная в примере 97, заменяя 4-бром-2-фторфенол и соединение 94F 4-бром-2,5-дифторфенолом м соединением 47F, соответственно. Указанное в заголовке соединение 118 получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 10,19 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,53 (1H, дд), 7,43-7,50 (2H, м), 7,34-7,42 (2H, м), 7,26 (1H, дд), 4,83 (2H, с), 4,35 (2H, с), 4,12 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,12-3,21 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,87 (6H, с), 1,96-2,10 (2H, м); LCMS (APCI) 688 (M+H).

Пример 119

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-(3-(2-хлор-4-(3-(диметиламино)проп-1-инил)фенокси)пропил)тиазол-4-карбоновой кислоты (119):

Указанное в заголовке соединение (119) получали, используя такую же процедуру, как описанная для примера 97, заменяя 4-бром-2-фторфенол и соединение 94F 4-бром-2-хлорфенолом и соединением 47F, соответственно. Указанное в заголовке соединение 119 получали как соль TFA: 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-D6) δ м.д. 12,90 (1H, с), 10,09 (1H, с), 8,04 (1H, д), 7,80 (1H, д), 7,67 (1H, д), 7,62 (1H, д), 7,44-7,50 (3H, м), 7,35-7,41 (2H, м), 7,15 (1H, д), 4,83 (2H, с), 4,30 (2H, с), 4,11 (2H, т), 3,72 (2H, т), 3,17-3,23 (2H, м), 3,03 (2H, т), 2,88 (6H, с), 2,00-2,10 (2H, м); LCMS (APCI) 686 (M+H).

Пример 120

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколиновой кислоты (120):

Стадия 1: Получение трет-бутил 6-фторпиколината (120A):

Тозил хлорид (915 мг, 4,8 ммоль) добавляли к раствору 2-фтор-пиколиновой кислоты (254 мг, 2 ммоль) и пиридина (1,08 мл, 13,4 ммоль) в 3,6 мл t-BuOH при 0°C. Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Затем добавляли водный раствор NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3 раза). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором соли и сушили над Na2SO4. Сырое соединение очищали флэш-хроматографией, используя SiO2 (петролейный эфир/EtOAc 100:0 до 90:10). Продукт 120A получали в виде белого твердого вещества (m=326 мг, 83%): 1H ЯМР (м.д., CDCl3) 1,6 (с, 9H), 7,05-7,11 (м, 1H), 7,85-7,93 (м, 2H).

Стадия 2: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиколината (120B):

Cs2CO3 (831 мг, 2,55 ммоль) и 500 мг сит 4Å сушили в высоком вакууме при 150°C в течение 6 часов перед началом реакции. Сразу после охлаждения соединение 120A (100 мг, 0,51 ммоль) и соединение 1B (327 мг, 0,61 ммоль) переносили в реакционный сосуд и создавали в нем атмосферу азота. 1,5 мл безводного DMA затем добавляли и реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 3 часов и затем при 100°C в течение 2 часов. Охлажденную реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом и лимонной кислотой 10%. Органическую фазу промывали три раза лимонной кислотой, один раз водой и насыщенным раствором соли и сушили над Na2SO4. Концентрирование органической фазы давало оранжевую пленку/пену. Этот остаток очищали флэш-хроматографией, используя SiO2 (AcOEt/петр. эф. от 0:100 до 40:60), получая белое твердое вещество (72 мг, 29% выход): 1H ЯМР (м.д., CDCl3) 1,54 (с, 9H), 3,01 (т, J=5,85 Гц, 2H), 4,05 (т, J=6 Гц, 2H), 5,04 (с, 2H), 6,92 (дд, J=8,55 и 0,63 Гц, 1H), 7,09-7,29 (м, 5H), 7,34 (дд, J=7,32 и 0,63 Гц, 1H), 7,60-7,51 (м, 2H), 7,81 (д, J=9 Гц, 1H).

Стадия 3: Получение указанного в заголовке соединения 120:

Соединение 1B (71 мг, 0,15 ммоль) растворяли в 2 мл EtOH. Два миллилитра воды затем добавляли с последующими 2 мл концентрированной HCl. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 72 часов, пока LCMS не показала полное превращение. Газообразный азот барботировали через смесь, чтобы удалить HCl и EtOH; белое твердое вещество осаждалось. Его собирали фильтрованием, промывали водой и небольшим количеством Et2O и сушили в вакууме, получая продукт в виде белого твердого вещества (42 мг, 67%): 1H ЯМР (м.д., DMSO) 2,98 (т, J=6,15 Гц, 2H), 3,92 (т, J=6,06 Гц, 2H), 4,95 (с, 2H), 7,02 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,27 (д, J=7,3 Гц, 7,31-7,49 (м, 4H), 758 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,66-7,71 (м, 1H), 7,77 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,02 (д, J=7,9 Гц); LCMS m/z 431,0 (M+1).

Пример 121

Синтез 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-феноксипропил)пиколиновой кислоты (121):

Стадия 1: Получение трет-бутил 2-бром-5-хлорбензоата (121A):

Тозил хлорид (7,7 г, 40,4 ммоль) добавляли к раствору 2-хлор-5-бром пиколиновой кислоты (4 г, 17 ммоль) и пиридина (9,2 мл, 114 ммоль) в 33 мл t-BuOH при 0°C. Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. NaHCO3 (насыщ.) затем добавляли и смесь экстрагировали этилацетатом (3 раза). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором соли и сушили над Na2SO4. Концентрирование давало желательное соединение 121A (количественно). Его использовали на следующей стадии без дополнительной очистки: 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,85 (д, 1H), 7,26 (д, 1H), 1,63 (с, 9H).

Стадия 2: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-бромпиколината (121B):

Cs2CO3 (4,1 г, 12,6 ммоль) и сита 4Å сушили в высоком вакууме при 150°C в течение 6-10 часов до начала реакции. Сразу после охлаждения соединение 121A (0,736 г, 2,53 ммоль) и соединение 1B (1,62 г, 3 ммоль) переносили в реакционный сосуд, в котором создавали атмосферу азота. 12 мл безводного DMA затем добавляли и реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 12 часов. Охлажденную реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом и лимонной кислотой 10%. Органическую фазу промывали три раза лимонной кислотой, один раз водой и насыщенным раствором соли и сушили над Na2SO4. Концентрирование органической фазы давало оранжевую пленку/пену. Очистка на Flash Master (SiO2, этилацетат/петролейный эфир от 0:100 до 40:60) давала продукт 121B в виде белого твердого вещества (1,15 г, 80% выход): 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,86 (м, 1H), 7,71 (д, 1H), 7,60 (д, 1H), 7,50 (м, 1H), 7,42-7,22 (м, 5H), 6,67 (д, 1H), 4,99 (с, 2H), 3,95 (т, 2H), 3,01 (т, 2H), 1,56 (с, 9H).

Стадия 3: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-бромпиколината (121C):

Соединение 121B (350 мг, 0,62 ммоль) растворяли в THF, NEt3 (127 мкл, 0,91 ммоль) и SEMCl (135 мкл, 0,74 ммоль) добавляли последовательно. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем ее концентрировали. Остаток забирали в этилацетат и воду. Водный слой экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и сушили над Na2SO4. После концентрирования остаток очищали флэш-хроматографией, используя flash master: SiO2, этилацетат/петролейный эфир 0:100 до 30:70. Получали бледно-желтое пенистое твердое соединение 121C (276 мг, 64%). ЯМР показывает два N-SEM продукта: 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3), смесь изомеров (1:0,6) δ 8,28 (д, 1H), 7,86 (д, 1H), 7,71 (д, 1H), 7,62-7,42 (м, 5H), 7,38-7,26 (м, 5H), 6,80 (д, 1H), 6,55 (д, 0,6H), 5,98 (с, 2H), 5,53 (с, 1H), 5,19 (с, 2H), 4,67 (с, 1H), 4,00 (т, 2H), 3,93 (т, 1H), 3,75 (т, 2H), 3,61 (т, 1H), 3,02 (м, 3H), 1,61 (с, 9H), 1,53 (с, 5H), 0,98 (т, 2H), 0,82 (т, 1H), -0,09 (с, 9H).

Стадия 4: Синтез трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-феноксипроп-1-инил)пиколината (121D):

К предварительно высушенному Cs2CO3 (378 мг, 1,16 ммоль) добавляли соединение 121C (180 мг, 0,26 ммоль), 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенил (18 мг, 0,04 ммоль) и бис(ацетонитрил)дихлорпалладий(II) (3,2 мг, 0,012 ммоль). Атмосферу продували азотом и после добавления пропионитрила (3,0 мл) смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин перед добавлением фенил пропаргилового простого эфира (205 мг, 1,54 ммоль). Смесь нагревали при 105°C в течение 1 ч, охлаждали до комнатной температуры, концентрировали, разбавляли насыщенным NH4Cl и экстрагировали EtOAc (3×). Органические фазы промывали насыщенным раствором соли (1×), сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали. Сырой материал очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент PE:EtOAc 100:0-85:15, получая продукт (90 мг, 47%): 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 8,28 (д, 1H), 7,69 (д, 1H), 7,57 (м, 2H), 7,47 (т, 1H), 7,38-7,26 (м, 5H), 6,99 (м, 3H), 6,82 (д, 1H), 5,98 (с, 2H), 5,24 (с, 2H), 4,92 (с, 2H), 4,07 (т, 2H), 3,74 (т, 2H), 3,02 (т, 2H), 1,60 (с, 9H), 0,97 (т, 2H), -0,09 (с, 9H).

Стадия 5: Получение трет-бутил 6-(8-(бензо[d]тиазол-2-ил((2-(триметилсилил)этокси)метил)карбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-3-(3-феноксипропил)пиколината (121E):

PtO2 (4,8 мг, 0,020 ммоль) добавляли к раствору соединения 2D (60 мг, 0,080 ммоль) в EtOAc (2,0 мл) и смесь перемешивали в атмосфере H2 в течение 2 ч. Смесь фильтровали, промывали EtOAc и концентрировали, получая продукт 121D (55 мг, 92%): 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 8,26 (д, 1H), 7,69 (д, 1H), 7,57 (д, 1H), 7,48 (т, 1H), 7,40-7,23 (м, 6H), 6,97-6,82 (м, 4H), 5,97 (с, 2H), 5,20 (с, 2H), 4,03 (т, 2H), 3,96 (т, 2H), 3,75 (т, 2H), 3,04 (т, 2H), 2,88 (т, 2H), 2,06 (м, 2H), 1,62 (с, 9H), 0,97 (т, 2H), -0,09 (с, 9H).

Стадия 6: Получение указанного в заголовке соединения 121:

Соединение 121E (55 мг, 0,073 ммоль) растворяли в 1 мл EtOH. Воду (1 мл) добавляли с последующим 1 мл концентрированной HCl. Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 12 часов. Твердые вещества, которые осаждались, собирали фильтрованием и промывали водой. Твердое вещество очищали препаративной ВЭЖХ, получая белое твердое вещество: 1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ 2,09 (т, 2H), 3,06 (т, 2H), 3,21 (т, 2H), 3,91 (т, 2H), 3,97 (т, 2H), 5,21 (с, 2H), 6,87-6,94 (м, 4H), 7,25-7,42 (м, 5H), 7,46-7,50 (м, 2H), 7,56 (м, 1H), 8,01(м, 1H); LCMS m/z 565,7 (M+1).

Пример 122

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)пиримидин-4-карбоновой кислоты (122):

Смесь соединения 1B (309 мг, 1 ммоль), 2-хлорпиримидин-4-карбоновой кислоты (134,5 мг, 1 ммоль), карбоната цезия (975 мг, 3 ммоль) в 2 мл DMSO нагревали до 60°C в течение 6 ч. Продукт выливали в воду и осаждали из раствора и собирали фильтрованием. Сырой материал хроматографировали (SiO2, 20% метанол в дихлорметане), получая соединение 37 в виде белого порошка: LCMS (97% чистота); время удерживания = 8,70 мин, 432,0 [M + H]; 1H ЯМР (300 МГц, DMSO): 8,60 (1H, д), 8,25 (1H, д), 7,80 (1H, м), 7,60 (1H, д), 7,45 (1H, д), 7,1-7,2 (2H, м), 7,0 (1H, т), 6,75 (1H, д), 5,25 (2H, с), 3,95 (2H, т), 2,85 (2H, т).

Пример 123

Синтез 2-(8-(бензо[d]тиазол-2-илкарбамоил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил)-5-хлорпиримидин-4-карбоновой кислоты (123).

Смесь соединения 1B (309 мг, 1 ммоль), 5-хлор-2-метансульфонил-пиримидин-4-карбоновой кислоты (236 мг, 1 ммоль) и карбоната цезия (975 мг, 3 ммоль) в 2 мл DMSO нагревали до 60°C в течение 6 ч. Продукт осаждали из раствора добавлением к воде и собирали фильтрованием. Сырой материал хроматографировали (SiO2, 20% метанол в дихлорметане), получая указанное в заголовке соединение 123 в виде белого порошка: LCMS (96% чистота): m/z 465,9 [M + H].

Пример 124

Определение конкурентности соединений по изобретению с F-Bak в отношении сайта связывания (Bcl-xL) белка семейства Bcl-2 с применением анализа связывания Time Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (TR-FRET):

Испытуемые соединения разбавляли сериями в DMSO, начиная с 50 мкM (2× исходная концентрация; 10% DMSO) и 10 мкл переносили в 384-луночный планшет. Затем 10 мкл смеси белок/проба/антитело добавляют в каждую лунку при конечных концентрациях, перечисленных в таблице 2.

Таблица 2
Белок Проба Белок
(нМ)
Проба
(нМ)
Антитело Антитело
(нМ)
GST-Bcl-xL F-Bak (GQVGRQLAIIGDK
(6-FAM)INR-амид)
1 100 Tb-анти-GST 1

Образцы затем смешивают в шейкере в течение 1 минуты, затем инкубируют в течение дополнительных 2 часов при комнатной температуре. В каждый планшет для анализа включали смеси проба/антитело и белок/антитело/проба в качестве отрицательного и положительного контроля, соответственно. Флуоресценцию измеряли на ENVISION (Perkin Elmer), используя 340/35 нм фильтр возбуждения и фильтры эмиссии 520/525 (F-Bak) и 495/510 нм (Tb-меченное анти-his антитело). Константы ионизации (Ki) определяли, используя уравнение Ванга (смотри, Wang, Z.X. An exact mathematical expression for describing competitive binding of two different ligands to a protein molecule. FEES Lett. 1995 360:111-114). Анализ TR-FRET может быть осуществлен в присутствии сыворотки человека (HS) или фетальной бычьей сыворотки (FBS) с изменяющимися концентрациями.

Для сравнения, определение конкурентности соединений по изобретению в отношении других сайтов связывания белка семейства Bcl-2 (например, Bcl-2, Mcl-1) с применением анализа связывания TR-FRET осуществляли путем замещения GST-Bcl-Xl в анализе TR-FRET другим GST-меченным белком, например, GST-Bcl-2, GST-Mcl-1, собственного производства.

Результаты анализа TR-FRET (Ki в микромолях) для характерных соединений по изобретению, представленных в таблице 1, приведены ниже в том порядке, в котором они следуют в таблице 1: 0,077, 0,0002, 0,0002, 0,0003, 0,001, 0,0002, 0,007, 0,00006, 0,00007, 0,0001, 0,0001, 0,0003, 0,0007, 0,006, 0,003, 0,006, 0,004, 0,004, 0,009, 0,003, 0,00005, 0,019, 0,002, 0,007, 0,0003, 0,003, 0,001, 0,001, 0,023, 0,0004, 0,0001, 0,017, 0,0003, 0,004, 0,004, 0,005, 0,004, 0,005, 0,0002, 0,0004, 0,0001, 0,002, 0,005, 0,00007, 0,001, 0,001, 0,0001, 0,00005, 0,012, 0,002, 0,0003, 0,00005, 0,00005, 0,00005, 0,0006, 0,00005, 0,00007 (w/1% HS), 0,0005, 0,0003, 0,176, 0,0003, 0,13, 0,248, 0,00005, 0,00007, 0,0001, 0,00005, 0,0002, 0,0005, 0,040, 0,174, 0,003, 0,00008, 0,00005, 0,00005, 0,008, 0,007, 0,00005, 0,0001, 0,0005, 0,00005, 0,00005, 0,00005, 0,00005, 0,00005, 0,00007, 0,00005, 0,00005, 0,0001, 0,00005, 0,0007, 0,00005, 0,00005, 0,002, 0,00005, 0,0001, 0,00005, 0,010, 0,125, 0,0005, 0,0007, NA, NA, NA, 0,15, 0,0662, 0,197, 0,66, NA, NA, NA, 0,0106, 0,0189, 0,00018, NA, 0,0006, 0,00015, 0,00004, 0,000004, 0,003, 0,000006 (w/1% HS), 0,00001, 0,00004, 0,00002, 0,00005, NA, 0,0006, NA, NA, NA, 0,002, 0,0002, 0,000023, NA, 0,0003, 0,001, 0,0002, 0,00007, 0,00002, NA, 0,000487, 0,000088, NA, NA, NA, NA, >0,66 и NA. Используемое здесь сокращение "NA" означает, что данные для соединения отсутствуют.

В одном варианте осуществления соединения по изобретению селективно ингибируют белок семейства Bcl-2, Bcl-xL, больше других белков семейства Bcl-2, таких как Bcl-2 и Mcl-1. Для сравнения, данные (Ki в микромолях) из определения конкурентности конкретных соединений по изобретению (например, соединений 52, 58, 64, 70, 74, 76, 81, 82, 84, 88, 93, 94, 97 и 100 в таблице 1) с F-Bak за сайт связывания Bcl-2, полученные при анализе связывания TR-FRET - 0,13, 0,31, 0,09, 0,5, 0,06, 0,35, 0,11, 0,12, 0,14, 0,3, 0,155, 0,572, 0,272 и 0,219, соответственно.

Пример 125

Определение конкурентности соединений по изобретению с Bim26-mer за сайт связывания белка семейства Bcl-2 с применением анализа связывания Alpha Screen Bcl-xL:

Анализ ALPHASCREEN™ белков BH3 использовали для идентификации активных малых молекул, отобранных скринингом белка семейства Bcl-2, например, Bcl-xL, hmMcl-1. Чтобы произвести точный расчет IC50, соединения испытывали, как положено, при исходных концентрациях 100 мкМ и/или 1 мкМ и сериями титровали 3-кратно свыше 11 разбавлений.

Анализ использует методику ALPHASCREEN™, которая основана на покрытых гидрогелем акцепторных и донорных шариках, которые имеют функциональные группы для соединения с белком (например, GST-hmMcl-1, GST-Bcl-xL или GST-Biotin) и пептидом (Biotin-Bak, Biotin-Bim), соответственно. Шарики приходят в тесную близость, когда белок и пептиды взаимодействуют. Донорные шарики содержат фотосенсибилизатор, который преобразует кислород в возбужденную форму O2 при возбуждении 680 нм. Энергия трансформируется из синглетного кислорода и взаимодействует с хемилюминесцентными агентами на акцепторном шарике, результатом чего является световая эмиссия при 520-620 нм. Соединения по изобретению, когда их добавляют к реакции, могут уменьшать интенсивность люминесценции в зависимости от ингибирования схожести акцепторных и донорных шариков. Исходя из этой информации рассчитывали IC50 каждого соединения.

Материалы

Белки GST-Bcl-xL, GST-hmMcl-1 и биотинилированный GST готовили сами и хранили как маточные растворы при -80°С. Биотинилированный Bak и биотинилированный Bim пептиды приобретали у Auspep и хранили как 500 мкМ маточные растворы в 100% DMSO при -80°С. Индикаторный набор ALPHASCREEN™ GST (глутатион-S-трансфераза) получали от Perkin Elmer Lifesciences (Cat #6760603R). Proxiplates, белые 384-луночные плоскодонные планшеты приобретали у Intherpath Services, Melbourn (Cat #784075). Уплотнители для покрывания планшетов приобретали у Proscience, Melbourn (Cat #784075). DMSO приобретали у AnalaR. 384-глубоколуночные планшеты и полипропиленовые 50 мкл V-донные полипропиленовые планшеты для соединений приобретали у Matrical.

Получение соединений

Соединения по изобретению получали как 10 мМ растворы с 100% DMSO на день перед проведением анализа. 12 мкл 100% DMSO и 6 мкл 10 мМ соединения (т.е. 3,333 мМ, конечные 100 мкМ) добавляли в столбцы 1 и 12 в полипропиленовых 50 мкл, V-донных планшетах для соединений. Чтобы достичь конечной концентрации соединения 1 мкМ, на отдельном матричном планшете 28 мкл 100% DMSO и 2 мкл 10 мМ соединения добавляли в лунку, перемешивали лунку, 2 мкл этого раствора отбирали и добавляли к 38 мкл 100% DMSO. 20 мкл этого раствора добавляли к матричному планшету для испытаний. Несколько контрольных соединений включали в планшеты для испытаний. Для контрольных лунок только 15 мкл 100% DMSO добавляли в соответствующие лунки каждого планшета. Планшеты для соединений затем сериями разбавляли 2-кратно, используя MiniTrak. Сразу после завершения титрований планшет для соединений покрывали фольговым уплотнением, чтобы предотвратить испарение.

Приготовление буфера

Буферы для анализа и шариков были свежеприготовленными. Каждый титрационный планшет для соединений анализировали в двух экземплярах. Следующие объемы были достаточными для прогона 12 Proxiplates (4 планшета для анализа участвовали в двух экземплярах в каждом анализе Bcl×1, hmMcl и количественном анализе)

Буфер для анализа
[основа] [конечный] [объем на 100 мл]
1 М Hepes pH 7,4 50 мМ 5 мл
1 M DTT 10 мМ 1 мл
4 M NaCl 100 мМ 2,5 мл
10% Tween-20 0,05% 0,5 мл
10 мг/мл казеин 0,1 мг/мл 1 мл
Milli-Q Н2О 90 мл
Буфер для шариков
[основа] [конечный] [объем на 100 мл]
1 M Tris-HCl pH 7,5 50 мМ 5 мл
10% Tween-20 0,01% 0,1 мл
10 мг/мл казеин 0,1 мг/мл 1 мл
Milli-Q Н2О 93,9 мл

Получение белка и пептида и проведение анализа

1. Буферы для анализа и для шариков использовали для приготовления акцепторных и донорных растворов. Шарики ALPHASCREEN™ являются светочувствительными и поэтому их готовили в темной комнате. 2,5 мкл шариков добавляли на 1 мл буфера.

2. Объем белка или пептида для добавления рассчитывали, используя следующую формулу:

C1 = конечная кконцентрация белка/пептида

С2 = начальная концентрация белка/пептида

V1 = суммарный объем акцепторного/донорного раствора

V2 = объем исходного белка/пептида для добавления к акцепторному/донорному раствору

3. Компоненты анализа готовили как отдельные акцепторные и донорные растворы. Акцепторный раствор содержал акцепторные шарики и целевой белок, тогда как донорный раствор содержал донорные шарики и биотинилированный пептид.

hmMcl-1
[акцепторный раствор] [мл] [донорный раствор] [мл]
буфер для анализа 10 мл буфер для анализа 10 мл
буфер для шариков 10 мл буфер для шариков 10 мл
акцепторные шарики 50 мкл донорные шарики 50 мкл
11,1 мкМ hmMcl-1 2,9 мкл 500 мкМ B-Bak 0,32 мкл
конечный белок [0,8 нМ] конечный пептид [4 нМ]
Bcl-xL
[акцепторный раствор] [мл] [донорный раствор] [мл]
буфер для анализа 10 мл буфер для анализа 10 мл
буфер для шариков 10 мл буфер для шариков 10 мл
акцепторные шарики 50 мкл донорные шарики 50 мкл
23,5 мкМ Bcl-xL 1,02 мкл 500 мкМ B-Bim 0,16 мкл
конечный белок [0,6 нМ] конечный пептид [2 нМ]
контр-GST
[акцепторный раствор] [мл] [донорный раствор] [мл]
буфер для анализа 10 мл буфер для анализа 8 мл
буфер для шариков 10 мл буфер для шариков 8 мл
акцепторные шарики 50 мкл донорные шарики 50 мкл
77 мкМ B-GST 1,04 мкл
конечный белок [2 нМ]

4. После приготовления растворов их оставляли инкубироваться в течение 30 минут при комнатной температуре, чтобы дать возможность шарикам связаться с белком и пептидом.

5. 50 мкл раствора Bcl-xL, 50 мкл раствора hmMcl-1 и 50 мкл раствора биотинилированного-GST добавляли в отдельные глубокие лунки на планшете для анализа. Контрольные 50 мкл буфера для анализа/для шариков добавляли в отдельные луночные планшеты (без белка).

6. 50 мкл раствора Bim и 50 мкл раствора Bak добавляли в отдельные глубоколуночные планшеты.

7. Перенос 0,3 мкл образца из планшета для соединений в каждый планшет для анализа.

8. Инкубировали в течение 30 мин при к.т., затем добавляли 5 мкл донорного раствора. После добавления донорного раствора осторожно дренировали и запечатывали индивидуально клейкой пленкой.

9. Планшеты затем помещали на ридер планшетов Envision 2103 для анализа.

Данные анализа

Процентное ингибирование рассчитывали по следующему уравнению:

х = RFU, полученный после обработки соединения

µ- = RFU, полученный для отрицательных контролей (контроли без белка)

µ+ = RFU, полученный для положительных контролей (контроли DMSO носителя)

Величины IC50 получали нелинейным приближением методом наименьших квадратов указанных данных, например, с помощью уравнения 205 (программа Xlfit3):

Качество результатов анализа отслеживали путем определения простого множителя Z для каждого планшета для анализа, где простой множитель Z=>0,5 был для результатов, которые считаются надежными (Zhang et al., J. Biomol. Screening, 4:67-73, 1999).

Результаты Alphascreen (IC50 в микромолях) для характерных соединений по изобретению, которые являются соединениями в таблице 1, против белка Bcl-xL приведены ниже в том порядке, в котором они следуют в таблице 1: 0,10, 0,001, 0,001, 0,0008, 0,002, 0,002, 0,025, 0,0005, 0,0008, 0,001, 0,002, 0,004, 0,010, 0,020, 0,010, 0,010, 0,020, 0,006, NA, 0,008, 0,0003, 0,050, 0,001, 0,027, 0,0009, 0,005, 0,007, 0,008, 0,117, 0,0003, 0,0003, 0,050, NA, 0,005, 0,010, NA, NA, 0,005, NA, NA, 0,0007, 0,007, NA, NA, 0,004, NA, NA, 0,0003, 0,080, 0,010, 0,006, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, 1,6, 0,574, NA, NA, NA, NA, NA, NA, 0,26, 0,57, NA, NA, NA, 0,0001, 0,086, 0,034, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA, 0,14, NA, NA, NA, 0,865, 7,5, 4, 0,31, 0,124, 0,0776, 0,598, 19, 0,030, 0,003, 0,136, 0,041, 0,0009, NA, NA, NA, 0,0002, 0,0002, 0,017, 0,0004, 0,0003, 0,00014, 0,0004, NA, 0,0924, 0,0106, 0,34, NA, NA, 0,020, 0,0009, 0,0012, 0,0011, 0,0022, 0,0096, 0,00045, NA, NA, NA, 3,8, NA, NA, NA, NA, NA, NA, NA и NA. Используемое здесь сокращение "NA" означает, что данные для соединения недоступны.

Пример 126

Анализ выживания клеток:

Общее:

Эффективность соединений по данному изобретению может быть также определена в анализах уничтожения на основе клеток с использованием разнообразных клеточных линий и мышиных моделей опухолей. Например, их действие на жизнеспособность клеток может быть установлено на панели культивируемых онкогенных и неонкогенных клеточных линий, а также на первичных популяциях клеток человека или мыши. В одном примерном наборе условий 5000-20000 клеток культивируют при 37°С и 10% СО2 в пригодной для выращивания среде (например, 100 мкл модифицированной по Дульбекко среды Игла, обогащенной 10% фетальной телячьей сыворотки, аспарагиназой и 2-меркаптоэтанолом в случае pre-B Eµ-Myc мышиных опухолей) в 96-луночных планшетах. Живые клетки и общую численность клеток можно отслеживать после от нескольких часов до нескольких дней инкубации с 1 нМ-100 мкМ соединений, чтобы установить те, которые убивают при ЕС50<10 мкМ. Жизнеспособность клеток может быть определена по способности клеток не впускать иодид пропидиния (10 мкг/мл, путем иммунно-флуоресцентного анализа эмиссионных длин волн 660-675 нм на проточном цитометре (BD FACScan) или путем люминесцентной регистрации после инкубирования с CELL TITER-GLO®. В качестве варианта, может быть использован высокопроизводительный калориметрический анализ, такой как CELL TITER® 96 водный нерадиоактивный анализ пролиферации клеток (Promega). Гибель клеток путем апоптоза подтверждается предварительным инкубированием клеток с 50 мкМ ингибитора каспазы, такого как zVAD-fmk.

а. Анализ жизнеспособности клеток для Mcl-1-/- мышиных эмбриональных фибробластов (MEF):

Нейтрализация обоих анти-апоптозных белков и Bcl-xL, и Mcl-1 перед тем, когда клетка подвергается апоптозу по находящемуся ниже по потоку пути Bax/Bak. Смотри Chen, L., et al. Mol. Cell (2005) 17, 393-403; Willis, S.N. et al. Genes Dev. (2005) 19, 1294-1305. Соединение, которое нацелено только на Bcl-xL не должно влиять на нормальные клетки, но должно убивать некоторые раковые клетки, если они больше зависят от Bcl-xl и меньше от других анти-апоптозных белков, например, Mcl-1, при жизни. Чтобы показать это, соединения по изобретению испытывали на их воздействие на выживание мышиных эмбрио-фибробластов (MEF) дикого типа (wt), клеток MEF, в которых выбиты оба Bax и Bak (BB DKO), клеток MEF, которые экспрессировали Noxa, и клеток MEF, которые экспрессировали Bad. Noxa специфически нейтрализует Mcl-1. Отсюда, клетки MEF, которые экспрессируют Noxa, отображают типы раковых клеток, которые зависят от Bcl-xL при жизни и должны быть значительно более чувствительны к уничтожению соединением, нацеленным на Bcl-xl, чем клетки MEF, в которых и Bcl-xL, и Mcl-1 являются защитными.

В этом анализе клетки Mcl-1(-/-) использовали для подтверждения того, что апоптоз клетки в присутствии малых молекул миметиков BH3 происходил преимущественно благодаря инактивации Bcl-xL. Эта инактивация не затрагивает Bax/Bak и имеет результатом апоптоз. Люминесцентный анализ жизнеспособности клеток CELLTTTER-GLO является однородным способом определения численности живых клеток в культуре, основанным на количественном определении наличия ATP. Количество ATP находится в определенном соотношении с присутствующими метаболически активными клетками, так что после лизиса клеток количество присутствующего ATP пропорционально количеству измеренной люминесценции.

Материалы

Мышиные эмбриональные фибробласты Mcl-1(-/-) (MEF) являются линией прилипающих клеток собственного производства. MEF выращивали в Iwaki склянках 75 см2 для культивирования ткани (cat # 3123-075) со средой FMA, которая состоит из:

- 89% DME Kelso

- 10% инактивированной теплом фетальной телячьей сыворотки (PCS) (Hyclone cat # SH30396.03)

- 1% 10 мM аспарагина (Fluka cat # 11149)

- 275 мкл разбавления 1:2000 2-меркаптоэтанола добавляют к конечному объему 500 мл FMA (Sigma cat #M7522; разбавлен в MT-PBS)

FMA хранили при 4°C и использовали при 37°C. Клетки MEF культивировали в среде FMA и собирали в MT-PBS с трипсином. Для анализа жизнеспособности клеток MEF клетки высевали отдельно в планшеты с 10% FCS-FMA и 1% FCS-FMA.

1% FCS-FMA состоит из:

- 98% DME Kelso

- 1% инактивированной теплом фетальной телячьей сыворотки (PCS) (Hyclone cat # SH30396.03)

- 1% 10 мM аспарагина (Fluka cat # 11149)

- 275 мкл разбавления 1:2000 2-меркаптоэтанола добавляют к конечному объему 500 мл (Sigma cat #M7522; разбавлен в MT-PBS)

Анализы проводили, используя белые плоскодонные 384-луночные планшеты Greiner grade (Interpath #781098). Соединения подготавливали в Matrical 384-луночных, 25 мкл V-донных планшетах (cat #MP101-2-PP), герметизировали алюминиевой фольгой от Beckman Coulter (cat #538619) и хранили при 12°C в течение ночи. Приготовление соединений и титрования осуществляли в DMSO сорта AnalaR (Merck cat #1,02952.2500). Применяемым анализом жизнеспособности клеток был CELLTITRE-GLO™, который коммерчески доступен от Promega (cat # G7572), хранили при -20°C и использовали при 37°C.

Автоматизированные системы, которые могут быть использованы в этом анализе, включают: 1) Многоканальное раздаточное устройство - MULTIDROP 384 (ThermoLabsystems) использовали для распределения клеток в асептических условиях на планшетах для анализа; 2) Систему минитрак - MiniTrak system от Perkin Elmer использовали для титрования планшетов для соединений; 3) систему зимарк - Zymark Sciclone ALH3000 System с игольчатым наконечником на 100 нл использовали для добавления соединения к клеткам; 4) EnVision - ридер планшетов EnVision использовали для определения выживаемости посредством обнаружения люминесценции.

Соединения по изобретению получали как 10 мM раствор в 100% DMSO и хранили при -20°C. Соединения оттаивали до комнатной температуры и распределяли на 384-луночном Matrical планшете. Стандартные контрольные соединения, например, 32,3 мM этопозида, добавляли на планшет в качестве контролей.

Планшеты можно было герметизировать фольгой и хранить при 12°C в течение ночи. Планшеты для соединений оставляли оттаивать при комнатной температуре и соединения титровали 1:3 в 100% DMSO на MiniTrak (смотри раздел способы ниже - день 3).

Способ

1. День один - Расщепление клеток

Среду отсасывали и клетки Me1-1(-/-) промывали 10 мл теплой MT-PBS. MT-PBS отсасывали и добавляли 1 мл трипсина. Склянки T75 инкубировали при 37°C, пока клетки не становились обособленными. 4 мл 10% среды PCS FMA добавляли к трипсинизированным клеткам и весь объем переносили в 50 мл пробирку для центрифуги и центрифугировали в течение 3 минут при 250 g. Супернатант отсасывали и осадок повторно суспендировали в 10 мл 10% PCS FMA. 3 мл этой суспензии клеток добавляли в прозрачную 75 см2 склянку, содержащую 17 мл 10% среды PCS FMA, осуществляя таким образом расщепление 3:10. Остальную суспензию клеток использовали, чтобы осуществить расщепление 1:50 в другой 75 см2 склянке для дальнейшего культивирования.

2. День два - Аналитические планшеты для высевания и планшеты для подготовки соединений

Клетки собирали согласно способу стадии 1 и осадок повторно суспендировали в 3 мл 10% PCS FMA. Численность клеток определяли подсчетом в счетной камере Neubauer и разбавление рассчитывали, чтобы достичь плотности 1×104 клеток мл-1 (500 клеток на лунку в 50 мкл среды). Отдельные разбавления получали в 50 мл 10% раствора PCS FMA и 50 мл 1% раствора PCS FMA, соответственно.

Четыре аналитических планшета подготавливали на один планшет для соединений. Два 384-луночных планшета, содержащие клетки Mcl-1(-/-) в 10% PCS FMA и два других планшета, содержащие клетки Mcl-1(-/-) в 1% PCS FMA.

Используя многоканальное раздаточное устройство, 25 мкл клеток раздавали в асептических условиях во все 384 лунки аналитических планшетов. Планшеты оставляли в покое в несобранном слое при комнатной температуре приблизительно на 30 минут (минимизирует побочные эффекты) и затем помещали как единственный слой в инкубатор при 37°C. Планшеты оставляли инкубироваться в течение ночи.

3. День три - Титрование планшетов для соединений и обработка клеток

Планшеты для соединений титровали, осуществляя серии 3-кратных 11-точечных разбавлений, используя 100% DMSO, на MiniTrak. После титрования соединений 100 нл соединений добавляли в планшеты для клеток, используя Zymark Sciclone Pintool. Это было разбавление 1:250 соединения, так что наивысшая конечная концентрация соединения была 40 мкM. Планшеты затем возвращали в инкубатор при 37°C и оставляли инкубироваться в течение ночи.

4. День четыре - Анализ выживаемости

Раствор CELLTITRE-GLO™ получали согласно инструкциям производителя путем разбавления субстрата CELLTITRE-GLO™ буфером CELLTITRE-GLO™ и хранили после применения при -80°C. Планшеты удаляли из инкубатора и оставляли для приобретения комнатной температуры на 15 мин. 25 мкл разбавленного CELLTITRE-GLO™ добавляли в каждую лунку аналитических планшетов, используя Multidrop. Планшеты взбалтывали на шейкере планшетов в течение 15 мин перед прочтением на Envision с использованием люминисцентного протокола.

Данные анализа

Процентное ингибирование рассчитывали по следующему уравнению:

х = CPS, полученный после обработки пробным соединением

µ- = CPS, полученный для отрицательных контролей

µ+ = CPS, полученный для положительных контролей

Величины IC50 получали нелинейным приближением методом наименьших квадратов указанных данных, например, используя логистическую подстановку 4 параметров (программа XLFit)

Качество результатов анализа отслеживали путем определения простого множителя Z' для каждого аналитического планшета, где простой множитель Z'≥0,5 был для результатов, которые считали надежными (Zhang et al., J. Biomol. Screening, 4:67-73, 1999).

Результаты выживания клеток MEF Mcl-1-/- KO (т.е. EC50 в микромолях и анализ, проведенный в присутствии 10% фетальной телячьей сыворотки) для конкретных соединений по изобретению, т.е. соединений 58, 64, 74, 81, 82, 84, 88, 94, 97 и 100 в таблице 1, - 1,3, 0,31, 0,007, 0,010, 0,030, 0,022, 0,028, 0,448, 0,026 и 0,399, соответственно.

b. Анализ жизнеспособности клеток для тромбоцитов

Плазму, обогащенную тромбоцитами (PRP), инкубировали с соединением по изобретению приблизительно в течение 4 часов при 37°C. После инкубирования тромбоциты приводили в состояние равновести с комнатной температурой в течение 20 минут и затем добавляли равный объем реагента CELL TITER-GLO™ (Promega Corporation). Образцы взбалтывали в течение двух минут и затем давали возможность прийти в состояние равновесия в течение дополнительных 10 минут при комнатной температуре. Люминесценцию, генерируемую образцами количественно определяли, используя ридер планшетов LJL Analyst. Анализ данных осуществляли, используя GRAPHPAD PRISM 4.0. Результаты выживания тромбоцитов (т.е. EC50 в микромолях) некоторых соединений по изобретению, т.е. соединений 54, 74, 75, 78, 79, 86, 87, 88, 90, 95, 96 и 97 в таблице 1, - 0,132, 0,021, 0,009, 0,003, 0,003, 0,010, 0,003, 0,003, 0,003, 0,003, 0,354 и 0,003, соответственно.

c. Клеточная жизнеспособность линии клеток опухоли человека NCI-H146

Клетки мелкоклеточной карциномы человека NCI-H146 (ATCC, Manassas, VA) помещали по 50000 клеток на лунку в 96-луночные планшеты для культивирования тканей в общем объеме 100 мкл среды для культивирования тканей, обогащенной 10% сыворотки человека (Invitrogen, Carlsbad, CA) и обрабатывали 2-кратным серийным разбавлением представляющих интерес соединений от 10 мкM до 0,020 мкл. Каждую концентрацию испытывали в двух экземплярах по меньшей мере 3 три раза. Численность живых клеток после 48 часов обработки соединением определяли, используя CELLTITER 96® водный нерадиоактивный MTS анализ пролиферации клеток согласно рекомендациям производителя (Promega Corp., Madison, WI). Результаты выживания клеток NCI-H146 (т.е. EC50 в микромолях) для некоторых соединений по изобретению, т.е. соединений 74, 82, 84, 93 и 97 в таблице 1, - 0,71, 2,5, 0,61, 3,2 и 2,4 соответственно.

1. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение
а) имеет Формулу I-a

где
R1 отсутствует;
нижний индекс m представляет собой целое число от 1 до 2, и
нижний индекс n представляет собой целое число от 1 до 3;
A представляет собой
,
где R3 отсутствует;
B представляет собой член, выбранный из группы, состоящей из:
и ,
где X2 представляет собой O или S;
R4a отсутствует; R4b выбирают из группы, состоящей из:
, , , , и ;
где Rk выбирают из C1-6алкила и C1-6галогеналкила; a1 обозначает точку присоединения группы B к атому азота в Формуле I-a и a2 обозначает точку присоединения группы B к группе L в Формуле I-a;
L отсутствует или представляет собой связывающую группу, выбранную из группы, состоящей из C6-10 арилен-C1-6гетероалкилена, C1-6гетероалкилена, C1-6алкилена, C2-6алкенилена и C2-6алкинилена, где алкиленовые, алкениленовые или алкиниленовые части группы L необязательно замещают 0-1 Rm, где Rm представляет собой C3-6 гетероциклоалкил-C1-6алкил, где гетероциклоалкил представляет собой пиперазинил;
E представляет собой водород; или в качестве варианта Е выбирают из группы, состоящей из фенила, C5-6гетероарила, выбранного из группы, состоящей из пиридила, пиразолила, пирролила, имидазолила и пиримидинила, C3-7гетероциклоалкила, выбранного из группы, состоящей из пирролидинила, пиперидинила, морфолинила и пиперазинила, и C3-7циклоалкила, и необязательно с E конденсированы 1 или 2 кольца, независимо выбранные из группы, состоящей из 3-7-членного карбоциклического кольца, от 3- до 7-членного гетероциклического кольца, бензольного кольца и 5-6-членного гетероароматического кольца, выбранного из группы, состоящей из тиазолила, пиразолила и пиридинила, где E и каждое кольцо, необязательно конденсированное с E, независимо замещено 0-5 заместителями R6, выбранными из группы, состоящей из галогена, -NRpRq, -ORp, -C(O)Rp, -NRpC(O)ORr, -Rr, -Rs, CN, -Z1-NRpRq, -Z1-ORp, -Z1-Rs и -Z1-CN; где Z1 выбирают из группы, состоящей из C1-6алкилена, C2-6алкенилена, C2-6алкинилена, C1-6гетероалкилена, пиперазинила и C3-7циклоалкила; каждый Rp и Rq независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, C1-6алкила и C3-7гетероциклоалкила, выбранного из группы, состоящей из пиперазинила и пиперидинила; и Rr представляет собой C1-6алкил; необязательно в каждом заместителе R6 Rp и Rq вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно соединены с образованием 3-7-членного гетероциклического кольца, включающего 1-2 гетероатома, выбранных из N и O в качестве атомов кольца; Rs выбирают из группы, состоящей из фенила, C5-6гетероарила, выбранного из группы, состоящей из тиенила, тиазолила, пиримидинила, пиразолила, пиридинила, имидазолила и триазолила, C3-7гетероциклоалкила, выбранного из группы, состоящей из пиперазинила и морфолинила, C3-7циклоалкила, и необязательно с Rs конденсированы 1 или 2 кольца, каждое независимо выбрано из группы, состоящей из фенила, тиенила, имидазолила и пиримидинила; и где Rs и каждое кольцо, необязательно конденсированное с Rs, каждое независимо замещено 0-5 заместителями R7, выбранными из группы, состоящей из галогена, -NRtRu, -ORt, -C(O)Rt, -Rv, -CN, и -Z2-NRtRu; где Z2 выбирают из группы, состоящей из C1-6алкилена и C1-6гетероалкилена, каждый Rt и Ru независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и C1-6алкила; Rv представляет собой C1-4алкил; и в каждом заместителе R7 Rt и Ru вместе с атомом, к которому каждый присоединен, необязательно соединены с образованием 3-7-членного гетероциклического кольца, включающего 1-2 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N и O в качестве атомов кольца; или
b) выбирают из группы, состоящей из:
, , , , , ,
, , ,
, , , , и .

2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, в котором соединение имеет Формулу I-a, где нижний индекс n представляет собой целое число, равное 2 или 3; и нижний индекс m представляет собой целое число от 1 до 2.

3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.2, где нижний индекс n равен 2 и нижний индекс m равен 1.

4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.3, где B представляет собой
.

5. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.3, где B представляет собой
.

6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.2, где соединение представлено Формулой, выбранной из группы, состоящей из
, и .

7. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.2, где L отсутствует или представляет собой необязательно замещенный C6-10арилен-C1-6гетероалкилен.

8. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.7, где L выбирают из группы, состоящей из
и .

9. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.2, где L необязательно замещен группой, выбранной из группы, состоящей из необязательно замещенного C1-6гетероалкилена, C1-6алкилена, C2-6алкенилена и C2-6алкинилена.

10. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.9, где L выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного C1-4алкиленокси, C2-4алкениленокси, C2-4алкиниленокси и C1-4алкилена, в котором L замещен 0-1 Rm.

11. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где соединение имеет Формулу I-a и L выбирают из группы, состоящей из
, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и .

12. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.2, где E представляет собой водород.

13. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.2, где E выбирают из группы, состоящей из фенила, C5-6гетероарила, выбранного из группы, состоящей из пиридила, пиразолила, пирролила, имидазолила и пиримидинила, и C3-7гетероциклоалкила, выбранного из группы, состоящей из пирролидинила, пиперидинила, морфолинила и пиперазинила, и необязательно с E конденсированы 1 или 2 кольца, независимо выбранные из группы, состоящей из 5-7-членного карбоциклического кольца, 5-7-членного гетероциклического кольца, бензольного кольца и 5-6-членного гетероароматического кольца, выбранного из группы, состоящей из тиазолила, пиразолила и пиридинила, где E и кольцо, необязательно конденсированное с ним, вместе замещены в целом 1-3 заместителям