Способ количественного определения альдегидных групп в окисленном декстране

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для количественного определения альдегидных групп в окисленных полисахаридах, а именно окисленного декстрана. Для этого к окисленному декстрану добавляют водные растворы 3-(4, 5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида и щелочи. Контрольный раствор, содержащий те же компоненты за исключением окисленного декстрана, готовят параллельно. Оптическую плотность опытного и контрольного растворов регистрируют на спектрофотометре при 540 нм, количество окисленного декстрана определяют с использованием калибровочного графика. Изобретение обеспечивает точные и воспроизводимые результаты для определения окисленного декстрана, применяемого в качестве биосовместимого и биодеградируемого носителя для лекарственных препаратов. 2 ил., 5 пр.

 

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для количественного определения альдегидных групп в водорастворимых окисленных полисахаридах, в частности окисленном декстране, применяемом в качестве биосовместимого и биодеградируемого носителя для лекарственных препаратов.

Альдегидные группы в окисленном декстране способны реагировать с нуклеофильными группами различных лекарственных препаратов, в частности с первичными аминогруппами, с которыми образуются устойчивые ковалентные азометиновые связи. В организме конъюгат окисленного декстрана с лекарственным препаратом захватывается клетками ретикуло-эндотелиальной системы, в которых происходит ферментативный гидролиз декстрановой матрицы с высвобождением лекарственного средства. Таким образом, происходит адресная доставка лекарственного препарата в клетки ретикуло-эндотелиальной системы, которые являются основным эндогенным очагом развития многих внутриклеточных инфекций, в частности туберкулеза и системных микозов. Чем больше альдегидных групп в окисленном декстране, тем больше к нему можно присоединить фармакологически активного компонента, содержащего первичные аминогруппы. В связи с этим, важное значение имеет количественное определение альдегидных групп в окисленном декстране.

В аналитической химии существует достаточно большое число методов количественного определения альдегидных групп.

В частности, известен метод, основанный на реакции альдегидных групп с солями гидроксиламина. Как правило, для реакции используют гидрохлорид гидроксиламина, который вступает в реакцию с альдегидными соединениями с образованием оксимов, а по количеству образующейся соляной кислоты, определяемой титриметрическими методами, находят количественное содержание альдегидных групп. Недостатком этого метода является неводное титрование с использованием таких органических растворителей, как безводный этанол, метанол, диметиламиноэтанол и др., которые осаждают как окисленные, так и неокисленные полисахариды, включая декстраны (1).

Известен способ определения альдегидных групп по реакции присоединения бисульфита. Как и при использовании гидроксиламина гидрохлорида, данный способ не отличается высокой чувствительностью. Дополнительным недостатком способа является использование серной кислоты, которая может привести к частичному гидролизу окисленного декстрана, особенно при нагревании (2).

Близким к вышеуказанным способам определения альдегидных групп является способ, основанный на образовании гидразонов. Этот способ имеет те же недостатки. Кроме того, он неприемлем для анализа окисленного декстрана, так как образующиеся гидразоны, за счет высокой гидрофильности декстрана, растворимы в воде и не могут быть отфильтрованы и количественно определены гравиметрически, как, например, алифатические или ароматические гидразоны (3).

Для количественного определения альдегидных групп в окисленном декстране также неприемлемы методы с использование гипоиодита, так как это соединение является достаточно сильным окислителем и может дополнительно вызывать окисление глюкозных остатков в окисленном декстране, что приведет к получению завышенных результатов. (4).

Существуют комбинированные способы определения альдегидных групп, основанные на предколоночной дериватизации альдегидов с образованием оксимов и гидразонов, с последующим использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии. Способы отличаются сложностью исполнения и неприемлемы для окисленного декстрана, так как окисленный декстран нерастворим в ацетонитриле, который используется для обращено-фазовой хроматографии (5).

Наиболее близким аналогом к заявляемому изобретению является способ количественного определения альдегидных групп в окисленном декстране, включающий добавление к окисленному декстрану раствора 2,4-динитрофенилгидразина в качестве аналитического реагента, спиртового раствора щелочи, инкубацию анализируемого раствора, регистрацию оптической плотности раствора на спектрофотометре при длине волны 480 нм относительно контроля; определение содержания альдегидных групп в мМ/л раствора окисленного декстрана по калибровочному графику, построенному по неокисленному декстрану соответствующей молекулярной массы (6). Недостатком известного способа является то, что при использовании 2,4-динитрофенилгидразина и спиртового раствора щелочи наблюдается осаждение декстрана, что приводит к появлению мутности и вследствие этого плохой воспроизводимости результатов. Снижение концентрации спирта приводит к тому, что окрашенный продукт взаимодействия окисленного декстрана, 2,4-динитрофенилгидразина и спиртового раствора щелочи становится нестабильным и окраска быстро в течение нескольких минут исчезает, что также приводит к плохой воспроизводимости результатов.

Задачей, на решение которой направлено изобретение, является повышение воспроизводимости способа. Техническим результатом является предотвращение осаждения окисленного декстрана из реакционной среды при реализации способа.

Решение поставленной задачи достигается тем, что к окисленному декстрану в качестве аналитического реагента добавляют 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида и водный раствор щелочи; оптическую плотность раствора регистрируют при длине волны 540 нм.

Раскрытие изобретения

Способ количественного определения альдегидных групп в окисленном декстране включает добавление в опытной пробе к водному раствору окисленного декстрана с молекулярной массой 40 или 70 кДа 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида в качестве аналитического реагента и водного раствора щелочи. В качестве контрольной пробы используют смесь водных растворов 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида и щелочи в тех же концентрациях и объемах, что в опытной пробе. Затем проводят инкубацию полученных растворов; регистрируют их оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 540 нм. По разности оптической плотности опытного и контрольного растворов определяют содержание альдегидных групп в мМ/л раствора окисленного декстрана с помощью калибровочного графика, построенного по неокисленному декстрану аналогичной молекулярной массы.

Для реализации способа в качестве щелочи может быть использована гидроокись калия. Окисленный декстран молекулярной массы 40 или 70 кДа может быть получен согласно (7).

Для реализации способа используют растворы в следующих концентрациях: водный раствор гидроокиси калия - не выше 0,2%; водный раствор 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида - не выше 0,05%; окисленный декстран - не выше 0,1%.

Полученные смеси растворов инкубируют при температуре не менее 30°С (30±0,2°С) не менее 15 мин.

Для инкубации растворов используют водяной термостат с точностью 0,2°С, например Ultraterm BWTU. Регистрацию оптической плотности осуществляют на спектрофотометре, например СФ-2000.

Примеры калибровочных графиков для неокисленного декстрана молекулярной массы 40 или 70 кДа приведены на фиг. 1, 2.

Условия реакции альдегидных групп окисленного декстрана с 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромидом установлены экспериментально. Изменение концентрации реактивов и условий проведения реакции снижает чувствительность способа и воспроизводимость результатов анализа. Например, при увеличении в реакционной смеси количества раствора 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида или увеличения его концентрации свыше 0,05% контрольные пробы приобретают значительную фоновую окраску, которая мешает определению оптических плотностей в пробах. Аналогичный эффект наблюдается при увеличении количества или концентрации раствора гидроокиси калия. Температура и время реакции также подобраны экспериментально, и при снижении температуры ниже 30°С и снижении времени реакции менее 15 минут наблюдается снижение оптических плотностей растворов, а при увеличении - оптические плотности не изменяются, так как количество окрашенного продукта реакции лимитируется количеством альдегидных групп в окисленном декстране.

Перечень фигур и иных материалов

Фиг. 1. Калибровочный график для неокисленного декстрана с молекулярной массой 40 кДа.

Фиг. 2. Калибровочный график для неокисленного декстрана с молекулярной массой 70 кДа.

Осуществление изобретения

В опытную пробу вносят 1,5 мл 0,1% водного раствора окисленного декстрана молекулярной массы 40 или 70 кДа, 1,5 мл 0,05% водного раствора 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида и 0,4 мл 0,2% водного раствора гидроокиси калия. В контрольную пробу вносят то же без окисленного декстрана. Пробирки встряхивают и помещают в термостат при температуре (30±0,2)°С на 15 минут.

По окончании инкубации измеряют оптическую плотность растворов в опытной и контрольной пробах на спектрофотометре при длине волны 540 нм в стандартной кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм. Определяют разность полученных значений, по которой определяют содержание альдегидных групп (С) в мМ/л раствора окисленного декстрана с использованием калибровочного графика, построенного по неокисленному декстрану той же молекулярной массы.

Примеры конкретного выполнения.

Заявленное изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.

Пример 1.

Перед осуществлением заявленного способа получают окисленный декстран с молекулярной массой 40 кДа согласно (7), добавляя в качестве окислителя 2 мл 2% раствора перманганата калия на 99 мл 5% раствора неокисленного декстрана с молекулярной массой 40 кДа.

Для осуществления заявленного способа в опытную пробирку вносят 1,5 мл 0,05% водного раствора 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида, 0,4 мл 0,2% водного раствора гидроокиси калия и 1,5 мл 0,1% водного раствора окисленного декстрана с м.М 40 кДа. В контрольную пробирку вносят 1,5 мл 0,05% водного раствора 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида, 0,4 мл 0,2% водного раствора. Пробирки встряхивают и помещают в водяной термостат Ultraterm BWTU при температуре (30±0,2)°С на 15 минут. По окончании инкубации измеряют оптическую плотность опытного и контрольного растворов на спектрофотометре СФ-2000 при длине волны 540 нм в стандартной кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм, определяют их разность. По величине последней определяют содержание альдегидных групп (С) в мМ/л раствора окисленного декстрана по калибровочному графику, построенному по неокисленному декстрану молекулярной массы 40 кДа. В результате анализа получено содержание альдегидных групп в окисленном декстране 0,21 мМ/г.

Пример 2.

Перед осуществлением заявленного способа получают окисленный декстран с м.М. 40 кДа согласно (7), добавляя в качестве окислителя 4 мл 2% раствора перманганата калия на 99 мл 5% раствора неокисленного декстрана с м.М. 40 кДа. Заявленный способ осуществляют, как описано в примере 1. В результате анализа получено содержание альдегидных групп в окисленном декстране 0,43 мМ/г.

Пример 3.

Перед осуществлением заявленного способа получают окисленный декстран с м.М. 70 кДа согласно (7), добавляя в качестве окислителя 2 мл 2% раствора перманганата калия на 99 мл 5% раствора неокисленного декстрана с м.М. 70 кДа. Заявленный способ осуществляют, как описано в примере 1, используя окисленный декстран с м.М. 70 кДа вместо окисленного декстрана с м.М. 40 кДа. Содержание альдегидных групп (С) в мМ/л раствора окисленного декстрана находят по калибровочному графику, построенному по не окисленному декстрану молекулярной массы 70 кДа. В результате анализа получено содержание альдегидных групп в окисленном декстране 0,11 мМ/г.

Пример 4.

Перед осуществлением заявленного способа получают окисленный декстран с м.М. 70 кДа согласно (7), добавляя в качестве окислителя 4 мл 2% раствора перманганата калия на 99 мл 5% раствора неокисленного декстрана с м.М. 70 кДа. Заявленный способ осуществляют, как описано в примере 3. В результате анализа получено содержание альдегидных групп в окисленном декстране 0,19 мМ/г.

Пример 5.

Перед осуществлением заявленного способа получают окисленный декстран с м.М. 70 кДа согласно (7), добавляя в качестве окислителя 6 мл 2% раствора перманганата калия на 99 мл 5% раствора неокисленного декстрана с м.М. 70 кДа. Заявленный способ осуществляют, как описано в примере 3. В результате анализа получают содержание альдегидных групп в окисленном декстране 0,29 мМ/г.

Во всех приведенных выше примерах визуально наблюдали отсутствие помутнения, опалесценции или выпадения осадка в области рабочих концентраций растворов исследуемых образцов, что подтверждает предотвращение осаждения окисленного декстрана из реакционной среды при реализации способа. При повторном воспроизведение способа в примерах 1-5, получали отклонение от первоначального результата количественного определения альдегидных групп в окисленном декстране не более 5%, что свидетельствует о высокой воспроизводимости заявленного способа.

Список использованных источников

1. С. Сиггиа, Дж. Г. Ханна. Количественный органический анализ по функциональным группам. Москва. Изд-во Химия, 1983, с. 80-84.

2. Там же, с. 85-89.

3. Там же, с. 89-95.

4. Там же, с. 112.

5. М. Czaplicka, K. Jaworek, A. Wochnic Determination of aldehydes in wet deposition // Archives of environmental protection, 2014. Vol. 40. N 2. P. 21-31.

6. С. Сиггиа, Дж. Г. Ханна. Количественный органический анализ по функциональным группам. Москва, Изд-во Химия, 1983, с. 122-125.

7. Евразийский патент на изобретение №011718 «Способ получения диальдегиддекстрана», опубл. 28.04.2009, МПК С08В 37/02.

Способ количественного определения альдегидных групп в окисленном декстране, включающий добавление аналитического реагента и раствора щелочи к окисленному декстрану молекулярной массы 40 или 70 кДа; приготовление контрольного раствора того же состава за исключением окисленного декстрана, инкубацию полученных растворов, регистрацию на спектрофотометре их оптической плотности, определение разности оптической плотности опытного и контрольного растворов, определение на основе полученной величины содержания альдегидных групп по калибровочному графику, построенному по неокисленному декстрану той же молекулярной массы, что у окисленного декстрана, отличающийся тем, что к окисленному декстрану добавляют водные растворы 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида и щелочи, оптическую плотность растворов регистрируют при длине волны 540 нм.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и касается способа получения селективного иммуносорбента для удаления антител к десмоглеину 3 типа (Dsg3) из крови больных пузырчаткой, при котором приготавливают раствор Dsg3 в фосфатном буфере.

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунохимии, а именно к способу получения материала для биологического связывания с помощью сорбирующих колонок. Сущность изобретения заключается в том, что разработан способ получения селективного иммуносорбента для удаления антител - IgG к десмоглеину 3 типа из сыворотки крови больных пузырчаткой с использованием твердофазного носителя, заключающийся в том, что для его получения рекомбинантый человеческий десмоглеин 3 типа (Dsg3) иммобилизируют путем ковалентного связывания с твердофазным носителем, в качестве которого применяют агарозный сорбент, несущий на своей поверхности N-гидроксисукцинимидные группы: NHS-активированную агарозу.

Группа изобретений относится к области диагностики, а именно к устройству для выявления аналитов, включающему пластиковую подложку, частично или полностью непосредственно покрытую связывающими полимерами, фиксированными на подложке нековалентно, при этом указанные связывающие полимеры содержат полисахаридный остов, снабженный: ароматическими группами формы -X-CONH-Z, группами карбоновой кислоты формы -Х-СООН и реакционно-способными группами F, имеющими форму -X-CONH-Z′, где X означает неразветвленную или разветвленную, замещенную или незамещенную алкильную цепь, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, Z означает арильную функцию, Z′ означает группу, которая способна связываться с другой молекулой, а также к способам производства указанного устройства, кроме того, к связывающему полимеру и к способу его получения.

Изобретение относится к области медицины и биотехнологии и касается способа анализа сахаридных вакцин без взаимовлияния. .
Изобретение относится к иммунобиотехнологии и может быть использовано в производстве высокочувствительных тест-систем для (качественного и количественного) определения антигенов, антител и других иммунореактивных соединений, а также в технологии изготовления безинструментальных и надежных диагностикумов для генно-гибридизационного и лиганд-рецепторного анализа.

Изобретение относится к фармации и может быть использовано для определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем, приобретенной в процессе технологической обработки исходного вещества в виде многократного последовательного уменьшения концентрации последнего с использованием носителя, которая проявляется в способности непосредственно изменять физико-химические и/или биологические свойства вещества, состоящего из молекул, структурно схожих с молекулами исходного вещества, при воздействии на него указанным носителем.

Изобретение относится к фармакологии и может быть использовано для определения выраженности модифицирующей активности, ассоциированной с носителем, приобретенной в процессе технологической обработки исходного вещества в виде многократного последовательного уменьшения концентрации последнего с использованием носителя, которая проявляется в способности непосредственно изменять физико-химические и/или биологические свойства исходного вещества при воздействии на него указанным носителем.

Изобретение относится к способу количественного определения методом ВЭЖХ таурина и аллантоина при их совместном присутствии в различных лекарственных препаратах, биологически активных добавках, косметической и пищевой продукции.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способу определения контаминации растворов и биологических жидкостей. Сущность способа состоит в том, что детектируют биологические объекты, включающие микроорганизмы или вирусы, с помощью наночастиц металлов, формирующихся in situ из внесенных в исследуемый объект солей соответствующих металлов, при последующем анализе динамики спектральных характеристик формирующихся наночастиц.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу биотестирования активности противопаразитарных субстанций и препаратов, содержащих в качестве активного вещества авермектины и их производные, с помощью олигохет вида Tubifex tubifex.
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, фармации, дерматологии, косметологии и судебной медицине, и может быть использовано при разработке новых лекарственных средств, предназначено для поиска и оценки эффективности средств, обесцвечивающих кожу в области «красных» и «синих», свежих и старых кровоподтеков, при разработке косметических технологий, предназначенных для удаления кровоподтеков, а также при судебной медицинской экспертизе давности кровоподтеков и ушибов мягких тканей.

Изобретение относится к медицине для определения концентрации в биосистемах (сыворотке крови, слюне и др.) и может быть использовано для количественного определения биоцидного гидразида изоникотиновой кислоты (изониазида) в водных растворах этого соединения при токсикологическом и техническом анализе субстанции и лекарственных форм этого препарата.

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, позволяющим осуществлять эффективный скрининг антиоксидантов. Способ экспресс-скрининга потенциальных антиоксидантов заключается в том, что выделяют липопротеиды низкой плотности (ЛНП) из плазмы венозной крови здоровых доноров, осуществляют окисление липопротеидов низкой плотности при температуре 37°С внесением 30 мМ сульфата меди (CuSO4), после чего через фиксированные интервалы времени измеряют накопление липогидропероксидов (конъюгированных диенов) при 233 нм (ΔD233) и по результатам исследования строят кинетическую кривую окисления ЛНП, из которой определяют продолжительность периода индукции (τ), затем в опытные пробы вносят исследуемые антиоксиданты (конечная концентрация 1 мкМ), растворенные либо в 96% этаноле - для жирорастворимых веществ или в среде инкубации - для водорастворимых веществ, и если продолжительность периода индукции исследуемого вещества выше 0,4 - вещество может рассматриваться в качестве эффективного антиоксиданта; если ниже 0,1 - исследованное вещество эффективным антиоксидантом не является.

Изобретение относится к фармации, фармакологии и клинической фармакологии и касается способа модельно-дискриминационной оценки фармацевтической эквивалентности лекарственных средств, покрытых кишечнорастворимой оболочкой, включающего определение кинетики растворения изучаемых препаратов и препарата сравнения путем последовательного помещения по одной единице твердой дозированной формы в фосфатный буфер объемом 500 мл с рН 1,05±0,05 и при температуре 37±0,05°С, перемешивания с помощью лопастной мешалки со скоростью 100 об/мин, отбора аликвоты через 2 часа и ее фильтрации, определения в аликвоте действующего вещества, переноса лекарственной формы в фосфатный буфер с рН 7,0±0,05, перемешивания с помощью лопастной мешалки со скоростью 100 об/мин, отбора аликвот через 10, 15, 20, 30, 45, 60 минут и в дополнительное расчетное время объемом 5 мл с восполнением этого объема средой растворения; аликвоты фильтруют, прибавляют к 2 мл фильтрата аликвот по 400 мкл 0,25 моль/л натрия гидроксида, определяют количество действующего вещества, перешедшего в раствор, параллельно проводят второй этап сравнительного теста кинетики растворения, включающий последовательное помещение по одной единице твердой дозированной формы в среду растворения с рН 4,0±0,05 объемом 500 мл, перемешивание с помощью лопастной мешалки со скоростью 100 об/мин, отбор проб через 10, 15, 20, 30, 45, 60 минут объемом 5 мл с восполнением этого объема средой растворения, фильтрацию аликвот, прибавление к 2 мл фильтрата аликвот по 400 мкл 0,25 моль/л натрия гидроксида, определение количества действующего вещества, перешедшего в раствор, с рН 7,0±0,05, объемом 900 мл, перемешивание с помощью лопастной мешалки со скоростью 100 об/мин, отбор проб через 10, 15, 20, 30, 45, 60 минут, при этом дополнительно определяют точку отбора аликвоты из среды растворения с рН 7,0±0,05 по формуле Тр=(Тк×0,121)+t(1).

Изобретение относится к области фармации и может быть использовано для определения фазы цветения лекарственного сырья, в частности горца птичьего, горца перечного и горца почечуйного.

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано для количественного определения серебряной соли сульфадимидина для стандартизации и контроля качества лекарственных средств. Для этого готовят контрольный водный раствор сульфадимидина. Оптическую плотность рабочего и контрольного образцов регистрируют спектрофотометрически при длине волны 242 нм. Расчет результатов проводят по удельному показателю поглощения с учетом молекулярных масс сульфадимидина и его серебряной соли. Изобретение обеспечивает унифицирование методики анализа в контрольно-аналитических лабораториях, результатов определения и уменьшение погрешности анализа. 2 табл., 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть использовано для концентрирования и разделения флавоноидов (ФЛ), таких как кверцетин, (+)-катехин, нарингин, для последующего определения в растительных образцах, фармацевтических препаратах. Способ концентрирования и разделения флавоноидов, включающий сорбционно-хроматографическое извлечение флавоноидов пропусканием раствора кверцетина, (+)-катехина или нарингина через мезопористый сорбент типа МСМ-41, полученный из реакционной смеси цетилтриметиламмоний бромида (CTABr), источника кремния и дистиллированной воды и прошедший гидротермальную обработку, фильтрование полученной смеси, экстракцию темплата, высушивание и кальцинирование, при этом используются ацетонитрильные растворы флавонидов, при этом в качестве источника кремния использован тетраэтоксисилан (TEOS), реакционная смесь дополнительно содержит аммиак и этиловый спирт, обработку сорбента производят при определенных условиях, полученный сорбент предварительно фракционируют до размера частиц 0,1-0,25 мм и дополнительно модифицируют триметилхлорсиланом, при этом в качестве растворителя при модификации используется трихлорметан. Вышеописанный способ повышает степень извлечения и разделения флавоноидов- кверцетина, нарингина, катехина. 6 ил., 13 пр..

Изобретение относится к композиционной частице для применения в маркировке, пригодной для идентификации/установления подлинности изделия. Частица содержит по меньшей мере одну суперпарамагнитную часть и по меньшей мере одну термолюминесцентную часть. Суперпарамагнитная часть содержит один или более супермагнитных материалов, выбранных из оксида железа, металлического Fe, металлического Со, металлического Ni и их сплавов. Термолюминесцентная часть содержит керамический материал, легированный одним или более ионами, выбранными из ионов переходных металлов и ионов редкоземельных металлов. Изобретение обеспечивает повышение степени защиты изделий, надежность идентификации и защиты от постороннего вмешательства, фальсификации и подделки. 11 н. и 24 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и контролю качества и может быть использовано в фармацевтической промышленности и научно-исследовательской деятельности для количественного определения гиалуронидазной активности лекарственных средств. Способ определения гиалуронидазной активности лекарственных средств включает смешивание исследуемого раствора известной концентрации с ацетатным буферным раствором с рН 5,6, инкубирование, добавление раствора гиалуроновой кислоты, инкубирование в течение 15 минут, охлаждение во льду, добавление рассчитанного по титру количества 0,8 М тетрабората калия, помещение на кипящую водяную баню, взаимодействие с реактивом Эрлиха, определение оптической плотности спектрофотометрическим методом при длине волны 586 нм, толщине слоя 10 мм, определение гиалуронидазной активности путем сравнения со стандартным образцом, в качестве рабочего стандартного образца используют лекарственный препарат «Лидаза» с гиалуронидазной активностью не менее 300 МЕ/мл и концентрацией белка не выше 4 мг/мл, определение гиалуронидазной активности проводят в Международных единицах. 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для количественного определения альдегидных групп в окисленных полисахаридах, а именно окисленного декстрана. Для этого к окисленному декстрану добавляют водные растворы 3--2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромида и щелочи. Контрольный раствор, содержащий те же компоненты за исключением окисленного декстрана, готовят параллельно. Оптическую плотность опытного и контрольного растворов регистрируют на спектрофотометре при 540 нм, количество окисленного декстрана определяют с использованием калибровочного графика. Изобретение обеспечивает точные и воспроизводимые результаты для определения окисленного декстрана, применяемого в качестве биосовместимого и биодеградируемого носителя для лекарственных препаратов. 2 ил., 5 пр.

Наверх