Способ получения тетразолилалкоксикарбостирилов
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТЕТРАЗОЛИЛАЛКОКСИКАРБОСТИРИЛОВ общ ;й формулы N-N д;1, АЗ где R - водород; С;,-С -алкил С2-С алкекил С -С -алканоил, фенилалкил, где алкил имеет , бенэоил или триметоксибензоил; R2 - водород, С -С -алкил или группа формулы N-V II II, -0-А- „хМ W R3 Л I где R - Сц-С -алкил, С -Св-циклоалкил , (циклоалкил)-алкил, где циклоалкил имеет С ,,-С к .-алкил, незамещенный фенил или замещенный одним или двумя заместителями из числа галоид-, нитрогруппа или С;,-С алкил; или фенилалкил, где алкил имеет и фенил может быть заMentBH одним или двумя заместителями из числа Сц-С -алкил, где алкил имеет алкиленд:.иоксигруппы, где .алкилен имеет j А - алкилен имеет пунктир означает возможную двойцую связь в положении 3 и 4; и группа НN -а-дЛ . ,1 : может занимать только одной из положений 4, 5, 6, 7 или 8, и когда К является такой группой, то положения 6, 5, 7 или 8 не могут иметь этой группы, отличающийся тем что оксикарбостирил общей формулы л где Н и нунктир имеют указанные знаОд 4 чения; ,2 - водород, С -Cw-алкил или оксигруппа и последняя мо00 жет занимать только одно из ; положений 4, 5, 6, 7 или 8, сг и если оксигруппа занимает положение 00 4, то положения .5, ,6, 7 или 8 имеют эгшестители, отличные от оксигруппы, подвергают взаимодействию с производными тетраэола общей.формулы v-v -AJ. , . I, . где it и А имеют указанные выше значения; X - галоген, с посг.едующим выделением целевого продукта.
СОКИ СОВЕТСНИ)(СОЦЮГИ М . РЕСПУБЛИК
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н ПАТЕНТУ
N N (lj, -0-А М
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
flO ДЕЛАМ ИЭОБРЕ П.:НИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 2804457/23-04 (22) 30.08.79 (31) 107869/78 (31) 01.09.78 (33) Япония (46) 30412.83. Бюл, М 48 (72) Такао Ниси и Казиуки Нахагава (Япония) (71) Оцука Фармасьютикал Ко, Лтд (Япония) (53) 547,796.1 ° 07(088.8) (56) 1. Вейганд-Хильгетаг Методы эксперимента s органической химии, М., Химия, 1968, с. 335. (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ TETPA3OJIKI .АЛКОКСИКАРБОСТИРИЛОВ общ;й формулы
_#_ — М
М 0
1 1 где R — водород, С -С -алкил, С -С алкенил С<-С4-алкайоил, фенилалкил, где алкил имеет С -С4, бенэоил или триметоксибенэоил1
R2 - водород, С -С4-алкил или . группа формулы
R ,где R - С.,-С»-алкил, С З-Сз-циклоалЭ ил, (циклоалкил) -алкил, где циклоалкил имеет С -Са и С„-С -алкил, не- замещенный фейил или замещенный од- ним или двумя заместителями иэ числа галоид-, нитрогруппа или С -С»алкил1 или фенилалкил, где алкил имеет С 1-С+ и фенил может быть замещен одним или двумя заместителями иэ числа С -С4-алкил, где алкил,.SU „„1064868 А (51) С 07 0 403/12; А 61 К 31/41 имеет С„-С4 алкилен1.иоксигруппы, где .алкйлей имеет C -C>., A — - алкилен имеет С1 пунктир означает возможную двойную связь в положении 3 и 4; и группа
М М !
1 tl
-0-А " М
7, .может занимать только одной иэ поло2 жений 4, 5, 6, 7 или 8, и когда R является такой группой, то положения
6, 5, 7 или 8 не могут иметь этой группы, отличающийся тем, что оксикарбостирил общей формулы ф а1 Эиий
I где R и нунктир имеют указанные зна-(1 чения;
R - водород, С -С -алкил или оксигруппа и йоснедняя мо- lagah жет занимать только одйо из (» .положений 4, 5, 6, 7 или 8, и если оксигруппа занимает .положение С5
4, .то положения .5, 6, 7 или 8 имеют (ф заместители, отличные от оксигруппы, .подвергают взаимодействию с производными тетраэола общей .формулы
М вЂ” - М ф, -х-А5
7 з
rig. R и A имеют указанные выше значения1
Х - галоген, с последующим выделением целевого продукта.
1064868
f ф
2f — М
N — М
65
Изобретение относится к способу получения новых тетразолилалкоксикарбостирилов., обладающих ценными фармакологическими свойствами, которые могут найти применение в медицине, 5
Известна реакция О-алкилирования фенолов алкилгалогенидами и их производными f1 ).
Цель изобретения -. пслучение новых тетраэолилалкоксикарбостирилов, 10 обладающих ценными фармакологическйми свойствами.
Поставленная цель достигается согласно способу получения тетразолилалкоксикарбостирилов общей фор- 15 мулы где R — водород, С -C»-алкил, С -С+алкенил, алканоил с l-4 атомами углерода, фенилалкил, где алкил имеет С - +, бенэоил или триметоксибенэоилу ф -- водород, С -С,(-алкил, или группа формулы к где Р - С„-С+-алкил, С Э-С8-циклоал-. 40
9 кйл (циклоалкил) -алкил, где: (циклоалкил) -алкил, где циклоалкил имеет С -С8и С„-С»-алкил, незамещенный фейил или замещенный 45 одним или двумя заместителями из числа галоид-,нит. рогруппа или С -С -алкил или фенилалкил, где алкил имеет С -С4 и фенил может быть замещен.одним или двумя заместителями из числа
С„-С+-алкил, диалкиламин, где алкил имеет С1-С4/ или алкилендиоксигруппы; где алкилен имеет С -С
A — алкилен имеет С„-С,, пунктир означает возможную двойную связь в положении 3 и 4; и группа может занимать только одно иэ положений 4, 5, 6, 7 или 8, и когда R является такой группой, то положения 5, 6, 7 или 8 не могут иметь этой группы, в котором оксикарбостирил общей формулы где R и пунктир имеют укаэанные зна4 чения;
R - водород, С -С -алкил, или оксигруппа и йоследняя может .занимать только одно положений 4, 5, 6, 7 или и если оксигруппа занимает положение 4, то положение 5, 6, 7 или .8 имеют заместители, отличные от оксигруппы подвергают взаимодействию с производным тетразола общей формулы
Э где R u A имеют указанные выше значенияу
Х - галоген, с последующим выделением целевого продукта.
Соединения (f), получаемые по
Предлагаемому способу, ингибйруют агрегацию тромбоцитов крови, обладают противовоспалительной:=активностью, противоязвенным, сосудорасширяющим действием, ингибирует фосфодиэстеразу и могут найти применение в качестве антитромбозных средств, улучшающих мозговой кровоток, противояэвенных, антигипертонических и антиастматических средств.
Соединения показывают высокую эффективность при профилактике или лечении вышеуказанных заболеваний при длительном применении, обладают невысокой токсичиостью и оказывают малое побочное действие на сердце, не вызывая тахикардии и миокардной недостаточности., Способ можно проводить в присутствии акцептора галогеноводорода из числа неорганических оснований, таких как гидроокись натрия или калия, карбонат натрия или калия, кислый углекислый калий или натрий, или карбонат серебра; щелочные металлы, как натрий или калий алкоголяты, такие как метилат или этилат натрия; и органических оснований, таких как триэтиламин, пириднн, N,N-диметиланилин, N-метилморфолин, 4-диметил1064868
3 амийопиридин, 1,5-диазабицикло(4,3,0)— нонен-5-(ДБН), 1,5-диазабицикло-(5,4,0)ундецен-5(ДБу) или 1,4-диазабицикло(2„2,2)октан(ДАБЦО) .
Реакцию можно проводить в отсутствии растворителя или в присутствии инертйого растворителя.
Примерами таких. растворителей могут служить спирты (метанол, этанол, пропанол, бутанол, этиленгликоль и т.п,}, эфиры (диметиловый эфир, тетрагидрофуран, диоксан, моноглим или диглим, и т.п.), кетоны (ацетон, метилэтилкетон и т.п.), ароматические углеводороды (бензол, толуол, ксилол и т.п.), сложные, эфиры .15 (метйлацетат, этилацетат и т.п.), а также апротонные полярные растворители (И,й»диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфортриамид и.т.п.) . Лучше проводить указанную реакцию в присутствии иодида металла,.например иодистого натрия или иодистого калия.
Количественное соотношение оксикарбостирильного производного (1П, тетразольного производного (111) может выбираться в широком интервале значений и, как правило, тетразол (L11} используют в интервале от. эквимолярного до 5 молярных количеств, обычно от зквимолярного до удвоенного молярного количества по отношению к соединению (I). температура реакции также не является решающим фактором и обычно реакцию проводят при температуре, лежащей в интервале от комнатной до 200сС, ча- . ще при 50-150 С. Время реакции сос- тавляет 1-30 ч, чаще 1-15 ч.
Оксикарбостирильные производные (II) используемые в качестве одного 40
as исходных продуктов в предлагаемом способе являются описанными соединениями производные тетразола
111, используемые в качестве второго исходного продукта, получают по сле- 45 дующей реакционной схеме:
РС1з
Х-А-СОЯКф — Х;А — С 1щ3
С1 59
Я вЂ”.Я
НИ 3 ((tl — х-л.-..я
Я
I .з
Справочный пример l.
В 200 мл,сухого бензола вносят
30,6 r N-у-хлорбутирилциклогексиламина. После установления температуры внутри реакционной массы ниже 60
20 С с помощью внешнего охлаждения реакционного аосуда льдом при пере- . мешивании добавляют 86 г пятихлористого фосфора. После окончания добавления перемешивание продолжают в те- g5 чение 2 ч при комнатной температуре, затем реакционную смесь концентрируют до половинного объема при температуре бани ниже 50©С. н сконцентрированную реакционную смесь по каплям добавляют при перемешивании Ы течение 90 мин 140 мл бензола, содержащего 104 HN> поддерживая при этом температуру внутри смеси ниже
15 С. По окончании добавления реакционную смесь выдерживают в течение ночи при комнатной температуре. 8атем реакционную смесь при перемешивании кипятят с обратным холодильником 3 ч и концентрируют. Концентрат зкстрагируют 200 мл хлороформа.
Хлороформный слой промывают 5В-ным водным раствором бикарбоната натрия и затем водой, после чего сушат сульфатом натрия. После фильтрации от асушителя фильтрат концентрируют и полученный остаток перекристаллизовывают из смеси кода-изопропанол.
Получают 28 г 1-циклогексил-5 †-хлорпропилтетразола в виде бесцветных ильгочатых кристаллов, т.пл.
82»85 С.!
Справочный пример2.
Аналогично получают 1-этил-5-j-хлорпропилтетразол в виде бесцветной жидкости, т.кип ° 160-163 С/20 мм рт.ст. !
Справочный пример 3.
В 150 мл сухого бензола вносят
17,6 г N -хлорацетилциклогексиламииа. Поддерживая температуру внутри смеси ниже 15 С с помощью внешнего охлаждения реакционного сосуда льдом, при перемешивании добавляют
24 г пятихлорного фосфора. После завершения добавления перемешивание продолжают 2 ч при комнатной температуре, затем реакционную смесь концентрирую до половинного объема .при температуре бани Ниже 50 С. К сконцентрированной реакционной смеси при перемешивании в течение
90 мин по каплям добавляют 100 мл бенэола:, содержащего 10% Нй, поддерживая при этом внутреннюю темпе.ратуру виме 15 С. По окончании доО бавления реакционную смесь выдержи.вают в течение ночи. Затем реакционную смесь кипятят с обратным холодильником 3 ч при перемешивании и концентрируют. Полученный концентрат экстрагируют 200 мп хлороформа.
Хлороформный слой промывают водой, 5%-ным водным раствором бикарбоната натрия, 5%-ной соляной кислотой и снова водой и сушат сульфатом натрия. После удаления осушителя фильтрацией фильтрат концентрируют и остаток перекристаллизовывают из сме-., си хлороформ-петролейный эфир
1064868
Справочные пример ы 4 - 13. Используя способ, аналогичный описанному в примере 3, получают следующие соединения:
Соединение
Агрегатное состояние
T.пл, или т,кип, Ос
Прн» мер !
Бесцветная жидкость т.кип. 205-210 НМР: д 3 (™ ) «! I, 1,55 (d, 6H)
2,3 (m, 2Н)
2)95 (t 28)
2,65 (d, 2Н)
4,7 (m, 18) Бесцветная жидкость
1,35-2,65 (m, 16H), 3,0 (t, 2Н)
3,67 (t, 28), 4,2-4,7 (m, 1Н) ЯМР: Ь"СДСЕ3 (тма>
0,3-2,3 (m, 148) 2,6-3!1 (m, 28)
3!35-3,77 (m, 2Н)
3,90-4,50 (m 1Н) ямы в рсдс.е (тмя) 4,67 (S, 2Н)
5,37 (S 2Н), 7, 1-7,6 (m 5Н) aMp: Ь" сдсе (тмв>
4 8 (S, 2Н) 7,76 (й, 1Н), 8,25-8,60 (ш! 2H) ямр: г сдсе, (тмя) Бесцветная жидкость
1,3 (е, 38)
2q75 4Ч! 28> .4 8 (S 2Н}, 7 43 (S 4Н) Получают 16,1 r 1-циклогексил-5хлорметилтетразола в виде бесцветных игольчатых кристаллов, тйл.101 103еС.
М
4 1-Бенэил-5- -хлорпропилтетразол
5 1-Фенил-5-т-хлорпропилтетразол
6 1-Иэопропил-5- -хлорпропилтетраэол
l-Циклопентил-5-э-хлорпропилтетра зол
8 . 1-Циклогексиметил-5-ухлорпропилтетразол
9 1-Циклооктил-5-у-хлорпропилтетраэол
10 . 1-Циклогексил-5- (4-хлорбутилтетразол
ll .1-Бензил-5-хлорметилтетраэол
12 1- (2-Хлор-4-нитрофенил) -5-хлорметилтетразол
13 1-(4-Этилфенил) -5-хлорметилтетразол! !» ! ! ° (! °
Желтоватая жидкость т.кип, 171-175/1 5 мм рт.ст. ямр д"сдсе (тмя)
1 5 2 7 (m! 108)
3 1 (t, 28),, 3,7 (С, 2Н)
4!6-5,0 (m 18)
@Mph д сдсе3 (тмя)
0 3-2,7. (m 13H)
3,5 (t, 28), 3,75 (t, 2Н), 4 15 (dq 2Н)
RMP: КСДСЕ (TMS) 1064868 о
Т. пл., С
Пример
Форма кристаллов
Соединение
5 4-/3-(1-Циклогексилтетраэол-5-ил)- Бесцветные
-пропокси/карбостирил игольчатые кристаллы
247-249
172-172,5
1 б
219,5-221
156-157
220-221,5
199,5-200
Пример 1. В 200 мл диметил( формамида вносят 3,2 г 6-оксикарбостирила, 3,5 г карбоната калия и
7,7 г l-циклогексил-5-г-хлорпропил-. тетраэола и полученную смесь перемешивают в течение 4 ч при 70-80 С. о
После завершения реакции диметилформамид отгоняют при пониженном давлении. Полученный. остаток затем экстрагируют 300 мл хлороформа и хлороформный слой промывают раэбав- 10 ,ленным водным раствором едкого натра
;:и водой, после чего сушат сульфатом ,натрия. После удаления осушителя фильтрацией фильтрат концентрируют и остаток перекристаллизовывают из 15 хлороформа.
Получают 3,54 r 6-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирила в виде бесцветных игольчатых кристаллов, т.пл. 211-212 С. 20
Пример 2. Используя метод примера 1, получают 6-/3-(1-этилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирил в виде бледно-желтых кристаллов, т.пл. 179- 181 5оC.
Пример 3. К 100 мл изопропанола добавляют 2,63 г 6-окси-l-.
-метилкарбостирила и 2,64 мл 1,5-диаэобицикло(5,4,0)-ундецена-5 (ДВУ) полученную смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании. Затем в течение 90 мин по каплям до бавляют 100 мл иэопропанола, содержащего 5 7 г 1-циклогексил-5-g- о пропилтетразола. После завершения добавления реакционную смесь дополнительно кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение
5 ч и затем концентрируют. Получен6 5-/3-(1-Бензилтетразол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
7 5-/1-Циклогексилтетразол-5-ил/метокси-3,4-дигидрокарбостирил, 8 1-Бензил-5-/1-циклогексилтетразол-5-ил/метокси-3,4-дигидро.карбостирил
9 5-/3- (1-Циклогексилтетраэол-5-ил) пропокси/-3, 4-дигидрокарбостирил
10 5-/3-(1-Циклопентилтетразол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбо.стирил ный остаток экстрагируют 300 мл хлороформа, хлороформный слой промывают разбавленным раствором едкого натра и затем разбавленной соляной кислотой. После сушки сульфатом натрия хлороформ отгоняют, полученный ос" таток перекристаллиэовывают из ацетона.
Получают 4,8 г l-метил-/3-(1-циклогексилтетраэол-5-ил)пропокси/карбостирила в виде бесцветных ,игольчатых кристаллов, т.пл. 150151 5 С °
Пример 4. K 100 мл этанола добавляют.3,22 г 6-оксикарбостирила и 3,51 мл 1,5-диазобицикло (5,4,0)ундецена-5(ДВУ) и полученную смесь при неремешивании кипятят с обратным холодильником. Затем по каплям в течение 90 мин добавляют 100 мн этанола, содержащего 7 г 1-бенэил-5-g-иодпропилтетразола. После завершения добавления реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч и затем концентрируют ° Полученный остаток экстрагируют 300 мл хлороформа, хлороформный слой промывают разбавленным водным раствором едкого натра, разбавленной соляной кислотой и водой и сушат сульфатом натрия. После удаления растворителя полученный остаток перекристаллиэовывают из водного этанола.
Получают 4 r 6-/3- (1-бензилтетразол-5-ил) пропокси/карбостирила в виде бесцветных игольчатых кристаллов, т.пл. 152 154 С.
Примеры 5-41. Аналогично получают следующие соединения:
106486Ы
10 т. пл, С о
Соединение
° !
278-281
173-174
226-228
233 5 235
° 1.175-175, 5
«! 1
220-220!5
196,5-197,5
177! 5-178, 5
139-140
102-103 5
154,5-155,5
124-126,5
136 5-138
159-160,5
137-138
° °
148-150 5
«1 1»
Пример
11 б-/(1-Циклогексилтетраэол-5-ил) метокси/карбостирил
12 б-/3-(1-Фенилтетраэол-, 5-ил)пропокси/карбостирил
13 4-Метил-б-/3-(1-циклогексилтетраэол-5-ил)пропокси/карбостирил
14 б-/1-Бензилтетразол-5-ил/метокси/карбостирил
15 6-/3-(l-,Öèêëîãåêñaëìåòèëòå ðàзол-5-ил)пропокси/карбостирил
16 6«/3-(1-Циклооктилтетраэол-5ил)пропокси/карбостирИл
17 б-/3-(1-Циклоцентилтетразол-5ил)пропокси/карбостирил
18 б-/4- (1-циклогексилтетраэол-5ил) бутокси/карбостирил
19 1-Бензил-6-/3-(l-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирил
20 1-Аллил-6-/3«(1-циклогексилтетразол-5-ил) пропокси/карбостирил
21 б-/3- (1-Циклогексилтетразол-5ил) пропок си/-3, 4-дигидрокарбостирил
22 1-Ацетил-6-/3- (1-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
23 . 6-/3-(1-Бензилтетраэол-5-ил) пропоксн/-3,4-дигидрокарбостирил
24 б-/3- (1-Фенилтетразол-5-ил) пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
25 6- /3-(1-Циклогексилметилтетразол-5-ил) пропокси/-3,4-днгидрокарбостирил
26 б«/4-(1-Циклогексилтетразол-5ил)бутокси/-3,4-дигидрокарбости
PHJI
Форма кристаллов
Бесцветные игольчатые кристаллы
Бесцветные игольчатые кристаллы
Продолжение таблицы
1064868
Продолжение таблицы
Т. пл., С
Форма кристаллов
Пример
Соединение
27 1-Пропионил-6- (1-бензилтетразол-5-ил) метокси-3, 4-дигидрокарбостирил
3125 (m, 6Н) Бесцветные пластинчатые кристаллы
106,5-108,5
214,5-216 (разложение) Желт ов атые зернистые кристаллы
Бесцветные игольчатые кристаллы
149-149,5
57-59
202-203
171,5-173,5
34 7-/3-(1-Фенилтетраэол-5-ил) пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
159-161 5
35 4-Метил-7-/3-(l-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирил
236-238
36 7-/1-Бензилтетразол-5-ил/метокси3,4-дигидрокарбостирнл
178,5-180
37 8- (1-Циклогексилтетраэол-5-ил) метокси/карбостирил
216-217
»! !»
38 8-/3-(1-Циклогексилтетразол-5-ил) пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
164, 5-166
Бесцветные зернистые кристаллы
145-146
40 8-/3-(1-Изопропилтетразол-5 -ил)— пропокси/карбостирил
Бесцветные игольчатые кристаллы
174-176
4l 6-/1-Бензилтетраэол-5-ил метокси/3, 4-дигидрокарбостирил
165-167.
Пример 42. 3,2 r 6-/3-(.1-, си/-3,4-дигидрокарбостирила и 3,4 Г
-циклогексилтетраэол-5-ил)пропок- 65 90%-ного раствора ДБМ добавлящт:и
28 1-Этил-6-/3- (1-циклогексилтетразол-5-ил) пропокси/ — 3, 4-дигидрокарбостирил
29 6-/1-(2-Хлор-4-нитрофенил)тетраэол-5-ил/метокси-3,4-дигидрокарбостирил
30 6-/1-(4-этилфенил)тетраэол-5ил/метокси-3,4-дигидрокарбостирил) 3l 1-(3,4,5-Триметоксибензоил) -6-/3-(1-циклогексилтетраэол-5-ил)— пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
32 6-/3- (1-Изопропилтетраэол-5-ил)пропокси/карбостирил
33 7-/3-(1-Циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
39 8-/3- (1-Ци клоок тилт етраз ол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
Бесцветная, сиропооб- о разная жидкость ЯМР: СЭСР (ТМЯ);
2,3
5,2 (S, 2Н)
5,65 (S, 2Н)
6,6-6,9 (m, 2H)
7г0 715 (m+ 6Н) 1064868
13 игольчатых кристаллов, т.пл. 154,5155 5оc
Пример 44. В 30 мл диметилформамида растворяют 1,8 r б-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/3,4-дигидрокарбостирила и добавляют
0,14 r гидрида натрия. При перемешивании и внешнем охлаждении реакционной смеси льдом в течение 1 ч по каплям добавляют 0,41 мл хлористо того ацетила. После завершения прибавления реакционную смесь перемешивают 2 ч при комнатной температуре. Затем реакционную смесь экстрагируют хлороформом (трижды, пор15 циями по 100 мл) . Хлороформный слой промывают насыщенным, раствором хлористого натрия и сушат сульфатом натрия. После отгонки хлороформа полученный остаток очищают хромато@ графированием на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат) . Выходящие фракции собирают и концентрируют, остаток перекристаллиэовывают иэ смеси хлороформ-петролейный эфир.
25 Получают l,l г 1-ац тил-б-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил) пропокси/-3,4-дигидрокарбостирила в виде бесцветных игольчатых кристаллов, т.пл. 124-126,5 С °
3() ° .Пример ы 45 - 47. Используя способ, аналогичный примеру 44 получают следующие соединения:
Т. пл., С
Пример
Форма кристаллов
Соединение
45 1-Бензоил-5-/(1-циклогексилтетразол-5-ил)метокси/-3,4-дигидро,карбостирил
Бесцветные. игольчатые кристаллы
156-157
1-/3,4,5-Триметоксибензоил-б-/3-/(1-циклогексилтетраэол-5-ил)пропокси/3,4-дигидрокарбостирил
57-59 СЭС (TMS) з 1, 2 (t, ЗН) 2,35, 3,25 (m, 6H)
5,2 (S, 2H)
5,65 (S, 2Н)
6,6-6,9 (m, 2Н)
7,0-7 5 (m, 6Н) 1-Пропионил-б-/(1-бенэилтетразол-5-ил)метокси/-3,4-дигидрокарбостирил
Бесцветная сиропообразная жидкость
Пример 48. В 50 мл диметилформамида растворяют 1,8 r 6-/3-(1- 6() ,-циклогексилтетразол-5-ил) пропокси/ карбостирипа и затем при перемешивании и внешнем охлаждении реакционного сосуда льдом добавляют 0,15 г гидрида натрия в течение 30 мин. В
100 мл диоксана, смесь кипятят 9,5 ч и затем охлаждают. После эавершейия реакции растворитель отгоняют, полученный остаток растворяют в хлороформе, органический слой промывают водным насыщенным раствором бикарбоната натрия и водой, сушат сульфатом натрия, после чего обрабатывают активированным углем. После отгонки растворителя полученный остаток очищают хроматографированием на колонке с силииагелем (элюентг хлороформ-метанол 10:1 (объем-объем) кристаллический продукт перекристаллизовывают из хлороформа.
Получают l l г 6/-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирила в виде бесцветных игольчатых кристаллов, т.пл. 211-212©С.
Пример 43. В 500 мл метанола вносят 2,5 г б-/3-(l-циклогек-. силтетразол-5-ил)пропокси/карбостирила, добавляют 0,1 r палладиевого катализатора и гидрируют при 2,5 атм при 50оС в течение 8 ч. После завершения реакции катализатор отделяют фильтрацией и фильтрат концентрируют досуха. Остаток перекристаллизовывают из смеси хлороформ-петролейный эфир.
Получают 1,5 г 6-/3-(1-циклогехсилтетразол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирила в виде бесцветных реакционную смесь по каплям и при перемешивании при комнатной температуре в течение 2 ч добавляют
0,52 мл бромистого аллила. Реакционную смесь концентрируют, остаток экстрагируют хлороформом, промывают водой и сушат сульфатом натрия. ПосI
1064868
15
Соединение
Форма кристаллов
Т. пл., С
Пример
Бесцветные игольчатые кристаллы
150-151,5
139-140
Бесцветные пластннчатые кристаллы
106,5-108,5
Пример ы 52 — 54. Используя метод примера 4, получают следующие соединения:
Т.пл., С
Соединение
Пример
Форма кристаллов
6- 13-/l-(p-3,4-Диметоксифенетил)тетраэол-5-ил/пропокси3карбостирил
6-(3-/1-(P-3,4-Метилендиоксифенетил)тетраэол-5-ил/пропокси ) карбостирил
Бесцветные листочки
206-208
Бесцветные пластинки
195-197
6-13-/1-(В-4-Диметиламинофенетил)тетраэол-5-ил/пропокси кар-. бостирил
141-143 ле удаления осушающего агента фильтрацией фильтрат концентрируют и остаток растворяют в хлороформе. Хлороформный раствор промывают водой и затем концентрируют..Полученный остаток очищают на колонке с силикагелем (элюент: хлороформ-метанол
50:1) . Фракции собирают и концентрируют, остаток перекристаллизовывают
49 1-Метил-6-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил) пропокси/карбостирил
50 1-Бензил-6-/3-(1-циклогексилтетраэол-5-ил)пропокси/карбостирил 51 1-Этил-6-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/-3,4.-дигидрокарбостирил
Ингибирование агрегации тромбоцитов крови. Ингибирование агрегации тромбоцитов соединениямй, получаемыми по предлагаемому способу, изучали с использованием агрегометра А-ll.
Для исследования брали пробу;представляющую смесь (1г9 по объему) цитрата натрия и крови кролика. Пробу центрифугировали 10 мин со.скоростью
1000 об/мин, получали плазму, обогащенную тромбоцитами (PRP), которую: . отделяли. Оставшуюся часть крови дополнительно центрифугировали 15 мин 60 со скоростью 3000 об/мин и получали плазму с дефицитом тромбоцитов (РРР) .
Число тромбоцитов в PRP рассчитывали методом Бречера-Клонкайта, и фракцию РВР разбавляли фракцией РРР 65 из смеси хлороформ-петролейный эфир.
Получают 1,2 г l=аллил-6-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/ карбостирила в виде бесцветных игольчатых кристаллов, т.пл. 102-103,5аС.
Пример ы 49 - 51. Используя способ, аналогичный примеру 48, получают следующие„.соединения:
I до получения образца PRP с концентрацией тромбоцитов 3000 в 1 мл для испытания на агрегацию, индуцированную аденозиндифосфатом (АДФ) .
Получали так.же образец, содержащий м4500 тромбоцитов в 1 мл, для испытания на агрегацию, индуцируемую колл аг еном .
Укаэанный образец PRP в количестве 0,6 мл добавляли к 0,01 мл раствора испытуемого соединения и полу-. ченную смесь помешали в термостат с температурой 37 С на 1 мин. Затем к смеси добавляли 0,07 мл раствора
АДФ или коллагена. Определяли коэффициент пропускания полученной сме-. си, изменение прозрачности эаписы18
1064868
17 вали с использованием агрегометра при скорости перемешивания 1100 об/мин.
Для получения растворов АДФ или коллагена использовали буфер АуренБероналя с рН 7,35. Концентрация
АДФ в этих растворах составляла 5
7,5 -10 М, а раствор коллагена готовили путем обработки 100 мг коллагена 5 мл укаэанного буфера, надосадочную жидкость испольэовали в качестве индукторов агрегации тромбо- . 10 цитов. Аденоэин и ацетилсалициловую кислоту применяли в качестве контрольных веществ при испытании на агрегацию АДФ или коллагеном. Эффект ингибирования агрегации тромбоцитов определяли в процентах, как отношение скорости агрегации в присутствии испытуемого соединения по отношению к скорости агрегации той же смеси в отсутствии антиагреганта.
С-а
Скорость агрегации х 100, где а - прозрачность PRP, Ь - прозрачность PRP, содержащего испытуемого соединение и индуктор агрегации;
25 с - прозрачность PPP.
Испытывали следующие вещества.
Предлагаемые соединения:
1. 6-/3-(1-Циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирил
2. 6-/3-(1-Изопропилтетразол-5-
-ил) пропокси/карбостирил
3. 6-/3-(1-Циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
4. 6-/3-(1-Бенэилтетраэол-5-ил) — 35 пропокси/карбостирил
5 ° 6-/3-(1-Циклогексилметилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирил
6. б-,/3-(1-Циклооктилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирил 40
7. б-/4- (1-Циклогексилтетраэол-5 -ил пропокси/карбостирил
8. 1-Метил-6-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил) пропокси/карбостирил
9. 6-/3-(1-Фенилтетразол-5-ил)про-45 покси/карбостирил
10. 4-Метил-6-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирил
11. 5-/3-(l-Циклогексилтетраэол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
12. 1-Бенэил-б-/3-(l-циклогексилТетразол-5-ил)пропокси/карбостирил
13. 1-Аллил-б-/3-(1-циклогексилтетразол-5-ил)пропокси/карбостирил
14. 1-Ацетил-6-/2-(1-циклогексил- 55 тетраэол-5-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
15. б-/1-(4-Этилфенилтетраэол-5-ил)метокси/-3,4-дигидрокарбостирил 16. 1-(3,4,5-Триметоксибензоил) = 60
-б-/3-(1-циклогексилтетраэол-5-ил)— пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
Известные: соединения:
17. аспирин (контрольное соединение) 65
Таблица 1
Соединение
Концентрация испытуемого соединения, М
10 4
10"
Предлагаемое
100,0В 100,0%
25,9%
11,8
100,0
58,1
53,5
100,0
10,3
72,5
100,0
lOO,0
10,8
100 0
24,7
100,0 27,4
100,0
100,0 .43,4
lO0 0
100,0
26,8
91,5
18,6
32,8
100,0
18,2
100,0 < <100,0
10 .
98,4
42,4
92,6
4l 5
21,8
89,7
44,8
23,2
86,8
47 3
100,0
35 1
91,3
45,3
18. 6-/3-(5-Метилтиотетразол-1-ил)пропокси/-3,4-карбостирил
19. 6-/3-(5-Метилтиотетразол-2-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
20. 6-/3-(Тетраэол-1-ил)пропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
21. 5-/2-Пиперидиноэтокси/-3,4-дигидрокарбостирил
22. 5-/2-Морфолиноэтокси/-3,4-дигидрокарбостирил
23. 5-/3-Пиперидинопропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
24. 6-/2-Морфолиноэтокси/-3,4 -дигидрокарбостирил
25 ° 7-/3-Пиперидинопропокси/3,4-дигидрокарбостирил
26. 8-/2-Пиперидинопропокси/-3,4-дигидрокарбостирил
В табл. 1 отражен эффект ингибирования карбостирильными производными индуцировàííой коллагеном агрегации тромбоцитов крови кролика.
19
1064868
Продолжение табл. 2!
-Продолжение табл. 1
Концентрация испытуемого соединения, Х
Соеди не .ние
Соеди
5 нение
1 1
Известное
12 76,8
13 81,6
35,2
17
41,7
43,2
13,3
67,4
14 79,4
73,4
15 78,5
16 75,6
38,9
48,4
77,4
21
Известное
22
23
24 (25
18.
В табл. 2 отражен эффект ингибирования карбостирильными производными индуцированной АДФ агрегации тромбоцитов крови кролика.
Т а б л и и, а 2 ние
10 +
Ингибирование активности циклической АМФ фосфодиэстеразы. Для определения ингибирующей активности
10 мл раствора полученного путем добавления 1.ммоль хлорида магния к
50 ммоль трио-буфера с р9 7„4, добавляли к тромбоцитам, полученным дополнительным центрифугированием, описанной выше фракции РРР при скорости 3000 об/мин в течение 10 мин, и суспенднрованные тромбоциты измельчали в тефлоново-керамическом гомогениэаторе. После этого проводили двухкратное замораживание и оттаивание и иэмельчение с помощью ультразвука от генератора мощностью в 200 В в течение 300 с. После дополнительного 60-минутного центрифугирования под действием силы в
100000 г верхний слой отбирали в качестве неочищенного энэимного раствора.
10 мл такого буферного раствора пропускали через колонку размерами
1,5»20 см с ДЕЛЕ-целлюлозой, которую
6$ предварительно обрабатывали 50 ммоль
32,7а
36,8
11 9
9,6
59,6
45,5
3,7
34,2
64,1
75,5
30,5
28,7
59,9
21,3
42,4
26,8
45,1
28,1
61,7
30»2
10 4 10 10 Ь
Сое- Концентрация испытуемого соедидн- нения, М не/ Предлаг аемое
1 100, 0% 63,4%.2 74,7
3 76,7
4 100,0
5 100,0
6 100,0
7 100,0 . 8 87,8
9 100,0
10 90,4
11 90,4
Концентрация испытуемого соеди. нения, М
10 =4 10- 10-6
17 7
18 0
l9 2,3
20 4,3
21 18
22 13
23 15
24 17
25 12
26 14
1064868
22 трис-ацетатного буфера (рН 6,0), после чего проводили. промывание и элюирование 30 мл 50 ммольного трисацетатного буфера и полученный элюат подвергали линейному градиентному элюированию с помощью ацетат 5 натрия-трисацетатного буфера в интервале концентраций 0-1 ммоль. Линейная скорость составила 0,5 мл/мин при этом отбирали по 5 мл каждой фракции. В результате такой операции получали фракцию, которая имела активность менее 2 и моль/мл/мин при высокой (100 ммоль) концентрации циклического АИФ субстрата, а также фракцию с высокой активностью поряд- 5 ка 100 р моль/мл/мин при низкой (0,4 ммоль) концентрации циклического AMC субстрата. Эту фракцию использовали в качестве циклической
АИФ фосфодиэстеразы.
0,1 мя водного раствора каждого испытуемого соединения смешивали с
40 ммолями трис-буфера (рЯ 8,0 содержащего 50 мг альбумина коровьей сыворотки и 4 ммоля хлористого магния), содержащего 0,4 ммоля циклической АИФ (тритий циклическая АИФ), и 0,2 мл такого раствора использовали в качестве субстрата.
0,2 мл приготовленной выше циклической АИФ фосфодиэстеразы с уста- ЗО новленной концентрацией добавляли ,к указанному субстратному раствору и осуществляли реакцию при 30©С в течение- 20 мин, в результате чего получали тритий 5,-AMC из тритий цикли- 35
1ческой АИФ.
Затем реакционную систему погружали в кипящую воду на 2 мин для остановки реакции, после этого реакционный раствор охлаждали в ледяной 4р воде с целью превращения полученной тритий 5 -AMP в тритий-аденоэин, в полученный раствор добавляли 0,05
5 -нуклеотидазы змеиного яда и проводили реакцию при 30 С в течение
10 мин. Реакционные растворы затем пропускали через катионо-обменную смолу (А65ООМ/ 4 200-400 меш, выпускаемой фирмой Bio-Pad, размер колонки 0,5 1,5 см), полученный тритийаденоэин собирали, промывали 6 мл дистиллированной воды и элюировали .1,5 мл 3 -N аммиачной воды. Весь элюент загружали в сцинтиллятор емкостью 10 мл и устанавливали количество полученного тритий-аденоэин с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика, которое опредедяло антифосфодиэстеразную активность.
Таким образом, определяли зна-,чение фосфодиэстеразной активации 60 (У5) испытуемого соединения для каждой концентрации, а скорость ингибирования фосфодиэстеразы .(%) определяли из указанного значения активации (Уя) и контрольного эначения (У ), йолученного для воды, несодержащей испытуемого соединения, по следующей формуле: у -vs
Скорость ингибирования — — 100 у фосфодиэстеразы (%)
В качестве контрольных соединений применяли папаверин и 1-метил-3-изобутилксантин °
В табл. 3 представлена скорость ингибирования фосфодизстеразы (%) .
Таблица 3
Концентрация раствора испытуемого соединения, М
Соединеwe
10 10 10 10
92,9 83,8 .58,4 44,7
89,9 73,4 55,2 38,6
6, 88 4 79,6 57,4 36,5
98,4
68,3 50,6
82,4 54,6
Папаверин
1-Метил-3-изобутилксантин
7,2
63,4 . 4,2
Стимуляция кровеснабжения мозговых полушарий.
Эффект стимуляции тока крови через мозг измеряли по описанной методике. Собаку (самец весом 12-20 кг) фиксировали в лежачем положении и анестезировали пентобарбиталом натрия (20 мл/кг), форсированное дыхание поддерживали на частоте равной
20 раэ/мин. Затем обнажали череп и удаляли поверхностную кость до появления венозного синуса и делали вывод венозной крови через канюлю. Количество венозной крови измеряли с использованием электромагнитного измерителя потока крови и дальнейшее измерение проводили с .помощью счетчика капель путем измерения числа капель крови в 10 с.
Эффект увеличения потока крови через мозг рассчитывали путем сравнения числа капель крови эа 30 с при максимальном увеличении, которое имело место до и после применения испытуемого соединения. Каждое из испытуемых соецинений растворяли в 24
1064868
Соединение
Дозировка, Эффект усилемг/кг ния мозгового ® кровообращения, ф
30
36,9
300 72,2
69,0
300
65,8
300
7lt0
300
75,3
300
68,4 300
69,9
Папаревин .1000
78,9
Гипотензивное действие. Гипотен"зивное действие соединений определя- З5 ли путем определения максимального давления крови у испытуемых животных согласно описанной методике.
Для экспериментов использовали животных двух типов. Для первого ти-. димйтилформамиде, разбавляли физиологическим раствором и вводили через канюлю в основной бедренной вене.
В качестве контрольного соединения применяли папаверин.
Полученные результаты представл 5 . ны в табл. 4.
1 Таблица 4 па самцов крыс линии GoId Blatt весом 160-180 г анестезировали эфиром, и левую почечную артерию перекрывали серебряным зажимом,имеющим внутренний диаметр 0,2 мм, тогда как правую почечную артерию оставляли без вся. ких изменений. Через четыре недели после операции отбирали крыс, имеющих максимальное кровяное давление выше 150 мм рт.столба, и их использовали в качестве испытуемых. животных,, этих животных не кормили в течение ночи. Вторую группу животных составляли крысы с увеличенным давлением крови, вызванным введением дезоксикортикостеронацетата (ДОСА) в физио- логическом растворе (ДНР) .
Для этого самцов крыс линии Wistar весом 150-170 г анестезировали эфиром и вылущивали левую почку.
Через неделю после операции подкожно вводили однократно 10 мг/кг ДОСА и в качестве питья давали 1Ъ-ный водный раствор хлористого натрия, Через пять недель после операции отбирали крыс, имеющих максимальное давление крови выше 150 мм рт.столба, и их использовали в качестве испытуемых животных, оставляя н . ночь. без еды.
Все испытуемые соединения применяли орально, кровяное давление измеряли перед применением и через
1,2,4,6 и 8 ч после применения °
Давление крови измеряли с использованием Рекордера (Rectihoriz-type 85, San-ei .Inst) и электростигманометра
РЕ-300 (Иасго Bio-systems, Houston;
Тех) .
Полученные результаты представле ны в .табл.5.
5, . ф О) 60 4«Ъ
») ф 1 °
Oj) ж 4
N 4«Ъ !
»)::1:. ) с Я и — —, ! в
)аэ 1 ЪО с 5 Ф
)C e " +))
)4 ): 4О Г о с
) )ОЙ ° I +!
1 М) е )
QQ 1 с
140 "I
)а) !1 +, !
ЕО 1 О
1)!)
1 ° 4)\
) с
I m A I e с (l5
A.
ao; .. у3
Э
О l O
1 о»)) 26
10б4868
4)Ъ с
4«)
+!
4)) с
М
4«Ъ
40 с о л
+ ф с .Ю
СЧ
) с
° )»
° в
С«) I Ф с
ФО
+!
)» с
Ch с
+) 4«Ъ с л
1 !
C«) ) lA с о
+В Ф с
4C)
4Ч
I ф
« Ф с щ1 с
+) +»
) л с с.
Ф Я
CV W
I ) lC) с
Ch
+И с ф
+! с
)»
+)!
«Ф с с о о
РЪ < Ъ
1 1
° О
М
))Ъ
4«Ъ
СО, с Ф л
)ю) 4)Ъ с а
С4
+I +!
lC) ° с с
° ч C«) л
) l ф л с ф о с
«)» ч
+I
C«) ь
4Ч
Ch с
Ch
+I ф с о
C«I с а
М с
)»
4О л
+I. +I
4C) Ch с с ф Ф
4>
I . !
4«) )» с с 4
44Ъ . л н +) 4«) . С«) с с ч 4)Ъ
c«) 1 !
4О с
) н
)» с о
I (м с н ь с о л ф
+I +f ь с
4«)
4 !
4А с
° «4
С! с
C«) л
Ч)
4«) ° с с О ф е 4
C«) ) с с
O O
m 4
1 I!
» с
6Ъ н л с о ч
C«) с
° Ф м
4)Ъ с
CO
O) с
Н) « о с о
4 Л
4)Н(+1
4f) «Ф с с
C«) .с
О!
4ЮЪ с
° Ч
ФЪ с
1О.4
4«) Ф
cv с ф
+I
)» с
О4
ФФ
C«l Ch
«с ф ОЪ.
+I +C е с с
4) Ю Ol
4«) л с с
И
+)
4«Ъ с
Ю л
« с
М ф
+) н
И . IC) с с о е
4 Л
ll»
)» 1;. «4
)I о о о о о
4«Ъ М 4«Ъ 4«Ъ . 44) I.
I л
1
t
I
I
1
1
I
I
I !
)
1
I. .I
I4
1 !
I. с
I !. .1 ! I
1 : .1 !
4«Ъ
1 ° .!
CO I !
I и
Э
О
4«Ъ 1
8 ! ф. !.„
1 Я . Ф ) щ е
1i В
1 A
27
1064868
Определение острой токсичности.
Предлагаемые соединения применяли орально на мышах и определяли LD мг/кг соединений; получаемых по предлагаемому способу.
Полученные результаты представлены. в табл. 6;
Продолжение табл. 6
pl000
Т 1000
>1000
Таблица 6!
О
LD мг/кг
1000
1000
>1000
) 1000
>1000
>1000
)1000
>1000
1000
1000
14, 1000
20 .15
1000
1000
Заказ 10367/61 Тираж 418 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП Патент, r.. Ужгород, ул. Проектная, .4
Составитель А. Орлов
Редактор С. Юско ТехредЖ. Кастелеьич . Корректор .М. Шароши
