Способ комплексной оценки содержания продуктов окислительной модификации белков в тканях и биологических жидкостях

Авторы патента:

Фомина Наталья Васильевна (RU)

Абаленихина Юлия Владимировна (RU)

Терентьев Александр Александрович (RU)

Фомина Мария Алексеевна (RU)

G01N33/52 - использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги

Владельцы патента RU 2524667:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к биологической химии, и предназначено для более полной оценки окислительной модификации белков (ОМБ) и анализа соотношения альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) основного и нейтрального характера в плазме и клетках крови, а также в тканях животных с целью определения степени выраженности и стадии окислительного стресса. Способ основывается на том, что спектр ОМБ делится на отдельные геометрические фигуры, представляющие собой прямоугольные трапеции. Площадь под кривой спектра окислительной модификации белков складывается из площадей под кривой АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера и определяется по формуле. Предложенный способ позволяет не только оценить общее значение ОМБ, определить количество АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, но и сопоставить первичные и вторичные маркеры ОМБ и в результате этого выявить путь нарушения нативной конформации белков. 3 ил., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности, к биологической химии, и предназначено для более полной оценки окислительной модификации белков (ОМБ) и анализа соотношения альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) основного и нейтрального характера в плазме и клетках крови, а также в тканях животных с целью определения степени выраженности и стадии окислительного стресса.

На сегодняшний день окислительная модификация белков признана одним из наиболее ранних показателей поражения различных тканей организма при свободнорадикальной патологии [1, 4]. Следует отметить, что окислительная деструкция белков рассматривается как один из ранних и стабильных признаков окислительного стресса (ОС). В ранних стадиях окислительного стресса преобладают альдегид-динитрофенилгидразоны (АДНФГ), в поздних стадиях - кетон-динитрофенилгидразоны (КДНФГ) [6].

Определение окисленных групп белков как маркеров ОС имеет ряд преимуществ. Так, карбонильные группы являются химически стабильными соединениями и циркулируют в крови более продолжительный промежуток времени, чем конечные продукты свободнорадикального окисления липидов, например малоновый диальдегид. Окисленные белки подвергаются разрушению в течение часов и дней, в то время как продукты окисления липидов нейтрализуются за считанные минуты [7, 8].

Одним из перспективных направлений в науке стало практическое исследование ОМБ в биологическом материале при патологических состояниях. Результатом окислительной деструкции белков является нарушение нативной структуры белков [4]. Под действием АФК могут происходить два процесса - фрагментация белков, маркерами которой являются АДНФГ, и агрегация белков, маркерами которой являются КДНФГ [5, 6].

Для определения продуктов ОМБ обычно используется метод R.L.Levine в модификации Е.Е.Дубининой, основанный на регистрации 2,4-динитрофенилгидразонов основного и нейтрального характера. Содержание окисленных белков определяют не только в плазме и клетках крови, но и в тканях.

Из данных литературы известно, что для алифатических альдегид-динитрофенилгидразонов нейтрального характера спектр поглощения зарегистрирован в диапазоне 230-558 нм, основного характера - в диапазоне 258-264 и 428-520 нм. Для алифатических кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера спектр поглощения 363-367 нм, основного характера - 430-434 и 524-535 нм [3].

Анализ ОМБ производится путем сравнения отдельных значений на соответствующих длинах волн. В результате такой оценки накапливается большой фактический материал, демонстрирующий изменение карбонильных производных. Однако полученный материал перегружен числовыми значениями, что затрудняет оценку и анализ полученного материала. Известно, что одним из способов комплексной оценки может быть подсчет площади под кривой, так например, Малаховой М.Я. оценивались результаты содержания в плазме и эритроцитах крови веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНиСММ) [2].

Из всего вышеперечисленного следует, что для корректной интерпретации полученных результатов ОМБ требуется разработка метода, позволяющего комплексно оценить и проанализировать значения ОМБ, учитывая стадию окислительного стресса и нарушения конформации белков.

Сущность изобретения заключается в том, что график спектра ОМБ делится на УФ-спектр (100-400 нм) и область видимого света (380-790 нм). В свою очередь, в УФ-спектре регистрируются АДНФГ и КДНФГ нейтрального характера. Следовательно, длины волн 230, 254, 270, 280, 356 нм характеризуют АДНФГ нейтрального характера, а λ=363 нм и λ=370 нм характеризуют КДНФГ также нейтрального характера. Немаловажно отметить, что в области видимого света регистрируются АДНФГ (428 и 430 нм) и КДНФГ (430, 434 нм и 524, 535 нм) основного характера («Характеристика регистрации динитрофенилгидразонов в световом спектре», рис.1).

Поставленная цель достигается тем, что график спектра ОМБ разделяется на сегменты, одни из которых характеризуют первичные маркеры ОС - АДНФГ, а другие характеризуют вторичные маркеры ОС - КДНФГ.

Результат, который может быть получен при осуществлении изобретения, состоит в более полном анализе фактического материала, используя комплексную оценку содержания окисленных продуктов белка.

Это достигается тем, что оценка осуществляется при подсчете площади под кривой спектра окислительной модификации белков.

Учитывая, что «шаг» между длинами волн является величиной непостоянной, то вычислить площадь плоской фигуры с помощью определенного интеграла не представляется возможным. В результате этого возникает необходимость разбить площадь под кривой на отдельные фигуры, которые представляют собой прямоугольные трапеции (рис 1), высота которых будет равна разнице между длинами волн (h=λ₂-λ₁), а основания равны значениям экстинкции на определенной длине волны, например Ext_λ1 и Ext_λ2, выраженные в единицах оптической плотности. Далее полученное значение можно выразить в е.о.п. на мл плазмы, ед.опт.пл. на грамм ткани, ед.опт.пл. на грамм белка для плазмы и тканей органов.

Таким образом, площадь под кривой спектра окислительной модификации белков, которая складывается из площадей под кривой АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, определяется формулой:

$S о б м = S_{\underset{н е й т р .}{А Д Н Ф Г}} + S_{\underset{о с н .}{А Д Н Ф Г}} + S_{\underset{н е й т р .}{К Д Н Ф Г}} + S_{\underset{о с н .}{К Д Н Ф Г}}$

где

$\begin{array}{l} S_{\underset{н е й т р .}{А Д Н Ф Г}} = \frac{E x t_{230} + E x t_{254}}{2} \times 24 + \frac{E x t_{254} + E x t_{270}}{2} \times 16 + \frac{E x t_{270} + E x t_{280}}{2} \times 10 + \\ + \frac{E x t_{280} + E x t_{356}}{2} \times 76 + \frac{E x t_{356} + E x t_{363}}{2} \times 7 \end{array}$

$S_{\underset{о с н .}{А Д Н Ф Г}} = \frac{E x t_{428} + E x t_{520}}{2} \times 92$

$S_{\underset{н е й т р .}{К Д Н Ф Г}} = \frac{E x t_{363} + E x t_{370}}{2} \times 7 + \frac{E x t_{370} + E x t_{428}}{2} \times 58$

$S_{\underset{о с н .}{К Д Н Ф Г}} = \frac{E x t_{430} + E x t_{434}}{2} \times 4 + \frac{E x t_{520} + E x t_{535}}{2} \times 15$

Таким образом, предложенный метод позволяет не только оценить общее значение ОМБ, определить количество АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, но и сопоставить первичные и вторичные маркеры ОМБ и в результате этого выявить путь нарушения нативной конформации белков.

Пример 1

Исследование проводилось на крысе линии Wistar массой 350 г. Животному в течение 10 дней перорально вводили L-аргинин в дозе 500 мг/кг. Содержание и выведение животных из эксперимента осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приказ Минздрава СССР №755 от 12.08.1977 г.). После выведения животного из эксперимента из навески ткани почки готовили гомогенат лизосомальной и внелизосомальной фракции. Окислительную модификацию белков определяли во внелизосомальной фракции по методу R.L.Levine в модификации Е.Е.Дубининой.

По полученным значениям экстинкции строится график («Спектр ОМБ под действием L-аргинина в почке крыс», рис.2), далее рассчитывается площадь под полученной кривой.

$S_{\underset{н е й т р .}{А Д Н Ф Г}} = \frac{0 + 0}{2} \times 24 + \frac{0 + 0}{2} \times 24 + \frac{0 + 0}{2} \times 16 + \frac{0 + 0,015}{2} \times 76 + \frac{0,015 + 0,02}{2} \times 7 = 0,6925$ $S_{\underset{о с н .}{А Д Н Ф Г}} = \frac{0,005 + 0,002}{2} \times 92 = 0,322$

$S_{\underset{н е й т р .}{К Д Н Ф Г}} = \frac{0,02 + 0,02}{2} \times 7 + \frac{0,02 + 0,005}{2} \times 58 = 0,865$

$S_{\underset{о с н .}{К Д Н Ф Г}} = \frac{0,01 + 0,015}{2} \times 4 + \frac{0,006 + 0,01}{2} \times 15 = 0,125$

S_омб=0,6925+0,322+0,865+0,125=2,0045

Полученное значение площади под кривой делится на содержание белка (3,7044 г/л) и окончательное значение выражается в е.о.п./грамм белка.

Общая площадь под кривой ОМБ почки составила 2,0045/3,7044=0,541 е.о.п./грамм белка, из них площадь АДНФГ_нейтр.=0,187, АДНФГ_осн=0,087, КДНФГ_нейтр=0,234, КДНФГ_осн=0,034 е.о.п./грамм белка.

Содержание первичных маркеров окислительного стресса составило 50,3%, из них на долю АДНФГ_неитр приходится 68%, а на долю АДНФГ_осн - 32%. Из общего количества ОМБ содержание вторичных маркеров составило 49,7%, из них на долю КДНФГ_нейтр приходится 86%, а на долю КДНФГ_осн - 14%.

Таким образом, под действием L-аргинина в дозе 500 мг/кг содержание вторичных и первичных маркеров окислительного стресса почти равны.

Пример 2.

Пациентке С.Т.И., 64 года, поставлен диагноз тромбофлебит вен нижних конечностей. Забор крови у пациентки производился утром из локтевой вены натощак в количестве 10 мл. В качестве антикоагулянта использовали ЭДТА. Кровь центрифугировали, плазму снимали и использовали для проведения определения ОМБ по методике Levine R. в модификации Дубининой Е.Е. По полученным значениям экстинкции строится график («Спектр ОМБ в плазме пациента с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей», рис.3), далее рассчитывается площадь под полученной кривой.

$\begin{array}{l} S_{\underset{н е й т р .}{А Д Н Ф Г}} = \frac{0 + 0,025}{2} \times 24 + \frac{0,025 + 0,035}{2} \times 16 + \frac{0,035 + 0,17}{2} \times 10 + \frac{0,17 + 0,4}{2} \times 76 + \\ + \frac{0,4 + 0,53}{2} \times 7 = 26,71 \end{array}$ $S_{\underset{о с н .}{А Д Н Ф Г}} = \frac{0,2 + 0,27}{2} \times 92 = 21,62$

$S_{\underset{н е й т р .}{К Д Н Ф Г}} = \frac{0,53 + 0,195}{2} \times 7 + \frac{0,195 + 0,2}{2} \times 58 = 13,9925$

$S_{\underset{о с н .}{К Д Н Ф Г}} = \frac{0,26 + 0,20}{2} \times 4 + \frac{0,25 + 0,28}{2} \times 15 = 3,975$

S_омб=26,71+21,62+13,9925+3,975=66,2975

Полученное значение площади под кривой ОМБ рассчитано на 0,1 мл плазмы, соответственно на 1 мл плазмы составит 662,975 е.о.п./мл плазмы, из них $S_{\underset{н е й т р .}{А Д Н Ф Г}} = 267,1;$ $S_{\underset{о с н .}{А Д Н Ф Г}} = 216,2;$ $S_{\underset{н е й т р .}{К Д Н Ф Г}} = 139,925;$ $S_{\underset{о с н .}{К Д Н Ф Г}} = 39,75 е .о .п ./мл плазмы .$

Содержание первичных маркеров окислительного стресса плазмы пациентки с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей составило 73%, из них на долю АДНФГ_нейтр приходится 55%, а на долю АДНФГ_осн - 45%. Из общего количества ОМБ содержание вторичных маркеров составило 27%, из них на долю КДНФГ_нейтр приходится 78%, а на долю КДНФГ_осн - 22%.

Таким образом, в плазме пациентки с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей значительно преобладают первичные маркеры окислительного стресса, что свидетельствует о фрагментации белковых молекул.

Источники информации

1. Зенков Н.К. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К.Зенков, В.З.Ланкин, Е.Б.Меньшикова. - М.: МАИК, 2001. - 343 с.

2. Малахова М.Я. Эндогенная интоксикация. Методы биохимической регистрации эндогенной интоксикации / М.Я.Малахова // Эфферентная терапия. - Т. 1, №1. - 1995. - С.61-64

3. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека. Метод ее определения / Е.Е.Дубинина [и др.] // Вопросы мед. химии, т.41, №1. - 1995. - с.24-26.

4. Окислительная модификация белков: проблемы и перспективы исследования / Л.Е.Муравлева [и др.] // Фундаментальные исследования - 2010. - №1. - С.74-78.

5. Токсикологические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях / Ю.И.Губский [и др.] // Современные проблемы токсикологии, т.8, №3. - 2005. - с.20-27.

6. Толочко З.С. Окислительная модификация белков в крови крыс при повреждении капсаицин-чувствительных нервов и изменении уровня оксида азота / 3.С.Толочко, В.К.Спиридонов // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - Т.96, №1. - 2010. - с.77-84.

7. Protein carbonyl groups as biomarkers of oxidative stress / I. Dalle - Donne [et al.] // Pubmed - 2003. - URL:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12589963.

8. Stadtman E.R. Protein oxidation / E.R.Stadtman, R.L.Levine // Annals of N.Y.Academy of Sciences. - Vol.899. - 2000. - P.191-208.

Способ комплексной оценки содержания продуктов окислительной модификации белков в тканях и биологических жидкостях, включающий определение количества карбонильных продуктов, отличающийся тем, что оценку степени окислительной модификации белков (ОМБ) в биологическом материале осуществляют при расчете площади под кривой спектра ОМБ, которая равна сумме площадей альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) нейтрального и основного характера:
$S_{омб} = S_{\underset{нейтр .}{АДНФГ}} + S_{\underset{осн .}{АДНФГ}} + S_{\underset{нейтр .}{КДНФГ}} + S_{\underset{осн .}{КДНФГ}}$
где
$\begin{array}{l} S_{\underset{н е й т р .}{А Д Н Ф Г}} = \frac{E x t_{230} + E x t_{254}}{2} \times 24 + \frac{E x t_{254} + E x t_{270}}{2} \times 16 + \frac{E x t_{270} + E x t_{280}}{2} \cdot 10 + \\ + \frac{E x t_{280} + E x t_{356}}{2} \times 76 + \frac{E x t_{356} + E x t_{363}}{2} \times 7 \end{array}$
$S_{\underset{о с н .}{А Д Н Ф Г}} = \frac{E x t_{428} + E x t_{520}}{2} \times 92$
$S_{\underset{н е й т р .}{К Д Н Ф Г}} = \frac{E x t_{363} + E x t_{370}}{2} \times 7 + \frac{E x t_{370} + E x t_{428}}{2} \times 58$
$S_{\underset{о с н .}{К Д Н Ф Г}} = \frac{E x t_{430} + E x t_{434}}{2} \times 4 + \frac{E x t_{520} + E x t_{535}}{2} \times 15$

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении экстракорпорального оплодотворения в плазме крови.

Способ определения маркера развития ревматоидного артрита на основе выявления укорочения относительной длины теломер на отдельных хромосомах в т-лимфоцитах периферической крови // 2522961

Изобретение относится к области медицины, включающей исследования биологического материала, и касается определения относительной длины теломер на хромосомах. Способ заключается в выявлении укорочения относительной длины теломер на отдельных хромосомах Т-лимфоцитов периферической крови с помощью метода количественной флуоресцентной гибридизации in situ (Q-FISH).

Способ раннего выявления дисметаболической нефропатии у детей 3-7 лет нефелометрическим методом // 2521366

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для раннего выявления дисметаболической нефропатии у детей 3-7 лет. Способ заключается в исследовании пробы мочи после взаимодействия мочи с 10% водным раствором хлорида кальция фотометрически на микропланшетном ридере при длине волны 620 нм и количественном определении кристаллообразующей способности мочи по формуле: Соп-(Dn-Dn-1)·13,4/(D4-D3), где D4 - оптическая плотность стандартного раствора 13,4 г/л оксалата натрия с 10% раствором хлористого кальция, D3 - оптическая плотность стандартного раствора 13,4 г/л оксалата натрия с дистиллированной водой, Dn - оптическая плотность опытной пробы пациента №Х с 10% раствором хлористого кальция, Dn-1 - оптическая плотность опытной пробы пациента с дистиллированной водой, 13,4 г/л - концентрация стандартного раствора оксалата натрия.

Способ прогнозирования развития кардиопатии и энцефалопатии в неонатальном периоде у новорожденных от женщин с фетоплацентарной недостаточностью // 2521287

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и неонатологии, и может быть использовано для прогнозирования патологического течения неонатального периода.

Способ интраоперационной диагностики рака щитовидной железы // 2521239

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для экспресс-диагностики злокачественных опухолей в условиях больницы на интраоперационном этапе.

Способ раннего выявления возможности инфекции мочевыделяющих путей у детей 3-7 лет фотометрическим методом // 2521201

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для скрининга детей дошкольного возраста с целью раннего выявления у них возможности инфекции мочевыводящих путей.

Применение бактериальной бета-лактамазы для диагностики in vitro и визуализации, диагностики и лечения in vivo // 2520661

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к использованию бактериальной бета-лактамазы для диагностики in vitro и визуализации, диагностики и лечения in vivo.

Способ оценки воздействия на организм животных низкоинтенсивного лазерного облучения крови // 2519725

(57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для оценки воздействия на организм животных низкоинтенсивного лазерного облучения крови. У животного проводят забор венозной крови до, во время и после низкоинтенсивного лазерного облучения крови, получают из нее плазму.

Способ определения вероятности образования пятна крови от живого лица // 2519187

Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине, и может быть использовано для определения вероятности образования пятна крови от живого лица.

Способ определения давности пятна крови // 2519183

Изобретение относится к медицине, а именно к судебной медицине, и может быть использовано для определения давности пятна крови. Способ включает измерение оптической плотности вытяжки из пятна крови и дополнительное определение вида ткани предмета-носителя.

Способ прогнозирования эффективности лечения больных раком легкого // 2526120

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности комплексного лечения больных раком легкого в раннем послеоперационном периоде. Сущность изобретения заключается в том, что в течение суток после операции и периоперационной аутохимиоиммунотерапии в плазме крови больного определяют активность α-1-протеиназного ингибитора. При ее повышении на 28% и выше по отношению к общепринятой норме прогнозируют эффективность лечения, а при изменении менее 28%, отсутствии изменений или снижении по сравнению с нормой прогнозируют неэффективность лечения. Применение способа обеспечивает высокую специфичность, возможность срочной объективной оценки эффективности воздействия начальных этапов комплексного лечения, проведения анализа по cito, также позволяет своевременно назначать адекватные лечебные мероприятия или заменять лечение. Специфичность способа для срочного прогнозирования эффективности начальных этапов комплексной терапии - 80,9%, для прогнозирования отсутствия эффективности - 97%. 4 пр.

Способ спекрофотометрического определения ионов металлов // 2526176

Изобретение относится к мониторингу окружающей среды и биологических объектов на предмет определения содержания ионов металлов в жидких средах с использованием фотохромных соединений. В способе спектрофотометрического определения ионов металлов в жидких средах с использованием фотохромных соединений из класса хроменов за счет образования комплексов между фотоиндуцированной мероцианиновой формой этих соединений и ионами металлов в качестве хроменов используются бисхромены, такие как 2,2,11,11-тетракис(4-метоксифенилфенил)диокса(1,12)трифенилен, 2,2,8,8-тетракис(4-метоксифенил)диокса(1,7)хризен, 3,3,11,11-тетра-(4-метоксифенил)-3,11-дигидро-4,10-диоксадибензо[a,h]антрацен, 3,3,10,10-тетра-(4-метоксифенил)-3,10-дигидро-4,11-диоксадибензо[а,h]антрацен. Достигается повышение селективности определения. 24 пр., 1 табл., 6 ил.

Способ оценки токсической опасности антихолинэстеразных соединений // 2526817

Изобретение относится к медицине, касается способа оценки токсической опасности антихолинэстеразных соединений (АнХЭС). Суть заявляемого способа заключается в определении антихолинэстеразного эффекта растворов исследуемых АнХЭС на препарат холинэстеразы - фермент пропионилхолинэстераза мозговой ткани кальмара (ПХЭ), а именно в оценке процента угнетения активности ПХЭ в растворах малой - 0,04 Е/мл и высокой - 4 Е/мл концентрации. Токсическую опасность растворов исследуемых АнХЭС определяют по различию их воздействия на активность ПХЭ в растворах малой и высокой концентрации. Если процент угнетения активности ПХЭ в растворе высокой концентрации падает до нуля или не превышает 5-10%, делают заключение о том, что анализируемый раствор содержит высокотоксичное АнХЭС 1 класса опасности. Если величина ингибирующего эффекта остается постоянной или падает не более чем на 10%, делают заключение о наличии малотоксичного АнХЭС. Использование заявленного способа позволяет в течение 30-60 минут оценить токсическую опасность АнХЭС в самых различных ситуациях, когда их состав не известен и они находятся в виде растворов неизвестной концентрации. 1 табл., 2 пр.

Способ диагностики тромбоэмболии легочных артерий // 2527346

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, кардиологии и сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано для диагностики тромбоэмболии легочных артерий (ТЭЛА). Сущность способа: предварительно готовят образец сыворотки крови пациента путем высушивания сыворотки крови, измельчения сухого осадка и суспензирования его в вазелиновом масле. Подготовленный образец исследуют методом ИК-спектроскопии путем определения высоты пиков полос поглощения с максимумами 1165; 1160; 1150; 1100; 1070; 1050 и 1025 см-1. Затем вычисляют значение отношения высот пиков: отношение высоты пика с максимумом при 1160 см-1 к высоте пика с максимумом при 1165 см-1; отношение высоты пика с максимумом при 1165 см-1 к высоте пика с максимумом при 1070 см-1; отношения высоты пика с максимумом 1165 см-1 к высоте пика с максимумом 1150 см-1, отношения высоты пика с максимумом при 1165 см-1 к высоте пика с максимумом 1050 см-1, отношение высоты пика с максимумом при 1100 см-1 к высоте пика с максимумом 1050 см-1, отношение высоты пика с максимумом при 1025 см-1 к высоте пика с максимумом 1165 см-1. На основании полученных значений отношений строят дифференциально-диагностический профиль образца сыворотки крови пациента, получая плоский многоугольник, образованный 6 лучами, соответствующих 6 отношениям, и сравнивают с многоугольником, являющимся эталонным дифференциально-диагностическим профилем ТЭЛА, где значения 6 отношений составляют: 1 (1,85±0,26), 2 (0,28±0,13), 3 (0,39±0,07), 4 (0,25±0,13), 5 (0,58±0,10), 6 (4,47±1,70). При наличии сходства полученного дифференциально-диагностического профиля пациента с эталонным профилем и совпадении всех 6 значений отношений образца сыворотки крови пациента со значениями отношений эталонного профиля диагностируют у пациента ТЭЛА. Изобретение обладает высокой точностью, прост в исполнении и не требует больших материальных и временных затрат, при этом позволяет диагностировать тромбоэмболию всех легочных артерий, как при наличии клинически значимых симптомов данного заболевания, так и в их отсутствии. 2 пр., 3 ил.

Способ прогнозирования рецидива рака яичников // 2530556

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования течения заболевания у больных раком яичников. Сущность способа: в опухолевой ткани яичников определяют долю клеток в S фазе клеточного цикла, при значении этого показателя менее 15,9% прогнозируют благоприятный исход, а при значении этого показателя более 15,9% прогнозируют неблагоприятный исход. Изобретение может быть использовано многократно в гинекологических клиниках и специализированных стационарах онкоучреждений для прогнозирования развития рецидива рака яичников по данным ДНК-цитометрического анализа опухолевой ткани. 2 пр.

Способ прогнозирования гнойных послеоперационных осложнений у больных колоректальным раком // 2530571

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования гнойных послеоперационных осложнений у больных раком толстой кишки (колоректальный рак) путем динамического исследования крови. У больного раком толстой кишки на вторые и пятые сутки после операции определяют уровень С-реактивного белка (СРБ) в плазме крови. При значении уровня СРБ на пятые сутки менее 10,0 мг/дл прогнозируется относительно гладкое течение послеоперационного периода. В случае снижения уровня СРБ относительно вторых послеоперационных суток риск развития осложнений низкий. При нарастании уровня СРБ относительно вторых послеоперационных суток или сохранении его на одном уровне - риск развития осложнений средний. При значении уровня СРБ на пятые сутки более 10,0 мг/дл риск развития гнойных послеоперационных осложнений высокий. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование развития гнойных осложнений у пациентов на вторые и пятые сутки после операции по поводу колоректального рака. 3 пр.

Способ ускоренной окраски гистологических препаратов для выявления микобактерий туберкулеза // 2530574

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ ускоренной окраски гистологических препаратов для выявления микобактерий туберкулеза, включающий приготовление гистологических препаратов по общепринятой методике, окрашивание их по Циль-Нильсону, отличающийся тем, что после стандартной подготовки препаратов к окраске срезы проходят процедуру депарафинизации путем последовательного помещения их в ксилол и спирты нисходящей концентрации по 5 минут в термостат при температуре 54°C с последующим помещением их в воду, затем в 1% раствор йодной кислоты на 2 минуты и промыванием в проточной воде в течение 10 секунд, после чего на срез, покрытый фильтровальной бумагой, наливают карбол-фуксин Циля и подогревают над пламенем спиртовки до появления паров в течение 2 минут, оставляют краску на срезе после прекращения подогревания на 3-5 минут, убирают фильтровальную бумагу и ополаскивают срезы в воде, дифференцируют их 1% кислотным буфером, ополаскивают в водопроводной воде в течение 1 минуты, после чего на срез помещают раствор метиленового синего по Лефлеру и подогревают над пламенем спиртовки до появления паров, промывают в воде, дифференцируют в 1% кислотном буфере и хорошо промывают водой, обезвоживают в спиртах восходящей крепости в течение 1 минуты, помещают в ксилол и заключают в бальзам. 1 пр.

Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики // 2532352

Изобретение относится к иммунологии и медицинской диагностике и представляет собой способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики. Предложенное изобретение предназначено для иммунохроматографического определения в жидких пробах антител к возбудителям инфекционных заболеваний или другим антигенам, например, таким как аллергены. Отличительной особенностью предлагаемого способа определения антител является то, что раствор для разбавления пробы содержит специфические антитела против иммобилизованной в аналитической зоне тест-полоски антигена (или антигенов). Используемая концентрация антител в разбавляющем растворе меньше нижнего предела определения антител данным методом при использовании разбавляющего раствора, не содержащего специфических антител, вследствие чего в отсутствие специфических антител в пробе окрашивания аналитической зоны тест-полоски не наблюдается. Если же проба содержит специфические антитела, то наличие в разбавляющем растворе дополнительного количества специфических антител приводит к усилению интенсивности окраски аналитической зоны тест-полоски. Применение изобретения позволяет регистрировать суммарную концентрацию специфических антител в пробе и в разбавляющем растворе, что приводит к снижению предела обнаружения анализа вследствие смещения рабочего диапазона определяемых тестом концентраций в область более низких значений. 3 ил., 1 пр.

Мелкозернистые наполнители для фотометрических реактивных пленок // 2532359

Изобретение относится к способу обнаружения аналита в пробе жидкости тела путем использования диагностического тестового элемента. Диагностический тестовый элемент (110) для обнаружения аналита в пробе (126) жидкости тела, в частности цельной крови объемом менее 2 микролитров, содержит по меньшей мере одно тестовое поле (116) с по меньшей мере одним реагентом-индикатором, где реагент-индикатор способен при наличии аналита испытывать по меньшей мере одно обнаруживаемое изменение, в частности оптическое изменение. Тестовое поле (116) включает по меньшей мере один детекторный слой (118), содержащий реагент-индикатор, где детекторный слой содержит частицы (137). При этом по меньшей мере 90% всех частиц (137) индикаторного слоя (118) имеют фактический размер менее 10 микрон. Диагностический тестовый элемент (110)содержит по меньшей мере один несущий элемент (112), имеющий по меньшей мере одну прозрачную область (114), где тестовое поле (116) своей стороной детектирования (120) по меньшей мере частично нанесено на прозрачную область (114). Обнаруживаемое изменение является оптически детектируемым изменением, где для детектирования обнаруживаемого изменения применяют оптический детектор с пространственным разрешением. 8 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл., 2 пр.

Способ определения степени выраженности воспалительного процесса при остеоартрозе коленного сустава // 2533216

Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения выраженности воспалительного процесса при остеоартрозе. Сущность способа состоит в том, что проводят люминолзависимую железоиндуцированную хемилюминесценцию модельной системы, которая имеет следующий состав: 2,72 г KH2PO4, 7,82 г KCl, 1,5 г цитрата натрия C6H8O7Na3*5,5H2O на 1 литр дистиллированной воды, pH 7,45 с 0,2 мл 10-5 М раствора люминола, затем в присутствии синовиальной жидкости определяют интенсивность свечения модельной системы до и после добавления синовиальной жидкости. Рассчитывают степень подавления интенсивности хемилюминесценции модельной системы по формуле. При ее значении от 1,71 до 6,48% определяют высокую активность воспалительного процесса, от 6,49 до 21,55% - среднюю активность, от 21,56 до 55,46% - малую активность. Использование способа позволяет уменьшить время определения и повышает точность оценки степени воспалительного процесса при остеоартрозе. 1 табл., 1 ил., 3 пр.