Способ прогнозирования наступления беременности

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении экстракорпорального оплодотворения в плазме крови. Сущность способа: определяют пиковую концентрацию тромбина в тесте генерации тромбина и при его значении свыше 360 нмоль/л беременную относят в группу высокого тромбогенного риска и за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов яичника проводят гепаринотерапию. Способ прост в исполнении, является высокоинформативным и позволяет выявить группу высокого тромбогенного риска, дифференцировать назначение антикоагулянтной терапии у пациенток при проведении ВРТ и найдет широкое применение в практическом здравоохранении, в частности акушерстве и гинекологии. 1 пр., 2 ил.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для повышения частоты наступления беременности у групп высокого тромбогенного риска, нуждающихся в антикоагулянтной терапии в программе вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) при проведении экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

Одной из актуальных проблем медицины является бесплодный брак, который по своей социальной значимости занимает одно из ведущих мест в современном акушерстве. В связи с этим большое распространение в мире получил метод лечения бесплодия путем ЭКО. При этом эффективность программы ЭКО по частоте наступления беременности остается в мире на уровне 30-40%. Неудачи ЭКО могут быть обусловлены многими факторами, однако к числу наиболее важных причин высокая тромбогенность самой репродуктивной технологии вследствие эстрогенгестагеновой гормональной нагрузки, наличии других (исходных, до ЭКО) факторов тромбогенного риска. В настоящее время нет точных и объективных лабораторных критериев для отбора женщин высокого тромбогенного риска, нуждающихся в гепаринотерапии для улучшения исходов ЭКО по частоте наступления беременности.

Известен способ выбора применения гепарина для профилактики тромботических осложнений (Патент №2408288 от 10.01.2011), который был предложен для снижения тромбогенности по уровню растворимых фибринмономерных комплексов при беременности.

Однако недостатком известного способа является то, что он не позволяет отобрать группу тромбогенного риска при проведении ЭКО.

Наиболее близким по достигаемому техническому результату является способ прогнозирования наступления беременности при проведении ЭКО (прототип), отражающий количество и качество ооцитов путем определения овариального резерва по измерению базального уровня фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), определяемого на 3-4-й день менструального цикла (Серов В.В., Прилепская В.Н., Овсянникова Т.В. Гинекологическая эндокринология. М: Медпресс-информ, 2006. - 528 с.).

Недостатком известного способа является низкая информативность в прогнозировании вероятности наступления беременности при проведении ЭКО.

Авторы предлагают способ определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении ЭКО, позволяющий повысить частоту наступления беременности.

Техническим результатом заявляемого способа является повышение информативности наступления беременности при проведении ЭКО.

Технический результат достигается тем, что определяют пиковую концентрацию тромбина в тесте генерации тромбина и при его значении свыше 360 нмоль/л беременную относят в группу высокого тромбогенного риска и за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов яичника проводят гепаринотерапию.

Способ осуществляют следующим образом

Заявляемый способ проиллюстрирован фигурами 1, 2 в виде таблиц.

На фигуре 1 представлены исходы ЭКО по динамике концентрации пика тромбина.

На фигуре 2 дана оценка результатов ЭКО в зависимости от динамики пика тромбина при лечении фраксипарином.

Кровь берут утром натощак из локтевой вены иглой без шприца (самотеком) и немедленно смешивают с 3,8% раствором цитрата натрия. Стабилизированную кровь до центрифугирования (в том числе и в процессе транспортировки) хранят при комнатной температуре (+18…+25°) не более 1 ч. Исследование крови со сгустками или гемолизом не допускается. Стабилизированную кровь центрифугируют на центрифуге, например «Eppendorf 581R», Германия, при 1000 об/мин (140-160 g) в течение 5-7 мин. Богатую тромбоцитами плазму с помощью пипетки переносят в другую пробирку, в которой ее дополнительно центрифугируют при 3000-4000 об/мин (1200-1400 g) в течение 15 минут, в результате получают бедную тромбоцитами плазму (БТП).

Материал для исследования и реактивы

БТП замораживают при температуре минус 40°-70°C на срок до 1 суток. Размораживают плазму на водяной бане при +37°C, после чего проводят исследование.

Исследование плазмы крови выполняют на планшетном флюориметре Fluoroskan Ascent «ThermoFisher SCIENTIFIC» (Финляндия), оснащенным диспенсером, с программным обеспечением «Thrombinoscope 3.0.0.26». В лунки 96-луночного планшета добавляют 20 мкл тканевого фактора (5 рМ), 20 мкл калибратора тромбина и 80 мкл исследуемой плазмы крови. Затем смесь инкубируют 10 мин. После инкубации смеси при температуре +37°C в лунки вносят 1000 мкл буфера, содержащий ионизированный кальций и флуорогенный субстрат. Образующийся тромбин расщепляет субстрат, в результате чего высвобождается флуорофор. Его излучение автоматически регистрируется через равные промежутки времени, причем интенсивность свечения пропорциональна концентрации образовавшегося тромбина. По данной кривой автоматически расчитывается пик тромбина (пиковая концентрация тромбина, нмоль/л) - максимальная концентрация тромбина в единицу времени.

В среднем, в норме уровень пика тромбина составляет 306,87±6,57 нмоль/л с пределами нормальных колебаний (±2σ) 276,87-336,87 нмоль/л. Апробация заявляемого способа включала в себя 2 этапа. На первом из них у 150 женщин с бесплодием (средний возраст 34,6±0,4 лет) определена динамика тромбогенности по концентрации пика тромбина: перед гормональной стимуляцией в цикле ЭКО, за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов и на 14 день после переноса эмбриона, в день определения наступления беременности по результатам ХГЧ и проанализирована частота наступления беременности (фигура 1). Результаты первого этапа показали, что у 52 женщин при наступлении беременности концентрация пика тромбина была 334,32±4,65, у 98 женщин беременность не наступила, пиковая концентрация тромбина была выше 360 нмоль/л, тогда как в контроле эти показатели не превышали 360 нмоль/л.

На втором этапе была сформирована группа высокого тромбогенного риска, состоящая из 19 женщин (средний возраст 33,1±0,7 лет) в процессе проведения процедуры ЭКО, у которых концентрация пика тромбина за 2-3 дня до пункции фолликулов яичников превышала 360 нмоль/л (фигура 2). Апробация заявляемого способа проведена на этих 19 пациентках, которым в связи с высоким пиком тромбина, более 360 нмоль/л, в течение 12-14 дней (после подсадки эмбриона и до определения наступления беременности по результатам ХГЧ) назначалась тромбопрофилактика лечебными дозами низкомолекулярных гепаринов: фраксипарин по 0,3 мл 2 раза в день подкожно в течение 14 дней. Как видно из фигуры 2, у 7 (36,8%) женщин при лечении лечебными дозами фраксипарина определено снижение пика концентрации тромбина в тесте генерации тромбина и у них наступила беременность по результатам ХГЧ. У 12 (63,1%) женщин снижения концентрации пика тромбина не произошло и беременность по показателям ХГЧ не наступила.

Клинический пример

Пациентка П.Н., 27 лет, обратилась 3.09.2011 г. в центр сохранения и восстановления репродуктивной функции Алтайской краевой клинической больницы по поводу бесплодия (трубного) для прохождения программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). У нее имелся регулярный менструальный цикл, противопоказаний к беременностям и родам не выявлено.

Для исследования системы гемостаза применялся тест генерации тромбина. Обследование проводилось в динамике, в образцах плазмы крови, полученных перед началом гормональной стимуляции (исходный фон - 1-й этап), за 2 дня до пункции яйцеклеток (2-й этап) и на 14 день после переноса эмбрионов (3-й этап). Анализы выполнялись на планшетном флюориметре Fluoroskan Ascent «ThermoFisher SCIENTIFIC».

До вхождения в цикл ЭКО (1-й этап) пиковая концентрация тромбина у женщины составила 340,22 нмоль/л (при норме 306,87±6,57 нмоль/л). На втором этапе наблюдений, перед пункцией яйцеклеток, значения пика тромбина оказалось равным 386,62 нмоль/л (при норме 346,32±4,65 нмоль/л).

С учетом полученных данных больной назначен курс лечения фраксипарином по 0,3 мл ×2 раза в день, в течение двух недель. На фоне проводимой гепаринотерапии в конце цикла ЭКО, на 3-м этапе наблюдений, пик тромбина составил 320,20 нмоль/л и соответствовал пределам нормальных колебаний данного показателя, что сопровождалось успешным наступлением беременности.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что при концентрации тромбина свыше 360 нмоль/л (за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов яичника) необходимо назначение гепаринотерапии в лечебных дозах для повышения частоты наступления беременности при проведении экстракорпорального оплодотворения.

Таким образом, заявляемый способ определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) обладает высокой информативностью и может быть использован в акушерстве и гинекологии.

Способ определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении экстракорпорального оплодотворения, заключающийся в том, что определяют пиковую концентрацию тромбина в тесте генерации тромбина, и при его значении свыше 360 нмоль/л беременную относят в группу высокого тромбогенного риска и за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов яичника проводят гепаринотерапию.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, включающей исследования биологического материала, и касается определения относительной длины теломер на хромосомах. Способ заключается в выявлении укорочения относительной длины теломер на отдельных хромосомах Т-лимфоцитов периферической крови с помощью метода количественной флуоресцентной гибридизации in situ (Q-FISH).

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для раннего выявления дисметаболической нефропатии у детей 3-7 лет. Способ заключается в исследовании пробы мочи после взаимодействия мочи с 10% водным раствором хлорида кальция фотометрически на микропланшетном ридере при длине волны 620 нм и количественном определении кристаллообразующей способности мочи по формуле: Соп-(Dn-Dn-1)·13,4/(D4-D3), где D4 - оптическая плотность стандартного раствора 13,4 г/л оксалата натрия с 10% раствором хлористого кальция, D3 - оптическая плотность стандартного раствора 13,4 г/л оксалата натрия с дистиллированной водой, Dn - оптическая плотность опытной пробы пациента №Х с 10% раствором хлористого кальция, Dn-1 - оптическая плотность опытной пробы пациента с дистиллированной водой, 13,4 г/л - концентрация стандартного раствора оксалата натрия.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и неонатологии, и может быть использовано для прогнозирования патологического течения неонатального периода.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для экспресс-диагностики злокачественных опухолей в условиях больницы на интраоперационном этапе.

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для скрининга детей дошкольного возраста с целью раннего выявления у них возможности инфекции мочевыводящих путей.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к использованию бактериальной бета-лактамазы для диагностики in vitro и визуализации, диагностики и лечения in vivo.

(57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для оценки воздействия на организм животных низкоинтенсивного лазерного облучения крови. У животного проводят забор венозной крови до, во время и после низкоинтенсивного лазерного облучения крови, получают из нее плазму.

Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине, и может быть использовано для определения вероятности образования пятна крови от живого лица.

Изобретение относится к медицине, а именно к судебной медицине, и может быть использовано для определения давности пятна крови. Способ включает измерение оптической плотности вытяжки из пятна крови и дополнительное определение вида ткани предмета-носителя.

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к способам дифференциальной диагностики, и может использоваться для дифференциальной диагностики новообразований головного мозга.

Изобретение относится к медицине, в частности к биологической химии, и предназначено для более полной оценки окислительной модификации белков (ОМБ) и анализа соотношения альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) основного и нейтрального характера в плазме и клетках крови, а также в тканях животных с целью определения степени выраженности и стадии окислительного стресса. Способ основывается на том, что спектр ОМБ делится на отдельные геометрические фигуры, представляющие собой прямоугольные трапеции. Площадь под кривой спектра окислительной модификации белков складывается из площадей под кривой АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера и определяется по формуле. Предложенный способ позволяет не только оценить общее значение ОМБ, определить количество АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, но и сопоставить первичные и вторичные маркеры ОМБ и в результате этого выявить путь нарушения нативной конформации белков. 3 ил., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности комплексного лечения больных раком легкого в раннем послеоперационном периоде. Сущность изобретения заключается в том, что в течение суток после операции и периоперационной аутохимиоиммунотерапии в плазме крови больного определяют активность α-1-протеиназного ингибитора. При ее повышении на 28% и выше по отношению к общепринятой норме прогнозируют эффективность лечения, а при изменении менее 28%, отсутствии изменений или снижении по сравнению с нормой прогнозируют неэффективность лечения. Применение способа обеспечивает высокую специфичность, возможность срочной объективной оценки эффективности воздействия начальных этапов комплексного лечения, проведения анализа по cito, также позволяет своевременно назначать адекватные лечебные мероприятия или заменять лечение. Специфичность способа для срочного прогнозирования эффективности начальных этапов комплексной терапии - 80,9%, для прогнозирования отсутствия эффективности - 97%. 4 пр.

Изобретение относится к мониторингу окружающей среды и биологических объектов на предмет определения содержания ионов металлов в жидких средах с использованием фотохромных соединений. В способе спектрофотометрического определения ионов металлов в жидких средах с использованием фотохромных соединений из класса хроменов за счет образования комплексов между фотоиндуцированной мероцианиновой формой этих соединений и ионами металлов в качестве хроменов используются бисхромены, такие как 2,2,11,11-тетракис(4-метоксифенилфенил)диокса(1,12)трифенилен, 2,2,8,8-тетракис(4-метоксифенил)диокса(1,7)хризен, 3,3,11,11-тетра-(4-метоксифенил)-3,11-дигидро-4,10-диоксадибензо[a,h]антрацен, 3,3,10,10-тетра-(4-метоксифенил)-3,10-дигидро-4,11-диоксадибензо[а,h]антрацен. Достигается повышение селективности определения. 24 пр., 1 табл., 6 ил.

Изобретение относится к медицине, касается способа оценки токсической опасности антихолинэстеразных соединений (АнХЭС). Суть заявляемого способа заключается в определении антихолинэстеразного эффекта растворов исследуемых АнХЭС на препарат холинэстеразы - фермент пропионилхолинэстераза мозговой ткани кальмара (ПХЭ), а именно в оценке процента угнетения активности ПХЭ в растворах малой - 0,04 Е/мл и высокой - 4 Е/мл концентрации. Токсическую опасность растворов исследуемых АнХЭС определяют по различию их воздействия на активность ПХЭ в растворах малой и высокой концентрации. Если процент угнетения активности ПХЭ в растворе высокой концентрации падает до нуля или не превышает 5-10%, делают заключение о том, что анализируемый раствор содержит высокотоксичное АнХЭС 1 класса опасности. Если величина ингибирующего эффекта остается постоянной или падает не более чем на 10%, делают заключение о наличии малотоксичного АнХЭС. Использование заявленного способа позволяет в течение 30-60 минут оценить токсическую опасность АнХЭС в самых различных ситуациях, когда их состав не известен и они находятся в виде растворов неизвестной концентрации. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, кардиологии и сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для диагностики тромбоэмболии легочных артерий (ТЭЛА). Сущность способа: предварительно готовят образец сыворотки крови пациента путем высушивания сыворотки крови, измельчения сухого осадка и суспензирования его в вазелиновом масле. Подготовленный образец исследуют методом ИК-спектроскопии путем определения высоты пиков полос поглощения с максимумами 1165; 1160; 1150; 1100; 1070; 1050 и 1025 см-1. Затем вычисляют значение отношения высот пиков: отношение высоты пика с максимумом при 1160 см-1 к высоте пика с максимумом при 1165 см-1; отношение высоты пика с максимумом при 1165 см-1 к высоте пика с максимумом при 1070 см-1; отношения высоты пика с максимумом 1165 см-1 к высоте пика с максимумом 1150 см-1, отношения высоты пика с максимумом при 1165 см-1 к высоте пика с максимумом 1050 см-1, отношение высоты пика с максимумом при 1100 см-1 к высоте пика с максимумом 1050 см-1, отношение высоты пика с максимумом при 1025 см-1 к высоте пика с максимумом 1165 см-1. На основании полученных значений отношений строят дифференциально-диагностический профиль образца сыворотки крови пациента, получая плоский многоугольник, образованный 6 лучами, соответствующих 6 отношениям, и сравнивают с многоугольником, являющимся эталонным дифференциально-диагностическим профилем ТЭЛА, где значения 6 отношений составляют: 1 (1,85±0,26), 2 (0,28±0,13), 3 (0,39±0,07), 4 (0,25±0,13), 5 (0,58±0,10), 6 (4,47±1,70). При наличии сходства полученного дифференциально-диагностического профиля пациента с эталонным профилем и совпадении всех 6 значений отношений образца сыворотки крови пациента со значениями отношений эталонного профиля диагностируют у пациента ТЭЛА. Изобретение обладает высокой точностью, прост в исполнении и не требует больших материальных и временных затрат, при этом позволяет диагностировать тромбоэмболию всех легочных артерий, как при наличии клинически значимых симптомов данного заболевания, так и в их отсутствии. 2 пр., 3 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования течения заболевания у больных раком яичников. Сущность способа: в опухолевой ткани яичников определяют долю клеток в S фазе клеточного цикла, при значении этого показателя менее 15,9% прогнозируют благоприятный исход, а при значении этого показателя более 15,9% прогнозируют неблагоприятный исход. Изобретение может быть использовано многократно в гинекологических клиниках и специализированных стационарах онкоучреждений для прогнозирования развития рецидива рака яичников по данным ДНК-цитометрического анализа опухолевой ткани. 2 пр.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования гнойных послеоперационных осложнений у больных раком толстой кишки (колоректальный рак) путем динамического исследования крови. У больного раком толстой кишки на вторые и пятые сутки после операции определяют уровень С-реактивного белка (СРБ) в плазме крови. При значении уровня СРБ на пятые сутки менее 10,0 мг/дл прогнозируется относительно гладкое течение послеоперационного периода. В случае снижения уровня СРБ относительно вторых послеоперационных суток риск развития осложнений низкий. При нарастании уровня СРБ относительно вторых послеоперационных суток или сохранении его на одном уровне - риск развития осложнений средний. При значении уровня СРБ на пятые сутки более 10,0 мг/дл риск развития гнойных послеоперационных осложнений высокий. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование развития гнойных осложнений у пациентов на вторые и пятые сутки после операции по поводу колоректального рака. 3 пр.
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ ускоренной окраски гистологических препаратов для выявления микобактерий туберкулеза, включающий приготовление гистологических препаратов по общепринятой методике, окрашивание их по Циль-Нильсону, отличающийся тем, что после стандартной подготовки препаратов к окраске срезы проходят процедуру депарафинизации путем последовательного помещения их в ксилол и спирты нисходящей концентрации по 5 минут в термостат при температуре 54°C с последующим помещением их в воду, затем в 1% раствор йодной кислоты на 2 минуты и промыванием в проточной воде в течение 10 секунд, после чего на срез, покрытый фильтровальной бумагой, наливают карбол-фуксин Циля и подогревают над пламенем спиртовки до появления паров в течение 2 минут, оставляют краску на срезе после прекращения подогревания на 3-5 минут, убирают фильтровальную бумагу и ополаскивают срезы в воде, дифференцируют их 1% кислотным буфером, ополаскивают в водопроводной воде в течение 1 минуты, после чего на срез помещают раствор метиленового синего по Лефлеру и подогревают над пламенем спиртовки до появления паров, промывают в воде, дифференцируют в 1% кислотном буфере и хорошо промывают водой, обезвоживают в спиртах восходящей крепости в течение 1 минуты, помещают в ксилол и заключают в бальзам. 1 пр.

Изобретение относится к иммунологии и медицинской диагностике и представляет собой способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики. Предложенное изобретение предназначено для иммунохроматографического определения в жидких пробах антител к возбудителям инфекционных заболеваний или другим антигенам, например, таким как аллергены. Отличительной особенностью предлагаемого способа определения антител является то, что раствор для разбавления пробы содержит специфические антитела против иммобилизованной в аналитической зоне тест-полоски антигена (или антигенов). Используемая концентрация антител в разбавляющем растворе меньше нижнего предела определения антител данным методом при использовании разбавляющего раствора, не содержащего специфических антител, вследствие чего в отсутствие специфических антител в пробе окрашивания аналитической зоны тест-полоски не наблюдается. Если же проба содержит специфические антитела, то наличие в разбавляющем растворе дополнительного количества специфических антител приводит к усилению интенсивности окраски аналитической зоны тест-полоски. Применение изобретения позволяет регистрировать суммарную концентрацию специфических антител в пробе и в разбавляющем растворе, что приводит к снижению предела обнаружения анализа вследствие смещения рабочего диапазона определяемых тестом концентраций в область более низких значений. 3 ил., 1 пр.

Изобретение относится к способу обнаружения аналита в пробе жидкости тела путем использования диагностического тестового элемента. Диагностический тестовый элемент (110) для обнаружения аналита в пробе (126) жидкости тела, в частности цельной крови объемом менее 2 микролитров, содержит по меньшей мере одно тестовое поле (116) с по меньшей мере одним реагентом-индикатором, где реагент-индикатор способен при наличии аналита испытывать по меньшей мере одно обнаруживаемое изменение, в частности оптическое изменение. Тестовое поле (116) включает по меньшей мере один детекторный слой (118), содержащий реагент-индикатор, где детекторный слой содержит частицы (137). При этом по меньшей мере 90% всех частиц (137) индикаторного слоя (118) имеют фактический размер менее 10 микрон. Диагностический тестовый элемент (110)содержит по меньшей мере один несущий элемент (112), имеющий по меньшей мере одну прозрачную область (114), где тестовое поле (116) своей стороной детектирования (120) по меньшей мере частично нанесено на прозрачную область (114). Обнаруживаемое изменение является оптически детектируемым изменением, где для детектирования обнаруживаемого изменения применяют оптический детектор с пространственным разрешением. 8 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл., 2 пр.
Наверх