Штамм микроскопического гриба @ @ - @ - @ -продуцент ксиланазы для поверхностного культивирования

 

Штамм микроскопического гриба Aspergillus foetidus D-73 Хколлекция Центрального музея промьшшенных микроорганизмов института ВНИИгенетика , коллекционный номер ЦМПМР-222) продуцент ксиланазы для поверхностного культивирования.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ .СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

° (! 9) (И) ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР (21) 3642163/28-13 (22) 25.07.83 (46) 07.06.85. Бюл. В 21 (72) Н.М. Павлова, P.Ã. Месхи, P.Â. Зуева, А.Б. Хабурдзания, К.А. Калунянц и В.П. Кременцова (71) Всесоюзный научно-исследовательский биотехнический институт (53) 577.152(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

И- 362871, кл. С 12 N,9/42, 1972.

Целлюлазы микроорганизмов АН СССР

Ордена Ленина институт биохимии им. А.Н. Баха. N., "Наука", 1981, с. 125-130.

4 ») С 12 N. 9/42; .С 12 N 1/14

С 12 R 1:665 (54) ШТАММ МИКРОСКОПИЧЕСКОГО ГРИ А

ASPERGILLUS F0WIDUS D-73 ПРОДУЦЕНТ

КСИЛАНАЗЫ ДЛЯ ПОВЕРХНОСТНОГО КУЛЬТИВИР ОВАНИЯ ° (57) Штамм микроскопического гриба

Aspergillus foetidus D-73 (коллекция Центрального музея промышленных микроорганизмов института "ВНИИгенетика", коллекционный номер ЦМПМ Р-222) продуцент ксиланазы для поверхностного культивирования.

11599

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к штаммам-продуцентам ферментных препаратов.

Целью изобретения является полу- 5 чение активного штамма-продуцента ксиланазы.

Штамм продуцирует систему фермен- . тов, действующих на ксиланы различного строения и происхождения и состоящую из эндо-1,4-у -ксиланазы, экзо-Ъ,;4-„ -ксилозидазы и l.-h-арабинофуранозидазы.

Наряду с этими ферментами штамм продуцирует эндо-1,4-.) -маннаназу, 15 . расщепляющую маннаны, лихеназу, ламинариназу, расщепляющие P глюканы, а также ферменты, входящие в состав. целлюлазного комплекса, эндо-1,4-P-глюканазу, С1 -экзим, целлобиазу.. 20

Штамм обладает арил )3-глюкозидаз-. ной активностью, продуцирует гидролитические ферменты пектолитического комплекса, обладает протеолитической и осахаривающей активностями. 2S

Штамм получен в результате селекции исходного. штамма Asp. Foetidus ,N-45 с применением нитрозогуанидина (концентрация 1Х экспозиция 30 мин).

Штамм имеет следующие характеристики, Морфология.

Мицелий сильно разветвленный, извилистый, имеет вид тонких сепарированных гиф. Стенки клеток мицелия 35 плотные. Ширина клеток мицелия от

3-6 мкм. Длина клетрк колеблется в пределах 14-18 мкм. Конидиеносцы длинные, прямые, без перегородок, ширина конидиеносцев 4,5-9,0 мкм. Ди- 40 аметр головки конидиеносцев 1120,0 мкм. Конидии круглые, равные, диаметр 3-5 мкм.

Культурально-физиологические признаки. 45

Среда сусло-агар. Колония круглая, с ровными краями, с глубокой радиальной складчатостью, белого цвета, Конидии образуются в центре колоний. 50

Диаметр гигантской колонии 6-8 см.

Нижняя поверхность колоний характеризуется радиальной извилистой складчатостью.

Среда Чапека. Колония плотная, бе-у лого цвета, круглая, слегка приподнята в центральной части. Конидиеобразование незначительно. Диаметр ко.

53 г лонии 4,5-5,5 см. На нижней стороне колонии сильная глубокая складчатость.

Картофельный агар. Колония белого цвета с ровными краями, складчатость радиальная. Диаметр колонии 3-4 см.

На нижней стороне колонии заметная складчатость, Морковный агар. Колония белого цве. та с ровными краями, с сильно рациальной складчатостью на обеих сторонах, Диаметр колонии 4-5 см.

Синтетическая агаризированная среда. Небольшая колония белого цвета.

Диаметр колонии 2-3 см. Складчатость отсутствует. Нитраты восстанавливает, Температурные границы развития: при 20 С рост замедленный, при 30 С рост хороший, при 40 С рост слабый, при 50 С рост очень слабый.

Физиологические свойства.

Рост на молоке. Молоко не свертывает и не пептонизирует. Желатину разжижает.

Рост на лолетиках картофеля хороший, с мощной складчатой пленкой, конидиеобразование довольно слабое.

Декстрины, крахмалы, сахарозу, мальтозу, маннит, лактозу, глюкозу, глицерин потребляет, но при этом происходит подкисление среды.

Пример. Для получения ферментного препарата ксилофоетидина П10Х используют штамм Asp. foetidus D-73 при культивировании er о в поверхностных условиях. Выращивание поверхностной культуры проводят в растительных камерах на среде, состоящей из пшеничных отрубей 607, биошрота из культуры Asp. f oetidus 26-30Х, пшеничной соломы 57, листьевой массы томатов 57 и с начальной влажностью, равной 58-60Х.

Посевной материал для засева растительных камер готовят следующим способом.

Колбу на 750 мл с пшеничными отрубями и влажностью 307. засевают конидиальной суспензией. Посевной материал выращивают в термостате при

30 С до обильного спороношения, Для засева одной растильной камеры используют 15-20 таких колб из расчета на 300 кг питательной среды. Культивируют гриб в растительной камере при

28-30 С 48-52 ч. Выращенную культуру .дробят и подвергают экстрагированию

О при 30 С. Отношение. абсолютно сухого веса культуры гриба к воде на стадии

Составитель В. Голимбет

Техред З.Палий Корректор М. Пожо

Редактор П. Коссей

Заказ 3694/24

Тираж 525 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 1 1599 экстракции составляет 1:7. Время экстракции 40 мин, температура смеси о

30 С. Содержание сухих веществ в экстракторе колеблется от 6 до 77.

Затем экстракт сепарируют для 5 удаления взвешенных частиц и снижения обсемененности препарата. Осветление экстракта проводят 1,5 ч на сепараторе.

Осаждение препарата проводят спиртом на установке непрерывного действия при концентрации его в смеси

75Х.

53 4

Перед осаждением спирт и экстракт о грибной культуры охлажцают до 0 С.

Температура смеси спирта и экстракта не превышает 10 С, о

Ферментный осадок отделяют от водно-спиртовой смеси в кларификаторе.

Влажность сырого препарата составляет

607. Сушку препарата осуществляют в вакуум-сублимационной сушилке КСЗО

12-14 ч. Влажность сухого препарата составляет 137.. Препарат представляет собой порошок светло-серого цвета.

Активность препарата по ксиланаэе составляет 4000 ед/г.