Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в экспериментальной медицине в целях укрепления тканей бельма на различных этапах кератопротезирования. У экспериментальных животных производят разрез роговицы концентрично лимбу. Формируют роговичный интрастромальный карман, в который вводят имплантат в виде диска, диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм, состоящий из 4-5 мг коллагена I типа и 100-300 мкг фактора роста rhBMP-2. Способ позволяет повысить биомеханические свойства роговицы в эксперименте, создать благоприятную почву для дальнейшего кератопротезирования, что приводит к уменьшению операционных и послеоперационных осложнений при лечении ожоговых бельм роговицы. 2 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в экспериментальной медицине в целях укрепления тканей бельма на различных этапах кератопротезирования.

Известен способ укрепления бельма роговицы аутохрящем ушной раковины [Краснов М.М. и др. Офтальмологический журнал. 1978, №7, с. 392-394].

Известен способ укрепления бельма роговицы аутонадкостницей большеберцовой кости [Волков В.В., Ушаков Н.А. в кн. «Вопросы восстановительной офтальмологии». Л., 1972, с. 37].

Недостатками этих способов являются необходимость в предварительном заборе аутологичных тканей и возникающие сложности при моделировании имплантата, а также слабые адаптационные возможности материала и его лизис в послеоперационном периоде.

Наиболее близким аналогом является способ подготовки ожогового бельма роговицы к кератопротезированию с использованием эквивалента хрящевой ткани [Перспективы использования тканеинженерной конструкции на основе культивированных аутологичных хондроцитов на этапах подготовки бельма к кератопротезированию. / Р.А. Гундорова, Е.В. Киселева, П.В. Макаров, Ю.А. Капитонов, Т.А. Канукова. // Российский офтальмологический журнал. - 2014. - Т. 7. - №3. - С. 65-70].

Недостатком данного способа является необходимость в заборе аутологичных клеток и их последующее культивирование, что требует проведения дополнительной операции и не дает возможности приступить к лечению в кратчайшие сроки. Также не решена проблема лизиса используемого имплантата и его большая толщина, усложняющая проведение операции.

Задачей изобретения является повышение биомеханических свойств роговицы в эксперименте и стабилизация полученного функционального эффекта в течение длительного времени.

Техническим результатом, достигаемым при использовании изобретения, является создание благоприятной почвы для дальнейшего кератопротезирования, что приводит к уменьшению операционных и послеоперационных осложнений при лечении ожоговых бельм роговицы.

Технический результат достигается тем, что в способе укрепления бельма роговицы в эксперименте, включающем использование имплантата, изготовленного из коллагена, согласно изобретению, у экспериментальных животных производят разрез роговицы концентрично лимбу, затем формируют роговичный интрастромальный карман, в который вводят имплантат в виде диска, диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм, состоящий из 4-5 мг коллагена I типа и 100-300 мкг фактора роста rhBMP-2. Биодеградация коллагена активирует находящийся в нем фактор роста, под воздействием которого происходит перестройка окружающих тканей. BMP (bone morphogenetic protein) - это плейотропные ростовые факторы, принадлежащие к суперсемейству β-трансформирующего фактора роста (TGF-β).

BMP регулируют три ключевые фазы остеогенеза: хемотаксис, митоз, дифференцировку. Также BMP регулируют гематопоэз, стимулируют синтез внеклеточного матрикса, влияют на поддержание жизнеспособности клеток. Укрепление бельма с помощью фактора роста rhBMP-2 позволяет надолго повысить биомеханические характеристики роговицы, восполнить дефицит ткани в случае истонченных бельм, повысить устойчивость тканей к ишемизации.

Таким образом, предложенный способ укрепления бельма по сравнению с существующими аналогами позволяет отказаться от использования трансплантатов из аутологичных тканей и успешно препятствовать развитию осложнений, таких как протрузия кератопротеза, за счет увеличения прочностных свойств исходных тканей самого бельма, образования новой соединительной ткани и улучшения обменных процессов, протекающих в бельме.

Способ прост в исполнении, не требует дорогостоящей аппаратуры и препаратов, может быть использован в экспериментальной медицине при разработке оперативных методов лечения ожоговых бельм.

Способ осуществляется следующим образом

В 4-5 мг/мл водного раствора коллагена I типа (производство фирмы «ИМТЕК», Москва) добавляли от 100 мкг до 300 мкг фактора роста rhBMP-2. Затем полученный гидрогель разливали в лунки 24-луночного планшета по 1,0 мл. Для формирования геля полученную смесь инкубировали при +37°C в течение 30 минут. Образованные коллагеновые гидрогели, извлеченные из планшета, отмывали в 500 мл фосфатного буферного раствора Рингера-Кребса при комнатной температуре в течение 24 часов, с заменой раствора каждые 8 часов. Далее гели выкладывали на поверхность и сушили их до полного высыхания потоком воздуха при +37°C. Полученные пленки регидратировали, высушивали, получая, таким образом, имплантат в виде, например, диска диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм.

Испытание проводилось на кроликах породы шиншилла весом 2,0-2,5 кг. Под общей и капельной анестезией производился разрез роговицы протяженностью 5 мм на 3/5 ее глубины концентрично лимбу. В данной плоскости формировали роговичный интраламеллярный карман, в который вводили заявленный имплантат. На разрез накладывались швы. У животных оперировали один глаз для сохранения ориентации в окружающем пространстве.

Предложенным способом было проведено укрепление бельма роговицы на 18 кроликах-самцах породы «шиншилла» с исходной массой тела 2,0-2,5 кг. Моделирование ожогового бельма проводилось за 6 месяцев до операции, на левом глазу животных путем аппликации на роговицу кролика хлопчатобумажного диска диаметром 10 мм, пропитанного 10% NaOH в течение 7 секунд, правый глаз был контрольным.

Клиническую оценку состояния глаз животных проводили по степени воспалительной реакции, васкуляризации роговицы (Ченцова Е.В., 1996), интенсивности помутнения роговицы (Войно-Ясенецкий В.В., 1953). Наблюдаемые изменения регистрировались путем фотографирования на фотощелевой лампе фирмы «Opton» (Германия).

Результаты эксперимента оценивали на предмет морфологии и биомеханики.

Пример 1

Кролику-самцу породы шиншилла, массой 3,5 кг, оперировали правый глаз. Выполняли ретробульбарную блокаду 0,5% новокаином. Производился разрез роговицы протяженностью 5 мм на 2/3 ее глубины концентрично лимбу. В данной плоскости при помощи расслаивателя формировали роговичный интрастромальный карман «от лимба до лимба». При помощи пинцета для завязывания и шпателя вводили имплантат, в виде диска диаметром 9 мм и толщиной 0,5 мм, состоящий из 4 мг коллагена I типа и 100 мкг фактора роста rhBMP-2 в полость сформированного кармана. На разрез накладывались швы. По окончании операции производили подконъюнктивальную инъекцию гентамицина сульфата 1,0% в объеме 0,5 мл. Далее в течение одной недели инстиллировали окомистин по 1 капле 2 раза в день.

Клиническую оценку состояния глаз животных проводили по степени воспалительной реакции, васкуляризации роговицы (Ченцова Е.В., 1996), интенсивности помутнения роговицы (Войно-Ясенецкий В.В., 1953). Наблюдаемые изменения регистрировались путем фотографирования на фотощелевой лампе фирмы «Opton» (Германия).

Результаты экспериментов оценивали морфологически. Роговую оболочку вырезали по окружности лимба, а затем фиксировали ее в формалине в течение суток. Полученный диск роговицы разрезали пополам, перпендикулярно по отношению к сосудам. Оба фрагмента обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заливали в парафин. Срезы толщиной 8-10 мкм изготавливали на микротоме и окрашивали гематоксилином и эозином. Исследование срезов роговицы проводили под световым микроскопом при 16- и 40-кратном увеличении.

Для исследования биомеханических характеристик роговую оболочку вырезали по окружности, захватывая при этом участок склеры, отступая 3 мм от лимба. Для чистоты эксперимента использовали свежевыкроенные ткани животных, полученные непосредственно перед проведением исследования. Полученный диск роговицы зажимали между двух металлических пластин с отверстием в центре, соответствующем диаметру роговицы, таким образом, чтобы фиксация происходила за ткань склеры, а роговица была интактной. Готовую конструкцию опускали в физиологический раствор, чтобы препятствовать высыханию тканей во время исследования. Оценку биомеханических свойств проводили при помощи исследования тканей на прокол на разрывных машинах фирмы «Instron».

В раннем послеоперационном периоде отмечено наличие незначительного отека роговицы. Отек был слабо выражен и обусловлен, по всей видимости, наличием операционной травмы. Клинических признаков острого инфекционного поражения окружающих тканей при осмотре не обнаружено. На 9-й день отмечалось появление новообразованных сосудов эксцентрично лимбу, с последующим нарастанием их числа и увеличением калибра сосудов. На 34-й день отмечалась стойкая стабилизация клинической картины. Через 2 месяца клинически значимых изменений не отмечалось. К концу периода наблюдения (90 дней) у кролика наблюдалась васкуляризация и утолщение тканей роговицы до 0,6 мм. Гистологическое исследование области трансплантата показало его частичное разволокнение и замещение новообразованной соединительной тканью, местами в него врастают сосуды. Роговица значительно утолщена. Исследование биомеханических свойств показало повышение прочностных характеристик тканей в 4,5 раза.

Пример 2

Кролику-самцу породы шиншилла, массой 3,5 кг, оперировали правый глаз. Выполняли ретробульбарную блокаду 0,5% новокаином. Производился разрез роговицы протяженностью 5 мм на 2/3 ее глубины концентрично лимбу. В данной плоскости при помощи расслаивателя формировали роговичный интрастромальный карман «от лимба до лимба». При помощи пинцета для завязывания и шпателя вводили имплантат, в виде диска диаметром 12 мм и толщиной 0,2 мм, состоящий из 5 мг коллагена I типа и 300 мкг фактора роста rhBMP-2 в полость сформированного кармана. На разрез накладывались швы. По окончании операции производили подконъюнктивальную инъекцию гентамицина сульфата 1,0% в объеме 0,5 мл. Далее в течение одной недели инстиллировали окомистин по 1 капле 2 раза в день.

Клиническую оценку состояния глаз животных, морфологические исследования и оценку биомеханических характеристик проводили согласно примеру 1.

В раннем послеоперационном периоде отмечено наличие незначительного отека роговицы. Отек был слабо выражен и обусловлен, по всей видимости, наличием операционной травмы. Клинических признаков острого инфекционного поражения окружающих тканей при осмотре не обнаружено. На 7-й день отмечалось появление новообразованных сосудов эксцентрично лимбу, с последующим нарастанием их числа и увеличением калибра сосудов. К концу первого месяца отмечалась стойкая стабилизация клинической картины. Через 2 месяца клинически значимых изменений не отмечалось. К концу периода наблюдения (90 дней) у кролика наблюдалась васкуляризация и утолщение тканей роговицы до 0,7 мм. Гистологическое исследование области трансплантата показало его частичное разволокнение и замещение новообразованной соединительной тканью, местами в него врастают сосуды. Роговица значительно утолщена. Исследование биомеханических свойств показало повышение прочностных характеристик тканей в 4,5 раза.

Способ укрепления бельма роговицы в эксперименте, включающий использование имплантата, изготовленного из коллагена, отличающийся тем, что у экспериментальных животных производят разрез роговицы концентрично лимбу, затем формируют роговичный интрастромальный карман, в который вводят имплантат в виде диска, диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм, состоящий из 4-5 мг коллагена I типа и 100-300 мкг фактора роста rhBMP-2.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области медицины. Способ изготовления глазного протеза заключается в формировании имитирующего склеру видимой части глаза непрозрачного основания и имитирующего роговицу прозрачного покрытия, получении и нанесении на основание изображения здорового глаза и закреплении покрытия на основании с помощью светоотверждаемого клея.

Изобретение относится к офтальмологии и представляет лечебную силикон-гидрогелевую мягкую контактную линзу (МКЛ). Линза содержит несквозные депо, заполненные лекарственным веществом.

Устройство офтальмологической линзы содержит вставку с изменяемыми оптическими свойствами, содержащую передний и задний криволинейные элементы. Задняя поверхность переднего криволинейного элемента и передняя поверхность заднего криволинейного элемента имеют различные радиусы кривизны.

Группа изобретений относится к медицине. Устройство офтальмологической линзы со вставкой с изменяемыми оптическими свойствами, расположенной в части оптической зоны устройства офтальмологической линзы, которая содержит: криволинейную переднюю и криволинейную заднюю поверхности, причем данные поверхности выполнены с возможностью формирования камеры; источник энергии, встроенный во вставку с изменяемыми оптическими свойствами на участке, содержащем неоптическую зону; и ориентирующий слой, содержащий участки жидкокристаллического материала, расположенный внутри камеры.

Группа изобретений относится к области медицины. Устройство контактной линзы со вставкой с изменяемыми оптическими свойствами расположена в части оптической зоны устройства контактной линзы.

Группа изобретений относится к области медицины. Офтальмологическая контактная линза для по меньшей мере одного из замедления, сдерживания или предупреждения прогрессирования миопии, содержащая: оптическую зону, выполненную с возможностью положительной асимметричной аберрации, для создания физиологического эффекта на глаз, причем положительная асимметричная аберрация включает в себя асимметричные радиальные профили оптической силы с увеличением оптической силы от центра к краю оптической зоны, причем асимметричные радиальные профили оптической силы могут изменяться вдоль различных радиальных меридианов, и при этом дифференциал оптической силы между центром и краем оптической зоны составляет от 0,5 дптр до 25 дптр, и периферийную зону, окружающую оптическую зону.

Офтальмологическое устройство содержит линзу, имеющую оптическую и периферическую зоны, выпуклую переднюю и вогнутую заднюю изогнутые поверхности, и текстурный узор, сформированный на одной или обеих из поверхностей на глубине и с интервалами, обеспечивающими повышение смачиваемости поверхности, тем самым улучшая комфорт и не нарушая нормальный обзор через устройство.

Изобретение относится к области офтальмохирургии. Способ определения радиуса кривизны передней поверхности интрастромальной оптической линзы (INLAY) для коррекции пресбиопии, включающий показатели преломления стромы роговицы (Nрогов), материала оптической линзы (Nматер) и радиус кривизны задней поверхности Rзадн.

Изобретение относится к медицине, а именно к области офтальмомикрохирургии. Искусственная радужка выполнена в виде плоского кольца и окрашенной, ее центральное отверстие выполнено в виде усеченного конуса.

Группа изобретений относится к медицине. Офтальмологическая линза содержит: оптическую зону, выполненную с возможностью коррекции зрения, причем оптическая зона образована из первого материала, имеющего первый модуль упругости; периферийную зону, окружающую оптическую зону и образующую верхнюю область, среднюю область и нижнюю область, причем периферийная зона образована из первого материала; и активные зоны увеличенной толщины, расположенные в средней области; и тонкие зоны, расположенные в верхней и нижней областях, и одну или более зон с высоким модулем упругости, встроенных в тонкие зоны в периферийной зоне, причем одна или более зон с высоким модулем упругости образованы из второго материала, имеющего второй модуль упругости, причем второй модуль упругости больше первого модуля упругости.
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для обработки донорской роговицы с проведением двухстороннего УФ-кросслинкинга перед кератопротезированием осложненных сосудистых бельм 4-5 категории. Для этого донорскую роговицу помещают на 1 час в среду для консервации. Затем донорскую роговицу перемещают в стерильную ёмкость и обрабатывают ультрафиолетом с одной стороны роговицы с длиной волны 365 нм мощностью 3 мВ/кв. см. При этом каждые 5 минут производят инстилляцию на роговицу 1 капли 0,1%-ного раствора рибофлавина (первая обработка). После обработки с одной стороны донорскую роговицу обрабатывают ультрафиолетом с противоположной стороны так же, как при первой обработке. Среда для консервации содержит рибофлавина мононуклеотид, декстран, глутатион, натрия хлорид и воду дистиллированную очищенную, при следующем соотношении компонентов, мас.%: рибофлавина мононуклеотид - 0,1, декстран - 10,0, глутатион - 0,09, натрия хлорид - 0,9, вода дистиллированная очищенная - остальное. Способ обеспечивает получение донорской роговицы с повышенными биохимическими, биомеханическими и прочностными свойствами, что способствует снижению риска некроза роговицы. 1 з.п. ф-лы, 1 пр.

Изобретение относится к медицине. Устройство для аппликации имплантатов роговицы содержит: аппликатор имплантатов с отверстием аппликатора, проделанным сквозь него, и опору имплантатов с отверстием опоры, проделанным сквозь нее. Причем аппликатор имплантатов и опора имплантатов расположены друг относительно друга так, что образуют гнездо для имплантатов, которое приспособлено к заключению в нем имплантата роговицы, При этом отверстие аппликатора и отверстие опоры выполнены так, что силы между имплантатом роговицы и жидкостью, находящейся в отверстии аппликатора, больше, чем силы между имплантатом роговицы и жидкостью, находящейся в отверстии опоры. При этом большие силы обеспечивают аппликатор, у которого сродство к имплантату роговицы больше, чем у опоры. Применение данного изобретения позволит расширить арсенал технических средств, а именно устройств для аппликации имплантатов роговицы. 11 з.п. ф-лы, 54 ил.
Группа изобретений относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначена для доставки лекарственных веществ к структурам заднего сегмента глаза. Для получения биодеградируемого имплантата экструдируют водные растворы полимеров и/или сополимеров гликозаминогликанов, молочной кислоты и поливинилпирролидона с формированием затравок - "сухих" эллипсоидов вращения, высушивают и сшивают гамма-излучением. Затравки переносят в водный раствор указанных полимеров и/или сополимеров с растворенным в нем лекарственным веществом, выдерживают 30-120 минут и подвергают экструзии и сшивке гамма-излучением. Повторяют экструзию с чередованием растворов, содержащих и не содержащих лекарственное вещество, формируя многослойный имплантат с максимальным размером по продольной оси 3,0- 5,0 мм, по поперечной оси 0,1-0,3 мм. Использование группы изобретений обеспечивает достижение и поддержание требуемой концентрации лекарственного вещества в витреальной полости. 2 н.п. ф-лы.

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Иридохрусталиковая диафрагма выполнена из эластичного материала в виде окрашенного кольца с расположенными по периферии дугообразными незамкнутыми опорными элементами для точечного касания, способными подгибаться в плоскости окрашенного кольца. При этом толщина опорных элементов превышает толщину окрашенного кольца. Применение данного изобретения позволит повысить жесткость и надежность фиксации опорных элементов при сохранении легкости иридохрусталиковой диафрагмы. 5 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Искусственная радужка выполнена из эластичного материала в виде окрашенного кольца с расположенными по периферии опорными элементами, способными подгибаться в плоскости окрашенного кольца. При этом опорные элементы замкнуты и их толщина превышает толщину окрашенного кольца. Применение данного изобретения обеспечит необходимой жесткостью и надежностью фиксации опорных элементов при сохранении легкости имплантации искусственной радужки. 5 з.п. ф-лы, 4 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначено для лечения миопии и укрепления склеры в зонах истончения, стафилом и разрывов. Трансплантат готовят из аллогенной склеры. После механической очистки ее замачивают в течение 4 часов в 6% растворе перекиси водорода. Промывают дистиллированной водой. Замораживают на 1-2 часа при -20°С. Дефростируют и замачивают на 2 часа в 10% растворе гидроксида аммония при температуре 40°С. Отмывают стерильной дистиллированной водой и вновь замачивают на 6 часов в 6% растворе перекиси водорода. Промывают стерильным физиологическим раствором и помещают в 75% раствор этилового спирта. Герметично упаковывают для хранения до использования. Использование изобретения обеспечивает получение органотипичного аллогенного биосовместимого коллагенового трансплантата из склеры со значительно сниженными антигенными свойствами. 1 ил., 3 пр.

Офтальмологическая линза по меньшей мере одна из основных поверхностей которой содержит фильтр. Фильтр имеет следующие свойства: средний коэффициент отражения синего света в диапазоне длин волн от 420 нм до 450 нм больше или равен 5% для угла падения в диапазоне от 0° до 15°; кривая спектральной отражательной способности для угла падения в диапазоне от 0° до 15° имеет максимальную отражательную способность на длине волны менее 435 нм и полную ширину на уровне половинной амплитуды, которая больше или равна 80 нм, и для угла падения θ в диапазоне от 0° до 15° и для угла падения θ' в диапазоне от 30° до 45° параметр Δ(θ,θ'), определяемый отношением Δ(θ,θ') = 1 - [Rθ'(435 нм) / Rθ(435 нм)], больше или равен 0,6, где Rθ(435 нм) и Rθ'(435 нм) - величины отражательной способности основной поверхности, содержащей фильтр, на длине волны 435 нм для углов падения θ и θ'. Технический результат – обеспечить пропускание всего светового излучения, уменьшение пропускания синего света в диапазоне длин волн от 420 нм до 450 нм и высокое пропускание в диапазоне длин волн от 465 нм до 495 нм. 4 н. и 17 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл.

Изобретение относится к полупроводниковым устройствам, содержащим матрицу из удерживающих ячеек, в которой каждая удерживающая ячейка сконфигурирована с возможностью содержания медикамента, и каждая удерживающая ячейка содержит элемент активации ячейки, сконфигурированный для высвобождения медикамента из удерживающей ячейки при получении триггера активации. 2 н. и 16 з.п. ф-лы, 7 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для коррекции глазной щели при ретракции верхнего века. Имплантат для устранения ретракции верхнего века выполнен из биосовместимого и биостабильного материала с помощью фотополимеризации светочувствительной композиции на основе олигомеров и мономеров метакрилового ряда в виде полимерной эластичной перфорированной пленки. Использование изобретения позволяет повысить эффективность лечения ретракции верхнего века. 6 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к медицине. Протез выполнен с возможностью ношения на глазу пользователя и содержит: выпуклую поверхность; вогнутую поверхность и зону расширения апертуры, имеющую участок, который отличается от остального протеза. При этом зона расширения апертуры имеет минимальный вертикальный размер больше чем или равный 10,5 мм. Причем зона расширения апертуры содержит площадь инкрементальной толщины с максимальным дополнительным приращением толщины, расположенным на расстоянии по меньшей мере 5,25 мм от геометрического центра протеза. Зона расширения апертуры сконфигурирована с возможностью расширения естественной глазной щели глаза пользователя. Применение данного изобретения позволит увеличить глаз или изменить внешний вид глаза носителя. 19 з.п. ф-лы, 1 табл., 69 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в экспериментальной медицине в целях укрепления тканей бельма на различных этапах кератопротезирования. У экспериментальных животных производят разрез роговицы концентрично лимбу. Формируют роговичный интрастромальный карман, в который вводят имплантат в виде диска, диаметром 9-12 мм и толщиной 0,2-0,5 мм, состоящий из 4-5 мг коллагена I типа и 100-300 мкг фактора роста rhBMP-2. Способ позволяет повысить биомеханические свойства роговицы в эксперименте, создать благоприятную почву для дальнейшего кератопротезирования, что приводит к уменьшению операционных и послеоперационных осложнений при лечении ожоговых бельм роговицы. 2 пр.

Наверх