Способ прогнозирования флотации тромба в системе нижней полой вены с дополнительным использованием молекулярно-генетического мониторинга


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2517215:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Северный государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования флотирующего тромбоза глубоких вен в системе нижней полой вены. Проводят клинико-лабораторные и инструментальные методы исследования и при наличии признаков, связанных с тромбозом глубоких вен, дополнительно проводят молекулярно-генетический анализ гена ингибитора активатора плазминогена первого типа (PAI-1). При выявлении полиморфного варианта -675 4G/4G гена PAI-1 прогнозируют наличие флотации тромба. Изобретение обеспечивает эффективный способ прогнозирования флотации тромба в системе нижней полой вены и позволяет целенаправленно использовать медикаментозную коррекцию фибринолиза. 2 табл., 5 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, клинической лабораторной диагностике, хирургии и может быть использовано гематологами, врачами-лаборантами, хирургами для своевременной диагностики и прогнозирования флотации тромба в системе нижней полой вены.

В настоящее время не существует достоверного способа прогнозирования развития флотации тромба в системе нижней полой вены с использованием молекулярно-генетического анализа в системе фибринолиза. В настоящее время в основном в диагностике тромбоза и его осложнении в виде флотации тромба используются консервативные или инвазивные методы, основанные на ультразвуковом исследовании (УЗДГ) и (или) проведении илеокаваграфии [1, 3, 4, 5, 10, 12, 14].

Наиболее близким к предлагаемому техническому решению является способ молекулярно-генетической диагностики венозного тромбоэмболизма, опубликованного в 2007 г.(автор - Капустин С.И. НИИ гематологии и трансфузиологии, г.СПб), основанный на определении генетических полиморфизмов в системе гемостаза при тромбозах глубоких вен и венозном тромбоэмболизме.

Однако метод имеет существенные недостатки, так как не позволяет использовать его для прогнозирования развития флотации тромба в виду того, что в данном методе не исследовались особенности распределения генетических полиморфизмов системы гемостаза в отдельности при окклюзионных и флотирующих тромбах в системе нижней полой.вены. Способ-прототип не предусматривает прогнозирования генетически детерминированной депрессии активности системы фибринолиза, которая в свою очередь обуславливает развитие нестабильности и неполноценности тромба (фибрина) и как следствие - флотации тромба. В прототипе не используется изучение генетических полиморфизмов системы гемостаза в зависимости от наличия или отсутствия флотации тромба.

Цель предлагаемого способа состояла в поиске молекулярно-генетических маркеров, определяющих генетическую детерминацию к развитию флотации тромба в системе нижней полой вены. То есть, нами выдвигалась гипотеза, согласно которой клиническому проявлению флотации тромба у части пациентов с тромбозами глубоких вен может предшествовать наличие наследственного генетически детерминированного тромбофилического состояния, характеризующегося повышенным риском развития нарушения в системе фибринолиза и как следствие этого - тромбинемии на фоне носительства полиморфизма в гене PAI-1 675 4G/5G. В связи с этим мы посчитали возможным в группе пациентов с диагнозом тромбоза глубоких вен в системе нижней полой вены дополнительно к клинико-лабораторным и инструментальным методам провести молекулярно-генетическое исследование на предмет наличия генетических полиморфизмов в фибринолитической системе, а именно в гене PAI-1, указывающих на наследственное тромбофилическое состояние, связанное с нарушением (депрессией) фибринолитической активности.

Известно, что генотипически значимые полиморфизмы системы гемостаза могут являться причиной патологической депрессии в системе фибринолиза, тем самым обуславливая развития тромбоза с последующей тромбоэмболией в легочные артерии.

Наша гипотеза основывалась на том, что у части исследуемых пациентов с острыми тромбозами глубоких вен в системе нижней полой вены диагностировалась выраженная лабораторная депрессия активности фибринолиза, которая положительно коррелировала с наличием признаков флотации по данным ультразвукового исследования или данным илеокаваграфии. При этом наличие флотации тромба становилось непосредственной причиной или предвестником тромбоэмболии в системе легочных артерий.

В настоящее время в доступной нам литературе мы не нашли данных о влиянии выбранных нами генетических вариантов полиморфизмов в гене PAI-1 6 75 4G/5G на возможность развития именно флотации тромба в системе нижней полой вены. Исходя из того, что одним из определяющих лабораторных показателей на фоне флотации тромба в нашем исследовании явилось лабораторное снижение активности фибринолиза при наличии подтвержденных признаков флотации тромба по данным УЗДГ и илеокаваграфии, мы посчитали - возможным провести поиск наследственно-детерминированного состояния, обусловленного наличием полиморфизмов именно в гене PAI-1 675 4G/5G.

В литературных источниках достаточно изучены следующие ингибиторы активатора плазминогена (PAI) - это PAI-1, PAI-2, PAI-3 и протеаза-nexin. При тромбозах циркулирующий тромбин может уменьшать эндогенный фибринолитический потенциал путем стимулирования высвобождения ингибитора активатора плазминогена (PAI-1) из тромбоцитов и эндотелия. В этой связи, наибольший интерес вызывают именно полиморфные варианты гена ингибитора активатора плазминогена I типа (PAI-1, -675 4G/5G), ассоциированные с вариацией уровня функциональной активности данного белка в плазме. Немаловажно отметить, что именно белок PAI-1 обеспечивает до 60% всей ингибиторной активности в отношении активаторов плазминогена в плазме крови, тем самым определяя в большинстве случаев регуляцию и активность фибринолиза. Кроме того, известна и доказана роль повышенного уровня PAI-1 при гематогенных тромбофилиях, при которых некоторыми авторами именно PAI-1 отводится ведущая роль в регуляции клинически значимого фибринолиза. Большинство исследований свидетельствует о связи повышения концентрации PAI-1 в крови при ДВС-синдроме, тромбозе глубоких вен, злокачественных новообразованиях, метаболическом синдроме. В клинической практике повышение уровня PAI-1 наблюдается примерно у 20% пациентов с различными проявлениями тромбофилических состояний.

Организация и экспрессия гена PAI-1. Ген человеческого PAI-1 локализуется на 7 хромосоме в диапазоне q21.3-22. Его размер составляет 12300 нуклеотидных пар, представленных 9 экзонами и 8 интронами. Молекула состоит из 379 аминокислот.Ингибиторы активаторов плазминогена являются гликопротеинами. По механизму ингибирования активаторов плазминогена они принадлежат к суперсемейству серпинов.

В настоящее время варианты полиморфизма гена PAI-1 (специфические аллели) связывают с повышением концентрации PAI-1 в плазме. К ним относятся Hind III - полиморфизм в рестриктивном участке гена, (CA)n-полиморфизм, связанный с повторяющимся СА-динуклеотидом и единичная нуклеотидная

замена или делеция - полиморфизм гуанидина 4G/5G в промотерном участке гена [11].

Характеристика известных вариантов полиморфизма 4 гуанидина в промоторе PAI-1 представлена в таблице 1.

Таблица 1
Характеристика гена-кандидата
Ген ингибитора активатора плазминогена - PAI-1 Хромосома Тип полиморфизма Обозначение аллелей
-675 4G/5G 7 в диапазоне q21.3-22 Нуклеотидная замена 4G, 5G

В настоящее время существует мнение, что наиболее часто присутствующий полиморфизм 4-гуанидина (4G/5G) в промоторе гена PAI-1 ассоциируется с повышенной активностью PAI-1 и, как следствием этого, со снижением активности фибринолитической системы. При гомозиготном носительстве 40-аллеля отмечается более высокая активность PAI-1. Таким образом, вариант 4G/4G ассоциируется с наибольшей активностью PAI-1, при этом вариант 5G/5G - с нормальной или низкой активностью PAI-1.

Дизайн нашего исследования - случай-контроль. Клиническая часть исследования проведена на базе Лаборатории гемостаза и атеротромбоза ГБУЗ «Первая городская клиническая больница им. Е.Е.Волосевич» г.Архангельска. Молекулярно-генетический анализ выполнен на базе Лаборатории ДНК-диагностики ЦНИЛ ГОУ ВПО Северного государственного медицинского университета.

Исследование выполнено на выборке пациентов с острыми тромбозами глубоких вен в системе нижней полой вены. Исходя из основной цели исследования, все пациенты были разделены на две группы. Группа 1 (n=98) - пациенты с тромбозами глубоких вен с признаками флотации тромба по данным УЗДГ или илеокаваграфии. Группа сравнения (2) была представлена 76 пациентами с острыми тромбозами глубоких вен в системе нижней полой вены с окклюзионными тромбозами (без признаками флотации тромба) по данным УЗДГ.

В качестве материала исследования использовали образцы

геномной ДНК, полученной из лейкоцитов периферической крови по методу Miller S.A. и соавт. Стабилизация крови осуществлялась раствором 4% ЭДТА, замораживание и хранение образца до исследования проводилось при температуре - 50 градусов. Для генотипирования полиморфизма -675 4G/5G в гене ингибитора активатора плазминогена I типа (plasminogen activator inhibitor type I, PAI-1) использовали метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим рестрикционным анализом продукта на оборудовании фирмы «Transgenomic», США. Исследование фибринолитической активности проводилось с использованием лизиса эуглобулиновой фракции плазмы при стимуляции стрептокиназой по Gidron et al., 1978, в модификации В.Г.Лычева и А.Е.Дорохова, 1981, (реактив фирмы «Технология-Стандарт»), норма 75-85 сек; активности плазминогена (реактив «Диагнотика-Стаго»)

Для определения частоты распределения генотипов в здоровой популяции без признаков тромбозов были обследованы 32 практически здоровых человека, соответствующих по полу и возрасту исследуемой группе пациентов и проживающих в г.Архангельске. Данные о распределении изученных вариантов полиморфизма в гене PAI-1 представлены в таблице 2.

Таблица 2
Распределение вариантов полиморфизма гена PAI-1 у пациентов с тромбозами глубоких вен в системе нижней полой вены
Вариант полиморфизма гена PAI-1 - 675 4G/5G Частота генотипов, n, %
Группа А n=98 Группа В n=76 Контроль n=32
-675 4G/4G - гомозиготный полиморфизм 52 (53,1) 12 (15,7) 0
-675 4G/5G - гетерозиготный полиморфизм 40 (40,8) 36 (47,5) 12 (37,5)
-675 5G/5G - отсутствие полиморфизма 6 (6,1) 28 (36,8) 20 (62,5)

Анализ результатов проведенного исследования (табл.2) демонстрирует распределение генотипов PAI-1. В представленной выборке пациентов группы 1 распределение вариантов генотипов PAI-1 было следующим: у 52 (53,1%) пациентов присутствовал генотип 4G/4G, у 40 (40,8%) - генотип 4G/5G, у 6 (6,1%) - 5G/5G. Уровень гетерозиготности составил 40,8%. В группе сравнения (2) соотношение генотипов PAI-1 отличалось от предыдущей выборки:

генотип 4G/4G определялся у 12 (15,7%) пациентов, 4G/5G - у 36 (47,5%) пациентов, и генотип 5G/5G - у 28 (36,8%). Уровень гетерозиготности - 47,5%. Сравнение частот аллелей (р=0.019, F-критерий) и генотипов (р=0.001) в каждой из групп выявило значимые различия в их распределении. Так, частота гомозиготного носительства аллеля -675 4G гена PAI-1, ассоциированного с депрессией фибринолиза, была достоверно выше (р<0.001) в группе пациентов с развитием флотации тромба в системе нижней полой вены. Попарное сравнение частот генотипов в группе 1 обнаружило, что генотип 4G/4G по сравнению с генотипом 4G/5G значимо чаще встречался у пациентов тромбозами глубоких вен с признаками флотации тромба, чем в группе сравнения 2 (р=0.005, F-критерий). Относительный риск (ОР) развития флотации тромба составил 1,6 при доверительном интервале (ДИ) для 95%-ного уровня вероятности, равном 1,1-2,9, для генотипа 4G/4G по сравнению с генотипом 4G/5G. Относительно контрольной группы у пациентов группы 1 определялись достоверные различия по распределению указанных выше генотипов PAI-1 675 4G/5G (р=0.003).

При анализе наличия флотации тромба в группах 1 и 2 пациентов получены достоверные различия по частоте выявления генетических полиморфизмов в гене PAI-1 (р=0.02).

Положительные результаты исследования.

Выявлено, что генетический полиморфизм гена PAI-1 связан с рядом признаков, проявляющихся на различных уровнях патогенеза развития нестабильности организации тромба (фибрина), и как следствие, провоцирует развитие флотации тромба. В нашем исследовании получены данные о связи вариантов полиморфных локусов гена PAI-1 с особенностями течения тромбозов глубоких вен в системе нижней полой вены в виде развития флотации тромба. При анализе результатов обнаружено, что генотип PAI-1 4G/4G достоверно чаще встречался у пациентов с наличием признаков флотации тромба на фоне тромбоза. Необходимо отметить, что присутствие генотипов PAI-1 4G/4G и 4G/5G ассоциировалось с проявлением лабораторной депрессии активности фибринолиза.

Выявленное нами присутствие варианта полиморфизма 4G/4G в гене PAI-1 у пациентов с признаками флотации тромба, по всей видимости, свидетельствует о возможной роли системы фибринолиза, а именно генетического полиморфизма в гене ингибитора активатора плазминогена первого типа в развитии процессов флотации тромба у пациентов с тромбозами глубоких вен в системе нижней полой вены. Подобные результаты, но в отношении полиорганной недостаточности ДВС-синдроме были представлены в ряде работ [2], где указывается на связь наличия определенных полиморфных вариантов гена PAI-1 с неблагоприятным исходом при ДВС-синдроме. Раннее сообщалось о роли полиморфизма гена протромбина, фибриногена, фактора V, наличие которых также коррелирует с развитием ТЭЛА [6, 7, 8, 9]. В доступных нам литературных источниках мы не обнаружили сведений о проведении подобных исследований и выявлении генетических маркеров флотации тромба при тромбозах в системе нижней полой вены.

Проведенный анализ показал, что при наличии снижения активности фибринолиза при тромбозах глубоких вен определенное значение могут иметь наследственно-детерминированные генетические полиморфизмы системы фибринолиза. В нашем исследовании установлено, что частота присутствия отдельных вариантов полиморфизма в гене PAI-1 была достоверно выше у больных с депрессией активности фибринолиза, что в свою очередь ассоциировалось с развитием флотации тромба, которая существенно влияла на прогноз и исход заболевания.

Таким образом, в ходе исследования была продемонстрирована значимость генетических полиморфизмов системы гемостаза в предрасположенности развития флотации тромба в системе нижней полой вены. Полученные результаты указывают на возможные молекулярные механизмы развития флотации тромба, и свидетельствуют о целесообразности широкого внедрения методов ДНК-диагностики в клиническую практику для диагностики и прогнозирования флотации тромба.

Представляем несколько клинических примеров, демонстрирующих значимость данного метода в плане прогнозирования и диагностики флотации тромба при тромбозах глубоких вен в системе нижней полой вены. Клинические примеры.

1. Пациент М., 32 г. № истории болезни 11760, поступил в клинику ГКБ №1 г.Архангельска 24.04.2012 г. с диагнозом: острый илеофеморальный тромбоз левой нижней конечности. Болен течении 5-ти суток, когда появились боли в области левого бедра, одышка. Показатели системы гемостаза при поступлении о наличии гиперкоагуляции с депрессией фибринолиза - (тромбоциты - 258×109/л, АЧТВ 28 сек, ТВ 14 сек, MHO 0,9, активность фибринолиза 120 сек, РФМК 28 мг/100 мл, AT III 87%, Д-димер 4.8 нг/мл). При УЗДГ - признаки тромбоза подвздошной вены слева. Учитывая наличие одышки и признаков тромбинемии выполнена илеокава-графия, где обнаружены признаки флотации тромба. При молекулярно-генетическом исследовании - PAI-1 675 4G/4G. Начата антикоагулянтная терапия. Назначена продленная терапия варфарином. Наблюдается в лаборатории гемостаза и атеротромбоза в ГКБ №1 г.Архангельска. Исход - выздоровление.

2. Пациент А., 47 лет, №истории болезни 11403, поступила в клинику ГКБ №1 г.Архангельска 20.04. 2012 г.с диагнозом: острый тромбоз левой нижней конечности. Показатели системы гемостаза при поступлении о наличии гиперкоагуляции с депрессией фибринолиза - (тромбоциты 263×109/л, фибриноген 7,1 г/л, АЧТВ - 30 сек, MHO 0,8, РФМК - 26 мг/100 мл, AT III 76%, ФА 135 сек, Д-димер 5.7 нг/мл). При УЗДГ - признаки тромбоза левой бедренной вены с признаками флотации тромба. При молекулярно-генетическом исследовании - PAI-1 675 4G/4G. Начата антикоагулянтная терапия надропарином, свежезамороженная плазма. Назначена продленная терапия варфарином. Наблюдается в лаборатории гемостаза и атеротромбоза в ГКБ №1 г.Архангельска. Исход - выздоровление.

3. Пациентка Г., 28 лет, №истории болезни 12227, поступила в клинику ГКБ №1 г.Архангельска 28.04.2012 г. с диагнозом: острый илеофеморальный тромбоз левой нижней конечности. 5 сутки послеродового периода. Показатели гемостазиограммы свидетельствовали о тромбинемии в стадии хронометрической гиперкоагуляции (тромбоциты 214×109/л, фибриноген 2,8 г/л, АЧТВ - 27 сек, MHO 0,8, РФМК - 26 мг/100 мл, Д-димер - 8.5 нг/мл, AT III 68%, ФА 158 сек). При илеокаваграфии - признаки тромбоза левой подвздошной вены с признаками флотации тромба в нижней полой вены, учитывая угрозу ТЭЛА, установлен кава-фильтр типа «зонтик» ниже устьев почечных сосудов. При молекулярно-генетическом исследовании - PAI-1 675 4G/4G. Назначена заместительная антикоагулянтная терапия. Назначена продленная терапия варфарином. Наблюдается в лаборатории гемостаза и атеротромбоза в ГКБ №1 г.Архангельска. Исход - выздоровление.

4. Пациент В., 53 лет, №истории болезни 11679, поступил в клинику ГКБ №1 г.Архангельска 18.04. 2012 г.с диагнозом: острый илеофеморальный тромбоз правой нижней конечности. Показатели гемостазиограммы - (тромбоциты 441×109/л, фибриноген 4,9 г/л, АЧТВ - 27 сек, MHO 0,8, РФМК - 26 мг/100 мл, Д-димер 17.2 нг/мл AT III 63%, ФА 148 сек). При илеокава-графии - признаки тромбоза правой подвздошной вены с признаками флотации тромба в нижней полой вены, установлен кава-фильтр типа «зонтик» ниже устьев почечных сосудов. При молекулярно-генетическом исследовании - PAI-1 675 4G/4G. Назначена заместительная антикоагулянтная терапия, стимуляторы фибринолиза. Назначена продленная терапия варфарином. Наблюдается в лаборатории гемостаза и атеротромбоза в ГКБ №1 г.Архангельска. Исход - выздоровление.

5. Пациент В., 53 лет, №истории болезни 11354, поступил в клинику ГКБ №1 г.Архангельска 20.04. 2012 г.с диагнозом: острый тромбоз правой нижней конечности. Считает себя больной в течении недели. Показатели гемостазиограммы - тромбоциты 347×109/л, фибриноген 8,9 г/л, АЧТВ - 29 сек, MHO 0,9, РФМК - 28 мг/100 мл, Д-димер 9.2 нг/мл AT III 83%, ФА 112 сек). При илеокаваграфии - признаки тромбоза левой подвздошной вены с признаками флотации тромба в нижней полой вены, установлен кава-фильтр типа «зонтик» ниже устьев почечных сосудов. При молекулярно-генетическом исследовании - PAI-1 675 4G/5G. Назначена заместительная антикоагулянтная терапия гепаринами, стимуляторы фибринолиза - трентал. Назначена продленная терапия варфарином. Наблюдается в лаборатории гемостаза и атеротромбоза в ГКБ №1 г.Архангельска. Исход - выздоровление.

Вышеизложенный материал клинически подтверждает полезность предложенного способа прогнозирования флотации тромба. Также наличие подтвержденной генетически детерминированной депрессии фибринолиза позволяет целенаправленно использовать медикаментозную коррекцию данного нарушения. Вышеизложенное подтверждает адекватность и полезность предложенного метода для прогнозирования и диагностики флотации тромба в системе нижней полой вены.

Сведения об известных аналогах

1. Борсов М.Х., Шуков Р.А., Воротынцев В.Г. МСКТ-флебография у пациентов с тромбозами глубоких вен нижних конечностей // Электронный журнал ANGIOLOGIA.ru - 2010. - №2

2. Воробьева Н.А. ДВС-синдром - что нового в строй проблеме // 2006. - Архангельск. - С.186

3. Золкин В.Н., Тищенко И.С. Антикоагулянтная терапия в лечении острых тромбозов глубоких и поверхностных вен нижних конечностей «Трудный пациент» №15-16-2007

4. Лобанова М.В. Оптимизация клинико-диагностической и лечебной тактики у больных острыми тромбозами глубоких вен нижних конечностей // Автореферат дис.… канд. мед. наук. - Москва 2011

5. Раптанова Т.А., Волгина Е.В., Вахлаков А.Н. Ультразвуковая диагностика венозного тромбоза в амбулаторных условиях // "SonoAce-Ultrasound" N17, 2008

6. Сидор Н.В. Роль фактора XIII в формировании тромбогенной опасности при различных видах тромбофилий // автореферат дис… канд. мед. наук. - 2003 Барнаул

7. Капустин С.И. Молекулярно-генетические аспекты патогенеза венозного тромбоэмболизма: диссертация… доктора биологических наук: Санкт-Петербург 2007. - 294 с

8. Капустин С.И. Генетические детерминанты наследственной тромбофилий в патогенезе венозного тромбоза / Капустин С.И., Блинов М.Н., Каргин В.Д., Филановская Л.И., Салтыкова Н.Б., Белязо О.Е., Головина О.Г., Шмелева В.М., Паншина A.M., Папаян Л.П. // Терапевтический архив. - 2003. - №10. - С.78-80

9. Капустин С.И. Генетическая предрасположенность к венозному тромбозу: роль полиморфизмов компонентов плазменного и тромбоцитарных звеньев гемостаза / Капустин С.И., Шмелева В.М., Паншина A.M., Филановская Л.И., Блинов М.Н., Папаян Л.П. // Ученые записки СПбГМУ им.акад. И.П.Павлова. - 2004. - Том XI, №3. - С.10-15

10. Чуриков Д.А., Кириенко А.И. Ультразвуковая диагностика болезней вен. Руководство практикующих врачей. Москва. Изд-во «Литтерра» 2006; 35-46

11. Huber S., McMaster K..J, Voelkerding K.V. Analytical evaluation of primer engineered multiplex polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism for detection of factor V Leiden and prothrombin G20210A. J Mol Diagnostics 2000; 2: 153-7

12. Mostbeck G.H. Duplex and color doppler imaging of the venous system: Spriger 2003; 170

13. Kapustin S.I. APOE gene polymorphism can modify the risk of venous thromboembolism / S.I.Kapustin, Y.S.Drizhum, V.M.Shmeleva, N.B.Saltykova // J.Thrombosis & Haemostasis - 2007. Vol.5, suppl. 2. - P-T-471

14. Lensing A., Davidson В., Prins M., Buller H. Diagnosis of deep-vein thrombosis with ultrasound imaging in symptomatic patients and asymptomatic high-risk patients / In: Hull R, Raskob G, Pineo G, editors. Venous thromboembolism: an evidence-based atlas. Armonk, NY: Futura Publishing Co; 1996. p.115-24

Способ прогнозирования флотирующего тромбоза глубоких вен в системе нижней полой вены на основании проведения клинико-лабораторных и инструментальных методов исследования, отличающийся тем, что при наличии признаков, связанных с тромбозом глубоких вен, дополнительно проводят молекулярно-генетический анализ гена ингибитора активатора плазминогена первого типа (PAI-1) и при выявлении полиморфного варианта -675 4G/4G гена PAI-1 прогнозируют наличие флотации тромба.



 

Похожие патенты:

Настоящее изобретение относится к биологии и медицине, а именно к области биохимических анализов, и позволяет определять качественно или количественно наличие лиганда в образце.
Изобретение относится к области медицины. Предложен способ определения чувствительности рака почки к иммунотерапии после проведения нефрэктомии, включающий верификацию диагноза, проведение нефрэктомии рака почки, забор опухолевой и нормальной ткани почки для определения уровня экспрессии цитокинов IL-4, IL-6, IL-10, TGFβ и расчет соотношения уровня экспрессии цитокинов в опухолевой и нормальной ткани почки.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу дифференциальной диагностики гепатита и цирроза печени. Сущность способа состоит в том, что у больного дополнительно в сыворотке крови определяют уровень IgG антител к ламинину-1.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к мутеинам липокалина слезной жидкости человека, и может быть использовано в медицине. Мутеин липокалина слезной жидкости человека (hTLc) имеет обнаруживаемую аффинность связывания с рецепторной тирозинкиназой Met (c-Met) человека, или ее доменом, или фрагментом c-Met человека.

Изобретение относится к области медицины, в частности к способам лабораторной диагностики негативного воздействия формальдегида на нарушение конъюгационной и элиминационной функций глутатионовой системы у детей, проживающих на территории, характеризующейся повышенным содержанием данного соединения в атмосферном воздухе.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для выявления развития гиперплазии неоинтимы и рестеноза сонных артерий после ангиореконструктивных операций на них у больных с прогрессирующим церебральным атеросклерозом без использования ангиовизуализации.
Изобретение относится к медицине. Сущность способа определения липидов заключается в том, что к 10 мл хлороформного экстракта липидов добавляют 25 мкл 10% раствора тезита при одновременном перемешивании смеси с помощью шейкера при 20°C и частоте колебаний платформы 120 в минуту в течение 30 минут получают прозрачный раствор липидов для ферментативного определения триацилглицеридов.

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Представлен способ, основанный на измерении в вагинальных соскобах уровня экспрессии мРНК генов интерлейкинов IL1B, IL8, IL10 и IL18 относительно представленности мРНК референсных генов B2M, GUS, TBP или HPRT; на основании полученных уровней экспрессии вычисляется значение канонической линейной дискриминантной функции (КЛДФ) следующим образом: Y=1,09*IL1B-0,61*IL8+0,21*IL10-0,11*IL18-0,91 (формула 1), где IL1B - относительный уровень экспрессии IL1B, IL8 - относительный уровень экспрессии IL8, IL10 - относительный уровень экспрессии IL10, IL18 - относительный уровень экспрессии IL18; IL=2^(Cpmin-Cpil)/NF (формула 2), где IL - относительный уровень экспрессии гена интерлейкина, Cpmin - коэффициент минимального значения уровня экспрессии, для IL1B Cpmin=17,9; IL8 Cpmin=16,6; IL10 Cpmin=28,8; IL18 Cpmin=23,3; Cpil - значение порогового цикла соответствующего IL в образце, определяемого автоматически; NF - фактор нормировки, вычисляется по формуле 3: (формула 3), где NF - фактор нормировки, вычисляемый как среднее геометрическое 4 факторов нормировки для референсных генов (см.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития бронхиальной астмы. Осуществляют выделение ДНК из лимфоцитов периферической венозной крови больного.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики вариантов поражения проводящей системы миокарда при инфекционной кардиомиопатии у детей.

Настоящее изобретение относится к области микробиологии. Группа изобретений включает способ и систему для определения количества культивируемых микробных клеток, таких как E.coli, Ps.aeroginosa, или смеси микробных клеток (например, для определения суммарного количества микробов) в исследуемом образце. При этом указанный способ включает (i) приведение во взаимодействие исследуемого образца, который может содержать культивируемые микробные клетки, с по меньшей мере одним сигнальным агентом, способным связываться с мембраной микробной клетки, указанное приведение во взаимодействие производится в течение предварительно определенного первого периода времени (T1), достаточного для интернализации сигнального агента в микробную клетку до такого уровня, при котором сигнал, испускаемый образцом, по существу достигает плато; (ii) удаление из указанного исследуемого образца неинтернализованного сигнального агента; (iii) в течение второго периода времени (T2), следующего за указанным первым периодом времени (T1), на протяжении которого указанный сигнал по существу сохраняется на уровне указанного плато, обнаружение среди сигнальных объектов в указанном образце сигнальных культивируемых клеток, основанное на параметрах отбора, предварительно определенных для указанных культивируемых клеток; и (iv) определение на основании указанных выбранных сигнальных объектов количественного значения, указывающего на количество культивируемых клеток в исследуемом образце. Группа изобретений позволяет, практически в реальном времени, получить высокоточное количественное значение, отражающее содержание микробных клеток в образце, которое может быть эквивалентом КОЕ. 2 н. и 37 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл.
Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, педиатрии, терапии, и может быть использовано для определения стадии дефицита железа как у беременных женщин и детей, так и у других групп населения. Способ состоит в том, что одномоментно определяют содержание сывороточного железа и ферритина и при значениях сывороточного железа менее 12,0 мкмоль/л и ферритина больше или равно 15 мкг/л определяют первую стадию дефицита железа, при содержании сывороточного железа больше или равно 12,0 мкмоль/л, а ферритина менее 15 мкг/л определяют вторую стадию дефицита железа, при значениях сывороточного железа менее 12,0 мкмоль/л и ферритина менее 15 мкг/л определяют третью стадию дефицита железа. Способ обеспечивает возможность оценить норму и дефицит железа на доклинической стадии для диагностических, терапевтических целей на ранних этапах заболевания, а также наблюдения за результатами лечения в динамике. Табл.1, пр.3.
Изобретение относится к медицине, точнее к профилактической медицине, гигиене, и может быть использовано для определения дермальной экспозиции при оценке риска вредного воздействия пестицидов на работающих при их применении в условиях сельскохозяйственного производства, фермерских и личных хозяйствах и других отраслях. Способ включает получение серии экспонированных смывов с различных участков кожи работающего в натурных условиях обработки препаратом с использованием рекомендованной смывающей жидкости, количественную идентификацию вещества в ходе химического анализа, расчет средней дермальной экспозиции (Дcр), при этом в качестве биологической модели для создания экспонированного смыва применяют подготовленную изолированную свиную кожу, выполняют не менее 10 нанесений дозированных количеств определяемого вещества, затем его смывов, устанавливают среднюю величину полноты смыва от нанесенного количества (К, %), которую включают в формулу расчета средней дермальной экспозиции (Дcр). Способ позволяет наиболее полно оценить выраженность загрязнения кожи, что является основным аргументом в обосновании мер индивидуальной первичной профилактики по защите кожных покровов и приоритетность дермального пути поступления токсиканта. 3 пр., 4 табл.
Изобретение относится к области медицины, в частности к оздоровительной нейрогормональной коррекции и омоложению с использованием музыкально-акустических воздействий и может использоваться в различных лечебно-профилактических учреждениях. На основании выявленного уровня содержания гормонов в крови, осуществляют воздействие подобранной с учетом в том числе жанровых музыкальных предпочтений пациента, музыкальной программой. Для воздействия используют три алгоритма: с доминирующим уровнем звукового давления ≤45 дБ и темпом <60 уд/мин (S-алгоритм); с доминирующим уровнем звукового давления более 65 дБ, но менее 90 дБ и темпом >80 уд/мин (Т-алгоритм); доминирующим уровнем звукового давления более 45 дБ, но менее 60 дБ, с темпом 60-80 уд/мин., или последовательным чередованием S- и Т-алгоритмов. Способ позволяет оптимизировать содержание уровня гормонов в крови, повышая резервные возможности организма и уровень здоровья с помощью возникающих реакций адаптации, что оказывает благоприятное воздействие на психологическое и физическое состояние обследуемых, в том числе на внешний вид пациента. 4 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования развития атопического дерматита у детей грудного возраста. Сущность способа состоит в том, что в мембранах эритроцитов пуповинной крови новорожденного с помощью газовой хроматографии определяют уровень гамма-линоленовой кислоты. При содержании кислоты в пределах от 0,01 до 4,63 мг/л прогнозируют развитие атопического дерматита у детей грудного возраста. Использование заявленного способа позволяет повысить точность прогнозирования развития атопического дерматита у детей. 2 пр.

Изобретение относится к способам определения эффективности лиганда ионного канала. Ex vivo способ определения эффективности лиганда ионного канала in vivo в зависимости от присутствия плазмы, включает стадии: a) приведение клетки, экспрессирующей ионный канал, в контакт с i) плазмой животного и ii) лигандом ионного канала и b) определение эффекта лиганда ионного канала на клетку, или a) приведение клетки, экспрессирующей ионный канал, в контакт с i) плазмой животного и ii) соединением, которое определяют как лиганд ионного канала, и b) определение эффекта соединения на клетку, или a) приведение клетки, экспрессирующей ионный канал, в контакт с плазмой животного, которому был введен лиганд ионного канала, и b) определение эффекта лиганда ионного канала на клетку. Способ по изобретению может использоваться для скрининга лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения заболевания, затрагивающего дисфункцию ионного канала, особенно для предупреждения и/или лечения сердечно-сосудистого заболевания или рака. Изобретение обеспечивает повышение эффективности способа и снижение затрат на скрининг лекарственных препаратов. 13 з.п.ф-лы, 4 табл., 2 пр., 3 ил.

Изобретение относится к устройству и способу для количественного измерения аналита с использованием камеры. В частности, для сбора данных идентификационного кода, необходимых для получения точного результата анализа аналита. Способ включает сбор данных результата взаимодействия аналита с использованием камеры, без дополнительного оборудования; считывание идентификационного кода и результата взаимодействия аналита. Измерительное устройство содержит: камеру для захвата зоны распознавания камерой аналитического набора, которая содержит результат взаимодействия аналита, полученный путем взаимодействия аналита, и идентификационный код аналитического набора; блок обработки изображений для выделения изображения результата взаимодействия аналита и изображения идентификационного кода из изображений зоны распознавания камерой аналитического набора, захваченной камерой; блок считывания для считывания изображения результата взаимодействия аналита и изображения идентификационного кода; блок управления для обеспечения возможности обрабатывать результат считывания изображения результата взаимодействия аналита, подлежащего обработке; и блок вывода для вывода конечного результата об аналите, который получен блоком управления. Изобретение обеспечивает получение точного результата. 4 н. и 14 з.п. ф-лы, 9 ил.
Изобретение относится к медицине и касается способа обследования субъекта, у которого присутствуют симптомы и/или биомаркеры аутоиммунного заболевания, на предмет наличия инфекции Helicobacter Pylori и атрофического гастрита тела или антрального отдела желудка, включающего отбор образца крови, сыворотки или плазмы у указанного субъекта; и количественное измерение концентрации биомаркеров, включающих пепсиноген I, пепсиноген II, отношение пепсиногенов I/II, гастрин-17 и антитела IgG и IgA к Helicobacter Pylori из указанного образца крови, сыворотки или плазмы, и сравнение полученного значения с граничными значениями или эталонными диапазонами значений. Изобретение обеспечивает возможность сделать вывод о присутствии или отсутствии у исследуемого субъекта инфекции Helicobacter Pylori и атрофического гастрита тела или антрального отдела желудка. 4 з.п. ф-лы, 1 пр., 1 табл.
Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для диагностики поражения отдела нефрона при заболеваниях почек у детей. Способ включает взятие суточной мочи больного и определение максимального удельного веса, титруемой кислотности, α1-микроглобулина и альбумина мочи, вычисление индекса поражения почек по формуле, и при значении индекса поражения почек X<800 наблюдение может быть отнесено к группе с преимущественным поражением канальцев, при значении функции X≥800 - к группе с преимущественным поражением клубочков. Данный способ диагностики позволяет с высокой степенью достоверности определить поражение отдела нефрона, его клубочковой или канальцевой части, а также снизить материально-экономические затраты на исследование. 2 пр.
Настоящее изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и касается прогнозирования течения инфаркта миокарда. Для этого у больного с острым инфарктом миокарда на фоне стандартной терапии проводят измерение уровня ферментов анаэробного цикла - сукцинатдегидрогеназы, молочной и пировиноградной кислот и перекисного окисления липидов - малонового диальдегида. Затем больному вводят триметазидин и через 12 часов вновь измеряют уровень ферментов. Снижение их уровня до нормальных величин свидетельствует о наличии компенсаторных возможностей энергетической системы миокарда и позволяет достоверно прогнозировать низкий риск смерти вследствие острого инфаркта миокарда. 2 пр.
Наверх