Способ диагностики нарушений анаэробного метаболизма глюкозы у работников химической и нефтехимической промышленности



 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2583946:

Федеральное бюджетное учреждение науки "УФИМСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ МЕДИЦИНЫ ТРУДА И ЭКОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА" (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к медицине труда. Сущность изобретения: в сыворотке крови определяют содержание лактата и лактатдегидрогеназы. При значении концентрации лактата выше 2,1 ммоль/л и значении концентрации лактатдегидрогеназы ниже 225 Е/л диагностируют нарушение в энергетической системе у работников. Использование изобретения повышает точность и достоверность диагностики нарушений в энергетической системе у работников химической и нефтехимической промышленности и служит прогнозом развития профессиональных заболеваний у работников химического комплекса. 4 пр.

 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к медицине труда, и может быть использовано для диагностики нарушения энергетической системы у работников химической и нефтехимической промышленности.

Химическая и нефтехимическая промышленность является ведущей основой экономики и имеет важное общехозяйственное и оборонное значение для развития Российской Федерации [Д.Д. Новиков, Т.Н. Шушунова Проблемы модернизации химического комплекса Республики Башкортостан / Успехи в химии и химической технологии. Том XXVI. 2012. - №6. - С. 82-87].

Химическая и нефтехимическая промышленность - одна из отраслей тяжелой промышленности. На предприятиях химической и нефтехимической отрасли производятся разнообразные виды химической продукции: горно-химическое сырье, продукты основной химии (аммиак, неорганические кислоты, щелочи, минеральные удобрения, содау, хлор, сжиженные газы и др.), синтетические смолы и пластические массы, химические волокна и нити, материалы и изделия из пластических масс и стеклопластиков, лакокрасочные материалы, синтетические красители, химические реактивы, фотохимическая продукция, товары бытовой химии и др. [Е.С. Карпушкин. О некоторых направлениях развития химической промышленности. Транспортное дело России №1, 2011 г. С. 16-19].

В химической индустрии, в т.ч. нефтехимической, насчитывается около 800 крупных и средних промышленных предприятий и более 100 научных и проектно-конструкторских организаций, опытных и экспериментальных заводов общей численностью работающих более 740 тыс. человек. [Г.Х. Яруллина Сценарный подход в инновационном развитии нефтехимического комплекса / Вестник Казанского технологического университета. Том 16. - №17, 2013 г. - С. 269-273].

Вместе с тем, около 39% работающих в химической и нефтехимической промышленностях занято во вредных условиях труда [Э.Т. Валеева. Научное обоснование системы охраны здоровья работников химической промышленности на основе оценки профессионального риска: автореф. дис. … док. мед. наук: - Москва, 2013, 48 с.].

Вредные производственные факторы отрасли воздействуют на органы и системы работников, вызывая развитие различных патологических состояний. У работников возникают нарушения сердечно-сосудистой, энергетической, метаболической систем и других.

Энергообеспечение осуществляется в организме посредством реакций гликолиза, в процессе которого образуется более 30 молекул АТФ. При нарушении последовательности реакций гликолиза в организме у работников развивается дисбаланс в энергетической системе.

Лактат является конечным продуктом анаэробного гликолиза. Лактатдегидрогеназа - гликолитический фермент, обратимо катализирующий отщепление водорода от молекулы молочной кислоты (лактата). Это важнейшая реакция анаэробного метаболизма глюкозы, которая присутствует во многих клетках. Накопление лактата может уменьшить pH крови и снизить концентрацию бикарбоната, что приводит к метаболическому ацидозу [А.А. Кишкун. Биохимические исследования в клинической практике. 2014 г. С. 127-129, 169-171].

Прототипом изобретения является способ диагностики нарушений энергообразования в митохондриях гепатоцитов у подростков, заключающийся в определении в сыворотке крови ферментов аспартатаминотрансферазы (ACT), аланинаминотрансферазы (АЛТ), креатинфосфокиназы (КФК), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), и при повышении активности фермента ACT при сохранении нормальной активности ферментов АЛТ, КФК, ЛДГ диагностируют нарушение энергопродуцирующей функции митохондрий гепатоцитов у подростков [патент РФ №2465599, 2012 г.)]. Недостатками данного способа являются его трудоемкость, энергоемкость и требование больших материальных затрат.

Задачей изобретения стала разработка объективного, высокоинформативного способа диагностики нарушений энергетической системы у работников химического комплекса при массовых обследованиях.

Технический результат - повышение точности и достоверности наличия нарушений анаэробного метаболизма глюкозы у работников химического и нефтехимического комплекса при массовых обследованиях.

Способ может быть широко использован в медицинских учреждениях для диагностики нарушений анаэробного метаболизма глюкозы у работников химического и нефтехимического комплекса в случае, если работающие предъявляют соответствующие жалобы, для дифференциальной диагностики с другими патологиями.

Предлагаемый способ диагностики нарушений анаэробного метаболизма глюкозы осуществляется следующим образом. Производят забор крови натощак из вены. В сыворотке крови определяют концентрацию лактата и лактатдегидрогеназы.

При увеличении лактата выше 2,1 ммоль/л и снижении лактатдегидрогеназы ниже 225 Е/л диагностируют нарушение анаэробного метаболизма глюкозы у работников химического и нефтехимического комплекса.

Технология: Натощак из вены работника осуществляют забор крови в количестве 5 мл в пробирку, дают отстояться 30 минут при температуре 22-25°C, центрифугируют при 1500 оборотов 15 минут для получения сыворотки.

Определение лактата в сыворотке крови

Определяют ферментативным ультра-фиолетовым тестом с лактатдегидрогеназой с помощью наборов фирмы Human (Германия). В присутствии НАД лактат конвертируется лактатдегидрогеназой. При этом образуется НАДН, который измеряется при 340 нм. Поглощение образуемого НАДН пропорционально концентрации лактата в образце.

Приготовливают монореагент: смешивают 4 части содержимого флакона №1 с буфером с 1 частью содержимого флакона №2 с НАД. Стабильность монореагента 2 недели при температуре 2-8°C.

Берут 15 мкл плазмы крови, добавляют 1000 мкл монореагента, смешивают и инкубируют 5 минут при температуре 37°C. Измеряют поглощение А против холостой пробы не позднее чем через 30 минут после смешивания. В холостой пробе вместо плазмы используют дистиллированную воду. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. По величине измеренного поглощения вычисляют А и умножают на фактор, равный 144,4. Получают содержание лактата в мг/дл. Коэффициент пересчета в ммоль/л равен 0,1109.

Определение лактадегидрогеназы в сыворотке крови

Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) - фермент, обратимо катализирующий окисление L-лактата в пировиноградную кислоту и участвующий в одном из конечных этапов превращения глюкозы с образованием молочной кислоты. ЛДГ содержится практически во всех органах и тканях человека.

Активность сывороточной ЛДГ возрастает у больных, страдающих анемией, обширным карциноматозом, опухолями, лейкозами, лимфомой, вирусным и невирусным гепатитами, обтурационной желтухой, циррозом печени, различными заболеваниями почек, опорно-двигательного аппарата, инфарктом миокарда и легкого.

Принцип метода определения ЛДГ основан на отличии спектров поглощения восстановленной (НАДН) и окисленной (НАД) форм никотинамидадениндинуклеотида с помощью наборов фирмы Human (Германия). При 340 нм НАДН имеет максимальное поглощение, тогда как НАД не имеет поглощения при данной длине волны. Таким образом, при превращении НАДН в НАД происходит уменьшение оптической плотности реакционной смеси при 340 нм.

Схема определения активности ЛДГ:

Приготовливают рабочий реагент: смешивают содержимое флакона с субстратом с содержимым флакона с буфером. Тщательно перемешивают. Рабочий реагент стабилен в течение 3 недель при температуре 2-8°C.

Берут 10 мкл сыворотки крови, добавляют 1000 мкл рабочего реагента, тщательно перемешивают и запускают секундомер, инкубируют ровно 1 минуту при температуре 37°C. Измеряют оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 минута. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. Вычисляют среднее значение А и умножают на фактор равный 16030. Получают содержание ЛДГ в Е/л.

Было проведено биохимическое исследование сыворотки крови, взятой натощак у обследованных с жалобами на общую слабость, головную боль, раздражительность, расстройства сна, на подверженность инфекциям, быструю утомляемость. Результаты проведенного исследования показали, что у работников с наличием клинических признаков нарушений в энергетической системе, чаще по сравнению с работниками без признаков нарушений в энергетической системе, обнаруживалось изменение показателей ЛДГ и лактата (p<0,001).

По результатам проведенных санитарно-гигиенических исследований на предприятии нефтехимического производства (г. Уфа, нефтехимический комплекс) установлено, что имеет место наличие комплекса вредных производственных факторов рабочей среды и трудового процесса (химический фактор, физический фактор (воздействие шума, физических нагрузок, микроклимата и др.), тяжесть и напряженность трудового процесса. Условия труда работников основной профессии по уровню вредных производственных факторов рабочей среды и трудового процесса соответствовали вредному классу условий труда 3 (класс 3.1-3.3). Работники данной группы были отнесены к основной группе. Обследованный контингент был представлен мужчинами по профессии «аппаратчик», средний возраст которых составил 37,4±1,3 года, средний стаж работы - 14,6±0,7 года.

Условия труда работников вспомогательной профессии соответствовали допустимому классу условий труда (класс 2) (согласно Руководству Р 2.2.2006-05 «Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда»). Работники данной группы были отнесены к группе сравнения. Группы были сопоставимы по полу, возрасту и стажу работы.

Для исключения других причин изменения лактата и лактатдегидрогеназы в сыворотке крови были проведены стандартные клинические и лабораторные методы обследования. Работникам производства был проведен осмотр согласно Приказу МЗ и CP РФ от 12 апреля 2011 г. N 302н «Об утверждении перечней вредных и (или) опасных производственных факторов и работ». Осмотр был проведен врачом - терапевтом, дерматовенерологом, неврологом, психиатром, офтальмологом, оториноларингологом, в необходимых случаях проведена консультация проктолога, кардиолога, ортопеда, хирургом и других специалистов. Также проведен анализ сывороточного железа и ферритина; электрокардиография, фиброгастродуоденоскопия, ультразвуковые исследования брюшной полости, забрюшинного пространства и малого таза, ирригография. При превышении одного лабораторного показателя на величину, превышающую одну сигму, и нарушений, выявленных у специалистов, биохимическое обследование (определение лактата и лактатдегидрогеназы работнику не проводились).

В связи с этим нами были сравнены показатели лактата и лактатдегидрогеназы у работников указанных групп.

По результатам проведенных биохимических исследований установлено, что у работников основной группы, занятой на производстве, в сыворотке крови, в отличие от работников группы сравнения, достоверно чаще наблюдается изменение показателей лактата и лактатдегидрогеназы (p<0,001). Необходимо отметить, что у работников основной группы в 100% случаев было отмечено снижение лактатдегидрогеназы относительно данных референтных значений (ниже 225 ммоль/л) и увеличение лактата относительно референтных значений (выше 2,1 ммоль/л), в то время как у работников группы сравнения были выявлены значения показателей лактата и лактатдегидрогеназы, находящиеся в пределах референтных значений, и значения, выходящие за пределы референтных значений в другую сторону.

Предлагаемый способ иллюстрирован следующим клиническим материалом.

Пример 1. Работник С., стаж работы - 11 лет, возраст - 34 года. Работник предъявлял жалобы на общую слабость, головную боль, раздражительность, подъемы артериального давления, расстройства сна, на подверженность инфекциям, быструю утомляемость.

Натощак из вены работника осуществляют забор крови в количестве 5 мл в пробирку, дают отстояться 30 минут при температуре 22-25°C, центрифугируют при 1500 оборотов 15 минут для получения сыворотки.

Определяют лактат в сыворотке крови ферментативным ультрафиолетовым тестом с лактатдегидрогеназой с помощью наборов фирмы Human (Германия). В присутствии НАД лактат конвертируется лактатдегидрогеназой. При этом образуется НАДН, который измеряется при 340 нм. Поглощение образуемого НАДН пропорционально концентрации лактата в образце. Приготовливают монореагент: смешивают 4 части содержимого флакона №1 с буфером с 1 частью содержимого флакона №2 с НАД. Стабильность монореагента 2 недели при температуре 2-8°C. Берут 15 мкл плазмы крови, добавляют 1000 мкл монореагента, смешивают и инкубируют 5 минут при температуре 37°C. Измеряют поглощение А против холостой пробы не позднее чем через 30 минут после смешивания. В холостой пробе вместо плазмы используют дистиллированную воду. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. По величине измеренного поглощения вычисляют А и умножают на фактор, равный 144,4. Получают содержание лактата в мг/дл. Коэффициент пересчета в ммоль/л равен 0,1109.

Определяют лактадегидрогеназу в сыворотке крови_с помощью наборов фирмы Human (Германия). При 340 нм НАДН имеет максимальное поглощение, тогда как НАД не имеет поглощения при данной длине волны. Таким образом, при превращении НАДН в НАД происходит уменьшение оптической плотности реакционной смеси при 340 нм.

Схема определения активности ЛДГ:

Приготавливают рабочий реагент: смешивают содержимое флакона с субстратом с содержимым флакона с буфером. Тщательно перемешивают. Рабочий реагент стабилен в течение 3 недель при температуре 2-8°C. Берут 10 мкл сыворотки крови, добавляют 1000 мкл рабочего реагента, тщательно перемешивают и запускают секундомер, инкубируют ровно 1 минуту при температуре 37°C. Измеряют оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 минута. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. Вычисляют среднее значение А и умножают на фактор, равный 16030. Получают содержание ЛДГ в Е/л.

Уровень лактата в сыворотке крови 4,0 ммоль/л, активность лактатдегидрогеназы в сыворотке крови 190 Е/л.

Предполагаемое нарушение анаэробного метаболизма глюкозы у работников химической и нефтехимической промышленности подтвердилось. В дальнейшем необходимы профилактические мероприятия.

Пример 2. Работник В., стаж работы - 10 лет, возраст - 33 года.

Работник предъявлял жалобы на расстройства сна, общую слабость, головную боль, раздражительность, на подверженность инфекциям, быструю утомляемость.

Натощак из вены работника осуществляют забор крови в количестве 5 мл в пробирку, дают отстояться 30 минут при температуре 22-25°C, центрифугируют при 1500 оборотов 15 минут для получения сыворотки.

Определяют лактат в сыворотке крови ферментативным ультрафиолетовым тестом с лактатдегидрогеназой с помощью наборов фирмы Human (Германия). В присутствии НАД лактат конвертируется лактатдегидрогеназой. При этом образуется НАДН, который измеряется при 340 нм. Поглощение образуемого НАДН пропорционально концентрации лактата в образце. Приготовливают монореагент: смешивают 4 части содержимого флакона №1 с буфером с 1 частью содержимого флакона №2 с НАД. Стабильность монореагента 2 недели при температуре 2-8°C. Берут 15 мкл плазмы крови, добавляют 1000 мкл монореагента, смешивают и инкубируют 5 минут при температуре 37°C. Измеряют поглощение А против холостой пробы не позднее чем через 30 минут после смешивания. В холостой пробе вместо плазмы используют дистиллированную воду. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. По величине измеренного поглощения вычисляют А и умножают на фактор, равный 144,4. Получают содержание лактата в мг/дл. Коэффициент пересчета в ммоль/л равен 0,1109.

Определяют лактадегидрогеназу в сыворотке крови с помощью наборов фирмы Human (Германия). При 340 нм НАДН имеет максимальное поглощение, тогда как НАД не имеет поглощения при данной длине волны. Таким образом, при превращении НАДН в НАД происходит уменьшение оптической плотности реакционной смеси при 340 нм.

Схема определения активности ЛДГ:

Приготавливают рабочий реагент: смешивают содержимое флакона с субстратом с содержимым флакона с буфером. Тщательно перемешивают. Рабочий реагент стабилен в течение 3 недель при температуре 2-8°C. Берут 10 мкл сыворотки крови, добавляют 1000 мкл рабочего реагента, тщательно перемешивают и запускают секундомер, инкубируют ровно 1 минуту при температуре 37°C. Измеряют оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 минута. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. Вычисляют среднее значение А и умножают на фактор, равный 16030. Получают содержание ЛДГ в Е/л.

Уровень лактата в сыворотке крови 2,0 ммоль/л, лактатдегидрогеназы в сыворотке крови 190 Е/л.

Предполагаемое нарушение анаэробного метаболизма глюкозы у работников химической и нефтехимической промышленности не подтвердилось.

Пример 3. Работник П., стаж работы - 9 лет, возраст - 31 год. Работник предъявлял жалобы на общую слабость, головную боль, раздражительность, расстройства сна, быструю утомляемость.

Натощак из вены работника осуществляют забор крови в количестве 5 мл в пробирку, дают отстояться 30 минут при температуре 22-25°C, центрифугируют при 1500 оборотов 15 минут для получения сыворотки.

Определяют лактат в сыворотке крови ферментативным ультрафиолетовым тестом с лактатдегидрогеназой с помощью наборов фирмы Human (Германия). В присутствии НАД лактат конвертируется лактатдегидрогеназой. При этом образуется НАДН, который измеряется при 340 нм. Поглощение образуемого НАДН пропорционально концентрации лактата в образце. Приготовливают монореагент: смешивают 4 части содержимого флакона №1 с буфером с 1 частью содержимого флакона №2 с НАД. Стабильность монореагента 2 недели при температуре 2-8°C. Берут 15 мкл плазмы крови, добавляют 1000 мкл монореагента, смешивают и инкубируют 5 минут при температуре 37°C. Измеряют поглощение А против холостой пробы не позднее чем через 30 минут после смешивания. В холостой пробе вместо плазмы используют дистиллированную воду. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. По величине измеренного поглощения вычисляют А и умножают на фактор, равный 144,4. Получают содержание лактата в мг/дл. Коэффициент пересчета в ммоль/л равен 0,1109.

Определяют лактадегидрогеназу в сыворотке крови с помощью наборов фирмы Human (Германия). При 340 нм НАДН имеет максимальное поглощение, тогда как НАД не имеет поглощения при данной длине волны. Таким образом, при превращении НАДН в НАД происходит уменьшение оптической плотности реакционной смеси при 340 нм.

Схема определения активности ЛДГ:

Приготавливают рабочий реагент: смешивают содержимое флакона с субстратом с содержимым флакона с буфером. Тщательно перемешивают. Рабочий реагент стабилен в течение 3 недель при температуре 2-8°C. Берут 10 мкл сыворотки крови, добавляют 1000 мкл рабочего реагента, тщательно перемешивают и запускают секундомер, инкубируют ровно 1 минуту при температуре 37°C. Измеряют оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 минута. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. Вычисляют среднее значение А и умножают на фактор, равный 16030. Получают активность ЛДГ в Е/л.

Уровень лактата в сыоротке крови 4,0 ммоль/л, лактатдегидрогеназы в сыворотке крови 487 Е/л.

Предполагаемое нарушение анаэробного метаболизма глюкозы у работников химической и нефтехимической промышленности не подтвердилось.

Пример 4. Работник Н., стаж работы - 11 лет, возраст - 34 года.

Работник предъявлял жалобы на быструю утомляемость, общую слабость, головную боль, раздражительность, расстройства сна, на подверженность инфекциям.

Натощак из вены работника осуществляют забор крови в количестве 5 мл в пробирку, дают отстояться 30 минут при температуре 22-25°C, центрифугируют при 1500 оборотов 15 минут для получения сыворотки.

Определяют лактат в сыворотке крови ферментативным ультрафиолетовым тестом с лактатдегидрогеназой с помощью наборов фирмы Human (Германия). В присутствии НАД лактат конвертируется лактатдегидрогеназой. При этом образуется НАДН, который измеряется при 340 нм. Поглощение образуемого НАДН пропорционально концентрации лактата в образце. Приготовливают монореагент: смешивают 4 части содержимого флакона №1 с буфером с 1 частью содержимого флакона №2 с НАД. Стабильность монореагента 2 недели при температуре 2-8°C. Берут 15 мкл плазмы крови, добавляют 1000 мкл монореагента, смешивают и инкубируют 5 минут при температуре 37°C. Измеряют поглощение А против холостой пробы не позднее чем через 30 минут после смешивания. В холостой пробе вместо плазмы используют дистиллированную воду. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. По величине измеренного поглощения вычисляют А и умножают на фактор, равный 144,4. Получают содержание лактата в мг/дл. Коэффициент пересчета в ммоль/л равен 0,1109.

Определяют лактадегидрогеназу в сыворотке крови с помощью наборов фирмы Human (Германия). При 340 нм НАДН имеет максимальное поглощение, тогда как НАД не имеет поглощения при данной длине волны. Таким образом, при превращении НАДН в НАД происходит уменьшение оптической плотности реакционной смеси при 340 нм.

Схема определения активности ЛДГ:

Приготавливают рабочий реагент: смешивают содержимое флакона с субстратом с содержимым флакона с буфером. Тщательно перемешивают. Рабочий реагент стабилен в течение 3 недель при температуре 2-8°C. Берут 10 мкл сыворотки крови, добавляют 1000 мкл рабочего реагента, тщательно перемешивают и запускают секундомер, инкубируют ровно 1 минуту при температуре 37°C. Измеряют оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 минута. Длина волны: 340 нм, оптический путь 1 см. Вычисляют среднее значение А и умножают на фактор, равный 16030. Получают содержание ЛДГ в Е/л.

Уровень лактата в сыворотке крови 2,6 ммоль/л, активность лактатдегидрогеназы в сыворотке крови 280 Е/л.

Предполагаемое нарушение анаэробного метаболизма глюкозы у работников химической и нефтехимической промышленности не подтвердилось.

Способ диагностики нарушений анаэробного метаболизма глюкозы у работников химической и нефтехимической промышленности, включающий определение концентрации лактатдегидрогеназы в сыворотке крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови дополнительно определяют концентрацию лактата, при значении концентрации лактата выше 2,1 ммоль/л и значении активности лактатдегидрогеназы ниже 225 Е/л диагностируют нарушение анаэробного метаболизма глюкозы у работников.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины и предназначено для ПЦР-детекции Atopobium vaginae, Leptotrichia amnionii, Sneathia sanguinegens и Eggerthella spp. в клиническом материале.

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии, и может быть использовано для исследования резецированного органокомплекса по поводу ампулярной карциномы.

Настоящее изобретение относится к области аналитической химии и касается способа определения полисорбата в пробе, содержащей белок. Способ по настоящему изобретению включает предварительную обработку пробы посредством щелочного гидролиза с последующим колориметрическим определением на основе металлокомплекса, определяемого при анализе вещества с тиоцианатным реагентом, при этом указанный комплекс экстрагируют несмешивающимся с водой органическим растворителем.

Изобретение относится к медицине, в частности к способу прогнозирования эффективности лечения злокачественного заболевания у субъекта цисплатином. Способ состоит в том, что у пациентов определяют аллельные варианты полиморфизмов rs1142345 гена ТРМТ и rs3219484 гена MUTYH и в зависимости от аллельного статуса одного или обоих указанных полиморфизмов прогнозируют эффективность лечения цисплатином, где благоприятный прогноз определяется наличием у пациента двух аллелей дикого типа полиморфизма rs1142345 гена ТРМТ (генотип АА) и/или комбинации из аллелей дикого и мутантного типов полиморфзма rs3219484 гена MUTYH (генотип GA).

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ выявления мутации p.Q368X (с.1102С>Т) в гене MYOC, сопровождающейся развитием наследственной формы первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ).

Изобретение относится к флуоресцентной иммуноцитохимической диагностике метастатического поражения лимфатических узлов. Сущность способа состоит в том, что для получения клеточной суспензии клеточный материал помещают в питательную среду накопления, состоящую из растворов: Хенкса, реоплиглюкина и альбумина, смешанных в равных количествах, хорошо перемешанную клеточную суспензию вносят по 100 мл на дно каждой пробирки с питательной средой, добавляют 5 мкл моноклонального антитела Ber ЕР4 FITC и перемешивают 5 с, после этого материал инкубируют 20 мин в холодильнике при t° 2-8 C, полученную взвесь клеток распределяют по 50-100 мкл в контейнеры центрифуги и центрифугируют при 1000 об/мин в течение 5 мин, полученные препараты окрашивают ядерным флюоресцентным красителем и осуществляют флуоресцентную микроскопию.

Изобретение относится к биохимии. Описан набор олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентно-меченого зонда для идентификации генетического материала риккетсий методом ПЦР в реальном времени.

Изобретение относится к области биотехнологии, молекулярно-генетической диагностики и молекулярной биологии. Предложен набор, содержащий два олигодезоксирибонуклеотидных праймера и флуоресцентно-меченый ДНК-зонд.

Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, и может быть использовано для прогнозирования эндогенной интоксикации у больных острым перитонитом.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения типа энтеровируса, явившегося причиной развития менингита у детей. В крови заболевших детей в период с 1 по 7-й день болезни определяют X- значение уровня лимфоцитов, на поверхности которых находятся СD3+IL4+ маркеры, рассчитывают значение Y по формуле 1,12+9,32*X.

Изобретение относится к области молекулярной генетики и микологии и предназначено для диагностики онихомикоза. Осуществляют выделение ДНК из биологического материала ногтей, проведение ПЦР и детекцию полученных результатов с помощью электрофореза в агарозном геле. Анализируют следующий спектр грибов: Trichophyton spp., Candida spp., Aspergillus spp., Fusarium spp., Scopulariopsis brevicaulis и микромицетов любой родовой принадлежности, используя мультиплексное решение для ПЦР с применением праймеров в двух реакциях, причем для определения грибов родов Aspergillus и Fusarium используют общий обратный праймер. В I реакции при детекции полосы, соответствующей 168 п.н., диагностируют онихомикоз, вызванный микромицетом Scopulariopsis brevicaulis, 120 п.н. - Candida spp., 600-650 п.н. - онихомикоз вызван любым микромицетом. Во II реакции при детекции полосы, соответствующей 302 п.н., диагностируют онихомикоз, вызванный микромицетом Trichophyton spp., 221 п.н. - Fusarium spp., 193 п.н. - Aspergillus spp. Изобретение обеспечивает эффективный способ одновременной идентификации всех этиологических агентов, клинически значимых для онихомикоза России. 1 ил., 4 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, а именно к получению жидкой стабильной шигеллезной сыворотки, которая может быть использована для постановки реакции пассивной гемаггютинации (РПГА), а также в реакции агглютинации (РА). Изобретение может быть также использовано для получения набора для выявления специфических антител к различным видам шигелл в сыворотки крови человека в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА). Изобретение представляет собой способ получения стабильной жидкой сыворотки диагностической шигеллезной, имеющей способность сохранять функциональную активность антител при их длительном нахождении в водных растворах, с использованием полиглюкина и красгемодеза, сыворотку диагностическую шигеллезную, полученную таким способом, и набор для выявления специфических антител к различным видам шигелл в сыворотке крови, включающий такую сыворотку. Изобретение позволяет в любой момент времени иметь уже готовую к использованию сыворотку, сократить расход используемых материалов, исключить из стадии получения трудоемкую и энергозатратную стадию лиофильной сушки, что значительно упрощает процесс получения сыворотки. 5 н.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, медицине и ветеринарии, а именно к получению жидкой стабильной шигеллезной сыворотки, которая может быть использована для постановки реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), а также в реакции агглютинации (РА). Изобретение может быть также использовано для получения набора для выявления специфических антител к различным видам шигелл в сыворотке крови человека в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА). Изобретение представляет собой способ получения стабильной жидкой сыворотки диагностической сальмонеллезной, имеющей способность сохранять функциональную активность антител при их длительном нахождении в водных растворах, с использованием полиглюкина и сорбита, сыворотку диагностическую сальмонеллезную, полученную таким способом, и набор для выявления специфических антител к различным видам сальмонелл в сыворотке крови, включающий такую сыворотку. Изобретение позволяет в любой момент времени иметь уже готовую к использованию сыворотку, сократить расход используемых материалов, исключить из стадии получения трудоемкую и энергозатратную стадию лиофильной сушки, что значительно упрощает процесс получения сыворотки. 5 н.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к области медицины, в частности к травматологии, и предназначено для прогнозирования нарушения консолидации при переломах костей конечностей. Осуществляют выделение ДНК, проводят анализ полиморфизмов гена TGFβ1 и гена EGFR. При выявлении генотипа -25Pro/Pro гена TGFβ1 и генотипа -2073Т/Т гена EGFR прогнозируют вероятность развития нарушения консолидации перелома. Изобретение обеспечивает повышение точности прогноза. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования течения рассеянного склероза (PC) путем исследования крови, отличающийся тем, что из крови, взятой из вены, выделяют лейкоцитарную взвесь, затем из лейкоцитарной взвеси выделяют ДНК и методом ПЦР в режиме реального времени определяют наличие или отсутствие патологических аллелей в полиморфных вариантах генов rs1800629 (TNFα) и rs6074022 (CD40), причем при выявлении аллеля G полиморфного локуса rs1800629 (TNFα) и аллеля С полиморфного локуса rs6074022 (CD40) прогнозируют повышенную среднюю скорость прогрессирования рассеянного склероза. Осуществление изобретения позволяет повысить точность прогнозирования, что способствует выбору соответствующей стратегии лечения. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска формирования хронической истинной экземы (ХИЭ) в зависимости от наследственной отягощенности у индивидуумов русской национальности, уроженцев Центрального Черноземья РФ. Сущность способа состоит в том, что осуществляют выделение ДНК из периферической венозной крови, проводят анализ полиморфизмов генов -308G/А TNFα, +250А/G Ltα, +1663А/G TNFR2 и их сочетаний. Прогнозируют риск развития ХИЭ у индивидуумов с наследственной отягощенностью при наличии аллеля +1663G TNFR2 или сочетания аллеля +1663G TNFR2 с аллелем -308G TNFα. Прогнозируют риск развития ХИЭ у индивидуумов без наследственной отягощенности при наличии аллеля -308А TNFα или сочетания аллеля +250G Ltα с аллелем +1663 G TNFR2 или сочетания аллеля -308 А TNFα с аллелем +250 G Ltα. Использование заявленного способа позволяет с высокой точностью спрогнозировать риск формирования хронической истинной экземы у индивидуумов в зависимости от наличия наследственной отягощенности. 4 пр., 2 ил.

Изобретение относится к медицине, к актуальной проблеме современного здравоохранения, разделу педиатрии и может быть использовано для оценки тяжести поражения гепато-билиарной системы у младенцев и детей раннего возраста и степени выраженности фиброза печени. Сущность способа оценки выраженности фиброза состоит в том, что у обследуемого ребенка утром натощак из периферической вены берут кровь с целью определения уровня фермента АсАТ и количества тромбоцитов. Далее вычисляют индекс APRI по формуле (1), при этом уже известен показатель верхнего нормального значения АсАТ у детей раннего возраста, который составляет 43,88 ед/л. В клинических исследованиях методом дискриминантного анализа было установлено, что показатель индекса APRI достоверно коррелирует с высокой степенью фиброза (F3) у детей первого года жизни, которым была проведена гепатобиопсия под наркозом, которая расценивается как диагностическое оперативное вмешательство. Установлено, что показатель индекса APRI у младенцев с циррозом печени (F4) принимал достоверно высокие значения более 2,45. У детей же без цирроза печени индекс APRI имел значения менее 1,5. Изобретение позволяет вычислять индекс APRI у детей раннего возраста, с помощью которого можно неинвазивным способом без проведения биопсии печени максимально точно, доступно и недорого мониторировать прогрессирование фиброза, прогнозировать исходы, своевременно назначать лечение и контролировать результаты терапии. 3 табл., 3 пр., 2 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для раннего иммунологического прогнозирования возникновения «малых повреждений миокарда» (МПМ) в послеоперационный период после проведения чрескожных коронарных вмешательств (ЧКВ) и стентирования коронарных артерий у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС). Для этого путем биохимического тестирования сыворотки крови на тропонин Т, креатинфосфокиназу-МВ, миоглобин: на 1-е сутки после выполнения чрескожных коронарных вмешательств и стентирования коронарных артерий у пациентов со стабильной ИБС определяют клинико-биохимические изменения показателей в сыворотке крови. При уровне содержания тропонина Т 0-0,030 нг/мл, КФК-МВ 0,10-4,94 нг/мл, миоглобина 25,0-72,0 нг/мл прогнозируют благоприятное клиническое течение послеоперационного периода без развития малых повреждений миокарда. При уровне содержания тропонина Т 0,031-0,090 нг/мл, КФК-МВ 4,95-14,82 нг/мл, миоглобина 72,1-216,0 нг/мл прогнозируют неблагоприятное течение послеоперационного периода с развитием малых повреждений миокарда. Использование данного способа позволяет проводить прогнозирование возникновения «малых повреждений миокарда» в 1-е сутки после ЧКВ и стентирование коронарных артерий, что позволяет проводить своевременные лечебные мероприятия. 4 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения наследственной предрасположенности к нарушению барьерной функции кожи. Сущность способа состоит в том, что из венозной крови осуществляют выделение генетического материала. Проводят полимеразную цепную реакцию синтеза ДНК с последующим анализом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов, определение нуклеотидной последовательности и на основании этого определение полиморфного варианта 2282del4 филаггрина. При проведении полимеразной цепной реакции используют специфические праймеры: «FLG-2 F1» 5'Biotin-TgA-CCA-gCC-TgT-CCA-Tgg-C3'; «FLG-2 R1» 5'CAA-gTg-CAg-gAg-AAA-gAC-ATg-gAT3', размер ампликона - 205 пар оснований, а после проведения полимеразной цепной реакции проводят реакцию пиросеквенирования в режиме реального времени с использованием специфического праймера «FLG-2 S1» 5'gAC-ATT-CAg-AAg-ACT-CAg-AC3'. Детекцию нуклеотидной последовательности осуществляют с помощью хемилюминисцентного сигнала, далее проводят сравнение полученной нуклеотидной последовательности в положении 2282 с референсными последовательностями. При выявлении на полученной пирограмме отсутствия делеции в положении 2282 гена филаггрина при воздействии на организм вредного производственного фактора раздражающего и сенсибилизирующего действия определяют низкую наследственную предрасположенность к нарушению барьерной функции кожи. При выявлении на полученной пирограмме гетерозиготного варианта ins/del в положении 2282 гена филаггрина определяют высокую наследственную предрасположенность к нарушению барьерной функции кожи. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность определения наследственной предрасположенности к нарушению барьерной функции кожи при воздействии на организм факторов раздражающего и сенсибилизирующего действия. 2 ил., 1 табл., 2пр.
Изобретение относится к медицине и касается способа получения продукта, содержащего иммуноглобулины G, A, M, при котором в качестве исходного сырья используют осадки фракции Кона, которые гомогенизируют с получением суспензии, которую обрабатывают хлороформом, перемешивают, выдерживают, центрифугируют, формируют осадок с последующим удалением балластных фракций дополнительным центрифугированием, выделяют целевой продукт с последующим розливом, замораживанием и высушиванием. Формирование осадка и удаление балластных фракций осуществляют введением ионов меди Cu2+ в концентрации 1,5-15 мкмоль при величине рН 4,5-5,5 и температуре 0-5°C. Изобретение обеспечивает повышение специфической активности выделяемых иммуноглобулинов и расширение сырьевой базы. 9 пр.
Наверх