Способ оценки белок синтезирующей функции лейкоцитов для клинических исследований


 


Владельцы патента RU 2530593:

Мишланова Ирина Витальевна (RU)
Владимирский Владимир Евгеньевич (RU)
Мишланов Виталий Юрьевич (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и описывает способ оценки белоксинтезирующей функции лейкоцитов для клинических исследований методом иммуноферментного анализа путем выделения лейкоцитов из венозной крови с использованием системы Vacutainer BD, содержащей декстрозу, процедуры отмывания клеток, подготовки суспензии, содержащей 50000 клеток в 1 мкл, последующего 20-часового культивирования в среде Игла-MEM при добавлении фактора некроза опухоли-альфа в концентрации 0,005 мкг/мл, разрушения клеточных мембран лизирующим раствором и 50-кратным разведением образцов при определении концентрации альфа-дефензинов, а при определении содержания C-реактивного белка без разведения. Изобретение обеспечивает повышение точности и производительности метода. 1 таб., 3 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно лабораторной диагностике, и может быть использовано в клинической практике для диагностики белков и пептидов, синтезируемых лейкоцитами.

Известными способами молекулярной диагностики являются иммуноферментный анализ, полимеразно-цепная реакция и различные варианты применения этих методик в комбинации с иммуноблотингом и методами культивирования клеток крови человека для диагностики синтезируемых белков или определения фрагментов ДНК (генов) или РНК, кодирующих синтез белков в клетке. (Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. - М.: Мир, 2002. - 589 с.; Kalendar R., Lee D., Schulman A.H., 2011 Java Web tools for PCR, in silico PCR, and oliginucletide assembly and analysis./ Genomics, 98(2): 137-144. http://pnmerdigital.com/tools; Клиническая лабораторная аналитика. Том II. Частные аналитические технологии в клинической лаборатории / Под ред. В.В. Меньшикова: М.: Лабинформ-РАМЛД. - 1999. - С.205; Меньшиков В.В. Клиническая лабораторная аналитика. Том I. - Основы клинического лабораторного анализа.- М.: Агат-Мед. - 2002. - 860 с.).

Описанные методы являются недостаточно точными в целях оценки белков, синтезируемых лейкоцитами в условиях очага воспаления и/или условиях тесного межклеточного контакта, дефицита питательных веществ и метаболического стресса.

Для решения данной задачи применяются специальные методики, например метод, примененный в научном исследовании К. Hattar at al (Grandel Amplification of LPS and LTA induced cytokine synthesis in NSCLC/neutrophil cocultures // J Clin Oncol 26: 2008 (May 20 suppl; abstr 22198)). Авторы установили роль межклеточной кооперации, стимулирующее влияние продуцируемых цитокинов (ИЛ-8) и тесного межклеточного контакта путем определения матричной РНК, кодирующей синтез цитокинов (ИЛ-6) нейтрофилами в культуре клеток.

Вместе с тем, описанный метод является экономически высокозатратным и трудоемким, что не позволяет применить его в клинической практике для индивидуальной диагностики.

Недостатком другого метода, описанного Туевым А.В., Мишлановым В.Ю. в 2000 году (Патент РФ №2194995 МПК G01N 33/92, опубл. 20.12.2002. «Способ диагностики прогрессирующей стенокардии у больных ишемической болезнью сердца». Приоритет установлен 28.04.00.), является определение только концентрации общего холестерина в супернатанте культуры лейкоцитов, ассоциированного с молекулами белка, что не позволяет осуществлять точную молекулярную диагностику белоксинтезирующей функции лейкоцитов для клинических исследований.

Общим недостатком описанных методов культивирования клеток является длительность периода культивации.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому методу является иммуноферментный анализ белков в сыворотке крови. Безусловным преимуществом метода является точность определения концентрации белков. Однако при воспалении белки и пептиды, определяемые в сыворотке крови, отражают системный уровень иммунного ответа, «включающийся» в ряде ситуаций позднее, чем местный, определяющийся процессами происходящими непосредственно в тканях (Ross R. Atherosclerosis - an inflammatory disease // N. Engl. J. Med. - 1999. - Vol.340. - P.115-126). В связи с этим изучение концентрации белков и пептидов, синтезируемых клетками (лейкоцитами) непосредственно в очаге воспаления, позволяет судить о местном воспалительном ответе и является в ряде ситуаций более ранним маркером патологического процесса.

Изобретение направлено на решение задачи: повышение точности и производительности метода.

Решение указанной задачи достигается путем применения метода иммуноферментного анализа, при котором белки и/или пептиды определяют после предварительного 20-часового культивирования лейкоцитов, выделенных из венозной крови, в присутствии фактора некроза опухоли-альфа с последующим разрушением клеточных мембран лизирующим раствором и 50-кратным разведением образцов при определении концентрации альфа-дефензинов, а при изучении содержания С-реактивного белка без разведения, рекомендованного для определения сывороточной концентрации фирмой производителем тест-системы, с целью достижения оптимального соотношения антигена и моноклональных антител (конъюгата).

Вышеперечисленная совокупность существенных признаков позволяет получить следующий технический результат - повышение точности и производительности метода.

Способ осуществляют следующим образом.

Лейкоциты выделяют из венозной крови с помощью системы Vacutainer BD, содержащей декстрозу, или методом отстаивания в растворе полиглюкина. Клеточную суспензию отмывают физиологическим раствором натрия хлорида, затем питательной средой Игла-МЕМ. Осуществляют подсчет количества клеток и доводят их концентрацию до 50000 в 1 мкл, что обеспечивает тесный клеточный контакт при культивировании лейкоцитов. Суспензию лейкоцитов в количестве 400 мкл помещают в стерильные пенициллиновые флаконы, закрывают резиновыми пробками. Культивирование клеточной суспензии, обогащенной лейкоцитами, осуществляется в среде Игла-МЕМ в течение 20 часов при 37°C, при добавлении фактора некроза опухоли -альфа в концентрации 0,005 мкг/мл. После культивирования клеточные мембраны лейкоциты разрушают, применяя лизирующий раствор. Проводят ресуспендирование, центрифугирование образцов. Затем молекулярную диагностику осуществляют методом иммуноферментного анализа, например, используя наборы фирмы Hycult Biotech для определения концентрации дефензинов-альфа (1-3) и/или наборы фирмы Biomerica для определения С-реактивного белка. При этом для повышения чувствительности методики и достижения оптимального соотношения антигена и моноклональных антител (конъюгата) в случае определения концентрации СРБ разведение биологического материала не применяется, в отличие от рекомендованного 100-кратного при изучении в сыворотке крови, а при определении содержания альфа-дефензинов образцы разводятся в 50 раз.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Проведено обследование 15 практически здоровых лиц среднего возраста 43,4±45 года. Среди них мужчины составили 37%, а женщины 63%. У всех обследуемых с использованием метода иммуноферментного анализа определялось содержание дефензинов (наборы фирмы Hycult Biotech) и C-реактивного белка (наборы фирмы Biomerica) в сыворотке крови и в супернатантах, содержащих лизаты лейкоцитарных культур по описанной методике с оптимального разведением образцов. Определены средние значения дефензинов и C-реактивного белка в сыворотке крови и в супернатантах, содержащих лизаты лейкоцитарных культур (см. табл.1).

Таблица 1
Содержание дефензинов и С-реактивного белка в сыворотке крови и супернатантах, содержащих лизаты лейкоцитарных культур у здоровых лиц
Показатель Единицы измерения Среднее значение в сыворотке±SD Среднее значение в супернатантах лейкоцитарных культур ±SD
Дефензин-альфа нг/мл 0,16±0,09 115,9±56,3
C-реактивный белок мкг/л 10,3±5,6 1,8±1,1

Приведенные данные свидетельствуют о том, что C-реактивный белок и дефензины, синтезированные лейкоцитами в культуре in vitro, могут быть определены описанным выше методом.

Пример 2. Больной П., 47 лет, обследован через 1 месяц после операции коронарного шунтирования по поводу окклюзирующего атеросклероза передней нисходящей и огибающей коронарных артерий с наложением 2-х аутовенозных шунтов. Клинически отмечается положительная динамика, заключающаяся в исчезновении симптоматики стенокардии после оперативного лечения, исчезновении болей, связанных с стернотомией, отсутствие местных воспалительных изменений со стороны послеоперационного шва передней грудной стенки, заживлением послеоперационных ран голени. Методом иммуноферментного анализа с использованием набора фирмы Hycult Biotech определена концентрация дефензинов-альфа в сыворотке крови - 0,23 нг/мл, в супернатантах, содержащих лизаты лейкоцитарных культур (предложенным методом) - 104,12 нг/мл. С помощью наборов фирмы Biomerica определена концентрация C-реактивного белка в сыворотке крови - 44,7 мкг/л, в супернатантах лейкоцитарных культур (предложенным методом) - 2,5 мкг/л.

Данный пример демонстрирует высокое диагностическое значение определения C-реактивного белка в культуре лейкоцитов и показывает, что у больного ишемической болезнью сердца, перенесшего операцию коронарного шунтирования 1 месяц назад, имеющего положительную клиническую динамику и исчезновение острых воспалительных изменений в области послеоперационных швов, концентрация C-реактивного белка, синтезируемого лейкоцитами в условиях in vitro, соответствует средним значениям, полученным в группе практически здоровых лиц, а концентрация C-реактивного белка в сыворотке крови уменьшается медленно и остается умеренно повышенной. Концентрация дефензинов в сыворотке и культуре лейкоцитов значимо не отличалась от уровня здоровых лиц (см. пример 1). Подобная особенность концентрации противомикробных пептидов может быть маркером минимальной активности воспаления, что подтверждается клинически благополучным течение послеоперационного периода.

Пример 3. Больной М., 50 лет, обследован через 1 месяц после операции коронарного шунтирования по поводу окклюзирующего атеросклероза передней межжелудочковой, огибающей и правой коронарных артерий с наложением 4-х аутовенозных шунтов. На 2 неделе послеоперационного периода появилась одышка, субфибрильная лихорадка. Пациент отмечал болевой синдром связанный со стернотомией, наблюдались признаки местного воспаления в области послеоперационной раны. При проведении ультразвукового исследования плевральных полостей в синусах выявлен уровень жидкости. Отмечался умеренный лейкоцитоз 8,8·109 и высокая СОЭ - 56 мм/час. На 4 неделе послеоперационного периода пациент был госпитализирован в кардиологическое отделение, где верифицирован посткардиотомный синдром.

В сыворотке крови и супернатантах, содержащих лизаты лейкоцитарных культур (по предложенной методике), была выявлена высокая концентрация C-реактивного белка - 103 мкг/л и 8,4 мкг/л соответственно. При относительно не высоком содержании сывороточных дефензинов - 0,29 нг/мл отмечен их высокий уровень в супернатантах лейкоцитарных культур (по предложенной методике) - 178,9 нг/мл. Оценка содержания изучаемых пептидов позволяет говорить об активном системном и местном воспалительном процессе, что коррелирует с неблагоприятным течением послеоперационного периода у данного пациента.

Представленные данные подтверждают высокое диагностическое значение предлагаемого метода и позволяют считать, что белки и пептиды, синтезированные лейкоцитами в условиях тесного межклеточного контакта in vitro имеют патогенетическое и высокое клиническое значение.

Предлагаемый способ отличается от известного следующими признаками.

Сроки культивирования лейкоцитов сокращены до 20 часов, для стимуляции синтеза белка применяется фактор некроза опухоли-альфа, определение белков или пептидов, синтезированных лейкоцитами, осуществляют иммуноферментным методом после предварительного разрушения мембран лейкоцитов лизирующим раствором, для повышения чувствительности методики и достижения оптимального соотношения антигенного материала и моноклональных антител (конъюгата) в случае определения концентрации СРБ разведение биологического материала не применяется, в отличие от рекомендованного фирмой производителем тест-системы 100-кратного при изучении в сыворотке крови, а при изучении содержания альфа-дефензинов образцы разводятся в 50 раз.

Данное описание и примеры рассматриваются как материал, иллюстрирующий изобретение, сущность которого и объем патентных притязаний определены в нижеследующей формуле изобретения, совокупностью существенных признаков и их эквивалентами.

Способ диагностики белоксинтезирующей функции лейкоцитов для клинических исследований методом иммуноферментного анализа, отличающийся тем, что белки и/или пептиды определяют после предварительного 20-часового культивирования лейкоцитов, выделенных из венозной крови, в присутствии фактора некроза опухоли-альфа с последующим разрушением клеточных мембран лизирующим раствором и 50-кратным разведением образцов при определении концентрации альфа-дефензинов, а при изучении содержания C-реактивного белка без разведения, рекомендованного для определения сывороточной концентрации фирмой производителем тест-системы.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к определению связанных с лечением данных для введения по меньшей мере одного медикамента пациенту, подлежащему лечению. Представлена система для определения относящихся к лечению данных для введения по меньшей мере одного медикамента пациенту, подлежащему лечению, содержащая: по меньшей мере одно устройство для отбора образцов крови для непрерывного и последовательного отбора крови у пациента для получения образцов крови; по меньшей мере одно устройство измерения показателей крови для измерения показателей крови отобранных образцов и получения наборов данных измерения показателей крови и по меньшей мере одно вычислительное устройство для вычисления относящихся к лечению данных из наборов данных измерения показателей крови, в которой каждому образцу крови и каждому связанному с ним набору данных измерения показателей крови, назначен по меньшей мере один связанный с пациентом первый идентификатор и один связанный со временем второй идентификатор, относящийся к моменту времени отбора образца крови, причем вычислительное устройство для вычисления связанных с лечением данных посредством первого оценивающего блока выполнено с возможностью назначения по меньшей мере одного индивидуального весового коэффициента каждому набору данных измерения показателей крови, с одинаковым первым идентификатором и отличающимся вторым идентификатором для характеристики взвешивания данных измерения показателя крови в вычислительной операции, при этом предусмотрены назначающее устройство, соединенное с каждым устройством измерения показателей крови, для назначения каждому набору данных измерения показателей крови третьего идентификатора, относящегося к измерительному оборудованию, назначенному для конкретных устройств измерения показателей крови, и четвертого идентификатора, относящегося к точности измерения; и второй оценивающий блок для назначения каждому набору данных измерения показателей крови, имеющему одинаковый первый идентификатор и отличающийся четвертый идентификатор, по меньшей мере одного индивидуального весового коэффициента для характеристики взвешивания данных измерения показателей крови в вычислительной операции.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования гнойных послеоперационных осложнений у больных раком толстой кишки (колоректальный рак) путем динамического исследования крови.
Изобретение относится к области медицины, конкретно к аллергологии, иммунологии и дерматологии, и может быть использовано для прогнозирования развития инфекционных осложнений при атопическом дерматите у детей.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики генетической предрасположенности к нарушениям сердечной проводимости. Проводят анализ генотипов генов-кандидатов патологии сердечно-сосудистой системы: полиморфизмов -44A/G гена Cx40, A/G гена SCN5A, VNTR4a/4b гена NOS3 и I/D гена ADRα2β.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования неблагоприятного исхода гипертрофической кардиомиопатии. Методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) в крови пациента определяют величины тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 (TIMP 1) и терминального фрагмента мозгового натрийуретического пептида (NT pro BNP).

Изобретение относится к области медицины, кардиологии и может быть использовано для прогнозирования риска развития рестеноза после коронарного стентирования. Сущность способа: определяют значения дополнительных факторов риска - измерения толщины эпикардиальной жировой ткани, уровней лептина, липопротеина «a» и глюкозы в крови, после чего осуществляют математическую обработку числовых значений факторов риска с получением вероятности возникновения рестеноза по формуле: Р= [ехр(-8,0248+0,0893·X1+0,00354·X2+0,1397·X3+1,1194·X4+0,3286·Х5+0,0665·X6)]/ [1+ехр (-8,0248+0,0893·X1+0,00354·X2+0,1397·X3+1,1194·X4+0,3286·X5+0,0665·X6)], где P - вероятность возникновения рестеноза в %, X1 - значение лептина пациента в нг/мл; X2 - значение липопротеина «a» в мг/л; X3 - толщина эпикардиальной жировой ткани в миллиметрах; X4 - значение холестерина липопротеидов высокой плотности в ммоль/л; X5 - значение глюкозы крови в ммоль/л; X6 - значение интерлейкина-6 в пкг/мл; -8,0248 - свободный член уравнения.
Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для оценки индивидуальной радиочувствительности больных местно-распространенным раком молочной железы и опухолями головы и шеи при лучевой терапии.
Изобретение относится к области медицины, а именно, к лабораторной диагностике, и касается прогнозирования прерывания беременности в первом триместре. Сущность способа: в сыворотке крови в ранние сроки гестации (до 13 недель) определяют содержание β-субъединицы хорионического гонадотропина (β-ХГЧ) и растворимого рецептора васкуло-эндотелиального фактора роста (sVEGFR-1), сочетание которых обладает высокой прогностической значимостью для оценки риска ранних репродуктивных потерь.

Группа изобретений относится к области медицинской диагностики, иммунологии и онкологии, в частности к новым онкомаркерам и способам диагностики онкологических заболеваний.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития сахарного диабета второго типа у уроженцев Центрального Черноземья, больных гипертонической болезнью.
Способ относится к области медицины, а именно к способам лабораторной диагностики в ревматологии, используется для диагностики тяжести остеоартроза коленного сустава. Сущность способа: устанавливают диапазон величин хрящевого гликопротеина и их среднее значение при различных стадиях заболевания, определяют тяжесть течения остеоартроза коленного сустава путем сопоставления полученных значений хрящевого гликопротеина с его стандартизированными показателями. При величине хрящевого гликопротеина от 56,99 до 71,02 нг/мл диагностируют компенсированную стадию заболевания, в диапазоне величин от 82,86 до 93,79 нг/мл диагностируют субкомпенсированную стадию остеоартроза, в диапазоне величин от 148,92 до 211,28 нг/мл диагностируют декомпенсированную стадию дегенеративно-дистрофического процесса в коленном суставе. Применение изобретения позволяет уточнить тяжесть течения остеоартроза коленного сустава, что определяет тактику лечения. 2 табл., 3 пр.

Группа изобретений относится к способу измерения тропонина I в образце. Для этого предоставляют образец. Затем приводят образец в контакт с моноклональным антителом к тропонину I, связанным с магнитной меткой. После чего осуществляют приведение образца в контакт с поликлональным антителом или с двумя различными антителами к тропонину I, связанным с поверхностью сенсора. Причем указанные антитела направлены на аминокислотную последовательность 30-110 тропонина I. Затем проводится детекция магнитной метки на поверхности сенсора. Группа изобретений также относится к устройству и к картриджу для измерения тропонина I в образце. Изобретения позволяют осуществлять диагностирование инфаркта миокарда в течение 5 минут и с использованием малого объема образца. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической и экспериментальной абдоминальной хирургии и может быть использовано для оценки характера течения репаративной регенерации после оперативного лечения механической травмы печени. Сущность способа: на 3-й и 7-й день после оперативного вмешательства на печени в сыворотке крови исследуют уровень альфа-фетопротеина, определяют коэффициент регенерации (КР) по формуле: К Р = А Ф П 7 А Ф П 3 , где: КР - коэффициент регенерации в условных единицах; АФП7 - уровень альфа-фетопротеина в сыворотке крови (нг/мл) на 3-й день после оперативного вмешательства на печени; АФП3 - уровень альфа-фетопротеина в сыворотке крови (нг/мл) на 7-й день после оперативного вмешательства на печени, и при величине КР, равной 1,0 и более условных единиц, прогнозируют вялый характер репаративной регенерации. Изобретение обеспечивает повышение точности и упрощение процедуры прогнозирования характера течения репаративной регенерации после оперативного лечения механической травмы печени. 1 табл., 2 пр., 1 ил.

Изобретение относится к области медицины. Сущность способа прогнозирования вероятности развития рестеноза с учетом локализации стента в правой коронарной артерии, огибающей артерии состоит в том, что на момент стентирования осуществляют забор крови пациента и регистрируют в физических величинах значения протромбинового индекса, коэффициента атерогенности, липопротеидов очень низкой плотности, липопротеидов высокой плотности, вычисляют величину стеноза S. После чего рассчитывают коэффициент вероятности развития рестеноза R, соответствующий прогнозируемой величине рестеноза через 6 месяцев, по формуле. При этом адекватность прогнозируемой величины рестеноза через 6 месяцев после стентирования обеспечивается для следующих интервалов: при локализации стеноза в огибающей артерии 0<R<40; при локализации стеноза в ветвях тупого края 0<R<50, 90<R<100; при локализации стеноза в правой коронарной артерии 0<R<50; при локализации стеноза в передней межжелудочковой артерии 0<R<100. Использование заявленного способа позволяет осуществить раннее прогнозирование рецидивов сердечнососудистых осложнений, в частности развития рестеноза, повторного сужения сосудов сердца после стентирования в правой коронарной артерии, огибающей артерии, в передней межжелудочковой артерии и ветвях тупого края. 4 пр.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицины и предназначено для определения генетической предрасположенности к привычному невынашиванию беременности (ПНБ). Осуществляют выделение геномной ДНК из образца крови обследуемого лица. Проводят генотипирование полиморфных вариантов 34V/L гена FXIII, М235Т гена AGT, 4a/b гена eNOS, PLA1/A2 гена GpIIIa и 353R/Q гена FVII. После установления генотипа по всем 5 генам определяют влияние выявленных аллелей на формирование предрасположенности к ПНБ путем подсчета суммарного балла по формуле и составляют заключение на основании обработки полученных данных. Значение суммарного балла <0,16 является основанием для отнесения обследуемого лица к группе с низким риском, значение от 0,16 до 0,40 баллов - к группе со средним риском, а значение >0,40 баллов - к группе с высоким риском формирования ПНБ. Предлагаемый способ позволяет выделить группы женщин низкого, среднего или высокого риска развития ПНБ, что необходимо для своевременной профилактики или коррекции выявленных нарушений до наступления беременности. 5 ил., 9 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способу характеристики микроорганизмов. Сущность способа состоит в (a) получении тестируемого образца, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы; (b) наслаивании тестируемого образца на плотностный буфер в контейнере, где указанный плотностный буфер обладает однородной плотностью от приблизительно 1,025 до приблизительно 1,120 г/мл; (c) добавлении идентификатора в указанный тестируемый образец и/или в указанный плотностный буфер; (d) центрифугировании указанного контейнера для разделения микроорганизмов от других компонентов указанного тестируемого образца и образовании осадка микроорганизмов; (e) спектроскопическом исследовании осадка и/или указанного одного или более чем одного идентификатора с получением измерений, которые характеризуют микроорганизмы, где указанные спектроскопические исследования проводят при нахождении указанного осадка в указанном контейнере; и (f) характеристике микроорганизмов в осадке на основании полученных измерений и/или присутствия или отсутствия указанного идентификатора или метаболизированной формы указанного идентификатора в осадке, где указанные микроорганизмы характеризуют по одной или более моделям классификации, выбранным из группы, состоящей из групп по Граму, клинических групп по Граму, терапевтических групп и функциональных групп. Использование заявленного изобретения позволяет повысить точность характеристики микроорганизмов. 14 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования течения и эффективности терапии сахарного диабета 2-го типа у индивидуумов русской национальности. После выделения ДНК из периферической венозной крови проводят анализ полиморфного варианта +250A/G гена лимфотоксина α (Ltα). В случае выявления генотипа +250GG Ltα прогнозируют благоприятное течение сахарного диабета 2-го типа и получение положительного эффекта от проведения терапии пероральными сахароснижающими препаратами. Изобретение обеспечивает получение новых критериев оценки течения заболевания и эффективности проводимой терапии у индивидуумов русской национальности, страдающих сахарным диабетом 2-го типа. 4 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования уровня гликированного гемоглобина y индивидуумов русской национальности, больных сахарным диабетом 2 типа. После выделения ДНК из периферической венозной крови проводят анализ полиморфного варианта +36A/G гена рецептора фактора некроза опухоли 1-го типа (TNFR1). В случае выявления генотипа +36АА TNFR1 прогнозируют повышенный уровень гликированного гемоглобина у больных сахарным диабетом 2-го типа. Изобретение обеспечивает возможность определения компенсации сахарного диабета 2 типа y индивидуумов русской национальности, больных сахарным диабетом 2 типа путем генотипирования TNFR1. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогноза течения ишемического инсульта у больных сахарным диабетом. Сущность способа: проводят забор анализируемого образца крови, при этом осуществляют в динамике цитофлюориметрический анализ полученного тестируемого образца на наличие маркеров эндотелиальной дисфункции - растворимых молекул адгезии sICAM-1 и sVCAM-1. При значении уровней экспрессии молекул адгезии sICAM-1 591,9 нг/мл и более и sVCAM-1 632 нг/мл и более в первые дни острейшего периода ишемического инсульта с последующим сохранением в динамике данных уровней или их повышением относительно исходных уровней прогнозируют неблагоприятное течение ишемического инсульта у данной категории больных. Применение способа обеспечивает высокую чувствительность, специфичность и точность прогноза в первые дни острейшего периода ишемического инсульта у больных сахарным диабетом. 5 ил 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к судебной медицине, а именно к судебно-медицинской экспертизе, и предназначено для определения биологического возраста трупа при длительной кровопотере. Для осуществления способа в базальном слое эпидермиса при длительной кровопотере определяют экспрессию иммуногистохимических маркеров Ki67, р53 и bcl-2. При величине Ki67 более 18,0%, величине р53 менее 0,3%, величине bcl-2 более 12,0% делают вывод о биологическом возрасте трупа 5-10 лет. При величине Ki67 7,3-11,6%, величине р53 1,0-2,28%, величине bcl-2 2,5-7,5% делают вывод о биологическом возрасте трупа 35-45 лет. При величине Ki67 менее 3,0%, величине р53 более 5,5%, величине bcl-2 менее 0,5% делают вывод о биологическом возрасте трупа 70-85 лет. Изобретение обеспечивает определение биологического возраста трупа и позволяет более объективно решать задачи, поставленные перед судебно-медицинским экспертом следственными органами. 2 пр.
Наверх